GB 5413.36-2010 嬰幼兒食品和乳品中反式脂肪酸的測(cè)定

  中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)010食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 嬰幼兒食品和乳品中反式脂肪酸的測(cè)定 of in 華人民共和國(guó)衛(wèi)生部發(fā)布  2010布  2010施 010 I 前     言  本標(biāo)準(zhǔn)附錄 A 為資料性附錄。  本標(biāo)準(zhǔn)系首次發(fā)布。010 1 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 嬰幼兒食品和乳品中反式脂肪酸的測(cè)定  1 范圍  本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了嬰幼兒食品和乳品中反式脂肪酸的測(cè)定方法。  本標(biāo)準(zhǔn)適用于嬰幼兒食品和乳品中反式脂肪酸的測(cè)定。  2 規(guī)范性引用文件 本標(biāo)準(zhǔn)中引用的文件對(duì)于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標(biāo)準(zhǔn)。 3 原理 試樣中的脂肪用溶劑提取。提取物在堿性條件下與甲醇反應(yīng)生成脂肪酸甲酯，用配有氫火焰離子化檢測(cè)器的氣相色譜儀分離順式脂肪酸甲酯和反式脂肪酸甲酯，外標(biāo)法定量。 4 試劑和材料 除非另有規(guī)定，本方法所用試劑均為分析純，水為  6682規(guī)定的一級(jí)水。  油醚：沸程 30 60 。  醚（   醇（ 體積分?jǐn)?shù)為 95 %。  己烷（ 色譜純。  水（ 2O）： 25 % 28 %。  氧化鉀（   醇（   粉酶：活力單位： ，根據(jù)活力單位大小調(diào)整用量。  水硫酸鈉（    氧化鉀 4 ）：稱取 26.4 g 氫氧化鉀，溶于約 80 醇中。冷卻至室溫，用甲醇定容至 100 入約 5g 無水硫酸鈉（ 充分?jǐn)嚢韬筮^濾，保留濾液。  肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品：十八酸甲酯（ ）、反 順 反 1212t）、順 1212c），放入冰箱在 以下保存。  010 2 式脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)貯備液：濃度分別為 10.0 取 500 確到 0.1  9， 12別用正己烷溶解并定容至 50.0 入冰箱在 以下保存。  式脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)中間液：濃度分別為 1.0 別吸取兩種反式脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（ 10.0 同一 100 量瓶中并用正己烷（ 容。臨用前配制。亦作為標(biāo)準(zhǔn)曲線最高點(diǎn)。  式脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)工作液：臨用前配制。分別吸取反式脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)中間液（  0、10.0  10 量瓶中，用正己烷定容，此濃度即為 0、 1.0 mg/標(biāo)準(zhǔn)工作液。  肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)混合液：將脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品（ 用正己烷配制成脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)混合溶液，其中每種成分的濃度約為 mg/ 0.5 mg/于進(jìn)行順反脂肪酸甲酯分離程度及定性的鑒定。  果紅溶液：稱取 1 g 剛果紅溶解稀釋至 100  5 儀器和設(shè)備 相色譜儀，帶氫火焰離子化檢測(cè)器。  轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。                             溫水浴： 40 80 。  旋振蕩器。  心機(jī)：轉(zhuǎn)速 4000 轉(zhuǎn) /分鐘。  氏抽脂瓶。  氏抽脂瓶搖混器。  肪收集瓶：圓底燒瓶，與旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀配套。  平：感量為 0.1  6 分析步驟 樣處理 淀粉的試樣：稱取混合均勻的固體試樣約 1.5 g，液體試樣約 5 g（精確到 0.1 毛氏抽脂瓶中，加入約 0.1 g 淀粉酶（酶活力 ），混合均勻后，加入 8 10 5 2 的水，搖勻。蓋上瓶塞置于 55 2 水?。? 2 h，每隔 10混一次。加入兩滴約 0.1  的碘溶液，檢驗(yàn)淀粉是否水解完全。若無藍(lán)色出現(xiàn)，則水解完全，否則將毛氏抽脂瓶重新置于水浴中，直至藍(lán)色消失，取出冷卻至室溫。  含淀粉的試樣：稱取混合均勻的固體試樣約 1.5 g，液體試樣約 10g（精確到 0.1 毛氏抽脂瓶（ ，加入 10 5 2 的水，將試樣洗入毛氏抽脂瓶（ 小球中，充分混合，直到試樣完全散開，冷卻至室溫。  010 3 肪的提?。合蛎铣橹浚?加入 3.0 水（ 混勻。置于 60 2 水?。? 15 20 卻至室溫。加入 10 醇（  1 滴剛果紅溶液（ 混勻。再加入25醚（ 塞上軟木塞，放到毛氏抽脂瓶（ 混器上震蕩 1 可采用手動(dòng)振搖方式，再加入 25油醚 （ ， 震蕩 1 不低于 4000 轉(zhuǎn) /分鐘離心分層。 傾出上清液于脂肪收集瓶 （ ，為第一次提取。在剩余試樣液中再加入 5 醇， 25 醚， 25 油醚按上述操作步驟進(jìn)行第二次提取。用離心機(jī)（ 心分層后傾出上清液與第一次的上清液合并。將脂肪收集瓶（ 于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（ ，在 60 2 通入氮?dú)鈼l件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，保留殘?jiān)?，即為脂肪? 肪酸甲酯的制備：將上述脂肪用正己烷（ 解并定容至 10.0 出 3.0  10 入 0.3 氧化鉀 蓋緊瓶蓋，渦旋振蕩器（ 劇烈振搖 2 000 轉(zhuǎn) /分鐘離心 5 將上清液轉(zhuǎn)入氣相色譜試樣瓶中，此為試樣測(cè)定液。  定 考色譜條件 色譜柱：填料為氰丙基芳基聚硅氧烷的毛細(xì)管柱，柱長(zhǎng) 100 m，內(nèi)徑 厚 m；或同等性能的色譜柱。  進(jìn)樣口溫度： 250 ；載氣（2） 。  檢測(cè)器溫度： 300 。  分流比： 10： 1。  進(jìn)樣量： L。  程序升溫：如表 1 所示。   表 1 程序升溫條件 升溫速率（ /  溫度（）  保持時(shí)間（  120 0 10 175 10 5 210 5 5 230 準(zhǔn)曲線的制備 在儀器最佳工作條件下，對(duì)系列標(biāo)準(zhǔn)工作液（ 別進(jìn)樣，以峰面積為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)工作液濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。  式脂肪酸甲酯色譜峰的鑒別 對(duì)脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)混合溶液（ 樣，進(jìn)行順反脂肪酸甲酯分離程度及定性的鑒定。反十八碳一烯酸甲酯和反十八碳二烯酸甲酯色譜峰的位置參見附錄  樣液的測(cè)定 將試樣測(cè)定液注入氣相色譜儀，試樣測(cè)定液中反式脂肪酸甲酯峰位置參見附錄 別測(cè)定區(qū)域 118： 2標(biāo)準(zhǔn)曲線得到試樣測(cè)定液中反十八碳一烯酸甲酯和反十八碳二烯酸甲酯的質(zhì)量濃度。  7 分析結(jié)果的表述  試樣中反十八碳一烯酸和反十八碳二烯酸含量分別計(jì)為 2，按式（ 1）分別計(jì)算：   100)21(=（ 1） 010 4 式中： X（1或2） 試樣中反十八碳一烯酸或反十八碳二烯酸含量，單位為毫克每百克（ 00g） ；  V試樣的定容體積，單位毫升（   m試樣質(zhì)量，單位為克（ g）；  試樣測(cè)定液中反十八碳一烯酸甲酯或反十八碳二烯酸甲酯的質(zhì)量濃度，單位為毫克每毫升(mg/  反十八碳一烯酸或反十八碳二烯酸的分子量；  反十八碳一烯酸甲酯或反十八碳二烯酸甲酯的分子量。  試樣中反式脂肪酸的總含量  X，按式（ 2）計(jì)算：  21= （ 2）  式中：  X反式脂肪酸的總含量，單位為毫克每百克（ 00g） ；  試樣中反十八碳一烯酸的含量，單位為毫克每百克（ 00g） ；  試樣中反十八碳二烯酸的含量，單位為毫克每百克（ 00g） 。  以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留三位有效數(shù)字。  8 精密度  在重復(fù)性條