《血液凝集反應(yīng)》PPT課件.ppt

抗原抗體反應(yīng),免疫凝集試驗,凝集反應(yīng)（agglutination）,是指顆粒性抗原，例如細菌、紅細胞、螺旋體、細胞性抗原，或可溶性抗原（或抗體）與載體顆粒結(jié)合成致敏顆粒后，與相應(yīng)的抗體（或抗原）在適量的電解質(zhì)存在的條件下，經(jīng)一定時間后凝聚成肉眼可見的凝集現(xiàn)象。,凝集反應(yīng)的特點,顆粒性抗原致敏顆粒（可溶性抗原或抗體與載體顆粒結(jié)合）電解質(zhì)的存在肉眼可見的凝集現(xiàn)象,凝集反應(yīng)的發(fā)生分兩階段：,抗原抗體的特異結(jié)合出現(xiàn)可見的顆粒凝集,凝集反應(yīng)的類型,直接凝集試驗,玻片凝集試驗：ABO血型,試管凝集試驗：外斐試驗，肥達試驗,間接凝集試驗,正向間接凝集試驗,反向間接凝集試驗,間接凝集抑制試驗,協(xié)同凝集試驗,間接血凝試驗,膠乳凝集試驗,明膠凝集試驗,根據(jù)凝集反應(yīng)中抗原的性質(zhì)，反應(yīng)的方式分為：直接凝集反應(yīng)間接凝集反應(yīng),直接凝集反應(yīng)（directagglutination）,細菌、螺旋體和紅細胞等顆?？乖谶m當電解質(zhì)參與下可直接與相應(yīng)抗體結(jié)合出現(xiàn)凝集，稱為直接凝集反應(yīng)。參加反應(yīng)的顆粒性抗原稱為凝集原（agglutinogen），抗體稱為凝集素（agglutinin）。,玻片法：（定性）細菌鑒定ABO血型的鑒定試管法：（半定量）肥達試驗（Widaltest）-傷寒外斐試驗（Weil-Felixtest）-立克次體交叉配血試驗,間接凝集反應(yīng)（indirectagglutination）,將可溶性抗原（或抗體）先吸附或偶聯(lián)與免疫無關(guān)大小適當?shù)念w粒性載體的表面，使之成為致敏載體顆粒，然后與相應(yīng)抗體（或抗原）作用，在適宜的電解質(zhì)存在的條件下，出現(xiàn)特異性凝集現(xiàn)象，稱間接凝集反應(yīng)（indirectagglutination）或被動凝集反應(yīng)（passiveagglutination）。其敏感度高于直接凝集反應(yīng)和沉淀反應(yīng)。,常用載體：,RBC聚苯乙烯膠乳（polystyrenelatex）明膠顆?；钚蕴吭硗粒╞entonite）火棉膠,間接凝集反應(yīng)分類依據(jù),根據(jù)致敏載體用的是抗原（正向）或抗體（反向）根據(jù)載體（RBC，膠乳，明膠）根據(jù)凝集反應(yīng)的方式（間接凝集試驗，間接凝集抑制試驗，協(xié)同凝集試驗）,間接反應(yīng)的常見類型,間接凝集試驗間接血凝試驗?zāi)z乳凝集試驗明膠凝集試驗間接凝集反應(yīng)的應(yīng)用,1、（正向）間接凝集試驗,2反向間接凝集試驗,3、間接凝集抑制試驗,本次實驗內(nèi)容,ABO血型鑒定,目的與要求,掌握凝集反應(yīng)的原理與類型掌握玻片凝集法操作與結(jié)果判斷熟悉ABO血型鑒定的原理與操作,玻片凝集法-ABO血型鑒定,試驗?zāi)康耐ㄟ^標準血清抗體鑒定紅細胞上ABO血型系統(tǒng)抗原，掌握鹽水介質(zhì)法進行ABO血型系統(tǒng)正定型的基本操作方法和結(jié)果判斷。,實驗原理,根據(jù)IgM類特異性血型抗體與紅細胞上特異性抗原結(jié)合能夠出現(xiàn)凝集反應(yīng)的原理，用已知IgM類特異性標準抗血清與被檢紅細胞在鹽水介質(zhì)中反應(yīng)（室溫），若出現(xiàn)凝集想象，表明被檢紅細胞膜上有與血型抗體相對應(yīng)的抗原，從而判斷和鑒定被檢者的血型。,實驗材料與方法,試劑：抗A血清，抗B血清材料：玻片，采血針，消毒干棉球，酒精棉球等,實驗方法與步驟,1、標記玻片：取玻片一張，一分為二，分別標記為抗A，抗B。2、采血：用酒精棉球消毒被檢者左手無名指或中指內(nèi)側(cè)，用采血針刺破皮膚，用干棉球擦去第一滴血，稍加擠壓，使其流出第二滴血，裝入鹽水試管，搖勻，即成血細胞懸液。,3、加抗血清：滴加抗A，抗B血清于玻片標記處、4、加RBC：在抗A，抗B血清中滴加RBC各一滴。5、混勻：前后左右搖動，觀察有無血細胞凝集出現(xiàn)。6、結(jié)果：記錄受檢者紅細胞凝集情況及血型鑒定結(jié)果,ABO血型結(jié)果判斷,試管凝集試驗,多用于半定量試驗，原則上是用定量抗原懸液與一系列倍比稀釋的受檢血清