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文檔簡介
生物膜系統(tǒng)及細(xì)胞工程 復(fù)習(xí)15 一 生物膜系統(tǒng) 生物膜的組成 細(xì)胞膜 核膜以及由膜圍成的細(xì)胞器組成的連續(xù)統(tǒng)一的膜系統(tǒng) 生物膜的結(jié)構(gòu) 蛋白質(zhì) 脂質(zhì) 多糖功能 均具有一定的流動性及選擇透過性作用 物質(zhì)運(yùn)輸 信息傳遞 能量轉(zhuǎn)變 細(xì)胞識別 1 直接聯(lián)系的膜 2 間接聯(lián)系的膜 膜的轉(zhuǎn)變依賴于膜的一定的流動性 同位素標(biāo)記法 32p標(biāo)記磷脂 內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 其它膜結(jié)構(gòu) 突觸小泡 分泌小泡 吞噬小泡 驗證膜具有連續(xù)性 分泌蛋白的合成及分泌過程 氨基酸 核糖體 內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 高爾基體 細(xì)胞膜 體現(xiàn)了生物膜在功能上的連續(xù)性 明確分工 緊密聯(lián)系 跨膜層數(shù) 指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的原理和方法 通過某種工程學(xué)手段 在細(xì)胞整體水平或細(xì)胞器水平上 按照人們的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品的一門綜合科學(xué)技術(shù) 植物細(xì)胞工程 動物細(xì)胞工程 細(xì)胞工程 1 動物細(xì)胞培養(yǎng)2 動物細(xì)胞融合3 單克隆抗體4 胚胎 分割 移植5 核移植 1 植物組織培養(yǎng)2 植物體細(xì)胞雜交 技術(shù)手段 植物細(xì)胞工程 動物細(xì)胞工程 細(xì)胞工程 1 定義 生物體的細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個體的潛能的特性 2 基礎(chǔ) 生物體的每一個細(xì)胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì) 都有發(fā)育成為完整個體所必需的全部基因 3 大小 4 實現(xiàn)條件 離體 一定的營養(yǎng)物質(zhì) 激素 其他外界條件 受精卵 生殖細(xì)胞 體細(xì)胞分化程度低的細(xì)胞 分化程度高的細(xì)胞植物體細(xì)胞 動物體細(xì)胞 不易表達(dá) 二 細(xì)胞的全能性 三 1 植物組織培養(yǎng) 離體的植物器官 組織或細(xì)胞 高度分化了的 愈傷組織 細(xì)胞團(tuán) 根 芽 胚狀體 植物體 外植體 脫分化 再分化 離體的植物器官 組織或細(xì)胞 脫分化 再分化 三 1 植物組織培養(yǎng) 1 植物組織培養(yǎng)過程 2 培養(yǎng)條件 含有全部營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基 一定的溫度 空氣 無菌環(huán)境 適合的ph 適合的光照等 外植體 舉例 花藥離體培養(yǎng)基因工程培育的抗棉鈴蟲的棉花植株細(xì)胞工程中培育的 番茄 馬鈴薯 雜種植株 過程 動物胚胎或幼齡動物的組織 器官 胰蛋白酶 分解彈性纖維 10代細(xì)胞 傳代培養(yǎng) 無限傳代 遺傳物質(zhì)未改變 遺傳物質(zhì)改變 三 2 動物細(xì)胞培養(yǎng) 植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較 均需適宜的外界條件 ph 溫度 營養(yǎng)及 無菌 無毒環(huán)境 固體 營養(yǎng)物質(zhì) 蔗糖 植物激素 培養(yǎng)成植株 液體 營養(yǎng)物質(zhì) 葡萄糖 動物血清 培育成細(xì)胞系或細(xì)胞株 1 生產(chǎn)蛋白質(zhì)制品 如病毒疫苗 干擾素 單克隆抗體 動物激素 2 用于某些器官移植 1 試管苗的快速繁殖 2 無病毒植物的培育 3 生產(chǎn)藥物等 4 人工種子 5 轉(zhuǎn)基因植物的培育 融合細(xì)胞 雜種細(xì)胞 去壁的常用方法 原生質(zhì)體融合方法 四 1 植物體細(xì)胞雜交 融合成功的標(biāo)志 人工誘導(dǎo) 篩選 物理法 化學(xué)法 滅活的仙臺病毒 四 2 動物細(xì)胞融合 過程 制備單克隆抗體 主要用于制備單克隆抗體 獲得雜種植株 用途 物理 化學(xué)方法 同左 生物 滅活的病毒 物理 離心 振蕩 電刺激 化學(xué) peg 誘導(dǎo)方法 使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合 去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合 細(xì)胞融合的方法 細(xì)胞膜的流動性 細(xì)胞膜的流動性 植物細(xì)胞全能性 原理 動物細(xì)胞融合 植物體細(xì)胞雜交 比較項目 植物體細(xì)胞雜交 動物細(xì)胞融合的比較 特點 產(chǎn)量低 特異性差 純度低 反應(yīng)不夠靈敏 五 單克隆抗體 1 常規(guī)抗體制備 一個b淋巴細(xì)胞 只分泌一種特異性抗體 2 單克隆抗體 雜交瘤細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 能無限增殖 融合 抗原注入小鼠體內(nèi) 已免疫的b淋巴細(xì)胞 骨髓瘤細(xì)胞 篩選出雜交瘤細(xì)胞 篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群 從培養(yǎng)液中提取 從小鼠腹水中提取 細(xì)胞融合 動物細(xì)胞培養(yǎng) 單克隆抗體的制備 特定的選擇培養(yǎng)基 主要用于疾病的診斷 治療和預(yù)防 若在單抗上帶上抗癌藥物制成 生物導(dǎo)彈 將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在部位 既消滅了癌細(xì)胞又不會傷害健康細(xì)胞 特點 與常規(guī)抗體相比 具有特異性強(qiáng) 靈敏度高 化學(xué)性質(zhì)單一的優(yōu)點 單克隆抗體的應(yīng)用 單克隆抗體是指 雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的單一抗體 哺乳動物的胚胎移植 受精卵 幼體動物 2 用途 加快優(yōu)良種畜的繁殖速度 解決哺乳動物妊娠時間長 產(chǎn)子數(shù)少 繁殖速度慢的問題 1 過程 細(xì)胞核移植 多莉羊的培育過程 核移植 動物細(xì)胞核有全能性 例 06江蘇 下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖 1 技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ) 2 根據(jù)培養(yǎng)基的用途分類 圖中hat培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基 3 單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比 最大的優(yōu)越性是 4 動物細(xì)胞融合除了采用植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合常用的誘導(dǎo)劑外 還可以采用 5 選出的雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的 特點 又具備淋巴細(xì)胞的 特點 6 淋巴細(xì)胞是由動物體 中的 細(xì)胞分化 發(fā)育而來 7 雜交瘤細(xì)胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖 氨基酸的主要方式是 動物細(xì)胞培養(yǎng) 選擇 特異性強(qiáng) 靈敏度高 滅活的病毒 在體外大量增殖 分泌特異性抗體 骨髓 造血干細(xì)胞 主動運(yùn)輸 1 科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合 得到雜交細(xì)胞 經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體 與骨髓疤細(xì)胞融合的是 a 經(jīng)過免疫的b淋巴細(xì)胞b 沒經(jīng)過免疫的t淋巴細(xì)胞c 經(jīng)過免疫的t淋巴細(xì)胞d 沒經(jīng)過免疫的 淋巴細(xì)胞 a 2 用于動物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織 其主要原因是這樣的組織細(xì)胞 a 容易產(chǎn)生各種變異b 具有更強(qiáng)的全能性c 取材十分方便d 分裂增殖的能力強(qiáng) d 3 動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物細(xì)胞培養(yǎng)的重要區(qū)別在于 a 培養(yǎng)基不同 b 動物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進(jìn)行 c 動物細(xì)胞可以傳代培養(yǎng) 而植物細(xì)胞不能 d 動物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng) 而植物細(xì)胞只能培養(yǎng)成植株 a 4 動物細(xì)胞融合和植物原生質(zhì)體融合比較 在動物細(xì)胞融合中有特殊性的是 c a 融合的原理b 融合的優(yōu)點c 融合的誘導(dǎo)手段d 融合的過程5 單克隆抗體制備過程中 骨髓瘤細(xì)胞和b淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后 要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞 在這種培養(yǎng)基上不能存活 增殖的細(xì)胞是 c b淋巴細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 b淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞a b c d 6 基因型為aabb的水稻 具有24條染色體 的花粉通過無菌操作 接入試管后 在一定條件下形成試管苗的育種過程 1 愈傷組織是花粉細(xì)胞不斷分裂后的形成的不規(guī)則細(xì)胞團(tuán) 愈傷組織形成中 必須從培養(yǎng)基中獲得 2 要促進(jìn)花粉細(xì)胞分裂生長 培養(yǎng)基中應(yīng)有 和 兩類激素 3 愈傷組織分化是指愈傷組織形成芽和根 再由芽發(fā)育成葉和莖 這一過程必須給予光照 其原因是 利用光照制造有機(jī)物 供試管苗生長
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