臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià).ppt

臨床檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià) 郭健衛(wèi)生部北京醫(yī)院衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心 方法評(píng)價(jià) 方法選擇 分析前準(zhǔn)備 常規(guī)分析 樣品 統(tǒng)計(jì)質(zhì)控 報(bào)告結(jié)果 預(yù)防措施 方法發(fā)展 分析方法分級(jí) 決定性方法 definitivemethod 經(jīng)詳盡研究尚未發(fā)現(xiàn)不準(zhǔn)確度或不確定性原因的方法 參考方法 referencemethod 經(jīng)詳盡研究證實(shí)其不準(zhǔn)確度與不精密度可以忽略的方法 常規(guī)方法 routingmethod 可滿足臨床或其他目的需要的日常使用的方法 方法分級(jí) 常規(guī)方法 參考方法 決定性方法 準(zhǔn)確度增加 應(yīng)用范圍增加 不同方法的關(guān)系 標(biāo)準(zhǔn)品分級(jí) 標(biāo)準(zhǔn)品 referencematerial 充分均勻并具有一個(gè)或多個(gè)良好確定的特性值的材料或物質(zhì) 用來(lái)校準(zhǔn)儀器設(shè)備 評(píng)估測(cè)定方法或給其它物質(zhì)賦值 一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品 原級(jí)參考物 具有最高計(jì)量學(xué)特性的參考物質(zhì) 由一級(jí)參考測(cè)量過(guò)程定值二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品 用一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn) 參考方法定值 校準(zhǔn)品 用二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn) 擬被用于校準(zhǔn)的常規(guī)方法定值 用于對(duì)常規(guī)方法和儀器的校準(zhǔn) 國(guó)際單位 原級(jí)參考方法 一級(jí)參考品 次級(jí)參考方法 二級(jí)參考品 廠家選定方法標(biāo)準(zhǔn)方法 廠家工作校準(zhǔn)品產(chǎn)品校準(zhǔn)品 終用戶方法 常規(guī)樣品 檢測(cè)結(jié)果 材料校準(zhǔn)和賦值測(cè)量過(guò)程執(zhí)行者不確定度 IFCC ARML ML End user 檢驗(yàn)結(jié)果的可溯源性 校準(zhǔn)品的應(yīng)用與試劑 儀器配套使用使用有證參考品 CRM GBW 不能使用定值質(zhì)控品 ControlMaterials 代替校準(zhǔn)品 Calibrator 人血清無(wú)機(jī)成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) GBW09135血清膽固醇標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) GBW09138 一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 紅細(xì)胞微粒標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) GBW E 090001膽紅素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) GBW E 090002氰化高鐵血紅蛋白溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) GBW E 090004純化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) GBW E 090011 方法的評(píng)價(jià)的主要內(nèi)容 初步評(píng)價(jià) NCCLSEP10 精密度 NCCLSEP5 對(duì)比及偏差 NCCLSEP9 線性 NCCLSEP6 抗干擾能力 NCCLSEP7 基質(zhì)效應(yīng) NCCLSEP14 臨床準(zhǔn)確度 NCCLSGP10 NCCLS文件EP9 A 用患者樣本進(jìn)行方法對(duì)比及偏差評(píng)估 批準(zhǔn)指南 1995年12月 目的及用途 引進(jìn)新方法前或用一種方法替代另一種方法時(shí)進(jìn)行偏差分析 評(píng)價(jià)兩種分析方法 同一分析項(xiàng)目 的偏差 評(píng)價(jià)操作要求 熟悉儀器操作熟悉評(píng)價(jià)方案質(zhì)控足夠的數(shù)據(jù) 實(shí)驗(yàn)樣本要求 來(lái)源于健康人或患者 無(wú)干擾 盡量避免貯存 測(cè)定物濃度范圍應(yīng)在醫(yī)學(xué)決定水平范圍內(nèi)均勻分布 樣本數(shù)至少40例 增加數(shù)量能提高可信性 對(duì)比方法 廠家要求的實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法或公認(rèn)的參考方法 具有好的精密度沒(méi)有已知的干擾物相同單位相對(duì)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或參考方法的偏差是已知的 測(cè)定方法 每天分別用兩種方法進(jìn)行測(cè)定 測(cè)定順序 1 2 3 4 5 6 7 88 7 6 5 4 3 2 1測(cè)定次數(shù) 至少測(cè)定5天 共40個(gè)樣本 數(shù)據(jù)監(jiān)督 系統(tǒng)誤差人為誤差常規(guī)質(zhì)控 熟悉儀器及方法收集數(shù)據(jù)檢查方法內(nèi)的離群點(diǎn)界限 雙份測(cè)定 相對(duì)差值均值的4倍 實(shí)驗(yàn)步驟 繪圖 均值散點(diǎn)圖 X Y 所有值散點(diǎn)圖 Yij Xi 偏差圖散點(diǎn)圖 Yij Xij Xi 均值散點(diǎn)圖 X Y 偏差圖 每次測(cè)定的Y均值與X均值之差 相應(yīng)X均值圖 線性相關(guān)目測(cè)檢查兩種方法間離群值目測(cè)檢查界限 4倍兩種方法間絕對(duì)偏差的均值絕對(duì)差值允許范圍 相對(duì)差值允許范圍 適合范圍計(jì)算r r2 0 95范圍適合r2 0 95擴(kuò)大數(shù)據(jù)范圍線性回歸計(jì)算均勻離散度的直觀檢查 預(yù)期偏差及可信范圍線性回歸方程計(jì)算偏差 高 中 低3組 解釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果并與內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)比較 定量分析方法的線性評(píng)價(jià) EvaluationofTheLinearityofQuantitativeAnalyticalMethodsEP6 P 目的 為實(shí)驗(yàn)室中采用定量分析方法的用戶提供評(píng)價(jià)儀器或方法是否滿足廠家線性指標(biāo)的評(píng)價(jià)方法 用戶可為分析方法設(shè)定線性范圍 定義 實(shí)驗(yàn)范圍 AssayRange 或者線性范圍 LinearRange 分析系統(tǒng)最終輸出的 與被測(cè)物濃度或活性成比例的 濃度或活性值范圍 定義 線性 Linearity 曲線接近直線的程度的量 與完整系統(tǒng)的反應(yīng)相關(guān) 是最后的分析結(jié)果或解釋 不僅是儀器的輸出結(jié)果 ScopeandLimitations 線性是分析方法的一個(gè)特征 不同于準(zhǔn)確性和精密度 線性實(shí)驗(yàn)應(yīng)該使用與待分析物基質(zhì)相似的樣本 線性檢驗(yàn)系統(tǒng)反應(yīng) 包括校準(zhǔn) 線性化技術(shù) 系數(shù)和儀器反應(yīng) 使用者的需求 用簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)來(lái)檢驗(yàn)廠家標(biāo)示的線性范圍及定量分析方法的分析范圍 在實(shí)驗(yàn)室中作為方法學(xué)的信息 方法線性 進(jìn)行線性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn) 儀器的熟悉過(guò)程 執(zhí)行分析過(guò)程的實(shí)驗(yàn)室人員必須掌握儀器操作和維護(hù)程序 樣本準(zhǔn)備方法和校準(zhǔn) 對(duì)較簡(jiǎn)單的設(shè)備需要5天或更少時(shí)間 對(duì)較復(fù)雜的多通道設(shè)備需要5天或更長(zhǎng)時(shí)間 實(shí)驗(yàn)周期 在完成儀器熟悉過(guò)程后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)并收集數(shù)據(jù) 全部實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)采集應(yīng)在同一工作日內(nèi)完成 線性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn) 樣本要求 最少4個(gè)濃度水平 推薦5個(gè)水平 基質(zhì)效應(yīng) 應(yīng)使用與病人樣本相似的樣本或注明基質(zhì)類型 可以使用的樣本 病人混合血清理想的樣本基質(zhì)高值樣本 高于上限30 低值樣本 線性低限或更低 可以使用的樣本 含添加物的混合病人血清 加入品在沒(méi)有干擾物存在時(shí)不需高純度 經(jīng)處理的材料稀釋的混合血清用于降低分析物濃度 材料處理 透析 熱處理 層析 可以使用的樣本 生理鹽水稀釋的混合血清 在線性實(shí)驗(yàn)中使用此類樣本可掩蓋不同的基質(zhì)效應(yīng) 商品質(zhì)控或校準(zhǔn)品 此類樣本由于不是正常的生理形式 可掩蓋實(shí)際的線性結(jié)果 可以使用的樣本 不同比例稀釋商品質(zhì)控物 水溶液 一般無(wú)基質(zhì)效應(yīng)其它溶液 基質(zhì)效應(yīng)與有機(jī)溶劑相似 推薦的樣本添加材料 ALB 白蛋白干粉 humanfractionV 乙醇 無(wú)水乙醇ALP 純酶AMS 腮腺或胰腺提取物BIL 膽紅素純品Ca CaCO3Cl NaCl 推薦的樣本添加材料 CHOL 膽固醇純品或稀釋質(zhì)控品CO2 CaCO3CREA 標(biāo)準(zhǔn)液或高值血清 ALT 純酶GLU 右旋糖AST 純酶ALT 純酶 推薦的樣本添加材料 HBD 純酶LDH 純酶Lipase 胰腺提取物Mg MgCl2P K H 2PO4或Na H PO4TP 白蛋白干粉 人或牛的成份VUA 在得不到高值病人樣本時(shí) 使用標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液或干燥尿酸 BUN 在得不到高值病人樣本時(shí) 使用標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液或干燥尿素 樣本分析順序 分析序列應(yīng)為隨機(jī)排列 有顯著攜帶污染時(shí) 應(yīng)用空白隔開(kāi)樣本 每個(gè)實(shí)驗(yàn)組內(nèi)應(yīng)至少分析4個(gè) 最好是5個(gè) 不同濃度水平的樣本 樣本濃度范圍 應(yīng)覆蓋待評(píng)線性范圍的上 下限 評(píng)價(jià)結(jié)果不滿意時(shí)應(yīng)重新設(shè)定濃度 線性范圍內(nèi)至少應(yīng)保留有4個(gè)濃度 樣本的準(zhǔn)備 足量的混合血清 低濃度混合血清 No1 高濃度混合血清 No5 血清 No2 3份 No1 1份 No5 血清 No3 2份 No1 2份 No5 血清 No4 1份 No1 3份 No5 樣本濃度計(jì)算 C1 V1 C5 V5濃度 V1 V5 數(shù)據(jù)收集 x1y1 1y1 2y1 3y1 4x2y2 1y2 2y2 3y2 4x3y3 1y3 2y3 3y3 4x4y4 1y4 2y4 3y4 4x5y5 1y5 2y5 3y5 4 數(shù)據(jù)評(píng)價(jià) 觀察有無(wú)明顯的數(shù)據(jù)錯(cuò)誤 若有明顯異常時(shí)應(yīng)判斷是否為離群點(diǎn) 如離群點(diǎn)超出2點(diǎn) 則保留全部數(shù)據(jù)或重做全部實(shí)驗(yàn) 離群點(diǎn)檢查 用于特定濃度Y值離群點(diǎn)的檢驗(yàn) 將4個(gè)重復(fù)值從大到小排列 Y1到Y(jié)4 計(jì)算 D Y1 Y4若Y1可能是離群點(diǎn) 計(jì)算 D1 Y1 Y2 D若Y4可能是離群點(diǎn) 計(jì)算 D4 Y3 Y4 D 離群點(diǎn)判斷 判斷值 Criticalvalue 0 05 0 765 0 01 0 889 繪圖和評(píng)價(jià) 線性X Y圖 X軸為分析物濃度 反應(yīng)值或儀器輸出值為Y軸 目測(cè)離群值 Y aX b 目測(cè)線性判斷是否符合要求 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)判斷和評(píng)價(jià) 注意 統(tǒng)計(jì)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)和臨床可接受限不同 慎用方法學(xué)線性范圍從0開(kāi)始 有臨床意義的濃度應(yīng)在線性評(píng)價(jià)中 最小的線性濃度醫(yī)學(xué)決定水平最大的線性濃度 參考文獻(xiàn) DixonW J andMasseyF J introductiontostatisticalanalysis 3rdedition McGraw HillBookCo NewYork 1969 pp308 310 500 536 537 WeissbergA andBeattyG H Tablesoftolerance limitfactorsfornormaldistributions Technometrics2 4 1960Graybill FranklinA Anintroductiontolinearstatisticalmodels volumeI McGraw HillBookCompany 1961 p191 臨床化學(xué)設(shè)備的精密度評(píng)價(jià) EvaluationofPrecisionPerformanceofClinicalChemistryDevices ApprovedGuideline 1984 EP5 精密度的內(nèi)容 批內(nèi)批間日內(nèi)日間總精密度 實(shí)驗(yàn)方法 試劑和校準(zhǔn)物 同一批號(hào)樣本 基質(zhì)與臨床樣本相似 2個(gè)以上濃度 參考醫(yī)學(xué)決定水平 實(shí)驗(yàn)天數(shù) 20天以上實(shí)驗(yàn)次數(shù) 每天2批 每批2個(gè) 批號(hào) 樣本 每個(gè)樣本重復(fù)2次 精密度實(shí)驗(yàn) 精密度評(píng)價(jià) 批內(nèi) 日內(nèi) 批間 日間 總精密度 批內(nèi)不精密度 I 總實(shí)驗(yàn)天數(shù) 一般為20天 j 每天測(cè)定的批次 一般為2批 Xij1 第i天j批實(shí)驗(yàn)第一次結(jié)果Xij2 第i天j批實(shí)驗(yàn)第二次 重復(fù) 結(jié)果 批間不精密度 I 實(shí)驗(yàn)天數(shù) 通常為20天 Xi1 第i天第一批實(shí)驗(yàn)結(jié)果的平均值 通常重復(fù)2次 Xi2 第i天第二批實(shí)驗(yàn)結(jié)果的平均值 通常重復(fù)2次 日間不精密度 I 實(shí)驗(yàn)天數(shù)X 所有結(jié)果的平均值Xi 第I天所有結(jié)果的平均值 總不精密度 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)的臨床準(zhǔn)確性評(píng)價(jià) NCCLGP 10 GP10 A AssessmentofTheClinicalAccuracyofLaboratoryTestsUsingReceiverOperatingCharacteristic ROC Plots ApprovedGuideline 1995 用ROC曲線圖評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)的臨床準(zhǔn)確性 定義 臨床準(zhǔn)確性ClinicalAccuracy 衡量檢驗(yàn)項(xiàng)目對(duì)于不同健康狀況的區(qū)分能力 如 健康與疾病 良性與惡性疾病 對(duì)治療的反應(yīng)性與不反應(yīng)性 預(yù)測(cè)疾病的好轉(zhuǎn)與惡化 定義 臨床有用性Usefulness 檢驗(yàn)信息在病人管理中的實(shí)用價(jià)值 如 檢驗(yàn)成本 假陽(yáng) 或假陰 性率 有損傷小 成本低的其他方法 檢驗(yàn)技術(shù)要求 檢驗(yàn)創(chuàng)傷和舒適性 定義 臨床檢驗(yàn)信息 準(zhǔn)確性敏感性Sensitivity特異性Specificity有用性 定義 ROC ReceiverOperatingCharacteristic接收機(jī)操作特性ROC曲線 描述實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)的敏感性和特異性關(guān)系的曲線 ROC曲線 定義 特異性Specificity真陰性結(jié)果 NT 數(shù)真陰性結(jié)果數(shù) 假陽(yáng)性結(jié)果 PF 數(shù) 定義 敏感性Sensitivity真陽(yáng)性結(jié)果 PT 數(shù)真陽(yáng)性結(jié)果數(shù) 假陰性結(jié)果 NF 數(shù) 定義 陽(yáng)性預(yù)測(cè)值 PPV 真陽(yáng)性結(jié)果數(shù)真陽(yáng)性結(jié)果數(shù) 假陽(yáng)性結(jié)果數(shù) 定義 陰性預(yù)測(cè)值 NPV 真陰性結(jié)果數(shù)真陰性結(jié)果數(shù) 假陰性結(jié)果數(shù) ROC曲線的意義 ROC曲線的意義 ROC曲線的意義 用ROC圖進(jìn)行方法比較 ROC曲線的繪制 ROC曲線的繪制 進(jìn)行臨床準(zhǔn)確性實(shí)驗(yàn)確定診斷的敏感性和特異性繪制ROC曲線圖ROC分析 敏感性 特異性的置信區(qū)間 ROC曲線下面積 多實(shí)驗(yàn)ROC曲線的比較 其他 ROC曲線的繪制 ROC曲線的繪制 ROC曲線制作及分析軟件 CLINROCMetzROCANALYZERROCLABRULEMAKERSIGNALTEP UH ROC曲線的優(yōu)點(diǎn) 利用簡(jiǎn)單易于分辨的圖形反應(yīng)臨床準(zhǔn)確性指標(biāo) 不需要確定臨床決定水平 可直接用于不同檢驗(yàn)方法臨床準(zhǔn)