控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證方案.doc

控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證方案1試驗(yàn)?zāi)康目刂凭鷻z查用培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查。本次驗(yàn)證的目的是為了確認(rèn)麥康凱液體培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基、RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基、木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基、三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基適合大腸埃希菌、沙門菌的控制菌檢查。2. 試驗(yàn)方法照中國藥典2015版四部非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查：控制菌檢查法（通則1106）進(jìn)行試驗(yàn)。3.試驗(yàn)材料3.1 培養(yǎng)基名 稱來 源批 號麥康凱液體培養(yǎng)基麥康凱瓊脂培養(yǎng)基RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基麥康凱液體對照培養(yǎng)基麥康凱瓊脂對照培養(yǎng)基RV沙門菌增菌液體對照培養(yǎng)基木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂對照培養(yǎng)基三糖鐵瓊脂對照培養(yǎng)基3.2 菌種驗(yàn)證菌株來源批號大腸埃希菌CMCC（B）44102金黃色葡萄球菌 CMCC（B）26003乙型副傷寒沙門菌CMCC（B）500943.3 儀器XXXXX水平流凈化工作臺/生物安全柜、XXXXX立式壓力蒸汽滅菌器、XXXXX電熱恒溫培養(yǎng)箱(3035)、XXXXX生化培養(yǎng)箱（2025）、XXXXX氣浴恒溫振蕩器3.4 稀釋劑0.9%無菌氯化鈉溶液4.試驗(yàn)過程4.1菌液制備用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每0.1ml含菌數(shù)為不大于100cfu的菌懸液，菌液制備后若在室溫下放置，應(yīng)在2小時內(nèi)使用；若保存在28，可在24小時內(nèi)使用。4.2 適用性檢查4.2.1 麥康凱液體培養(yǎng)基適用性檢查取大腸埃希菌菌懸液各0.1 ml分別接種于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中，在35條件下培養(yǎng)24h，進(jìn)行促生長能力檢查。取金黃色葡萄球菌菌懸液各0.1 ml接種于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中，在35條件下培養(yǎng)24h，進(jìn)行抑制能力檢查4.2.2 麥康凱瓊脂培養(yǎng)基適用性檢查取大腸埃希菌菌懸液各0.1 ml分別涂布被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基平板上，在35條件下培養(yǎng)24h，進(jìn)行促生長能力和指示特性檢查4.2.3 RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基適用性檢查取乙副傷寒沙門氏菌菌懸液各0.1 ml接種于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中，35條件下培養(yǎng)24h，進(jìn)行促生長能力檢查。取金黃色葡萄球菌菌懸液各0.1 ml接種于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中，35條件下培養(yǎng)24h，進(jìn)行抑制能力檢查。4.2.4 木糖賴氨基酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基適用性檢查取乙副傷寒沙門氏菌菌懸液各0.1 ml分別涂布被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基平板上，在35條件下培養(yǎng)24h，進(jìn)行促生長能力和指示特性檢查。3.2.5三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基適用性檢查取乙副傷寒沙門氏菌菌懸液各0.1 ml分別涂布被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基平板上，在35條件下培養(yǎng)24h，進(jìn)行指示能力檢查。3.2.6陰性對照為確認(rèn)試驗(yàn)條件符合要求，同時進(jìn)行培養(yǎng)基陰性對照試驗(yàn)，陰性對照試驗(yàn)應(yīng)無菌生長。5. 試驗(yàn)結(jié)果被檢培養(yǎng)基陰性對照結(jié)果： 表1麥康凱液體培養(yǎng)基適用性檢查結(jié)果菌種類型被檢培養(yǎng)基對照培養(yǎng)基A/B（%）被檢培養(yǎng)基菌與對照培養(yǎng)基上的菌落落形態(tài)皿1皿2平均A皿1皿2平均B大腸埃希菌金黃色葡萄球菌表2麥康凱瓊脂培養(yǎng)基適用性檢查結(jié)果菌種類型被檢培養(yǎng)基對照培養(yǎng)基A/B（%）被檢培養(yǎng)基菌與對照培養(yǎng)基上的菌落落形態(tài)皿1皿2平均A皿1皿2平均B大腸埃希菌表3 RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基適用性檢查結(jié)果菌種類型被檢培養(yǎng)基對照培養(yǎng)基A/B（%）被檢培養(yǎng)基菌與對照培養(yǎng)基上的菌落落形態(tài)皿1皿2平均A皿1皿2平均B乙型副傷寒沙門菌金黃色葡萄球菌表4木糖賴氨基酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基適用性檢查結(jié)果菌種類型被檢培養(yǎng)基對照培養(yǎng)基A/B（%）被檢培養(yǎng)基菌與對照培養(yǎng)基上的菌落落形態(tài)皿1皿2平均A皿1皿2平均B乙型副傷寒沙門菌表5三糖