【畢業(yè)學(xué)位論文】（Word原稿）太谷核不育基因ms2區(qū)域BAC跨疊群的構(gòu)建及不育相關(guān)基因的研究生化與分子生物學(xué)博士論文

密級：內(nèi)部 5 年 論文編號： 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 博士學(xué)位論文 太谷核不育基因 域 疊群的構(gòu)建及不育相關(guān)基因的研究 A on I on 錄 摘 要 . 一章 文獻(xiàn)綜述 . 1 物雄性不育的細(xì)胞生物學(xué)研究 . 1 藥的結(jié)構(gòu)和發(fā)育 . 1 粉發(fā)育與雄性不育 . 3 藥發(fā)育中的細(xì)胞程序性死亡 . 5 小麥細(xì)胞核雄性不育 . 6 麥細(xì)胞核雄性不育材料的發(fā)掘 . 6 麥細(xì)胞核雄性不育基因的定位 . 7 谷核不育小麥的研究進(jìn)展 . 8 谷核不育小麥的發(fā)現(xiàn)及其遺傳特點 . 8 谷核不育小麥的生理生化特性 . 8 谷核不育小麥雄性敗育過程的細(xì)胞學(xué)特征 . 8 谷核不育基因研究的意義 . 9 記性狀的引入 . 9 太谷核不育基因的分子水平研究 . 11 物基因克隆及表達(dá)分析 . 12 位克隆技術(shù)與分子標(biāo)記 . 13 于同源序列的基因克隆 . 19 位雜交技術(shù) . 21 題意義及技術(shù)路線 . 23 題意義 . 23 術(shù)路線 . 23 第二章 間 疊群構(gòu)建、序列測定和分子標(biāo)記的開發(fā). 25 料與方法 . 25 料 . 25 法 . 25 果與分析 . 35 間 疊群的搭建 . 35 隆測序 . 36 列中尋找分子標(biāo)記 . 43 論 . 49 倍體基因組文庫為小麥基因的圖位克隆開辟新途徑 . 49 分同源群在開發(fā)分子標(biāo)記中的干擾 . 50 分布和特點 . 50 第三章 矮敗 /中國春小麥近等基因系的形態(tài)學(xué)觀察及不育過程中的程序性死亡研究 . 52 料和方法 . 52 物材料 . 52 料處理 . 52 導(dǎo)的 端標(biāo)記（ . 52 離與電泳 . 54 果與分析 . 54 敗 /中國春小麥近等基因系孕穗期小穗與小花的形態(tài)學(xué)觀察 . 54 敗 /中國春小麥孕穗期花藥的細(xì)胞學(xué)觀察 . 54 敗 /中國春小麥孕穗期花藥的細(xì)胞程序性死亡的檢測 . 58 論 . 61 第四章 小麥雄性不育相關(guān)基因的分離及表達(dá)分析 . 62 料和方法 . 62 料 . 62 法 . 62 果與分析 . 72 小麥雄 性不育相關(guān)基因的定位分析 . 72 敗 /中國春小麥近等基因系可育和不育植株總 測結(jié)果 . 74 谷核不育小麥雄性不育相關(guān)基因的表達(dá)分析 . 74 谷核不育相關(guān)基因全長序列的獲得 . 76 位雜交結(jié)果分析 . 78 論 . 79 麥基因組中存在擬南芥 同源基因 . 79 谷核不育相關(guān)基因的表達(dá)模式 . 81 第五章 全文結(jié)論 . 82 參考文獻(xiàn) . 83 致 謝 . 96 附 錄 . 97 作者簡歷 . 105 i 摘 要 太谷核不育小麥?zhǔn)俏覈?1972 年發(fā)現(xiàn)的一份珍貴小麥材料 ， 雄性不育穩(wěn)定、徹底，不受外界環(huán)境條件的干擾和影響，其不育性受顯性單基因控制，國際上基因注冊符號為 敗小麥?zhǔn)蔷哂邪捇驑?biāo)記的顯性核不育材料，其顯性不育基因 位于 小麥 4D 染色體短臂上與顯性矮稈基因 密連鎖。太谷核不育基因 世界上發(fā)現(xiàn)的第一個小麥的顯性核不育基因，該基因的克隆對于保護(hù)我國自主的知識產(chǎn)權(quán)以 及理解小麥育性的機制都有重大的意義。本研究的主要目的就是搭建 疊群，為圖位克隆 因奠定基礎(chǔ)，并對不育過程及相關(guān)基因進(jìn)行研究。 疊群的構(gòu)建是圖位克隆基因的基礎(chǔ)。本研究 利用與 因緊密連鎖的分子標(biāo)記篩選六倍體矮敗 /中國春小麥 庫和 D 基因組粗山羊草 庫， 經(jīng)過 析和 端測序搭建起 396 疊群。 對該跨疊群中的 200行測序， 共獲得 3,072條 高質(zhì)量的序列，拼接后長約 198 有 3 個基因， 18 種類型簡單重復(fù)序列，基因區(qū)僅占 整個 列的 6%。 對小麥的 的基因與 水稻的 基因 位點進(jìn)行比較分析，發(fā)現(xiàn)包括選基因在內(nèi)共有 3 個同源基因保持了很好的微共線性，但 仍有1 個基因在水稻 沒發(fā)現(xiàn)同源基因，水稻中也有 7 個假定基因在 1沒有同源基因。 通過 列和 列，設(shè)計引物在矮敗 /中國春小麥近等基因系矮稈不育和高稈可育材料中進(jìn)行擴增，尋找基因區(qū)和低拷貝區(qū)的等位特異性分子標(biāo)記和 記，盡管該區(qū)域序列存在有很多差異，但是由于 部分同源群的干擾，沒有開發(fā)出分子標(biāo)記；根據(jù)的 列設(shè)計了 18 對引物，結(jié)合 7 對 4D 染色體上的 物對矮稈不育株、高稈可育株和高稈不育株進(jìn)行檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn) 16 對引物沒有多態(tài)， 8 對引物只在 有擴增，一對引物沒有擴增。說明這一段非常保守，不易檢測出多態(tài)。 為了更好地理解敗育過程，本研究對矮敗 /中國春小麥高稈可育株和矮稈不育株孕穗期不同穗長的幼穗取其中部小穗的第 1 小花的形態(tài)進(jìn)行形態(tài)學(xué)和細(xì)胞學(xué)的觀察，發(fā)現(xiàn)在幼穗長到 6育花藥外觀與可育花藥差異非常明顯，此后，不育花藥不再繼續(xù)生長 ?？捎筒挥幕ㄋ幗?jīng)過鏡檢確定，當(dāng)花藥長度為 ，不育花藥形成花粉母細(xì)胞； 進(jìn)入減數(shù)分裂；并且能夠完成減數(shù)分裂進(jìn)入四分體階段，在形成幼嫩小孢子后，細(xì)胞質(zhì)收縮而降解。利用 段化檢測發(fā)現(xiàn)，在花粉母細(xì)胞進(jìn)行減數(shù)分裂前期 矮敗 /中國春小麥不育花藥的花粉母細(xì)胞開始出現(xiàn)程序化死亡。 察發(fā)現(xiàn)，太谷核不育小麥的敗育時期與擬南芥不育基因 敗育時期一致，所以對小麥中擬南芥不育基因 同源基因，進(jìn)行定位與表達(dá)分析發(fā)現(xiàn)，該基因位于小麥 4，只在可育花藥減數(shù)分裂時 期進(jìn)行表達(dá)，在成熟的花藥和成熟植株的其他部位及幼嫩植株各部位都沒有表達(dá)。利用該基因序列從矮敗 /中國春小麥花藥文庫中篩選得到該片段的全長基因。在核苷酸和氨基酸水平上同 的序列進(jìn)行比對，發(fā)現(xiàn) 該基因具有不育結(jié)構(gòu)域，進(jìn)而確定該基因為太谷核不育相關(guān)基因。 位雜交結(jié)果表明，該基因在減數(shù)分裂前期、中期、二分體時期、四分體時期和花粉粒時期在花藥藥室壁中均有較強的表達(dá)信號，說明該基因主要參與了花藥發(fā)育過程中，營養(yǎng)物質(zhì)的運輸。而不育花藥中，可能由于運輸物質(zhì)的中斷而最終影響花藥的不育。 關(guān)鍵詞 太谷核不育 基因 疊群，細(xì)胞程序性死亡，同源基因克隆， 位雜交 972, is of in of is a a on of D, a as in by to 3 AC is in In by S AC 96kb of a of 00kb AC to a ,072 bp 1.5 x 8 0kb % is at 9% in in to to No S SR no of in be of to It of of cm at of it it in NA in CD it at of of s2 iv s2 on of It on D in in at t in of or in it in of a in be in in 國農(nóng)業(yè)科學(xué)院博士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述 1 第一章 文 獻(xiàn)綜述 雄性不育的研究對于雜種優(yōu)勢的利用具有重要意義。細(xì)胞核雄性不育性是由細(xì)胞核不育基因控制的，其作用不受細(xì)胞質(zhì)類型影響，沒有正反交的遺傳效應(yīng)，其雄性不育的遺傳和表達(dá)完全符合孟德爾遺傳定律，一般由控制花粉正常育性的核基因發(fā)生突變造成。在核不育材料中，多數(shù)由隱性不育基因控制，只有少數(shù)受控于顯性基因。隱性核不育與任何育性正常材料的 均是正常可育的，即任何育性正常材料均為它的恢復(fù)系，但找不到典型的保持系，故不能生產(chǎn)大量不育系種子供制種之用，而只能從 雜合可育株的自交后代中分離得到不育株，因此，隱性核不育系兼具不育系、保持系的功用（兩用系）。單基因控制的顯性核不育通常由基因突變引起，這種核不育材料既找不到完全的恢復(fù)系，也找不到完全的保持系，后代總是分離出一半不育株和一半可育株。顯性核不育的遺傳行為在許多方面與隱性核不育相似，但二者具有兩個明顯區(qū)別：顯性核不育測交 出現(xiàn)育性分離，而隱性核不育測交 全部可育， 出現(xiàn)育性分離；顯性核不育群體中的可育株的自交后代全部正常可育，而隱性核不育則出現(xiàn)育性分離。 物雄性不育的細(xì)胞生物學(xué)研究 植物雄性不育是指植物在有性繁殖過程中雄性生殖器官發(fā)育異常，不 能產(chǎn)生有正常功能的雄配子 花粉，而其雌性器官生長發(fā)育是完全正常的一種現(xiàn)象。雄性不育在植物界中是一種常見現(xiàn)象，據(jù)統(tǒng)計已經(jīng)在 43 科， 162 屬， 320 個種和 297 個種間雜種中發(fā)現(xiàn)了雄性不育現(xiàn)象 (988)，并且這個數(shù)目還在不斷增加。雄性不育對植株本身來說是一種不利性狀，但它是自然界中植物進(jìn)化的一種方式，植株因自身雄性不育，只有接受外來花粉，才能受精結(jié)實，產(chǎn)生雜種，雜種在生長勢和適應(yīng)性方面具有強大優(yōu)勢。對雄性不育進(jìn)行研究，在理論上可以豐富花粉發(fā)育、細(xì)胞質(zhì)遺傳和核質(zhì)互作等方面的知識，在實踐上可以作為一種遺 傳工具，減少人工去雄的麻煩，在作物雜種優(yōu)勢利用、群體改良中有重要的應(yīng)用價值。 被子植物可育花粉的產(chǎn)生，涉及到大量遺傳控制的生理、生化和形態(tài)學(xué)過程。任何干擾雄蕊發(fā)育、孢原細(xì)胞分化、小孢子的發(fā)育、花粉的發(fā)育等和植物花粉發(fā)育過程的突變，都有可能導(dǎo)致植物的雄性不育?，F(xiàn)就植物的花粉發(fā)育及其過程中的程序性死亡與雄性不育關(guān)系的研究進(jìn)展情況進(jìn)行簡要綜述。 藥的結(jié)構(gòu)和發(fā)育 花藥的發(fā)育分為兩個階段，第一階段細(xì)胞分裂分化形成花藥組織?；ㄋ幱兴膫€藥室，每個藥室由孢子體物質(zhì)包圍著花粉母細(xì)胞，它們之間的信息和物質(zhì)交流通過 中間的維管束進(jìn)行，花粉母細(xì)胞發(fā)育成小孢子。第二階段花藥膨大，小孢子進(jìn)一步發(fā)育成花粉，隨之，花藥組織解體，花藥開裂，花粉釋放。 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院博士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述 2 圖 藥的分化（ Ma et 2005） 10,12: 表示花藥的發(fā)育時期 ; 在 16， 7， 8， 10， 12 中代表 25m; 孢子細(xì)胞； E: 表皮層 ; 藥室內(nèi)壁 ; 2,1,2,3 層 ; 中層 ; 小孢子母細(xì)胞 ; 孢子 ; 花粉粒 ; 初生周緣細(xì)胞 ; 造孢細(xì)胞 ; 隔 ; 次生周緣細(xì)胞 裂口 ; T: 絨氈層 ; 四分體 . 10,12 25m; E: 2,2,3; T: 依據(jù)形態(tài)學(xué)、細(xì)胞學(xué)觀察，花藥的發(fā)育被劃分為 14 個時期，如圖 示 12 個時期。時期1上述的第一階段，而時期 9于第二階段。在時期 1 雄蕊原基分化為三個“胚”層，即。時期 2細(xì)胞發(fā)育成花藥的表皮層（ E）， 成管狀的連接四個藥室的藥隔、維管束物質(zhì)；在時期 2， 細(xì)胞分化成孢原細(xì)胞，孢原細(xì)胞在時期 3 分化成初生周緣細(xì)胞（ 造孢細(xì)胞（ 初生周緣細(xì)胞位于表皮層下，包圍造孢細(xì)胞；初生周緣細(xì)胞在時期 4 時發(fā)育成兩層次生周緣細(xì)胞（ 外層的次生周緣發(fā)育成花粉囊壁的藥室內(nèi)壁和中層，內(nèi)層 的次生周緣細(xì)胞發(fā)育成絨氈層的外層， 胞層提供了絨氈層內(nèi)層細(xì)胞；時期 5 時，花藥形態(tài)建成，有四個藥室，每個藥室有四層細(xì)胞，從外到內(nèi)是表皮層（ E），藥室內(nèi)壁（ n），中層（ 絨氈層（ T）。這四層細(xì)胞包圍的就是花粉母細(xì)胞。從時期 6 開始，花粉母細(xì)胞開始進(jìn)行減數(shù)分裂，并游離于絨氈層形成子囊腔，同時胼胝體開始沉積在減數(shù)分裂的細(xì)胞上；時期 7 完成了減數(shù)分裂形成四個單倍體小孢子的四分體；時期 8 時，胼國農(nóng)業(yè)科學(xué)院博士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述 3 胝體壁降解，小孢子釋放。小孢子在 9期發(fā)育成花粉。時期 10 和 11，絨氈層降解；時期 12，花粉開始有絲分裂形成功能花粉粒；時期 13 時花藥開裂，釋放功能花粉；時期 14 時花藥委縮。 粉發(fā)育與雄性不育 花粉的發(fā)育過程是非常復(fù)雜的，所以任何影響花藥和花粉發(fā)育必需基因的突變，都有可能導(dǎo)致雄性不育。根據(jù)敗育發(fā)生的時期，雄性不育分為下列幾種表現(xiàn)型： （ 1） 雄蕊退化或變形 如果敗育發(fā)生在雄性器官分化的早期，可能使整個雄蕊的發(fā)育失敗，例如雄蕊退化只剩痕跡，或雄蕊變成花瓣（雄蕊心皮化）等。 （ 2） 花藥異常 除花藥外，雄蕊的形狀正?；蚧?本正常，但花藥較瘦小干縮，或有非正常色澤而變白或變褐，或花藥不正常開裂或不開裂，花藥內(nèi)一般無花粉，少數(shù)有敗育花粉或少數(shù)正?；ǚ邸?（ 3） 孢子囊退化 花藥外形接近正常，但由于花藥沒有造孢細(xì)胞，或孢母細(xì)胞減數(shù)分裂不正常，或在四分體時期敗育，從而使花藥內(nèi)沒有花粉或只有少量花粉。 （ 4） 小孢子退化 一般花藥近于正常，花藥內(nèi)有敗育花粉。根據(jù)花粉敗育程度不同，常常又分為典敗、圓敗和染敗。典敗為單核期小孢子敗育；圓敗為單核中后期至雙核早期發(fā)生敗育，花粉圓形，無淀粉積累；染敗是在雙核后期異能染色時停止發(fā)育。 （ 5） 花粉功能缺陷 花粉形態(tài)正常，也能染色，但在正常條件下不能萌發(fā)，只在某些特定條件下才能萌發(fā)，形成花粉管。 藥敗育與花絲、花藥維管束的發(fā)育 花藥敗育與花絲、花藥維管束的發(fā)育異常有關(guān)（廖蘭杰和徐乃瑜， 1998）。關(guān)于花藥維管束變化的研究，在番茄、小麥、高梁、玉米、水稻等作物上均有報道（胡適宜等， 1977； 1982；王臺等， 1982；徐樹華， 1984；夏濤等， 1989；孟金陵， 1995；）。 （ 1966）曾觀察到雄性不育小麥花藥藥隔維管束發(fā)育不良。刁現(xiàn)民（ 1980）在研究谷子 顯性雄性核不育花藥發(fā)育時，發(fā)現(xiàn)不育株表現(xiàn)敗育的花藥藥隔維管束分化不良，特別是維管束鞘細(xì)胞不能形成。眾所周知，維管束是植物的輸導(dǎo)組織，運輸有機物、水分、礦物質(zhì)及無機離子。此外，有些植物激素如細(xì)胞分裂素和赤霉素也可通過維管束運輸（ et 1972）。因此輸導(dǎo)組織在植物生長和發(fā)育過程中的重要地位不言而喻。維管束鞘細(xì)胞代謝活性也直接影響物質(zhì)的交換和運轉(zhuǎn)。在本實驗中觀察到可育株維管組織發(fā)達(dá)，導(dǎo)管數(shù)量多，薄壁細(xì)胞內(nèi)容物豐富，排列有規(guī)則，并有淀粉的積累，而不育系的維管組織分化不良，導(dǎo)管少，口徑小。在 純合不育株的花絲維管束的導(dǎo)管還可看到有其它物質(zhì)存在，類似于侵填體。同時薄壁細(xì)胞畸形，液泡化非常嚴(yán)重，排列非常紊亂，薄壁細(xì)胞之間互相融合成一大片狀，并有核遷移現(xiàn)象。不育株導(dǎo)管少，篩管分子比可育株少 2 3 個；維管束薄壁細(xì)胞排列紊亂，細(xì)胞質(zhì)解體嚴(yán)重，細(xì)胞器少。尤其在純合不育株中還發(fā)現(xiàn)薄壁細(xì)胞互相融合，核遷移的現(xiàn)象，它不同于以前所觀察到的細(xì)胞之間的核轉(zhuǎn)移（鄭國 錩 ， 1956；婁成后， 1956），它們是細(xì)胞之間通過胞間連絲而發(fā)生的，是細(xì)胞的一種正常生理現(xiàn)象。而我們所看到的則是由于液泡化嚴(yán)重，液泡膜破裂使水解酶得不到控制 和有效的保護(hù)，在胞質(zhì)內(nèi)任行其事，使細(xì)胞內(nèi)含物解體。這些降解物可能通過導(dǎo)管紋孔被運轉(zhuǎn)到導(dǎo)管腔內(nèi)，阻塞導(dǎo)管，使物質(zhì)得不到有效的運輸，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院博士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述 4 具體物質(zhì)是什么，要通過細(xì)胞化學(xué)進(jìn)一步確定。由于液泡化所產(chǎn)生的膨壓又可推動核的遷移，導(dǎo)致細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能受到破壞，薄壁細(xì)胞內(nèi)不能貯存有機物供小孢子發(fā)育所需。雄性不育基因不僅在性細(xì)胞中有所表達(dá) , 而且在體細(xì)胞中也有特異表達(dá)。 粉敗育與絨氈層發(fā)育 絨氈層是花藥壁的最內(nèi)層體細(xì)胞，一般認(rèn)為，它是由初生壁層衍生而來的。在發(fā)育早期，絨氈層包圍著花粉囊，絨氈層細(xì)胞之間彼此通過細(xì)胞 之橋連接起來。在花粉發(fā)育晚期，絨氈層開始降解。發(fā)育后期的絨氈層可能仍然與花粉壁保持聯(lián)系。絨氈層在減數(shù)分裂過程中進(jìn)行特殊的分裂，形成兩個或更多核 ,并具有極性分泌特征的細(xì)胞。從絨氈層細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)可以看出 ,細(xì)胞內(nèi)含有大量核糖體、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等細(xì)胞器。根據(jù)絨氈層發(fā)育后期的形態(tài)上的差別，可以分為腺質(zhì)（分泌）絨氈層和變形（周原質(zhì)團(tuán)）絨氈層兩種類型。在小孢子形成過程中，絨氈層分化形成雙核的、具極性的分泌細(xì)胞層。細(xì)胞學(xué)分析表明，絨氈層細(xì)胞質(zhì)膜的內(nèi)表面含有許多的囊泡，通過向花藥室中分泌大量的碳水化合物、蛋白質(zhì)、 脂類等物質(zhì)，促進(jìn)花粉的發(fā)育或變成花粉外壁的重要成分 (et 1985; 1987; 1992)。正因為絨氈層細(xì)胞與發(fā)育的小孢子或花粉之間存在著一種直接接觸的“生化對話”關(guān)系，當(dāng)這種正常的交流出現(xiàn)紊亂時，就會導(dǎo)致雄性不育。許多作者都認(rèn)為雄性不育的發(fā)生是與絨氈層正常的發(fā)育途徑受干擾有關(guān)(et 1997; et 1997; et 2001)。 近年來，采用遺傳學(xué)方法鑒定了一些導(dǎo)致雄性不育的突 變體 (1988)。大部分細(xì)胞生物學(xué)證據(jù)表明這與絨氈層細(xì)胞的功能失常有一定的關(guān)系，如玉米的 變體。 （ 2000）對玉米的兩個隱性雄性不育突變體 小孢子發(fā)育進(jìn)行了研究 ,發(fā)現(xiàn)形成絨氈層的細(xì)胞分化形成兩層細(xì)胞 使花粉壁含有 5 層細(xì)胞，發(fā)育不正常。而 不能正常分化形成絨氈層，導(dǎo)致花粉母細(xì)胞在減數(shù)分裂前期 始時敗育。因此可以推測絨氈層細(xì)胞并不是獨立對小孢子起作用。換句話說，在花粉發(fā)育過程中絨氈層細(xì)胞和小孢子是互相依賴的。（ 1998）在擬南芥的 性不育突變體中發(fā)現(xiàn)絨氈層提早降解對花粉發(fā)育的影響，是導(dǎo)致花粉在單核靠邊期敗育的直接原因。 （ 1999）在對擬南芥雄性不育突變體微結(jié)構(gòu)的觀察中發(fā)現(xiàn)絨氈層細(xì)胞在減數(shù)分裂前期就形成了合成和分泌胼胝酶的粗糙內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，成垛疊狀（而相應(yīng)野生型的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)則到了四分體時期才開始形成），這樣就導(dǎo)致了包裹花粉母細(xì)胞和四分體的胼胝壁過早降解，致使花粉敗育。 （ 2001）在對高溫脅迫下絨氈層細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)觀察中看到高溫影響了絨氈層細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)，從而導(dǎo)致了絨氈 層的提前降解并使花粉敗育。 （ 2002）在對大豆細(xì)胞質(zhì)雄性不育花藥的電鏡觀察中發(fā)現(xiàn)絨氈層細(xì)胞中線粒體內(nèi)膜首先發(fā)生了降解，內(nèi)腔異常擴大；接著內(nèi)質(zhì)網(wǎng)呈現(xiàn)出了不規(guī)則的同心環(huán)結(jié)構(gòu)，這些異常變化使絨氈層細(xì)胞降解，最終影響了小孢子的發(fā)育，使花粉敗育。 （ 2002）在擬南芥雄性不育 花藥中觀察到起源于絨氈層的營養(yǎng)物質(zhì)減少，推測絨氈層細(xì)胞生物合成活性的下降影響了小孢子發(fā)育，導(dǎo)致花粉敗育。謝潮添等（ 2004）在白菜細(xì)胞核雄性不育系中發(fā)現(xiàn)：白菜花粉粒中的儲存物