【畢業(yè)學(xué)位論文】（Word原稿）豇豆種質(zhì)資源遺傳多樣性分析及核心種質(zhì)構(gòu)建方法初探作物種質(zhì)資源學(xué)碩士論文

密級(jí)： 論文編號(hào)： 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 學(xué)位論文 豇豆種質(zhì)資源遺傳多樣性分析及核心種質(zhì)構(gòu)建方法初探 I 摘 要 豇豆 是世界 上三大 食用豆類(lèi)作物 之一，面積和產(chǎn)量?jī)H次于菜豆和鷹嘴豆 ， 廣泛栽培于熱 帶亞熱帶地區(qū)和部分溫帶地區(qū)，如：非洲、亞洲、南美洲、地中海盆地和美國(guó)南部。豇豆也是我國(guó)六大食用豆類(lèi)作物之一。我國(guó)豇豆資源比較豐富，已收集的豇豆資源近 5000 份。本研究，在國(guó)內(nèi)首次利用 物對(duì) 316 份來(lái)自于國(guó)內(nèi)外的豇豆資源進(jìn)行了系統(tǒng)的分析，并利用 記數(shù)據(jù)與形態(tài)性狀數(shù)據(jù)，對(duì)豇豆核心種質(zhì)的構(gòu)建方法進(jìn)行了初步探究。研究結(jié)果有助于國(guó)內(nèi)外豇豆種質(zhì)資源的收集 保護(hù) 、研究及 育種 工作。 主要研究結(jié)果： 利用 13 對(duì) 物 ， 對(duì) 316 份 參試資源 進(jìn)行分析。檢測(cè)到 47 個(gè)等位位點(diǎn)，每對(duì) 物2 等位位點(diǎn)，平均值 ，有 效等位基因平均 。國(guó)內(nèi)外參試資源遺傳多樣性 指數(shù) 介于 物 于檢測(cè)參試資源的遺傳多樣性最為有效。同時(shí)，對(duì)形態(tài)數(shù)據(jù)進(jìn)行遺傳多樣性分析的結(jié)果表明，粒色 的 變異最豐富， 其次是 臍環(huán)色和莢色。 我國(guó)豇豆資源的遺傳多樣性較低，采用不同標(biāo)記對(duì)不同省份普通豇豆資源遺傳多樣性進(jìn)行分析，其變化趨勢(shì)基本吻合。遺傳多樣性最豐富的省區(qū)是廣西、湖北和內(nèi)蒙古，遺傳多樣性最低的省區(qū)是安徽、山西、吉林和黑龍江。 本研究分別采用 記與形態(tài)標(biāo)記對(duì) 不同省份普通豇豆資源之間親緣關(guān)系進(jìn)行分析，各省份資源 間的親緣關(guān)系與地理位置關(guān)系 緊密。地理位置相鄰省份資源間的遺傳距離較小，親緣關(guān)系密切；地理位置相距較遠(yuǎn)省份資源間的遺傳距離較大，親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。采用 記對(duì)全部參試資源進(jìn)行 圖，結(jié)果顯示國(guó)內(nèi)、外資源差異明顯，被劃為 2 大類(lèi)群；國(guó)內(nèi)資源類(lèi)亞組群 之間有一定的地理分布相關(guān)性 。利用受環(huán)境影響較少的 8 個(gè)形態(tài)性狀對(duì)全部資源進(jìn)行 圖，結(jié)果表明國(guó)內(nèi)、外資源間的差異不明顯，組群間遺傳差異與地理來(lái)源有一定的關(guān)系但不十分密切。將 記數(shù)據(jù)與形態(tài)性狀數(shù)據(jù)整合，進(jìn)行 圖，結(jié)果表明國(guó)內(nèi)、外資源差異明顯，被劃為 2 大類(lèi)群，國(guó)內(nèi)亞組群間遺傳差異與地理來(lái)源關(guān)系較密切。以 記進(jìn)行的聚類(lèi)結(jié)果與以形態(tài)學(xué)標(biāo)記進(jìn)行的聚類(lèi)結(jié)果中個(gè)體吻合性較低。 本研究在 記數(shù)據(jù) 類(lèi)圖，形態(tài)性狀數(shù)據(jù) 類(lèi)圖，以及 將 據(jù)與形態(tài)性狀數(shù)據(jù)整合進(jìn)行 類(lèi)的 基礎(chǔ)上，以預(yù)定取樣數(shù)目確定截距，劃分類(lèi)群，在每個(gè)類(lèi)群抽取一份入選資源 ，從而構(gòu)建了三套預(yù)選核心種質(zhì)。對(duì)三套預(yù)選核心種質(zhì)進(jìn)行分析，抽取重復(fù)出現(xiàn)兩次以上的資源 49 份構(gòu)建核心種質(zhì)， 取樣比例為 16%，經(jīng)檢測(cè)此核心種質(zhì)涵蓋了 100%的位變異，具有很好的代表性；重復(fù)出現(xiàn)三次的 11 份資源構(gòu)成微核心種質(zhì)，取樣比例為 經(jīng)檢測(cè)此微核心種質(zhì)涵蓋了 81%的 位變異，仍具有良好的代表性，更便于育種利用。 本研究中發(fā)現(xiàn)豇豆高代材料的遺傳多樣性狹窄，豇豆親本材料的遺傳背景亟待拓寬。 關(guān)鍵詞： 普通豇豆，遺傳多樣性， 記，核心種質(zhì)，形態(tài)標(biāo)記 is of in .) .), it is in of is of in of is in ,000 to 16 SR of on SR in of as 1 13 to a 16 -7 SR a 7 in s to SR on At on of 2 SR of by SR 3 to of of in CA SR of to t of of to CA on SR SR on 4 on SR SR of 9 by in 6% 9 00% 1 by in 1 1% of is is in is 5 a 錄 第一章 文獻(xiàn)綜述 . 1 遺傳多樣性概念及研究的目的和意義 . 1 遺傳多樣性與種質(zhì)資源的概念 . 1 遺傳多樣性研究的目的意義 . 1 遺傳多樣性的研究方法 . 1 形態(tài)學(xué)標(biāo)記 . 2 細(xì) 胞學(xué)標(biāo)記 . 2 生化標(biāo)記 . 2 分子標(biāo)記 . 2 豇豆的概述 . 4 豇豆的起源 . 4 豇豆的分類(lèi) . 4 我國(guó)豇豆資源保存狀況 . 5 國(guó)內(nèi)外豇豆種質(zhì)資源遺傳多樣性的研究進(jìn)展 . 5 國(guó)內(nèi)研究進(jìn)展 . 5 國(guó)內(nèi)研究進(jìn)展 . 6 第二章 材料與方法 . 8 實(shí)驗(yàn)材料 . 8 試驗(yàn)材料 . 8 物 . 8 實(shí)驗(yàn)方法 . 8 形態(tài)性狀調(diào)查與賦值方法 . 8 形態(tài)學(xué)標(biāo)記數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析方法 . 10 取與 記檢測(cè) . 10 數(shù)據(jù)記錄與統(tǒng)計(jì)分析方法 . 10 第三章 結(jié)果與分析 . 11 豇豆種質(zhì)資源 記遺傳多樣性分析 . 11 13 對(duì) 物的貢獻(xiàn)率 . 11 豇豆種質(zhì)資源 記遺傳多樣性分析 . 11 豇豆種質(zhì)資源 記聚類(lèi)分析 . 15 豇豆種質(zhì)資源 記數(shù)據(jù) 析 . 22 豇豆種質(zhì)資源形態(tài)學(xué)標(biāo)記遺傳多樣性分析 . 23 不同形態(tài) 性狀貢獻(xiàn)率 . 23 豇豆種質(zhì)資源形態(tài)標(biāo)記遺傳多樣性分析 . 23 豇豆種質(zhì)資源形態(tài)學(xué)標(biāo)記聚類(lèi)分析 . 27 V 豇豆種質(zhì)資源形態(tài)標(biāo)記數(shù)據(jù) 析 . 33 豇豆種質(zhì)資源 記數(shù)據(jù)與形態(tài)學(xué)標(biāo)記數(shù)據(jù)綜合遺傳多樣性分析 . 34 13 對(duì) 物及 8 個(gè)形態(tài)性狀的貢獻(xiàn)率 . 34 豇豆種質(zhì)資源 13 對(duì) 物與形態(tài)性狀遺傳多樣性分析 . 34 豇豆種質(zhì)資源 記數(shù)據(jù)與形態(tài)學(xué)標(biāo)記數(shù)據(jù)綜合聚類(lèi)分析 . 36 豇豆種質(zhì)資源 記數(shù)據(jù)與形態(tài)學(xué)標(biāo)記數(shù)據(jù)綜合 析 . 45 豇豆種質(zhì)資源 記與形態(tài)學(xué)標(biāo)記綜合比較 . 45 豇豆種質(zhì)資源 記與形態(tài)學(xué)標(biāo)記遺傳多樣性指數(shù)比較 . 45 豇豆種質(zhì)資源 記與形態(tài)學(xué)標(biāo)記有效等位基因數(shù)比較 . 47 第四章 豇豆種質(zhì)資源核心種質(zhì)構(gòu)建方法初探 . 49 核心種質(zhì) . 49 核心種質(zhì)的概念 . 49 核心種質(zhì)的構(gòu)建 . 49 核心種質(zhì)的評(píng)價(jià) . 49 根據(jù) 記聚類(lèi)結(jié)果構(gòu)建預(yù)選核心種 . 50 根據(jù)形態(tài)標(biāo)記聚類(lèi)結(jié)果構(gòu)建預(yù)選核心種 . 50 根據(jù)整合的 形態(tài)數(shù)據(jù)的聚類(lèi)結(jié)果構(gòu)建預(yù)選核心種質(zhì) . 51 豇豆資源核心種質(zhì)的建立 . 52 豇豆資源核心種質(zhì)的評(píng)價(jià) . 53 第五章 綜合討論與結(jié)論 . 56 遺傳多樣性分析 . 56 聚類(lèi)分析 . 57 育種親本遺傳背景 . 57 關(guān)于核心種質(zhì)的構(gòu)建 . 58 結(jié)論 . 58 參考文獻(xiàn) . 60 附錄 . 64 致謝 . 73 作者簡(jiǎn)歷 . 74 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述 1 第一章 文獻(xiàn)綜述 遺傳多樣性概念及研究的目的和意義 遺傳多樣性與種質(zhì)資源的概念 遺傳多樣性 (指一個(gè)種群或者一個(gè)物種中，個(gè)體之間或群落之間遺傳差異的程度，一 個(gè)位點(diǎn)上的等位變異組成該位點(diǎn)的遺傳多樣性，而所有位點(diǎn)的變異組成一個(gè)群體或一個(gè)物種的遺傳多樣性。這種變異是以空間和時(shí)間的形式構(gòu)成的，既是生存和適應(yīng)的基礎(chǔ)，也是物種發(fā)生、進(jìn)化、選擇、重組和創(chuàng)新的物質(zhì)基礎(chǔ)（王洪新等， 1996； 1999）。即遺傳多樣性是一個(gè)物種或一個(gè)種群存在的遺傳基礎(chǔ)，一個(gè)種群遺傳多樣性越豐富，對(duì)環(huán)境脅迫的適應(yīng)能力越強(qiáng)，越容易擴(kuò)展其分布范圍和開(kāi)拓新的環(huán)境，遺傳變異的大小與其進(jìn)化速度成正比。 品種資源是育種工作者用以選育新品種的原始材料，又稱(chēng)為種質(zhì)資源。包括古老的地方品種、人工創(chuàng)制選育的 新品種和高代品系、自然形成的突變種和野生種。這些種質(zhì)中蘊(yùn)藏著各種性狀的遺傳基因，故又稱(chēng)為基因資源或基因庫(kù)。在育種工作中，抗病、優(yōu)質(zhì)新品種的成功育成依賴(lài)于大量豐富、優(yōu)異的原始材料的獲得。即所收集種質(zhì)資源具有豐富的遺傳多樣性，是快速、高效、成功選育新品種的物質(zhì)基礎(chǔ)和前提。由于人口劇增、環(huán)境惡化、品種更新等原因，正造成基因不斷滅絕。一個(gè)基因一旦滅絕，便很難再生。因此，收集保存和評(píng)價(jià)利用作物種質(zhì)資源已成為世界關(guān)注的熱點(diǎn)。目前作物種質(zhì)資源研究的宗旨是 “廣泛收集、妥善保存、深入研究、積極創(chuàng)新、高效利用、共享服務(wù)、主權(quán)保 護(hù) ”。 遺傳多樣性研究的目的意義 遺傳多樣性是作物種質(zhì)資源研究的重要內(nèi)容，它是用以衡量一個(gè)種、亞種或種群內(nèi)基因變異性的概念，是維持物種長(zhǎng)期保存和生物多樣性的基礎(chǔ)，是生物多樣性的核心。一個(gè)物種遺傳多樣性越豐富，其進(jìn)化的潛力就越大，或者說(shuō)遺傳多樣性為物種的進(jìn)化提供了潛在的原料儲(chǔ)備。高度的遺傳多樣性是維持物種長(zhǎng)期生存的基礎(chǔ)，這是因?yàn)橛蓡我患兒蟼€(gè)體組成的群體對(duì)環(huán)境不斷變化的壓力不能有效地適應(yīng)。人們發(fā)現(xiàn)很多滅絕或者受到威脅的物種有非常高的遺傳純合性，在相當(dāng)程度上，它們的滅絕是遺傳多樣性的減小或丟失所引起 的。近年來(lái)，由于集中使用少數(shù)幾個(gè)品種，排斥當(dāng)?shù)仄贩N和野生親緣種，造成遺傳多樣性丟失，多樣性降低，基因庫(kù)減小。因此，遺傳多樣性的研究，不僅可以揭示物種或群體的進(jìn)化歷史，有助于進(jìn)一步分析進(jìn)化潛力和未來(lái)的命運(yùn)，也為人類(lèi)保護(hù)作物的遺傳多樣性，開(kāi)發(fā)利用生物界豐富多彩的遺傳資源，促進(jìn)經(jīng)濟(jì)發(fā)展和科學(xué)進(jìn)步提供重要的保證和物質(zhì)基礎(chǔ)（張媛媛， 2005）。 遺傳多樣性的研究方法 遺傳標(biāo)記法是生物多樣性研究的重要方法，根據(jù)檢測(cè)技術(shù)的不同可以分為形態(tài)學(xué)標(biāo)記、細(xì)胞學(xué)標(biāo)記、生化標(biāo)記和分子標(biāo)記（徐吉臣等， 1992；賈繼增， 1996；劉勛甲等， 1998）。有用的遺傳標(biāo)記必須高度遺傳，且基因型與環(huán)境之間的相互作用?。?995； 國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述 2 et 996）。 形態(tài)學(xué)標(biāo)記 形態(tài)標(biāo)記（ 指生物的外部特征特性，可以觀察到的性狀，總體上可區(qū)分為質(zhì)量性狀遺傳標(biāo)記和數(shù)量性狀遺傳標(biāo)記。它是最早被使用和研究的遺傳標(biāo)記，因?yàn)樗憩F(xiàn)直觀，人們只要通過(guò)細(xì)心觀察就可以將不同表型的個(gè)體區(qū)分開(kāi)來(lái)。 形態(tài)標(biāo)記方法簡(jiǎn)單直觀，檢測(cè)過(guò)程快，需要資金少。但研究 中很多看似不同的類(lèi)型或個(gè)體在進(jìn)化上可能有非常近的親緣關(guān)系，這些不同的類(lèi)型可能具有相同的基因位點(diǎn)，但只是等位基因的擁有頻率不同，這樣的不同類(lèi)型很難通過(guò)形態(tài)性狀加以區(qū)別。由于形態(tài)標(biāo)記的遺傳力低和難以確定其同源性，特別是不能準(zhǔn)確的確定出特殊品系的遺傳組成，因此不能完全適應(yīng)種質(zhì)資源研究的需要（ 992）。 細(xì)胞學(xué)標(biāo)記 細(xì)胞學(xué)標(biāo)記 (指能明確顯示遺傳多態(tài)性的細(xì)胞學(xué)特征。染色體的結(jié)構(gòu)特征和數(shù)量特征是常見(jiàn)的細(xì)胞學(xué)標(biāo)記 (979)，它們分別反映了染 色體結(jié)構(gòu)上和數(shù)量上的遺傳多樣性。 染色體結(jié)構(gòu)特征包括染色體的核型和帶型。最初的細(xì)胞學(xué)標(biāo)記主要指染色體的核型，包括染色體數(shù)目，大小，隨體，著絲點(diǎn)位置等。而染色體顯帶是 20 世紀(jì) 60 年代后期發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)細(xì)胞學(xué)技術(shù)，它借助一套特殊處理程度，使染色體顯出深淺不同的帶紋，由此可以反映染色體上常染色質(zhì)和異染色質(zhì)的分布差異。 細(xì)胞學(xué)標(biāo)記克服了形態(tài)標(biāo)記易受環(huán)境影響的缺點(diǎn)，但這種標(biāo)記材料的產(chǎn)生需要花費(fèi)大量的人力物力進(jìn)行培養(yǎng)選擇。有些物種對(duì)染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目的變異的耐受性差，難以獲得相應(yīng)的標(biāo)記材料。某些物種雖然已有細(xì)胞學(xué)標(biāo)記材料 ，但這些標(biāo)記常常伴有對(duì)生物有害的表型效應(yīng)，或有時(shí)觀察和鑒定比較困難，從而限制了細(xì)胞學(xué)的應(yīng)用。 生化標(biāo)記 生化標(biāo)記 (要包括同工酶和儲(chǔ)藏蛋白。主要應(yīng)用于研究細(xì)胞分化，組織，器官的生長(zhǎng)發(fā)育習(xí)性以及形態(tài)建成等方面，應(yīng)用于研究鑒定各類(lèi)植物種質(zhì)資源的地理起源、分類(lèi)等（ 990）。 近年來(lái)在植物遺傳育種研究領(lǐng)域里，進(jìn)一步研究了不同同功酶基因位點(diǎn)與植物的生物學(xué)特性、產(chǎn)量性狀、抗病性、抗逆性以及產(chǎn)品的品質(zhì)等數(shù)量性狀、質(zhì)量性狀的連鎖關(guān)系或相關(guān)性，同時(shí)還研究 了這些連鎖關(guān)系或相關(guān)性在植物育種中的應(yīng)用。目前同工酶已廣泛應(yīng)用于品種質(zhì)量和純度鑒定以及群體遺傳結(jié)構(gòu)的研究（ 997）。生物標(biāo)記雖然具有一定的多態(tài)性，但其標(biāo)記數(shù)目有限，無(wú)法滿(mǎn)足大量遺傳基礎(chǔ)變異研究和輔助育種的需要。 分子標(biāo)記 80 年代以來(lái)，分子生物學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展為遺傳多樣性的檢測(cè)提供了更直接、更精確的方法，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述 3 即直接檢測(cè) 列本身的變化。 析技術(shù)可以大致分為兩類(lèi)：一類(lèi)是直接測(cè)序，主要分析一些特定基因或 段的核苷酸序列，度量這些片段 變異性；另一類(lèi)是檢測(cè)基因組的的 一批識(shí)別位點(diǎn)，從而估測(cè)基因組的變異性。直接測(cè)序是一件費(fèi)時(shí)、費(fèi)力、經(jīng)濟(jì)投入很大的工作，相比之下，對(duì)不特定基因組或 段識(shí)別位點(diǎn)的研究則十分普遍。由于 子標(biāo)記的多態(tài)性豐富，核坩酸序列的多態(tài)性不受選擇影響，因此是一種較理想的遺傳標(biāo)記（ 987）。分子標(biāo)記的類(lèi)型有許多種，下面重點(diǎn)介紹幾種最常用的 子標(biāo)記。 （）限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性 ( 1980 年， 提出了 概念。其原理是利用限制性?xún)?nèi)切酶對(duì)不同個(gè)體基因組 泳分離產(chǎn)生多態(tài) 段 ，最后與同位素或非同位素標(biāo)記的探針雜交，從而顯示與探針同源序列的酶切片段在長(zhǎng)度上的差異（ 989）。 優(yōu)點(diǎn)在于它可以區(qū)別純合基因型和雜合基因型，能夠提供單個(gè)位點(diǎn)的較完整的資料，探針極多，目前各種主要作物上篩選的探針多達(dá)數(shù)千個(gè)，因此它檢測(cè)的遺傳位點(diǎn)也非常之多。但是由于 繁瑣操作步驟，使得其實(shí)驗(yàn)費(fèi)用昂貴，而且探針是進(jìn)行 前提，析的效率更依賴(lài)于合適探針的獲得。同時(shí)由于操作中要用到限制性?xún)?nèi)切酶，因此對(duì) 需樣品量也較大，因此在對(duì)涉 及許多個(gè)體的居群遺傳變異進(jìn)行分析時(shí)，這種方法通常不被采用。 （）隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性 以 基礎(chǔ)的分子標(biāo)記技術(shù)，基本原理是采用 10 個(gè)堿基（隨機(jī)序列）的寡核甘酸為引物，該引物的基因組 許多個(gè)結(jié)合位點(diǎn)，當(dāng)兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)之間的 段長(zhǎng)度符合應(yīng)條件時(shí)即可被擴(kuò)增。不同來(lái)源的 有不同的 物結(jié)合位點(diǎn)，從而在 應(yīng)中獲得不同的擴(kuò)增產(chǎn)物，再經(jīng)凝膠電泳分離， 色后即可觀察(990;990)。 技術(shù)優(yōu)點(diǎn)是： 1、 合成一套引物可以對(duì)沒(méi)有進(jìn)行任何分子生物學(xué)研究的物種進(jìn)行 具種屬特異性。 2、無(wú)需制備克隆、標(biāo)記探針、 交，簡(jiǎn)單迅速，成本低。 3、樣品用量少，靈敏度高。 術(shù)的缺點(diǎn)： 產(chǎn)生顯性標(biāo)記（即有或沒(méi)有），所以不能用來(lái)鑒定雜合體，但對(duì)自交系和回交群體來(lái)說(shuō)是不成問(wèn)題的，因?yàn)樗谢虼蠖鄶?shù)的基因位點(diǎn)都是同源的。 不能單獨(dú)的用來(lái)對(duì)沒(méi)有基因標(biāo)記的生物進(jìn)行遺傳圖譜的分析，因?yàn)樗a(chǎn)生的多態(tài)性是隨機(jī)的。 （） 擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性（ 由荷蘭科學(xué)家 展起來(lái)的一種檢測(cè) 態(tài)性的新方法。它是將 可靠性和 高效性完美結(jié)合起來(lái)。它的原理是基于對(duì)植物基因組總 酶切，經(jīng) 增后的限制片斷進(jìn)行選擇。它的特點(diǎn)是結(jié)合了 優(yōu)點(diǎn)，多態(tài)性高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定可靠，而且再現(xiàn)性高，重復(fù)性好，是一種檢測(cè)遺傳多樣性的理想方法。限制性酶和引物的選擇可能直接影響到可檢測(cè)的 多態(tài)性。與 似， 以在對(duì)所研究材料分子生物學(xué)背景無(wú)任何了解的情況下獲得大量信息。但是這種方法實(shí)驗(yàn)步驟復(fù)雜繁瑣，費(fèi)用相對(duì)中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述 4 昂貴；操作難度較高，要求 實(shí)驗(yàn)者對(duì)該實(shí)驗(yàn)操作較為熟練；對(duì)酶切用的 板的質(zhì)量要求較高（吳敏生等， 1998）。 （）微衛(wèi)星 稱(chēng)簡(jiǎn)單重復(fù)序列（ 記，重復(fù)單位很短，只有 1復(fù)數(shù)可變，總長(zhǎng)度為幾十個(gè) 布于整個(gè)基因組的不同位置上。微衛(wèi)星 端的序列一般是相對(duì)保守的單拷貝序列，據(jù)此可設(shè)計(jì)特異引物進(jìn)行 擴(kuò)增串聯(lián)重復(fù)序列，根據(jù)串聯(lián)重復(fù)數(shù)的不同，揭示微衛(wèi)星 長(zhǎng)度多態(tài)性。其特點(diǎn)是：共顯性、多態(tài)性強(qiáng)、可通 過(guò) 速檢測(cè)，引物序列公開(kāi)發(fā)表后，便能廣泛交流使用。是構(gòu)建初級(jí)遺傳連鎖圖譜非常有效的分子標(biāo)記。缺點(diǎn)是必須依賴(lài)于微衛(wèi)星兩端序列設(shè)計(jì)引物。目前， 記技術(shù)已廣泛的應(yīng)用于遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建、基因定位、品種鑒定、種子純度的檢測(cè)、種質(zhì)分類(lèi)和遺傳多樣性的研究和親緣關(guān)系的鑒定等 (方宣鈞， 2000；李明芳， 2004)。 豇豆的概述 豇豆屬豆科 (蝶形花亞科 (豇豆屬 (. )，一年生草本植物，學(xué)名 L.)別名豆角、角豆、長(zhǎng)豆、裙帶豆、飯豆、蔓豆、潑豇豆、黑臍豆等，英文常用名為 色體 2n 2x=22(鄭卓杰， 1997)。 豇豆是熱帶和亞熱帶發(fā)展中國(guó)家必需的作物，尤其是在非洲、亞洲、美國(guó)的中部和南部。作為一種食用豆，豇豆的蛋白含量高，并且在它幼嫩的葉子、豆莢、種子中也含有維生素和礦物質(zhì)。2005 年全世界豇豆 栽培面積 10 457 000 產(chǎn) 3 697 000 t， 僅次于菜豆、鷹嘴豆，在全部 20多種食用豆類(lèi)作物中排第 3 位（ 2006），豇豆 是世界上主要的食用豆類(lèi)作物， 也是我國(guó) 六大食用豆類(lèi)作物