中藥化學(xué)成分提取分離技術(shù)ppt課件

.,第2章中藥化學(xué)成分的提取技術(shù),.,目的要求,了解中藥化學(xué)成分的類型及理化性質(zhì)。掌握中藥有效成分的提取、分離方法。了解中藥有效成分結(jié)構(gòu)鑒定的方法。,.,中藥中所含各類化學(xué)成分簡(jiǎn)介,生物堿糖和苷醌類苯丙素類黃酮類強(qiáng)心苷皂苷萜類和揮發(fā)油其他成分,.,生物堿（alkaloids）,生物體內(nèi)的含氮有機(jī)物，有似堿的性質(zhì)（能與酸成鹽），有生理活性。,鹽酸小檗堿(Berberinehydrochloride),.,苷類（glycosides）,苷元與糖或糖的衍生物通過苷鍵（縮醛鍵）連接而成的化合物。苷易水解成苷元和糖。,.,糖類（saccharides）,單糖：無色晶體，味甜。易溶于水，難溶于有機(jī)溶劑。低聚糖：210個(gè)單糖縮合而成。味甜，溶于水，難溶于有機(jī)溶劑。多糖：10個(gè)以上單糖脫水縮合而成。無甜味，大多不溶于水。,D-葡萄糖L鼠李糖D葡萄糖醛酸(D-glucose)(L-rhamnose)(D-glucuronicacid),-D-Gal-(14)-D-Glc-D-Fru-(16)-(14)-D-Glc,.,醌類（quinones）,具有醌式結(jié)構(gòu)化合物。分子中多有酚OH，有一定酸性。,大黃酚大黃酚-D-葡萄糖苷(chrysophanol)(chrysophanol-8-D-glucoside),.,苯丙素類（phenylpropanoids）,以苯丙基（C6-C3）為基本骨架的化合物。香豆素：具有苯駢-吡喃酮母核的一類天然化合物。木脂素：有兩分子苯丙素衍生物聚合而成的天然化合物。,七葉內(nèi)酯五味子酯甲(aesculetin)(schisantherinA),.,黃酮類（flavonoids）,兩個(gè)苯環(huán)通過三碳鏈連接而成（C6-C3-C6）的化合物。多有酚OH，有一定酸性。,黃芩素黃芩苷(baicalein)(baicalin),.,萜類和揮發(fā)油（terpeonidsandvolatileoils）,萜類：由甲戊二羥酸衍生、分子式符合（C5H8）n的衍生物。揮發(fā)油（精油）：可隨水蒸氣蒸餾的與水不相混溶的無色或淡黃色透明油狀液體。,薄荷醇細(xì)辛醚(menthol)(asarone),.,強(qiáng)心苷（cardicaglycosides）,對(duì)心臟有顯著生理活性的甾體苷類。無色，有旋光性、對(duì)粘膜有刺激性。,洋地黃毒苷(digitoxin),.,皂苷（saponins）,由螺甾烷類或三萜類化合物與糖結(jié)合的低聚糖苷，前者為甾體皂苷，后者為三萜皂苷。無色，對(duì)粘膜有刺激性，有吸濕性、發(fā)泡性和溶血性。,薯蕷皂苷人參皂苷Rb1(dioscin)(ginsenosideRb1),.,其他成分,有機(jī)酸鞣質(zhì)氨基酸、蛋白質(zhì)和酶植物色素樹脂油脂和蠟無機(jī)成分微量元素,.,第1節(jié)中藥化學(xué)成分的經(jīng)典提取技術(shù)-溶劑提取法,概述原理溶劑的種類溶解性的經(jīng)驗(yàn)規(guī)律溶劑提取的五種常用提取工藝提取液的濃縮,.,1.概述,中藥化學(xué)成分的構(gòu)成特點(diǎn)同種植物含有多種結(jié)構(gòu)類型的化學(xué)成分總成分含量少而種類多有效成分含量低,.,1.概述,不同的中藥材，成分不同，提取的方法也應(yīng)不同。設(shè)計(jì)合理的提取方法、正確的操作不但能提取出有效成分，而且還有利于下一步的分離純化。中藥有效成分的提取方法主要有經(jīng)典的溶劑提取法，其次還有水蒸氣蒸餾法、超臨界流體萃取法、超聲提取法、微波提取法等。,.,2.原理,規(guī)律：相似相溶。溶劑穿透入藥材粉末的細(xì)胞膜，溶解溶質(zhì)，形成細(xì)胞內(nèi)外溶質(zhì)的濃度差，將溶質(zhì)滲出，進(jìn)行提取。范圍：所有化學(xué)成分。,.,2.原理,溶劑提取法是根據(jù)中草藥中各種成分在不同溶劑中的溶解度不同，選用對(duì)有效成分溶解度大，對(duì)雜質(zhì)成分（不需要成分）溶解度小的溶劑，將有效成分從藥材組織內(nèi)溶解出來的方法。,.,三、溶劑的選擇1、常見的溶劑可以分為三大類：水；親水性有機(jī)溶劑；親脂性有機(jī)溶劑。2、中草藥的化學(xué)成分（包括被溶解的成分）也有親水性和親脂性的不同。親水性、親脂性及其大小與化合物的分子結(jié)構(gòu)有關(guān)。,.,植物中的親水性成分有蛋白質(zhì)、單糖、及低聚糖、氨基酸、水溶性有機(jī)酸、水溶性色素、生物堿等；親脂性成分有游離生物堿、非水溶性有機(jī)酸、樹脂、脂溶性色素、油脂、蠟等。,.,3、溶劑的選擇選擇適當(dāng)溶劑是溶劑提取法的關(guān)鍵。要做到最大限度的將有效成分從藥材中提取出來，首先需遵循“相似相溶”的原理。另外還要注意：溶劑對(duì)有效成分溶解度大，對(duì)雜質(zhì)溶解度小。溶劑不能與中藥成分起化學(xué)變化。溶劑要經(jīng)濟(jì)、易得、使用安全、易于回收等。,.,石油醚苯氯仿乙醚乙酸乙酯正丁醇丙酮乙醇甲醇水,常用溶劑的性質(zhì),.,23,常用提取溶劑性能特點(diǎn),提取溶劑性能特點(diǎn)適宜提取成分提取方法強(qiáng)極性溶劑溶解范圍廣生物堿鹽水穿透能力強(qiáng)苷類煎煮法安全、經(jīng)濟(jì)糅質(zhì)藥廠提取糖類滲漉法最常用氨基酸蛋白質(zhì),.,24,易酶解苷類成分有些脂溶性成分溶解不完全提取液易發(fā)霉變質(zhì)，不易保存提取液中水溶性雜質(zhì)多，過濾困難沸點(diǎn)高，濃縮困難,缺點(diǎn)：,.,25,親水性有機(jī)溶劑（和水可任意混溶）優(yōu)點(diǎn)：1.溶解范圍廣，提取較全面除多糖、滲濾法2.對(duì)植物細(xì)胞壁穿透力強(qiáng)蛋白質(zhì)外浸漬法3.可抑制酶的活性大多數(shù)回流法4.提取出的蛋白質(zhì)、多糖化學(xué)成分連續(xù)回流法等水溶性雜質(zhì)少均可溶解5.價(jià)廉毒小，回收方便6.有防腐蝕和保護(hù)成分的作用缺點(diǎn)：但有揮發(fā)性、易燃燒、比水貴,.,26,乙醇最常用的有機(jī)溶劑甲醇溶解特點(diǎn)與乙醇相似，但有毒丙酮溶解性能同乙醇，但沸點(diǎn)低、易揮發(fā)，不常于提取溶劑；對(duì)色素溶解性好，常用于分離、精制。,.,27,親脂性有機(jī)溶劑優(yōu)點(diǎn)：1.對(duì)化合物溶解選擇性較強(qiáng)2.水溶性雜質(zhì)少、易純化揮發(fā)油連續(xù)回流法3.沸點(diǎn)低，濃縮回收方便油脂回流法缺點(diǎn)：1.多易燃燒樹脂2.揮發(fā)性大，有毒、價(jià)格昂貴，葉綠素對(duì)提取設(shè)備要求高生物堿3.穿透力較弱，提取時(shí)間長苷元等作為提取溶劑不常用,.,28,乙醚bp.35，極易燃氯仿bp.61，不易燃，毒性大對(duì)生物堿溶解性好苯bp.80.1，毒性大石油醚沸程3060、6090、90120脫脂、脫色,.,3.溶解性的經(jīng)驗(yàn)規(guī)律,原理：相似相溶。親水性成分易溶于親水性有機(jī)溶劑和水中親脂性成分易溶于有機(jī)溶劑中,注：表示不溶，表示溶,.,中藥各類成分的極性與提取溶劑的關(guān)系,.,4.五種常用提取工藝,常用提取工藝：,浸漬法滲漉法煎煮法回流提取法連續(xù)回流提取法,.,（1）浸漬法,（1）、浸漬法此法適用于有效成分遇熱易揮發(fā)和易破壞的中草藥的提取。按溶劑的溫度分為熱浸、溫浸、冷浸等。,.,操作：現(xiàn)將中草藥粉或碎片裝入適當(dāng)?shù)娜萜髦校缓蠹尤脒m宜的溶劑，浸漬藥材以溶出其中有效成分。特點(diǎn)：簡(jiǎn)單易行，但提出率較低。最好采用二次、三次浸漬，以減少損失，提高提取率。如果溶劑為水的話，需加入適當(dāng)?shù)姆栏瘎?.,滲漉法,（2）、滲漉法操作：將中草藥粉末裝在滲漉器中使藥材浸漬2448小時(shí)膨脹，然后不斷添加新溶劑，使其自上而下滲過藥粉，從滲漉筒下端出口流出、收集浸出液。,.,當(dāng)溶劑滲進(jìn)藥粉溶出成分比重加大而向下移動(dòng)時(shí)，上層的溶液或稀浸液便置換其位置，造成良好的濃度差，使擴(kuò)散能較好地進(jìn)行，故浸出效率較高，當(dāng)浸出液很淺時(shí)提取基本完全。但溶劑消耗量大、費(fèi)時(shí)長。,.,.,3、煎煮法此法是我國最早使用的傳統(tǒng)的浸出方法。,.,操作：將中藥粗粉加水加熱（加熱時(shí)最好時(shí)常攪拌，以免局部藥材受熱容易焦糊）煮沸，將中藥成分提取出來。一般藥材易煎2次。所用容器一般為陶器、砂罐或銅制、搪瓷器皿，不宜用鐵鍋，以免藥液變色。,.,（4）回流提取法,如用易揮發(fā)的有機(jī)溶劑加熱提取中藥成分時(shí)，則需采用回流提取法以減少溶劑消耗，提高浸出效率。但受熱易破壞的成分不宜用此法，且溶劑消耗量仍大，操作亦麻煩。此法提取效率較冷浸法高，但是由于操作的局限性，大量生產(chǎn)中多采用連續(xù)提取法。,.,回流提取裝置,索氏提取裝置,.,為了彌補(bǔ)回流提取法中需要溶劑量大、操作較煩的不足，可采用連續(xù)提取法。實(shí)驗(yàn)室常用索氏提取器。此法需要溶劑量較少，提取成分也比較完全，但一般需數(shù)小時(shí)（提取液受熱時(shí)間長）才能完成，因此對(duì)熱不穩(wěn)定易變化的成分不宜用此法。盡管如此，在應(yīng)用揮發(fā)性有機(jī)溶劑提取時(shí)，不論小型實(shí)驗(yàn)或大型生產(chǎn)均以連續(xù)提取法為好,（5）連續(xù)提取法,.,優(yōu)劣對(duì)比：浸漬：簡(jiǎn)便，但效率低，用水時(shí)易發(fā)霉。滲漉：效率高，效果好（較澄清）；但溶劑消耗大，費(fèi)時(shí)。煎煮：簡(jiǎn)便，但雜質(zhì)溶出多，難過濾?；亓魈崛。盒矢撸軇┫拇?，操作煩瑣。連續(xù)回流提取：效率高,溶劑消耗少,但操作煩瑣。*后三種不適宜加熱易分解成分的提取。,.,影響提取效率的因素思考：溶劑提取法的關(guān)鍵是選擇合適的溶劑和提取方法，但在操作過程中，還受其他因素的影響嗎？,.,1、原料的粒度粉碎是中藥前處理過程中的一個(gè)必要環(huán)節(jié)，通過粉碎可增加藥物的表面積，促進(jìn)藥物的溶解與吸收，加速藥材中有效成分的浸出。但粉碎過細(xì)，藥粉比表面積太大，吸附作用增強(qiáng)，反而影響擴(kuò)散速度，尤其是含蛋白、多糖類較多的中藥，粉碎過細(xì)，用水提取時(shí)容易產(chǎn)生粘稠現(xiàn)象，影響提取率。,.,原料的粉碎度應(yīng)考慮選用的溶劑和藥用部位。如果用水提取，最好采用粗粉，用有機(jī)溶劑時(shí)可略細(xì)；原料為根莖類最好采用粗粉，全草類、葉類、花類等可用細(xì)粉。,.,2、提取的溫度溫度增高可以提高提取效率，但是雜質(zhì)的提出也相應(yīng)增加。過高的溫度會(huì)使有些有效成分氧化分解而遭到破壞。一般加熱到60為宜，最高不宜超過100。,.,3、提取的時(shí)間在藥材細(xì)胞內(nèi)外有效成分的濃度達(dá)到平衡以前，隨著提取時(shí)間的延長，提取的量也隨著增加。因此，提取的時(shí)間沒必要無限延長，只要合適、提取完全就行。4、提取設(shè)備,.,5.提取液的濃縮,.,蒸發(fā),.,.,.,第2節(jié)中藥化學(xué)成分的其他提取技術(shù),水蒸氣蒸餾法超臨界流體萃取法超提取法微波提取法,.,（1）水蒸氣蒸餾法,原理：與水蒸氣產(chǎn)生共沸點(diǎn)。范圍：適用于具有揮發(fā)性的，能隨水蒸氣蒸餾而不被破壞，與水不發(fā)生反應(yīng)，且難溶或不溶于水的成分的提取。如揮發(fā)油、小分子量的生物堿等。,.,.,超臨界流體（SCF）：,溫度、壓力略超過或靠近超臨界溫度(Tc)和臨界壓力(Pc)、介于氣體和液體之間的流體。,（2）超臨界流體提取法,超臨界萃?。⊿FE）：,SCF為萃取劑，萃取固體或液體中高沸點(diǎn)或熱敏性成分，達(dá)到分離、純化目的,.,56,物理性質(zhì),特點(diǎn)：氣液兩重性，高滲透能力、低粘度密度與液體相近、優(yōu)良的溶解能力,.,原理：用處于超臨界條件下的特殊流體（介于氣體和液體之間）為溶劑，具有更低的黏度和更高的擴(kuò)散速度，對(duì)許多物質(zhì)有很強(qiáng)的溶解能力。如CO2：Tc31.4，Pc7.37Mpa范圍：適用于對(duì)熱及化學(xué)不穩(wěn)定的成分、低極性的成分的提取。,.,特點(diǎn)：接近室溫工作，適用對(duì)熱不穩(wěn)定的成分，無有機(jī)溶劑殘留，對(duì)環(huán)境無公害，提取效率高，節(jié)約能耗等。但對(duì)設(shè)備要求高。,.,（3）超聲提取法,.,.,.,第三章中藥化學(xué)成分的分離技術(shù),第一節(jié)中藥化學(xué)成分的經(jīng)典分離技術(shù)兩相溶劑萃取法沉淀法結(jié)晶法第二節(jié)中藥化學(xué)成分的其他分離技術(shù)第三節(jié)色譜法,.,天然藥物粗粉,提取,溶劑提取法水蒸氣蒸餾法超臨界流體萃取法,混合物,分離,兩相溶劑萃取法,有效成分,鑒定,沉淀法,透析法,分餾法,鹽析法,色譜法,（重）結(jié)晶法,【新課導(dǎo)入】,.,一、兩相溶劑萃取法,是指在提取液（被萃取溶液）中加入一種與其不相混溶的溶劑（萃取劑），充分振搖增加兩相接觸的面積，使原提取液中的某種成分轉(zhuǎn)溶至萃取劑中，而其他成分仍保留在原提取液中，待兩相完全分層后，分離兩相,又稱液-液萃取法。,.,基本原理,兩相溶劑萃取法的理論依據(jù)是分配定律。,K=CA/CB,(K表示分配系數(shù)，CA表示化學(xué)成分在上相溶劑中的濃度，CB表示化學(xué)成分在下相溶劑中的濃度。),.,分配系數(shù)越大，表示成分主要在上層。分配系數(shù)越小，表示成分主要在下層。萃取時(shí)，混合物中各成分的分配系數(shù)相差越大，越易分離，萃取效率高，分離效果越好。K與萃取次數(shù)的關(guān)系：,K值與萃取次數(shù)成反比。即K值越大，萃取次數(shù)越少，反之越多。,.,不相混溶較好分層,萃取劑的選擇原則,K相差越大越好,根據(jù)分離物質(zhì)的極性選擇萃取劑,.,可進(jìn)行兩相溶劑萃取的組合,水石油醚水苯水乙醚水己烷水氯仿水乙酸乙酯水正丁醇不可進(jìn)行萃取的溶劑組合水乙醇水甲醇水丙酮乙醇氯仿甲醇乙酸乙酯,.,方法,分次萃取法,逆流連續(xù)萃取法,萃取方法,.,分次萃取法（又稱簡(jiǎn)單萃取法）,梨形分液漏斗,操作注意事項(xiàng),.,簡(jiǎn)單萃取法,.,檢漏,注意檢漏、排氣、振搖、靜置。,視具體情況而定,第一次為水提取液的1/2至1/3,遵循“少量多次”的原則，一般3-4次,.,乳化現(xiàn)象,預(yù)防乳化（避免猛烈振搖、改用混合溶劑等）,乳化已形成需及時(shí)破壞（7種方法）,嚴(yán)重時(shí)可選用逆流連續(xù)萃取法,.,萃取操作注意問題,必須是互不相容的兩相溶劑注意溫度濃度對(duì)K值的影響注意事項(xiàng)防止乳化破乳方法抽濾，加熱，冷凍長時(shí)間放置加入破乳劑,.,逆流連續(xù)萃取法,.,二、沉淀法,（一）酸堿沉淀法,.,酸提堿沉法提取生物堿堿提酸沉法提取酚酸性成分：黃酮、蒽醌等原理離子態(tài)溶解，分子態(tài)難溶而沉淀析出,.,（二）溶劑沉淀法,原理改變混合溶劑極性使一部分成分沉淀。分類:1.水提醇沉法去除多糖、蛋白質(zhì)等水溶性雜質(zhì)2.醇提水沉法除去樹脂、葉綠素等親脂性雜質(zhì)3.醇提醚（丙酮）沉淀法可沉淀皂苷,.,（三）鉛鹽沉淀法,中性Pb(AC)2可沉淀COOH，鄰二酚羥基堿性Pb(OH)AC(除以上可沉淀外)再加使單酚羥基或多元醇沉淀,.,.,脫鉛處理,.,脫鉛處理,.,（四）專用試劑沉淀法,酸性物可用Ca+Ba+Pb+等沉淀堿性物苦味酸鹽沉淀、雷氏銨鹽沉淀,.,（五）鹽析法,.,三、結(jié)晶法,原理利用溫度不同引起溶解度的改變進(jìn)行分離,.,結(jié)晶溶劑的選擇,1溶解度：對(duì)純化成分熱溶，冷不溶對(duì)雜質(zhì)冷熱都不溶或冷熱都溶2與被結(jié)晶的成分不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。3沸點(diǎn)溶劑的沸點(diǎn)適中，若沸點(diǎn)過高，則附著于晶體表面不易除去，過低又不利于晶體析出。,.,常用于結(jié)晶的溶劑有甲醇、乙醇、丙酮、醋酸乙酯、醋酸、吡啶等。當(dāng)用單一溶劑不能達(dá)到結(jié)晶時(shí)，可用兩種或兩種以上溶劑組成的混合溶劑進(jìn)行結(jié)晶操作。常用的混合溶劑有：水-乙醇、水-丙酮、乙醇-乙醚、乙醇-氯仿、乙醇-醋酸乙酯-乙醚等。,.,.,結(jié)晶方法,去雜制備過飽和溶液析晶操作關(guān)鍵：溶解趁熱抽濾沉淀（熱不溶型雜質(zhì)）濾液放冷析晶（冷熱都不溶雜質(zhì)）母液結(jié)晶,.,結(jié)晶純度的檢查,1、外觀：顏色、晶型結(jié)晶性純凈物質(zhì)，一般具有一定的晶形和均勻的色澤。化合物結(jié)晶的形狀往往因所用溶劑不同而有差異。2、mp檢查溶點(diǎn)、溶距3、TLC三種不同溶劑系統(tǒng)均為一個(gè)斑點(diǎn)4、HPLC基線穩(wěn)定的單峰,.,過濾技術(shù),.,第二節(jié)中藥化學(xué)成分的其他分離技術(shù),一、分餾法,.,.,二、透析法,.,.,三、升華法,適于有升華性的成分的分離，如游離蒽醌、小分子游離香豆素、某些生物堿如咖啡因等。在加熱升華的過程中，往往伴有熱分解現(xiàn)象，產(chǎn)品不純，產(chǎn)率較低，故少用于提取而常用于升華性成分的預(yù)實(shí)驗(yàn)。,.,第三節(jié)色譜法,定義利用混合物中各成分對(duì)固定相和移動(dòng)相的親和力的差異使之相互分離的方法，又稱層析法或色層法。這是一種物理化學(xué)分離、分析技術(shù)。作用可用于混合物的分離，又可用于化合物的定性檢識(shí)和定量分析。,.,二、色譜法的分類,按兩相狀態(tài)不同分類按操作方法不同分類按色譜分離過程的原理不同分類,.,按兩相狀態(tài)不同分類,色譜其中的一相固定不動(dòng)，稱為固定相;另一相是攜帶試樣混合物流過此固定相的流體（氣體或液體），稱為流動(dòng)相。,兩相狀態(tài),流動(dòng)相的物態(tài),液相色譜（LC）氣相色譜（GC）,.,二、色譜法的分類,按兩相狀態(tài)不同分類按操作方法不同分類按色譜分離過程的原理不同分類,.,按操作方法不同分類,柱色譜,紙色譜,薄層色譜,.,二、色譜法的分類,按兩相狀態(tài)不同分類按操作方法不同分類按色譜分離過程的原理不同分類,.,按色譜分離過程的原理不同分類,（1）吸附色譜（2）分配色譜（3）離子交換色譜（4）凝膠過濾色譜法,.,.,三、色譜過程,.,四、色譜曲線相關(guān)術(shù)語,W：峰寬,Wh/2：半峰寬,tR：保留時(shí)間,t0：死時(shí)間,tR，：調(diào)整保留時(shí)間,色譜峰,基線,.,一、吸附色譜法,.,（一）原理,利用吸附劑對(duì)不同成分吸附力的大小及展開劑解吸附作用的差異進(jìn)行分離。吸附牢的組分隨展開劑移動(dòng)慢，吸附弱的組分隨展開劑移動(dòng)快，一段時(shí)后，組分被分離。,.,.,（二）吸附色譜的三要素,1、吸附劑,常用的吸附劑：硅膠、氧化鋁、聚酰胺、活性炭和大孔吸附樹脂等。,.,（1）硅膠：極性吸附劑，應(yīng)用范圍廣物理吸附為主，氫鍵吸附為輔微酸性，不直接用于堿性成分的分離機(jī)械強(qiáng)度好，適用于薄層色譜吸附容量大，與羥基數(shù)目有關(guān)常用硅膠的規(guī)格：硅膠H，硅膠G，硅膠GF254等,.,（2）氧化鋁：a.極性吸附劑，較硅膠強(qiáng)。b.物理吸附為主，氫鍵吸附為輔c.微堿性，不直接用于酸類成分的分離,堿性氧化鋁：適用于碳?xì)浠衔?、生物堿以及其它堿性化合物的分離。中性氧化鋁：應(yīng)用最廣，適用于醛、酮、醌以及酯類化合物的分離。酸性氧化鋁：適用于有機(jī)酸類的分離。,.,（3）活性炭,.,2、移動(dòng)相,.,展開劑（流動(dòng)相）的選擇,硅膠、氧化鋁薄層：展開劑的極性越大，其展開能力越強(qiáng)，化合物在色譜中移動(dòng)的速度就越快，表現(xiàn)為Rf增大。,常用溶劑極性大小,石油醚環(huán)已烷四氯化碳苯甲苯乙醚三氯甲烷（氯仿）乙酸乙酯正丁醇丙酮乙醇甲醇水,選擇原則：被分離成分極性大展開劑極性大被分離成分極性小展開劑極性小,.,3、被分離成分,硅膠、氧化鋁薄層：被分離物質(zhì)極性越大，越易被吸附。一般規(guī)律：（1）官能團(tuán)極性越大，整個(gè)分子極性越大，越易被吸附；（2）形成分子內(nèi)H鍵時(shí)，被吸附力減弱；（3）同系物中，分子量越大，極性越小，被吸附力越弱。常見官能團(tuán)極性順序：烷烴烯烴醚類硝基化合物酯類酮類醛類硫醇胺類醇類酚類羧酸類,.,硅膠薄層色譜規(guī)律總結(jié),.,薄層色譜是在平面上進(jìn)行分離的一種方法，又叫平面色譜法。通常將固定相(吸附劑)均勻地涂鋪在表面潔凈的玻璃、塑料或金屬板形成薄層，制成薄板，進(jìn)行樣品分離。,特點(diǎn)：快速、靈敏（用量小）、高選擇性（如同分異構(gòu)體）簡(jiǎn)便、顯色方便應(yīng)用廣泛：化合物的鑒別和少量化合物的分離用于檢測(cè)藥品含量藥物合成中用于鑒別反應(yīng)程度和監(jiān)控反應(yīng)歷程用于摸索高效液相的色譜條件,（二）吸附色譜的操作技術(shù),1、吸附薄層色譜法,.,（1）制板,軟板：直接將吸附劑鋪在玻璃板上制成，不加粘合劑,要求：厚度隨分離要求而定，一般0.250.5mm玻璃棒推動(dòng)速度不宜過快、也不應(yīng)停頓影響厚度均一性優(yōu)點(diǎn)：方法簡(jiǎn)便、隨用隨鋪、展開速度快。缺點(diǎn)：吸附劑易脫落、只能用近水平展開，效果差。,.,（2）硬板的制備,硬板：吸附劑加粘合劑制成的板,常用的粘合劑：煅石膏（）機(jī)械強(qiáng)度差，易脫落，但不易腐蝕羧甲基纖維素鈉（CMC-Na）機(jī)械強(qiáng)度好，不易脫落，但易腐蝕,a、傾注法：硅膠G或氧化鋁G，直接加水調(diào)成糊狀硅膠或氧化鋁，加羧甲基纖維素鈉水溶液調(diào)成糊狀,倒在玻璃板上,均勻鋪開、振蕩、晾干、活化、置干燥器中備用。,.,注意事項(xiàng),調(diào)制時(shí)慢慢攪拌，勿使產(chǎn)生氣泡。均勻涂布在玻璃板上，搖動(dòng)攤平，晾干。使用前放入烘箱內(nèi)，在105-115左右烘干40-50min。冷卻后使用。,.,b、平鋪法：,1.吸附劑薄層2.涂布器3.玻璃夾板4.玻璃板5.玻璃夾板,過程：制板振蕩晾干活化備用優(yōu)點(diǎn)：一次鋪多塊薄層板，簡(jiǎn)單易行。,.,c、機(jī)械涂布法：,優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)單方便、薄板厚度均勻、分離效果好。,手動(dòng)涂布器全自動(dòng)涂布器,.,常用的薄層板：軟板：硅膠H板、氧化鋁H板硬板：常用的有硅膠G板、氧化鋁G板、硅膠CMC-Na板、氧化鋁CMC-Na板、硅膠GF、硅膠GF,.,2、點(diǎn)樣,（1）樣品溶液的制備：怎樣選擇溶劑？水可以用嗎？,樣品的濃度應(yīng)在510左右。溶解樣品的溶劑要盡量避免用水，因?yàn)樗芤喊唿c(diǎn)容易擴(kuò)散，且不易揮發(fā)。,.,2、點(diǎn)樣,（2）點(diǎn)樣量：與薄層板的關(guān)系太多太少的影響,點(diǎn)樣基線：距底邊1-1.5cm樣點(diǎn)直徑：2-3mm點(diǎn)間距離：1.5-2.0cm,.,2、點(diǎn)樣,（3）點(diǎn)樣方法：劃線、樣品記號(hào)點(diǎn)、點(diǎn)樣注：動(dòng)作要輕，毛細(xì)管或點(diǎn)樣器不能混用，斑點(diǎn)大小適當(dāng)，可多次點(diǎn)樣。,平頭50ul微量點(diǎn)樣器,全自動(dòng)點(diǎn)樣儀,.,3、展開,展開缸（色譜缸）,.,3、展開,展開缸（色譜缸）,.,3、展開,（1）展開方式：,a、近水平展開,特點(diǎn)：速度快、適用于軟板的展開。,.,3、展開,（1）展開方式：,b、上行展開,過程：預(yù)飽和（濾紙貼于展開槽內(nèi)側(cè)）、展開、標(biāo)記溶劑前沿,.,c、單向二次展開d、雙向二次展開,3、展開,（1）展開方式：,.,3、展開,（2）注意事項(xiàng)：,a、色譜槽需密閉良好脂溶性展開劑：甘油淀粉糊水溶性展開劑：凡士林b、注意防止邊緣效應(yīng),.,4、顯色和定位,一般規(guī)律：日光下觀察、紫外燈下觀察、加顯色劑加顯色劑：多噴霧，軟板使用浸漬顯色法,紫外燈觀察,噴顯色劑觀察,.,比移值（Rf）,組分二,組分一,被分離混合物,Rf的范圍：0Rf1Rf=0.20.8（常用）Rf=0.30.5（最佳）,.,影響Rf值的因素：（1）展開溫度：室溫對(duì)分離影響不明顯。其他