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1、1,病原微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo),實(shí)驗(yàn)教學(xué)中心 成 靜,2,實(shí)驗(yàn)一 細(xì)菌的基本形態(tài)與特殊結(jié)構(gòu),實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?1、掌握革蘭染色法和細(xì)菌的基本形態(tài) 2、熟悉細(xì)菌涂片的制備 3、掌握細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)觀(guān)察 4、掌握顯微鏡油鏡的使用和保護(hù),3,實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,1、臨床微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室規(guī)則 2、實(shí)驗(yàn)室意外的緊急處理辦法 3、實(shí)驗(yàn)時(shí)的注意事項(xiàng) 4、細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查: 革蘭染色和細(xì)菌基本形態(tài)觀(guān)察 特殊結(jié)構(gòu)觀(guān)察,4,臨床微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室規(guī)則,1、進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必須穿白大衣,離室時(shí)脫下反折,必要時(shí)戴口罩操作。 2、不必要物品勿帶入實(shí)驗(yàn)室,必要的物品應(yīng)放在指定區(qū)域。 3、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)禁止飲食、抽煙,不得高聲談笑或隨意走動(dòng)。 4、用過(guò)的有菌器材必須放
2、在指定位置,小心處理傳染材料、培養(yǎng)物和污染物。 5、避免任何有菌材料的濺出,如不慎污染工作臺(tái)、人、衣服、地面等,應(yīng)及時(shí)報(bào)告老師并處理。 6、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后物歸原處,用消毒液浸泡、洗手,打掃衛(wèi)生的同學(xué)清潔和消毒桌面、地面,并將實(shí)驗(yàn)器材送到準(zhǔn)備室和消毒間,關(guān)閉水電門(mén)窗后離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室,5,實(shí)驗(yàn)室意外的緊急處理辦法,1、皮膚破損 2、燒傷 3、化學(xué)藥品腐蝕傷 4、菌液誤入口中 5、菌液流灑桌面 6、火警,6,實(shí)驗(yàn)時(shí)的注意事項(xiàng),一、嚴(yán)格遵循實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) 二、認(rèn)真完成實(shí)驗(yàn)操作 三、充分利用參考資料,7,細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查,8,革蘭染色法和細(xì)菌的基本形態(tài),器材和試劑: 菌種:金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌 培養(yǎng)基:普通瓊脂平
3、板 試劑:革蘭染液 其他:載玻片、生理鹽水、酒精燈、火柴等,9,革蘭染色法和細(xì)菌的基本形態(tài),細(xì)菌涂片的制作 涂片 干燥 固定,10,革蘭染色法,方法 1、初染:將結(jié)晶紫染液加在制好的涂片上,染色1分鐘,用細(xì)水沖洗,甩去積水。 2、媒染:加盧戈碘液,染1分鐘,用細(xì)水沖洗,甩去積水。 3、脫色:加95%酒精數(shù)滴,輕搖玻片數(shù)秒,使均勻脫色,至無(wú)紫色淌下,用細(xì)水沖洗,甩去積水。 4、復(fù)染:加稀釋復(fù)紅染1分鐘,用細(xì)水沖洗,甩去積水。用吸水紙吸干后,在涂片上滴加鏡油,置油鏡下檢查,11,革蘭染色法,結(jié)果觀(guān)察(油鏡下觀(guān)察,放大1000倍): 1、細(xì)菌的基本形態(tài)及大?。呵蚓U菌、弧菌 2、細(xì)菌的排列方式:散在、葡萄狀、鏈狀、成雙、四疊、八疊 3、細(xì)菌的染色性:陽(yáng)性呈紫色、陰性呈紅色 4、細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu):莢膜、芽孢,不能看到鞭毛,12,大腸桿菌,金葡菌,13,霍亂弧菌,14,鏈球菌,15,革蘭陰性雙球菌,16,革蘭染色法,思考題: 1、原理 2、意義 3、注意事項(xiàng),17,特殊結(jié)構(gòu)觀(guān)察,芽孢:破傷風(fēng)桿菌(革蘭染色法) 莢膜:肺炎雙球菌(革蘭染色法) 鞭毛:變形桿菌(鍍銀染色法,18,破傷風(fēng)芽孢
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