高中生物 6.2基因工程及其應(yīng)用課件2.pptVIP

基因工程的基本操作程序 獲取目的基因 構(gòu)建表達(dá)載體 導(dǎo)入受體細(xì)胞 目的基因檢測與鑒定 第一步 第二步 第三步 第四步 三 通過dna合成儀直接合成目的基因 獲取目的基因 第一步 二 通過pcr擴增 一 從基因文庫中獲取 三 通過dna合成儀直接合成目的基因 當(dāng)基因比較小 蛋白質(zhì)的氨基酸序列可以測得或核苷酸序列已知時 可采用此種方法 三 通過dna合成儀直接合成目的基因 蛋白質(zhì)的氨基酸順序 當(dāng)基因比較小 蛋白質(zhì)的氨基酸序列可以測得或核苷酸序列已知時 可采用此種方法 三 通過dna合成儀直接合成目的基因 蛋白質(zhì)的氨基酸順序 推測 當(dāng)基因比較小 蛋白質(zhì)的氨基酸序列可以測得或核苷酸序列已知時 可采用此種方法 三 通過dna合成儀直接合成目的基因 蛋白質(zhì)的氨基酸順序 mran核苷酸序列 推測 當(dāng)基因比較小 蛋白質(zhì)的氨基酸序列可以測得或核苷酸序列已知時 可采用此種方法 三 通過dna合成儀直接合成目的基因 蛋白質(zhì)的氨基酸順序 mran核苷酸序列 推測 推測 當(dāng)基因比較小 蛋白質(zhì)的氨基酸序列可以測得或核苷酸序列已知時 可采用此種方法 三 通過dna合成儀直接合成目的基因 蛋白質(zhì)的氨基酸順序 mran核苷酸序列 基因dna的核苷酸序列 推測 推測 當(dāng)基因比較小 蛋白質(zhì)的氨基酸序列可以測得或核苷酸序列已知時 可采用此種方法 三 通過dna合成儀直接合成目的基因 蛋白質(zhì)的氨基酸順序 mran核苷酸序列 基因dna的核苷酸序列 推測 推測 合成 當(dāng)基因比較小 蛋白質(zhì)的氨基酸序列可以測得或核苷酸序列已知時 可采用此種方法 三 通過dna合成儀直接合成目的基因 蛋白質(zhì)的氨基酸順序 mran核苷酸序列 基因dna的核苷酸序列 目的基因 推測 推測 合成 當(dāng)基因比較小 蛋白質(zhì)的氨基酸序列可以測得或核苷酸序列已知時 可采用此種方法 三 通過dna合成儀直接合成目的基因 dna合成儀 蛋白質(zhì)的氨基酸順序 mran核苷酸序列 基因dna的核苷酸序列 目的基因 推測 推測 合成 當(dāng)基因比較小 蛋白質(zhì)的氨基酸序列可以測得或核苷酸序列已知時 可采用此種方法 二 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 二 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 用限制酶切割質(zhì)粒使之出現(xiàn)一個切口 將目的基因插入切口處 讓目的基因的黏性末端與切口上的黏性末端互補配對后 在連接酶的作用下連接形成重組dna分子 即基因表達(dá)載體 一 構(gòu)建目的 一 構(gòu)建目的 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在 并且可遺傳給下一代 同時 使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用 一 構(gòu)建目的 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在 并且可遺傳給下一代 同時 使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用 二 構(gòu)建零件及其作用 一 構(gòu)建目的 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在 并且可遺傳給下一代 同時 使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用 二 構(gòu)建零件及其作用 一 構(gòu)建目的 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在 并且可遺傳給下一代 同時 使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用 二 構(gòu)建零件及其作用 1 目的基因 一 構(gòu)建目的 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在 并且可遺傳給下一代 同時 使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用 二 構(gòu)建零件及其作用 1 目的基因 2 啟動子 3 終止子 一 構(gòu)建目的 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在 并且可遺傳給下一代 同時 使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用 二 構(gòu)建零件及其作用 1 目的基因 2 啟動子 3 終止子 4 標(biāo)記基因 三 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 三 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為轉(zhuǎn)化 三 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為轉(zhuǎn)化 基因工程中常用的受體細(xì)胞有大腸桿菌 枯草桿菌 土壤農(nóng)桿菌和動植物細(xì)胞等 導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法主要是借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑 且因受體細(xì)胞的不同而不同 一 導(dǎo)入植物細(xì)胞 1 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 一 導(dǎo)入植物細(xì)胞 1 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 一 導(dǎo)入植物細(xì)胞 1 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 一 導(dǎo)入植物細(xì)胞 2 其他方法 見教材p12 生物技術(shù)資料卡 1 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 一 導(dǎo)入植物細(xì)胞 2 其他方法 見教材p12 生物技術(shù)資料卡 1 基因槍法 1 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 一 導(dǎo)入植物細(xì)胞 2 其他方法 見教材p12 生物技術(shù)資料卡 1 基因槍法 2 花粉管通道法 二 導(dǎo)入動物細(xì)胞 二 導(dǎo)入動物細(xì)胞 顯微注射技術(shù) 二 導(dǎo)入動物細(xì)胞 顯微注射技術(shù) 二 導(dǎo)入動物細(xì)胞 含目的基因的表達(dá)載體 顯微注射技術(shù) 二 導(dǎo)入動物細(xì)胞 含目的基因的表達(dá)載體 顯微注射 顯微注射技術(shù) 二 導(dǎo)入動物細(xì)胞 含目的基因的表達(dá)載體 動物的受精卵 顯微注射 顯微注射技術(shù) 二 導(dǎo)入動物細(xì)胞 含目的基因的表達(dá)載體 動物的受精卵 含目的基因的受精卵 顯微注射 顯微注射技術(shù) 二 導(dǎo)入動物細(xì)胞 含目的基因的表達(dá)載體 動物的受精卵 含目的基因的受精卵 顯微注射 分裂分化 顯微注射技術(shù) 二 導(dǎo)入動物細(xì)胞 含目的基因的表達(dá)載體 動物的受精卵 含目的基因的受精卵 早期胚胎 顯微注射 分裂分化 顯微注射技術(shù) 二 導(dǎo)入動物細(xì)胞 含目的基因的表達(dá)載體 動物的受精卵 含目的基因的受精卵 早期胚胎 顯微注射 分裂分化 移植 顯微注射技術(shù) 二 導(dǎo)入動物細(xì)胞 含目的基因的表達(dá)載體 動物的受精卵 含目的基因的受精卵 早期胚胎 雌性動物輸卵管或子宮 顯微注射 分裂分化 移植 顯微注射技術(shù) 二 導(dǎo)入動物細(xì)胞 含目的基因的表達(dá)載體 動物的受精卵 含目的基因的受精卵 早期胚胎 雌性動物輸卵管或子宮 顯微注射 分裂分化 移植 發(fā)育 顯微注射技術(shù) 二 導(dǎo)入動物細(xì)胞 含目的基因的表達(dá)載體 動物的受精卵 含目的基因的受精卵 早期胚胎 雌性動物輸卵管或子宮 轉(zhuǎn)基因動物 顯微注射 分裂分化 移植 發(fā)育 顯微注射技術(shù) 二 導(dǎo)入動物細(xì)胞 含目的基因的表達(dá)載體 動物的受精卵 含目的基因的受精卵 早期胚胎 雌性動物輸卵管或子宮 轉(zhuǎn)基因動物 顯微注射 分裂分化 移植 發(fā)育 顯微注射技術(shù) 為什么將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞常用的受體細(xì)胞是受精卵 問題 三 導(dǎo)入微生物細(xì)胞 三 導(dǎo)入微生物細(xì)胞 ca2 處理法 三 導(dǎo)入微生物細(xì)胞 1 過程 1 制備感受態(tài)細(xì)胞 用ca2 cacl2 處理細(xì)菌 使細(xì)菌易于接受外源dna分子 ca2 處理法 三 導(dǎo)入微生物細(xì)胞 1 過程 1 制備感受態(tài)細(xì)胞 用ca2 cacl2 處理細(xì)菌 使細(xì)菌易于接受外源dna分子 2 重組dna分子與感受態(tài)細(xì)胞混合 完成轉(zhuǎn)化 ca2 處理法 三 導(dǎo)入微生物細(xì)胞 1 過程 1 制備感受態(tài)細(xì)胞 用ca2 cacl2 處理細(xì)菌 使細(xì)菌易于接受外源dna分子 2 重組dna分子與感受態(tài)細(xì)胞混合 完成轉(zhuǎn)化 ca2 處理法 2 優(yōu)點繁殖快 多為單細(xì)胞 遺傳物質(zhì)相對較少 操作簡單 價格低廉 三 導(dǎo)入微生物細(xì)胞 1 過程 1 制備感受態(tài)細(xì)胞 用ca2 cacl2 處理細(xì)菌 使細(xì)菌易于接受外源dna分子 2 重組dna分子與感受態(tài)細(xì)胞混合 完成轉(zhuǎn)化 ca2 處理法 3 常用受體細(xì)胞大腸桿菌 e coli 2 優(yōu)點繁殖快 多為單細(xì)胞 遺傳物質(zhì)相對較少 操作簡單 價格低廉 四 目的基因的檢測與鑒定 四 目的基因的檢測與鑒定 目的基因是否真正插入受體細(xì)胞的dna中 是否能夠在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳和正確表達(dá) 只有通過檢測 鑒定才能得知 四 目的基因的檢測與鑒定 目的基因是否真正插入受體細(xì)胞的dna中 是否能夠在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳和正確表達(dá) 只有通過檢測 鑒定才能得知 常用的檢測手段主要從分子水平和個體水平進(jìn)行 一 分子水平 一 分子水平 分子雜交技術(shù) 一 分子水平 1 檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體dna上是否插入了目的基因 分子雜交技術(shù) 一 分子水平 1 檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體dna上是否插入了目的基因 提取受體生物全部dna 分子雜交技術(shù) 一 分子水平 1 檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體dna上是否插入了目的基因 提取受體生物全部dna 適當(dāng)限制酶切割 分子雜交技術(shù) 一 分子水平 1 檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體dna上是否插入了目的基因 提取受體生物全部dna 適當(dāng)限制酶切割 dna片段 分子雜交技術(shù) 一 分子水平 1 檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體dna上是否插入了目的基因 提取受體生物全部dna 適當(dāng)限制酶切割 dna片段 用同位素標(biāo)記的目的基因片段雜交 分子雜交技術(shù) 一 分子水平 1 檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體dna上是否插入了目的基因 提取受體生物全部dna 適當(dāng)限制酶切割 dna片段 用同位素標(biāo)記的目的基因片段雜交 顯出雜交帶 分子雜交技術(shù) 一 分子水平 1 檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體dna上是否插入了目的基因 提取受體生物全部dna 適當(dāng)限制酶切割 dna片段 用同位素標(biāo)記的目的基因片段雜交 顯出雜交帶 表明目的基因已插入 分子雜交技術(shù) 一 分子水平 1 檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體dna上是否插入了目的基因 提取受體生物全部dna 適當(dāng)限制酶切割 dna片段 用同位素標(biāo)記的目的基因片段雜交 顯出雜交帶 表明目的基因已插入 分子雜交技術(shù) 2 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mrna 2 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mrna 提取受體生物的mrna 2 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mrna 提取受體生物的mrna 用同位素標(biāo)記的目的基因片段雜交 2 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mrna 提取受體生物的mrna 用同位素標(biāo)記的目的基因片段雜交 顯出雜交帶 2 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mrna 提取受體生物的mrna 用同位素標(biāo)記的目的基因片段雜交 顯出雜交帶 表明目的基因已轉(zhuǎn)錄出了mrna 2 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mrna 提取受體生物的mrna 用同位素標(biāo)記的目的基因片段雜交 顯出雜交帶 表明目的基因已轉(zhuǎn)錄出了mrna 檢測dna利用的是dna與dna雜交 檢測mrna利用的是dna與mrna雜交 3 檢測目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì) 3 檢測目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì) 抗原 抗體雜交技術(shù) 3 檢測目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì) 抗原 抗體雜交技術(shù) 提取受體生物的蛋白質(zhì) 3 檢測目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì) 抗原 抗體雜交技術(shù) 提取受體生物的蛋白質(zhì) 與相應(yīng)抗體雜交 3 檢測目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì) 抗原 抗體雜交技術(shù) 提取受體生物的蛋白質(zhì) 與相應(yīng)抗體雜交 顯