第2節(jié)動物細(xì)胞工程.ppt

2.2動物細(xì)胞工程,04:43:10,1,04:43:10,2,（最基礎(chǔ)）,動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)：,動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞核移植動物細(xì)胞融合單克隆抗體等,植物細(xì)胞工程常用的技術(shù)：,植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交,知識回顧：,04:43:10,3,2.2.1動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù),04:43:10,4,自主閱讀教材P44第5段，思考下列問題：,1、什么叫動物細(xì)胞培養(yǎng)（animalcellculture)？2、動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是什么？,04:43:10,5,一、動物細(xì)胞培養(yǎng),1、概念：從動物機(jī)體中取出相關(guān)組織，將它們分散成單個細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖。,2、原理：,細(xì)胞增殖,如何進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)?,（有絲分裂）,實驗材料,處理方法,實驗條件,實驗?zāi)康?（重點）,04:43:10,6,結(jié)合以下問題，閱讀教材P44-P46，然后分組討論。,合作學(xué)習(xí)：,2、為何動物細(xì)胞培養(yǎng)過程將組織分散成單個細(xì)胞呢？如何分散？由此可說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么成分？,4、培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面為何要光滑、無毒？,5、培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)到什么時候就不再分裂、增殖？如果培養(yǎng)的是癌細(xì)胞會出現(xiàn)這種情況嗎？,1、選用組織時，一般用動物胚胎或幼齡個體的器官或組織做培養(yǎng)材料，而不用老齡動物的，這是為什么？,3、胰蛋白酶處理組織時間能否太長？能夠用胃蛋白酶代替嗎？為什么？,6、動物細(xì)胞培養(yǎng)能否最終培養(yǎng)成新個體？,7、對于目前使用或冷凍保存的細(xì)胞有什么要求？為什么？,04:43:10,7,相關(guān)概念：,原代培養(yǎng)：,細(xì)胞貼壁：,接觸抑制：,傳代培養(yǎng)：,懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。,細(xì)胞核型：,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時，細(xì)胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。,通常將直接從動物體內(nèi)取出的動物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。,原代培養(yǎng)的細(xì)胞出現(xiàn)接觸抑制后，貼滿瓶壁的細(xì)胞需要重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，讓細(xì)胞增殖。這樣即為傳代培養(yǎng)。,染色體組在有絲分裂中期的表型,染色體數(shù)目、大小、形態(tài)特征的總和，即細(xì)胞核型。,04:43:10,8,細(xì)胞貼壁,接觸抑制,04:43:10,9,核型分析,04:43:10,10,動物胚胎或幼齡動物的組織、器官,單個細(xì)胞,細(xì)胞懸浮液,10代細(xì)胞,傳代培養(yǎng),3、過程：,50代細(xì)胞,無限傳代,原代培養(yǎng),細(xì)胞株,細(xì)胞系,04:43:10,11,04:43:10,12,多細(xì)胞動物和人體的細(xì)胞都生活在內(nèi)環(huán)境中，根據(jù)所學(xué)的知識和視頻操作過程，你認(rèn)為體外培養(yǎng)動物細(xì)胞應(yīng)該模擬內(nèi)環(huán)境的哪些條件呢？,問題探討：,？,04:43:10,13,4、動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件,1、無菌、無毒的環(huán)境,（無菌操作、添加一定量的抗生素，定期更換培養(yǎng)液）,2、營養(yǎng),（葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、動物血清等）,3、溫度和PH,（36.5+0.5度,7.2-7.4）,4、氣體環(huán)境,（95%空氣和5%CO2）,調(diào)節(jié)PH值,保證細(xì)胞順利生長增值,04:43:10,14,生物制品的生產(chǎn)用于基因工程用于檢測有毒物質(zhì)細(xì)胞的生理、病理、藥理研究,5、動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用,04:43:10,15,獲得細(xì)胞,細(xì)胞的全能性,植物體,培養(yǎng)條件,或細(xì)胞產(chǎn)物,培養(yǎng)結(jié)果,葡萄糖、動物血清,蔗糖、植物激素,培養(yǎng)基特有成分,液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基,培養(yǎng)基狀態(tài),細(xì)胞增殖,原理,動物細(xì)胞培養(yǎng),植物組織培養(yǎng),比較項目,植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的比較,無菌、適宜PH常溫、光照,無菌、適宜PH、恒溫,04:43:10,16,1動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段中，最基礎(chǔ)的是A.動物細(xì)胞培養(yǎng)B.動物細(xì)胞融合C.單克隆抗體D.胚胎核移植,練一練,2貼壁細(xì)胞的分裂方式具體是A.無絲分裂B.有絲分裂C.減數(shù)分裂D.增殖,04:43:10,17,3關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，不正確的是A.動物細(xì)胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散開來B.通常將動物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)C.動物細(xì)胞培養(yǎng)只能傳50代左右，所培育的細(xì)胞全部衰老死亡D.用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動物的器官或組織,練一練,04:43:10,18,4回答下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的問題：在動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到細(xì)胞表面時，細(xì)胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的。此時，瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是，要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是。隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)的現(xiàn)象；但極少數(shù)細(xì)胞可以連續(xù)增殖，其中有些細(xì)胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變