高中生物 第1部分 專題2 課題3 分解纖維素的微生物的分離課件 新人教版選修1.ppt_第1頁
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第1部分 專題2 課題3 理解教材新知 把握熱點考向 應用創(chuàng)新演練 知識點一 知識點二 考向一 考向二 1 纖維素酶是復合酶 包括c1酶 cx酶和葡萄糖苷酶等組分 2 纖維素酶的作用是 纖維素纖維二糖葡萄糖 3 剛果紅與纖維素形成紅色復合物 當纖維素被分解后 培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈 4 分離后 為確定得到的是纖維素分解菌 還需進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實驗 自讀教材 夯基礎 1 纖維素 1 基本組成單位 2 含量 是地球上最豐富的類物質(zhì) 3 分布 是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物 此外 木材 作物秸稈等也富含纖維素 葡萄糖 多糖 棉花 復合酶 c1酶 cx酶 葡萄糖苷酶 c1酶和cx酶 葡萄糖苷酶 3 實驗驗證 11 1ml 完全 分解 基本無 變化 3 纖維素分解菌的篩選 1 方法 染色法 常用的有兩種 一種是先 再加入進行顏色反應 另一種是在時就加入 剛果紅 培養(yǎng)微生物 剛果紅 倒平板 剛果紅 以纖維 素分解菌 紅色 跟隨名師 解疑難 纖維素分解菌的篩選 1 篩選原理 剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物 但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖反應 當纖維素被纖維素酶分解后 該復合物無法形成 培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈 2 篩選方法 自讀教材 夯基礎 1 實驗設計流程 1 土壤取樣 選擇富含的環(huán)境 纖維素 濃度 微生物 選擇培養(yǎng)基 搖床 1 2d 混濁 3 梯度稀釋 4 涂布培養(yǎng) 將樣品涂布到的培養(yǎng)基上 5 篩選菌株 染色法 挑選產(chǎn)生的菌落 鑒別纖維素分解菌 剛果紅 透明圈 2 課題延伸 纖維素分解菌的鑒定 1 為確定得到的透明圈中的菌落是纖維素分解菌 需要進行發(fā)酵產(chǎn)的實驗 纖維素酶的發(fā)酵方法有和兩種 2 纖維素酶的測定方法 一般是采用對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的進行測定 纖維素酶 液體發(fā)酵 固體發(fā)酵 葡萄糖 定量 1 在實驗過程中 為什么要進行梯度稀釋 提示 通過梯度稀釋使聚集在一起的微生物分散成單個細菌 在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落 2 分離分解纖維素的微生物實驗 只是分離純化的第一步 為確保得到的是纖維素分解菌 還需要做什么工作 提示 還需要進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實驗 跟隨名師 解疑難 1 纖維素分解菌的篩選過程中所用兩種培養(yǎng)基的成分和作用 1 纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基 5g1g1 2g0 9g0 5g0 5g0 5g0 5g 2 鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基 2 纖維素分解菌的篩選過程中所用兩種培養(yǎng)基的比較 1 纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基 利用液體培養(yǎng)基能使營養(yǎng)成分充分消耗 以增加纖維素分解菌的濃度 2 纖維素分解菌的鑒別培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基 因為需要在培養(yǎng)基上形成我們?nèi)庋劭梢姷木?3 在上述選擇培養(yǎng)基中能以纖維素作為碳源和能源的微生物可以正常生長 而其他絕大多數(shù)微生物不能正常生長 而在上述鑒別培養(yǎng)基中 絕大多數(shù)微生物都可以正常生長 特別提醒 1 判斷某個培養(yǎng)基是否具有選擇作用時 應設立基礎培養(yǎng)基進行對照 2判斷所使用的培養(yǎng)基是否被雜菌污染時 應設立不接種該菌種的培養(yǎng)基進行空白對照 例1 下列有關剛果紅染色法的敘述 不正確的是 a 剛果紅可以在細菌菌落形成前倒平板時加入b 剛果紅可以在菌落形成后加入c 在菌落形成前倒平板時加入 剛果紅不需要滅菌d 在菌落形成后加入剛果紅時 剛果紅不需要滅菌 解析 利用剛果紅篩選纖維素分解菌時 剛果紅可以在細菌菌落形成前倒平板時加入 也可以在菌落形成后加入 在細菌菌落形成前倒平板時加入 要進行滅菌 以防雜菌的侵入 影響纖維素分解菌菌落的形成 在菌落形成后加入剛果紅 則不需要滅菌 答案 c 例2 某實驗小組欲從土壤中篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌 設計實驗步驟如下 請給予合理的補充 1 采樣與培養(yǎng) 將采集的土樣混勻后稱取1g 置于經(jīng)過 法滅菌處理的 填 固體 或 液體 培養(yǎng)基中 28 振蕩培養(yǎng) 2 接種與選擇 為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高 需將培養(yǎng)液進行 處理 之后 將菌液涂布接種于以 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上 30 條件下培養(yǎng) 為避免污染 需將培養(yǎng)皿呈 狀態(tài)放置 此外 為排除其他因素的影響 提高實驗可信度 本步驟需設計 作為空白對照 3 篩選與純化 將適量的碘液滴加在平板中的菌落周圍 如果菌落周圍的現(xiàn)象是 則說明此種菌能夠 從平板中挑取實驗效果明顯的目的菌株 采用 法接種于新的培養(yǎng)基平板上 可對菌株進行進一步的純化 解析 1 對培養(yǎng)基的滅菌方式是高壓蒸汽滅菌 因為后面要進行涂布 所以應該用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng) 2 減小培養(yǎng)液菌體濃度一般用稀釋方法 由于題目要求選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌 所以培養(yǎng)基中的碳源就應只有淀粉 倒置可以減少培養(yǎng)基受污染 為排除其他因素影響 需要設置未接種的空白的培養(yǎng)基作對照組 3 淀粉被水解 培養(yǎng)基會出現(xiàn)透明圈的現(xiàn)象 用平板劃線法來培養(yǎng) 可進一步純化菌種 答案 1 高壓蒸汽滅菌液體 2 系列稀釋 或 梯度稀釋 淀粉倒置未接種的空白培養(yǎng)基 或

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