【畢業(yè)學(xué)位論文】（Word原稿）玉米抗大斑病種質(zhì)的抗性基因分析作物種質(zhì)資源碩士論文

密級(jí) : 論文編號(hào) : 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 學(xué)位論文 玉米抗大斑病種質(zhì)的抗性基因分析 I 摘 要 大斑突臍孢菌（ 起的玉米大斑病 是世界性流行病害，目前該菌已成為影響我國(guó)玉米生產(chǎn)的主要病原菌之一。利用抗病品種是防治大斑病最為經(jīng)濟(jì)、有效的措施。玉米與玉米大斑病菌間的互作符合 “基因?qū)颉奔僬f(shuō)，因此可以利用基因推導(dǎo)方法對(duì)玉米資源進(jìn)行抗大 斑病基因鑒定。隨著分子標(biāo)記技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用，包括玉米大斑病抗性基因在內(nèi)的許多植物抗病基因被分子定位和作圖。利用與抗病基因緊密連鎖的分子標(biāo)記對(duì)抗病資源進(jìn)行檢測(cè)是鑒定抗病基因快速而有效的方法。本研究對(duì) 100 份抗大斑病玉米資源進(jìn)行了抗性基因推導(dǎo)，分析了部分已發(fā)表的抗大斑病基因連鎖標(biāo)記的實(shí)用性，利用 析技術(shù)構(gòu)建了抗大斑病基因的新的連鎖標(biāo)記，并利用有效的標(biāo)記檢測(cè)了抗性種質(zhì)中可能攜帶的抗性基因。主要研究結(jié)果如下： 1. 用噴霧接種法鑒定了 100 份抗大斑病玉米資源，通過(guò)分析寄主與病菌小種的互作模式，確認(rèn) 49 份玉米資源攜帶 因，占供試資源的 49； 24 份攜帶 因，占供試資源的 24； 29 份攜帶 因，占供試資源的 29； 13 份攜帶 因，占供試資源的 13。 2. 利用含不同抗大斑病基因背景的黃早四近等基因系對(duì)已報(bào)道的與抗性基因 鎖的引物 抗性基因 鎖的引物 果發(fā)現(xiàn)這 5 對(duì)引物在近等基因系內(nèi)均有有效擴(kuò)增，且片段大小基本一致，并未產(chǎn)生多態(tài)性擴(kuò)增或與相關(guān)抗性基因 背景一致的 特異性的 擴(kuò)增。 3. 利用 4 個(gè)成對(duì)近等基因系對(duì) 29 對(duì) 物分別進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)只有位于染色體 黃早四 黃早四這對(duì)近等基因系內(nèi)的擴(kuò)增具有多態(tài)性，初步推測(cè) 鎖。 4. 利用 30 條 物對(duì)黃早四近等基因系進(jìn)行了擴(kuò)增，發(fā)現(xiàn)引物 1012、 擴(kuò)增產(chǎn)生特異性條帶。對(duì)這些特異條帶進(jìn)行回收、測(cè)序、引物設(shè)計(jì)、擴(kuò)增檢測(cè)，獲得與 性基因連鎖的 物對(duì) 與 性基因連鎖的 物對(duì) 用這兩對(duì)引物對(duì) 100 份抗性資源進(jìn)行鑒定，檢測(cè)出 20份材料中攜帶 因， 10 份材料中攜帶 因，結(jié)果與基因推導(dǎo)方法一致。 關(guān)鍵詞： 玉米，大斑病，抗性，基因 is of in is of is to E. is a of so in be on to in a of to in as of 986 004. 1. 100 t1 9 9%; 4 4%; 9 9%; 3 3%. 2. of t2 tN in no or in of 3. 29 of on It be t3 4. 30 to of to be to be t3 to be to 00 t3 0 tN 0 略 語(yǔ) 表 縮略詞 英文全稱 中文全稱 GA NA , N, N, N芐青霉素 堿基對(duì) 乙二胺四乙酸二鈉鹽 表達(dá)序列標(biāo)簽 聚丙烯酰胺凝膠電泳 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 數(shù)量性狀位點(diǎn) 隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性 制性酶切片段長(zhǎng)度多態(tài)性 抗病基因同源序列 每秒轉(zhuǎn)速 特征序列擴(kuò)增區(qū) 單核苷酸多態(tài)性 簡(jiǎn)單重復(fù)序列 序列標(biāo)簽位點(diǎn) N, N, N, N三（羥甲基）氨基甲烷 513 吲哚 近等基因系 錄 第一章 引 言 . 1 1. 玉米大斑病概況 . 1 米大斑病的病原 . 1 米大斑病的癥狀 . 1 害發(fā)生和環(huán)境條件 . 2 理小種分化 . 2 國(guó)玉米大斑病的流行與變化 . 2 病機(jī)制 . 3 米抗大斑病資源篩選 . 3 米大斑病的防治方法 . 4 2. 玉米大斑病抗性基因及抗性遺傳 . 4 米大斑病抗性基因的來(lái)源 . 4 米大斑病抗性基因的遺傳特征 . 5 3. 子標(biāo)記的研究進(jìn)展 . 6 記 . 6 記 . 7 記 . 7 4. 玉米抗大斑病基因的分子標(biāo)記 . 7 找目標(biāo)基因分子標(biāo)記的方法 . 7 玉米大斑病基因的分子標(biāo)記 . 8 5. 分子標(biāo)記輔助選擇育種 . 10 6. 研究目的和意義 . 11 第二章 玉米抗大斑病種質(zhì)的抗性基因推導(dǎo) . 12 1. 材料與方法 . 12 驗(yàn)材料 . 12 驗(yàn)方法 . 12 2. 結(jié)果與分析 . 13 米資源對(duì)大斑病 4 個(gè)生理小種抗性鑒定結(jié)果 . 13 米大斑病發(fā)病的影響因素 . 16 3. 討論 . 16 第三章 已報(bào)道與 性基因連鎖分子標(biāo)記的應(yīng)用檢測(cè) . 17 1. 材料與方法 . 17 驗(yàn) 材料 . 17 驗(yàn)試劑及儀器 . 17 驗(yàn)方法 . 18 2. 結(jié)果與分析 . 23 米基因組 提取與檢測(cè) . 23 因連鎖標(biāo)記的檢測(cè) . 24 因連鎖標(biāo)記的檢測(cè) . 25 V 物 增片段回收、克隆及序列分析 . 25 3. 討論 . 28 第四章 因連鎖 記的篩選 . 29 1. 材料與方法 . 29 驗(yàn)材料 . 29 驗(yàn)方法 . 29 2. 結(jié)果與分析 . 31 米基因組 提取與檢測(cè) . 31 物的擴(kuò)增與檢測(cè) . 31 3. 討論 . 33 第五章 玉米大斑病抗性基因的 析 . 34 1. 材料與方法 . 34 驗(yàn)材料 . 34 驗(yàn)方法 . 34 2. 結(jié)果與分析 . 35 米基因組 提取與檢測(cè) . 35 物的擴(kuò)增與檢測(cè) . 36 異性 段的克隆 . 37 3. 討論 . 41 結(jié)論 . 42 參考文獻(xiàn) . 43 致謝 . 48 作者簡(jiǎn)歷 . 49 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第一章 引言 1 第一章 引 言 1876 年首次在意大利發(fā)現(xiàn)的玉米大斑病，目前已經(jīng)成為世界性流行病害，主要發(fā)生在氣候冷涼濕潤(rùn)地區(qū)。中國(guó)在 1899 年首次記載了大斑病的發(fā)生，目前病害已遍及全國(guó)，以東北、華北北部、西北和南方山區(qū)的冷涼玉米產(chǎn)區(qū)發(fā)病較重（ 董金皋， 2001） 。 大斑病的流行常對(duì)玉米生產(chǎn)造成嚴(yán)重的損失， 一般年份減產(chǎn) 20左右，嚴(yán)重流行年份減產(chǎn)可達(dá) 50以上（ 孫淑琴等， 123）。由于目前育種中使用的大斑病抗源貧乏、抗病品種的單一布局及大斑病病菌小種的變異， 20 世紀(jì) 80 年代 末期在生產(chǎn)上推廣的骨干自交系 8112 和 5003 等高度感染，帶有 因的 也出現(xiàn)萎蔫斑 （ 董金皋， 2001） ；以后的十年間， 遼寧等北方省區(qū)出現(xiàn)了玉米大斑病菌 2 號(hào)小種，且逐步變?yōu)閮?yōu)勢(shì)種群，使帶 因的丹玉 13 號(hào)等品種抗病性逐步喪失，大斑病的發(fā)生逐年加重，玉米大面積減產(chǎn)（ 陳剛等， 1993）。 根據(jù)田間調(diào)查、生產(chǎn)信息收集和對(duì)國(guó)家玉米區(qū)域試驗(yàn) 200 余個(gè)試點(diǎn)多年結(jié)果數(shù)據(jù)的分析，玉米大斑病近年來(lái)又呈現(xiàn)明顯加重趨勢(shì)，特別是在東北春玉米區(qū)和西南春玉米區(qū)的局部地區(qū)已經(jīng)成災(zāi)（ 王曉鳴等， 2006；王玉萍等， 2006） 。 1. 玉米大斑病概況 米大斑病的病原 玉米大斑病（ 由大斑剛毛球腔菌 性態(tài)為大斑突臍孢 所引起的以葉部產(chǎn)生大型病斑癥狀為主的玉米病害 ， 又稱條斑病、煤紋病、枯葉病、葉斑病等 。 大斑病菌主要以菌絲體或分生孢子在發(fā)病的組織（病殘?bào)w）中越冬，因此遺落在 田間的病葉和秸稈是重要的初侵染源；種子上和堆肥中尚未腐爛的病菌也能越冬，成為來(lái)年的初侵染來(lái)源 （ 董金皋， 2001） 。 米大斑病的癥狀 玉米在整個(gè)生育期均可感染大斑病。在自然條件下由于存在階段抗病性，苗期很少發(fā)病，到玉米生長(zhǎng)后期，尤其是在抽雄后發(fā)病逐漸加重。 病菌主要危害葉片，嚴(yán)重時(shí)也可危害葉鞘、苞葉和籽粒。葉片發(fā)病后，發(fā)病部位先出現(xiàn)水漬狀（室內(nèi)）或灰綠色（田間）小斑點(diǎn)，隨后沿葉脈方向迅速擴(kuò)大，形成黃褐色或灰褐色梭形大斑，病斑中間顏色較淺，邊緣較深 （ 董金皋， 2001） 。 病害主要發(fā)生在玉米抽雄以后，下部葉片首先發(fā)病并迅速向上部葉片擴(kuò)展，在葉片上產(chǎn)生大量病斑，影響植株光合作用，造成籽粒灌漿不足，導(dǎo)致產(chǎn)量降低。 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第一章 引言 2 害發(fā)生和環(huán)境條件 玉米大斑病分生孢子形成的溫度 15 33，最適溫度 23 25；分生孢子萌發(fā)的溫度5 42，較適宜的溫度 26 32。不同小種菌絲生長(zhǎng)、孢子形成和萌發(fā)的溫度不同。分生孢子形成和萌發(fā)都需要較高的溫度，但孢子形成后抗干燥能力很強(qiáng)，在玉米種子上可存活 1年以上。 該病的發(fā)病適溫為 20 25，超過(guò) 28則對(duì)病害有抑制作用；適宜發(fā)病的相對(duì)濕度在90以上，這對(duì)孢子的形成、萌發(fā)和 侵入都有利。因此， 7 8 月份，如果溫度偏低，多雨高濕，日照不足，均有利于大斑病的發(fā)生和流行。中國(guó)北方各玉米產(chǎn)區(qū)， 6 8 月氣溫大多適于發(fā)病，這樣降雨就成為大斑病發(fā)病輕重的決定因素 （ 董金皋， 2001） 。 理小種分化 玉米大斑病菌的寄主范圍很廣，它能侵染玉米、高粱、蘇丹草、約翰遜草、狗牙草和稗等多種禾本科植物。大斑病菌有明顯的生理分化現(xiàn)象， 1974 年將大斑病菌劃分為兩個(gè)?；?，即高粱?；秃陀衩讓；?。前者可以侵染玉米、高粱、蘇丹草和約翰遜草，而后者只侵染玉米。在玉米?；椭?，根據(jù) 對(duì)玉米中含有的顯性單基因 毒性差異分為不同的生理小種。 1989 年， 建議修正大斑病菌生理小種命名法 (表 1)，以有效抗性基因 /無(wú)效寄主基因表示，并以無(wú)效寄主基因的序號(hào)作為該小種的名稱，與該小種的致病性相關(guān)，這樣可以將新發(fā)現(xiàn)的生理小種和新鑒定的抗性基因明確表示出來(lái)。 表 1 玉米大斑病菌的生理分化 he 種名稱 新命名法 * 小種名稱 病斑反應(yīng)型 毒力公式 （有效抗性基因 /無(wú)效寄主基因） 0 R R R R 0 2 1 S R R R 23 R S S R 23N R S S S 2N R S R S 國(guó)玉米大斑病的流行與變化 玉米病害的發(fā)生發(fā)展 , 按照生物進(jìn)化的規(guī)律而演變 , 玉米品種的更換 , 與玉米病害種類的更迭及某些病害的病原菌生理小種的演替是相輔相成的。 在自然生態(tài)系統(tǒng)中，寄主植物與有害生物（ 病原菌和害蟲(chóng)）大多是遺傳上具有多樣性的異質(zhì)群體。雙方通過(guò)相互適應(yīng)和選擇而協(xié)同進(jìn)化（ 小種組成比例常隨寄主的品種類型和自然、栽培條件的變化而消長(zhǎng)。當(dāng)某一地區(qū)大面積推廣某個(gè)品種時(shí)，能寄生與該品種上的小種，便逐漸繁殖、積累而成為優(yōu)勢(shì)小種；而原來(lái)的優(yōu)勢(shì)小種，由于失去了最優(yōu)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第一章 引言 3 的寄主條件便降為次要小種。 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)造成的品種單一化和遺傳單一化加速了對(duì)病原菌定向選擇和優(yōu)勢(shì)生理小種形成，由于大斑病生理小種的變異，致使原來(lái)抗大斑病的玉米品種抗性不斷 “喪失 ”，對(duì)玉米生產(chǎn)造成嚴(yán)重危害。根據(jù)病菌與寄主的互作， 在理論上，玉米大斑病病菌可以存在 16 個(gè)小種。60 年代以來(lái)，國(guó)內(nèi)外對(duì)于玉米大斑病菌生理小種的變化已有很多報(bào)導(dǎo)。 潘順?lè)?等 （ 1982） 對(duì) 1977 1979 年采自全國(guó) 21 個(gè)玉米產(chǎn)區(qū)的 171 個(gè)玉米大斑病標(biāo)樣進(jìn)行測(cè)定， 發(fā)現(xiàn) 當(dāng)時(shí)我國(guó)玉米產(chǎn)區(qū)大斑 病 菌完全是 0 號(hào)生理小種，沒(méi)有 1 號(hào)小種或其他小種 。吳紀(jì)昌等于 1983 年在遼寧丹東發(fā)現(xiàn)了 1 號(hào)小種，然而由于生產(chǎn)上大面積推廣含 因的玉米品種，使得 1 號(hào)小種迅速發(fā)生流行。 吳安國(guó)等 （ 1986， 1989） 首次在云南報(bào)道了侵染 菌株 ， 即 23 號(hào) 生理小種；而 0 號(hào)小種仍為當(dāng)時(shí) 的 優(yōu) 勢(shì)小種 。李曉等 1999 年報(bào)道，在我國(guó)四川、貴州等地已經(jīng)發(fā)現(xiàn)有 1、 23、 23N 號(hào)生理小種，以及一些未定型的生理小種。 桂秀梅 等（ 2003） 對(duì) 1999 年采集來(lái)自河北，遼寧，黑龍江等省的 40 份玉米大斑病菌進(jìn)行鑒定， 共 鑒定出 0 號(hào) 、 1 號(hào) 、 12 號(hào) 、 13 號(hào) 、 3 號(hào) 、 1N 號(hào) 、 3N 號(hào) 、 N 號(hào) 、 23N 號(hào) 、 12N 號(hào) 、123N 號(hào) 等 16 個(gè)生理小種。 今后隨著玉米新雜交種的更新?lián)Q代，特別是 抗性基因在玉米雜交種中的普遍利用，勢(shì)必加大對(duì)病菌群體的選擇壓力，造成病菌群體內(nèi)的變異，使之很快產(chǎn)生更多的新的致病類型 ，從而對(duì)我國(guó)的玉米種植和生產(chǎn)產(chǎn)生嚴(yán) 重影響。 病機(jī)制 （ 1957）報(bào)道，孢子萌發(fā)和侵入的最高峰出現(xiàn)在接種后 12 18 小時(shí)，約有90%是直接侵入的，多數(shù)侵入點(diǎn)為表皮細(xì)胞壁的結(jié)合處； 10%左右經(jīng)氣孔侵入。白金鎧（ 1985）和劉紀(jì)麟（ 1991）研究報(bào)道，從孢子萌發(fā)、侵入寄主組織到發(fā)病出現(xiàn)病斑，不同基因型的玉米品系之間無(wú)明顯的差異。 在多基因抗性玉米上，菌絲侵入葉片組織內(nèi)木質(zhì)部后，在木質(zhì)部的管胞和導(dǎo)管里縱向和橫向生長(zhǎng)受到阻礙，延緩病斑擴(kuò)大，其病斑區(qū)擴(kuò)大是由壞死的葉肉組織里菌絲生長(zhǎng)造成的。在 因控制的褪綠斑里，菌絲在木質(zhì)部 導(dǎo)管和管胞中生長(zhǎng)受抑制，在被菌絲侵害區(qū)的葉肉細(xì)胞里產(chǎn)生特殊的顆粒狀物質(zhì)，葉肉細(xì)胞解體，葉綠體結(jié)構(gòu)變成無(wú)定形狀態(tài)，病斑區(qū)外觀表現(xiàn)為褪綠斑；由 制的無(wú)病斑抗性，菌絲不能進(jìn)入木質(zhì)部導(dǎo)管和管胞里，在葉肉細(xì)胞里細(xì)胞物質(zhì)消失，或葉綠體結(jié)構(gòu)被破壞，細(xì)胞內(nèi)沉積許多小球狀物質(zhì)，它比具有 因的寄主產(chǎn)生的顆粒狀物質(zhì)大，但數(shù)量少，且局限于幾個(gè)細(xì)胞中（ ， 1965；劉曙東等，1986）。 米抗大斑病資源篩選 對(duì)于大范圍發(fā)生并通過(guò)氣流傳播的真菌病害，主要的控制措施是采用抗病品種，而培育抗病品種的前提是篩選 抗病資源。 “七五”、“八五”期間 ， 中國(guó)農(nóng)科院品資所組織全國(guó)有關(guān) 科研單位 ， 采取統(tǒng)一供種、設(shè)立抗感對(duì)照品種、對(duì)中抗以上材料重復(fù)鑒定的評(píng)價(jià)方法 ，系統(tǒng)地同步異地開(kāi)展了玉米資源對(duì)大斑病抗性鑒定 ， 完成了 6085 份的抗性鑒定工作 ,發(fā)現(xiàn)抗大斑病的種質(zhì)（中抗水平以上） 654 份，只占 。 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第一章 引言 4 1997曉鳴等采用人工接種方法對(duì) 64份自交系和 28份育成材料進(jìn)行了鑒定，中抗 大斑病以上材料為 24份，其中高抗的只有 5份。趙寶榮 2000年對(duì) 496份玉米自交系進(jìn)行大斑病抗性鑒定，抗病材料占 其中高抗的只占 1 。佟圣輝等于 2005年對(duì)我國(guó)玉米育種和生產(chǎn)上應(yīng)用的五大雜優(yōu)群自交系對(duì)主要病害的抗性進(jìn)行了鑒定和分析，認(rèn)為 其組配雜交種在 米大斑病的防治方法 大斑病的防治，應(yīng)采取以推廣和利用抗病品種為主，加強(qiáng)栽培管理，及時(shí)輔以必要的藥劑防治（ 董金皋， 2001；劉紀(jì)麟， 1991； 白金鎧， 1997；王曉鳴， 2002） 。 植抗病品種，進(jìn)行合理布局 種植抗病品種是控制大斑病發(fā)生和流行的根本途徑，是最經(jīng)濟(jì)有效的措施。大斑病菌生理分化現(xiàn)象明顯，在選用抗病 品種時(shí)應(yīng)注意小種類群與玉米品系之間的關(guān)系，根據(jù)病菌生理小種類群的變異消長(zhǎng)和穩(wěn)定程度，慎重選用帶 因的玉米品系。 在大的區(qū)域里合理布局品種，在一定區(qū)域范圍里種植一套抗病基因品種，在另一地區(qū)里種植另一套抗病基因品種，起到隔離作用，限制住毒力小種的定向選擇，防止優(yōu)勢(shì)小種的形成和擴(kuò)散。在小的區(qū)域里，搭配種植不同抗性的品種，使品種群體的抗病性在遺傳上是異質(zhì)的、多樣的。 進(jìn)栽培技術(shù)，及時(shí)清除菌源 玉米大斑病菌屬于弱寄生菌，當(dāng)植株從營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)過(guò)渡到生殖生長(zhǎng)時(shí)易受到病菌的侵染，因此增施糞肥可提高寄主的抗病能 力。另外，適期早播可以縮短后期處于高溫多雨和低濕階段的生育日數(shù)，對(duì)夏玉米避病和增產(chǎn)有較明顯的作用。 大斑病菌能在病株殘?bào)w上，以分生孢子和菌絲體安全越冬，成為第二年玉米發(fā)病的初侵染來(lái)源。因此玉米收獲以后，搞好田間衛(wèi)生，徹底清除田內(nèi)外病殘組織，消滅初侵染來(lái)源，是一項(xiàng)行之有效的措施。 劑防治 由于玉米植株高大，田間作業(yè)比較艱苦，因此使用化學(xué)藥劑防治玉米大斑病在生產(chǎn)上較難推廣，但在極端情況下（抗病品種大面積喪失抗性）以及在發(fā)病初期仍不失為一種補(bǔ)救措施。常用藥劑有 75百菌清可濕性粉劑 300 500 倍液 、 50多菌靈可濕性粉劑 500 倍液、80代森錳鋅可濕性粉劑 500 倍液。 2. 玉米大斑病抗性基因及抗性遺傳 米大斑病抗性基因的來(lái)源 因是 1959 年從來(lái)源于秘魯?shù)谋延衩?婦人指上發(fā)現(xiàn)的，受顯性單基因控制（ 1961），對(duì)大斑病菌生理小種 0、 23、 23N、 2N 號(hào)小種均表現(xiàn)為褪綠斑抗性，而對(duì) 1 號(hào)生理小種則表現(xiàn)為萎蔫斑。該基因可以通過(guò)回交方法轉(zhuǎn)育到任何自交系里，已被廣中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第一章 引言 5 泛應(yīng)用于國(guó)內(nèi)外的玉米雜交種組配選育中。為表明 因的來(lái)源，凡用 育的加一個(gè) A 字，如 婦人指轉(zhuǎn)育的加一個(gè) B 字，如 因是 來(lái)自澳大利亞自交系 獲得的。它與 因座不同，用 交后可將兩個(gè)顯性基因分離開(kāi)，一個(gè)是 因座上有一個(gè) 個(gè)是 因座上有一個(gè) 因。 大斑病菌 0 號(hào)和 1 號(hào)生理小種均表現(xiàn)為褪綠斑抗性，而對(duì) 23、 23975）。 因是 佛羅里達(dá)州的摩擦禾（ 分離到的一個(gè)獨(dú)立于 因的新的顯性單基因，它對(duì) 0、 1 和 2N 號(hào)生理小種均表現(xiàn)褪綠斑抗性，而對(duì) 23 和 23N 號(hào)生理小種則表現(xiàn)為萎蔫斑（ 1977）。 因?qū)儆跓o(wú)病斑抗性， 1975 年 羅得西亞的墨西哥玉米品種 衍生出一個(gè)顯性單基因抗病類型（ 1975）。這種抗性阻止病菌進(jìn)入木質(zhì)部導(dǎo)管，延長(zhǎng)了病害的潛育期，推遲病斑出現(xiàn)和開(kāi)始產(chǎn)孢的時(shí)間。這個(gè)基因?qū)?0、 1 和 23 號(hào)生理小種均表現(xiàn)抗性，對(duì) 23N 號(hào)小種則表現(xiàn)感病。 1995 年 道發(fā)現(xiàn) 357 系對(duì)大斑病 0、 1、 23 和 23N 號(hào)生理小種表現(xiàn)出褪綠斑抗性，該表現(xiàn)型由一個(gè)隱性基因控制，定名為 1995）。 因是 來(lái)自 選育出來(lái)的自交系 發(fā)現(xiàn)的。經(jīng)與 6 個(gè)自交系雜交和多基因抗病親本回交，結(jié)果表明 大斑病的抗性是由單基因控制的，其主效基因不同于 因，認(rèn)為是位于另一基因座上的 因（ ， 1993）。 玉米對(duì)大斑病菌的抗性有數(shù)量抗病性和質(zhì)量抗病 性兩種類型。 數(shù)量抗病性是受多基因控制的水平抗病性，對(duì)所有大斑病菌的生理小種均有效，而且?guī)缀跛械挠衩追N質(zhì)（雜交種、自交系、農(nóng)家種等）都具有這種抗性。雜交子代對(duì)大斑病的抗性呈部分顯性，多介于兩個(gè)親本之間，且多傾向于抗病強(qiáng)的親本。這種由多基因聯(lián)合作用控制的抗病性，不易受到新的生理小種克服而喪失抗病性，這種抗病基因通過(guò)育種程序可以累加，采取輪回選種方法是一種集中抗病基因的有效方法 （ ， 1994） 。據(jù) 定，雜交種里抗性表現(xiàn)為累加性和上位性，所有雜交組合都是以累加性基因作用為最 重要的，非累加基因效應(yīng)一般較小 （ ， 1971） 。 質(zhì)量抗病性是受顯性單基因控制的垂直抗性，但也有少數(shù)自交系表現(xiàn)的抗性不是由顯性單基因控制，其中 抗性可能是隱性遺傳的 （ ， 1981） 。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了由 制的褪綠斑抗性，其中 因是弱基因，其純合時(shí)比雜合時(shí)抗病性更強(qiáng)（ 劉紀(jì)麟， 1991）。褪綠斑抗性的作用是限制病斑的擴(kuò)展，抑制產(chǎn)孢，大大減少初始菌量，從而抑制病害的流行。此外，還有由顯性單基因 制的無(wú)病斑抗性，其作用主要是延長(zhǎng)病害潛育期，推遲病斑出 現(xiàn)和開(kāi)始產(chǎn)孢的時(shí)間。 因與 因是獨(dú)立遺傳的，并對(duì)它們具有顯性上位作用，當(dāng)它與 因存在于同一個(gè)體中時(shí)，由于其抗病作用發(fā)生于病斑的早期，因而抑制了褪綠斑表型的表達(dá)，仍然表現(xiàn)為無(wú)病斑（徐中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第一章 引言 6 尚忠， 1987）。在組配雜交種的親本中有一個(gè)親本具有單基因抗性時(shí)，其雜交后代多表現(xiàn)為褪綠斑呈顯性遺傳，大部分表現(xiàn)為超親抗性 （李莫然 ， 1990） 。 在不同的自然環(huán)境條件下，各種抗性基因均能表現(xiàn)出不同程度的抗病作用。 因的抗性受環(huán)境條件的影響較小， 因受環(huán)境條件影響較大。 因抗性受環(huán)境影響最明顯，在春季表現(xiàn)為理想的無(wú)病斑抗性，而在秋季其病斑反應(yīng)型與感病基因的反應(yīng)型很難區(qū)別，抗病作用顯著下降（ 朱友林， 1995）。 顯性單基因相互獨(dú)立遺傳，但這些抗性基因具有累加效應(yīng)