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GeneMapper 軟件微衛(wèi)星分析中文簡(jiǎn)易操作手冊(cè) 設(shè)定微衛(wèi)星分析方法:1. 登錄軟件2. 創(chuàng)建分析所需kit、panel和marker等參數(shù);3. 創(chuàng)建新文件,導(dǎo)入數(shù)據(jù);4. 設(shè)置分析參數(shù);5. 執(zhí)行初始分析;5. 創(chuàng)建Bin以及Bin Set; 微衛(wèi)星分析流程:分析并檢查結(jié)果:1. 編輯分析方法;2. 分析數(shù)據(jù);3. 查看結(jié)果;打印并導(dǎo)出數(shù)據(jù)(可選):1. 打印結(jié)果;2. 導(dǎo)出結(jié)果。軟件術(shù)語(yǔ)介紹:術(shù)語(yǔ)定義Analysis Parameters軟件中分析樣品所使用的特定設(shè)置;用于計(jì)算片段大小和基因型,這些特定設(shè)置包括analysis method, size standard 和panelbin在marker 內(nèi)設(shè)定等位基因的片段大小和顏色bin set等位基因特定實(shí)驗(yàn)條件下一組binmarker微衛(wèi)星標(biāo)記,通過(guò)位點(diǎn)名稱、片段大小、熒光標(biāo)記和重復(fù)長(zhǎng)度進(jìn)行設(shè)定panelMarker組合kitpanel 組合一 設(shè)定微衛(wèi)星分析方法:1. 登錄GeneMapper軟件:1.1 選擇開(kāi)始 - All Programs - Applied Biosystems - GeneMapper-GeneMapper ;或雙擊桌面快捷方式 打開(kāi)軟件;1.2 登錄GeneMapper軟件:用戶名默認(rèn)為gm,在Passwprd中輸入密碼,點(diǎn)擊OK進(jìn)入GeneMapper軟件2 創(chuàng)建分析所需kit、panel和marker等參數(shù): 2.1 點(diǎn)擊軟件上方工具欄Tools,選擇Panel Manager;2.2 在Panel Manager對(duì)話框中,選中1 Panel Manager,點(diǎn)擊2 新建 Kit;于New Kit對(duì)話框中依次輸入Kit名稱,Kit類型,并點(diǎn)擊OK保存設(shè)置;2.3 在Panel Manager對(duì)話框中,選中1 STR KIT,點(diǎn)擊2 新建 Panel;3中輸入Panel名稱;2.4 選中1 STR panel,點(diǎn)擊2 新建Marker,在3 位置依次輸入Marker Name (Marker名稱) ,Dye Color (熒光標(biāo)記種類) ,Min Size,Max Size (片段最小值和最大值) ,Marker Repeat (重復(fù)次數(shù)) ;2.5 重復(fù)2.4步驟,完成所有Marker設(shè)置, 點(diǎn)擊OK保存;3. 創(chuàng)建新文件,導(dǎo)入數(shù)據(jù): 3 .1 點(diǎn)擊1 新建文件夾,在2 Project Type中文件夾類型選擇Microsatellite ,點(diǎn)擊OK;3.2 導(dǎo)入數(shù)據(jù):點(diǎn)擊1 Add Samples To Project 添加數(shù)據(jù),在彈出的對(duì)話框中選擇待分析數(shù)據(jù),通過(guò)3 Add To List 添加到右邊的面板中,點(diǎn)擊4 Add完成數(shù)據(jù)添加;4. 設(shè)置分析參數(shù):4.1 完成數(shù)據(jù)添加后,在1 位置,Analysis Method中選擇New Analysis Method 新建分析方法;在彈出的對(duì)話框中選擇分析類型 2 Microsatellite,點(diǎn)擊OK確認(rèn);4.2 設(shè)置分析參數(shù):在Analysis Method Editor中,點(diǎn)擊1 General,填寫(xiě)2 Name(分析方法名稱);之后點(diǎn)擊3 Allele,在將4 Bin Set選擇none;其它參數(shù)為軟件默認(rèn),不需要 修改;點(diǎn)擊OK確認(rèn);4.3 選定好之前設(shè)定的分析方法,在后續(xù)的欄目中設(shè)定Panel 和Size Standard(分子量?jī)?nèi)標(biāo));4.4 完成分析參數(shù)設(shè)定后,選中Analysis Method,Panel和Size Standard欄目,點(diǎn)擊1File,選擇2Fill Down;此時(shí),Analysis Method,Panel和Size Standard欄目會(huì)使用之前選定的分析參數(shù);也可以使用鼠標(biāo)分別選擇;4.5 保存分析文件:點(diǎn)擊File,選擇Save Project,輸入文件夾名稱:5. 執(zhí)行初始分析:5.1 點(diǎn)擊分析按鈕1,分析數(shù)據(jù):5.2 在1 Genotypes中查看初步分析結(jié)果,或通過(guò)2 Display Plots選項(xiàng)查看樣品分型圖:5.3 在樣品分型圖界面中,Plot Setting選擇 Microsatellite Default;通過(guò)軟件上方的快捷按鈕編輯數(shù)據(jù)顯示方式:6 創(chuàng)建Bin Set:6.1 打開(kāi)ToolsPanel Manager,選中1 STR Kit,點(diǎn)擊2 新建Bin Set,在彈出的New Bin Set 對(duì)話框 3中輸入Bin Set名稱:6.2 添加參考數(shù)據(jù):6.2.1 確保1 Bin Set已選擇新建的Bin Set,選中2 STR Panel,此時(shí)會(huì)顯示出之前新建的每個(gè)Marker,點(diǎn)擊3 Add Reference Data 添加參考數(shù)據(jù);6.2.3 在Add Microsatellite Reference Data對(duì)話框中,選擇1 參考數(shù)據(jù),通過(guò)2 Add To List 添加至右面的面板中,點(diǎn)擊3 Add,完成添加:6.3 生成Bin Set:完成參考數(shù)據(jù)添加后,點(diǎn)擊1 Auto Bin,之后使用軟件默認(rèn)參數(shù),點(diǎn)擊2 OK,自動(dòng)生成Bin Set:6.4 編輯Bin Set:分別選中每個(gè)Marker 1 查看其對(duì)應(yīng)的Bin,選中2 Bin,右鍵進(jìn)行Bin的編輯或者刪除,也可通過(guò)軟件3處的快捷圖標(biāo)進(jìn)行Bin的編輯;完成后點(diǎn)擊OK生成Bin Set;二 分析并檢查結(jié)果:1. 編輯分析方法:點(diǎn)擊軟件上方快捷圖標(biāo)1 Analysis Method Editor,將Allele中的2 Bin Set修改為之前新建的Bin Set,其他參數(shù)保持默認(rèn),點(diǎn)擊OK;2. 點(diǎn)擊分析按鈕再次分析數(shù)據(jù),通過(guò)Genotypes查看分型結(jié)果,或選中數(shù)據(jù)通過(guò)Display Plots查看樣品分型圖;選中需要查看的數(shù)據(jù),否則無(wú)法查看Samples Plot:查看樣品分型圖:三 打印并導(dǎo)出數(shù)據(jù)(可選):1. 在View中選擇不同的界面(Samples,G
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