滅菌制劑與無菌制劑(11)

1、可編輯ppt,1,第十章 滅菌制劑與無菌制劑,可編輯ppt,2,教學(xué)內(nèi)容,第一節(jié) 概述 第二節(jié) 滅菌制劑與無菌制劑的相關(guān)技術(shù)和理論 第三節(jié) 注射劑 第四節(jié) 輸液 第五節(jié) 注射用無菌粉末 第六節(jié) 眼用制劑,可編輯ppt,3,第一節(jié) 概述,一、滅菌制劑與無菌制劑的定義和類型 滅菌制劑：指采用某一物理、化學(xué)方法殺滅或除去所有活的微生物的一類藥物制劑。 無菌制劑：采用某一無菌操作方法或技術(shù)制備的不含任何活的微生物的一類藥物制劑,可編輯ppt,4,3、滅菌制劑和無菌制劑的分類 注射用制劑：注射劑、輸液、注射粉針等； 眼用制劑：滴眼劑、眼用膜劑、軟膏劑、凝膠劑等； 植入型制劑：植入片等； 局部用外用制劑：

2、潰瘍、燒傷及外傷用溶液、軟膏劑、氣霧劑等。 手術(shù)用制劑：止血海綿劑和骨蠟等,可編輯ppt,5,二、滅菌制劑與無菌制劑的質(zhì)量要求,無菌 無熱原 靜脈注射、脊椎腔注射、一次用量超過5ml的注射劑 可見異物和不溶性微粒，應(yīng)符合藥典規(guī)定。 安全性 非水溶劑和附加劑，須經(jīng)動物實驗證實無刺激性和毒性 滲透壓 等滲和等張 pH 與血液和組織相近 穩(wěn)定性 物理、化學(xué)和生物穩(wěn)定性 降壓物質(zhì) 須符合規(guī)定,可編輯ppt,6,第二節(jié) 滅菌制劑與無菌制劑的相關(guān)技術(shù)和理論,一、水處理技術(shù) 概述 制藥用水包括：飲用水、純化水、注射用水及注射用水 各種水的來源和質(zhì)量要求 原水 不能直接用于制藥 飲用水 用于藥材的漂洗、制藥用

3、具的粗洗 純化水 用作配制普通制劑的溶劑或試驗用水、滅菌或非滅菌制劑所用藥材的提取溶劑、非滅菌制劑用器具的精洗。 注射用水 又稱重蒸餾水 滅菌注射用水 無菌 五熱原?？芍苯佑糜谂R床,可編輯ppt,7,三、原水處理技術(shù),初濾和精濾 石英砂濾、活性炭濾器及細(xì)過濾器而成的過濾器。 電滲析法 常用于原水處理。 除去帶電荷的某些離子或雜質(zhì)，對不帶電荷的物質(zhì)除去能力差。 常用于離子交換前的水處理,可編輯ppt,8,依據(jù)：在電場作用下離子定向遷移及交換膜的選擇性透過 當(dāng)原水含鹽量高達3000mg/L時，不宜采用離子交換法制備純化水，但電滲析法仍適用。它不用酸堿處理，較離子交換法經(jīng)濟。電滲析法常用于原水預(yù)處理

4、，供離子交換法使用，以減輕離子交換樹脂的負(fù)擔(dān),可編輯ppt,9,反滲透法 什么是反滲透？ 反滲透的結(jié)果是使水從濃溶液中分離出來 有機物的排除率與其分子量有關(guān)，分子量大于300的化合物幾乎全部除盡，故可除去熱原。 除去有機物微粒、膠體物質(zhì)和微生物的原理，一般認(rèn)為是機械過篩作用。 耗能低、水質(zhì)好、設(shè)備使用語保養(yǎng)方便,可編輯ppt,10,離子交換法：利用陽、陰離子樹脂可以除去絕大部分陽、陰離子，對熱原、細(xì)菌也有一定的清除作用。 優(yōu)點：水質(zhì)化學(xué)純度高，所需設(shè)備簡單，耗能小，成本低。 對熱原、細(xì)菌也有一定的去除作用。 缺點：除熱原效果不可靠，樹脂需定期更換或再生。 離子交換法制得的離子交換水主要供蒸餾法

5、制備注射用水使用，也可用于洗瓶，但不得用來配制注射液,陽離子交換樹脂： 氫型：RSO3- H+ 鈉型（穩(wěn)定）Na,陰離子交換樹脂： 氫氧型：RN +(CH3)3OH- 氯型（穩(wěn)定）： Cl,陽床 脫氣塔（CO2）陰床混合床,可編輯ppt,11,大型離子設(shè)備圖,可編輯ppt,12,1.蒸餾法 制備注射有水最經(jīng)典的方法。 （1）蒸餾水器 種類：塔式和亭式蒸餾水器、多效蒸餾水器和氣壓式蒸餾水器。 構(gòu)成：蒸發(fā)鍋（塔）、隔沫裝置和冷凝器 缺點：耗能高，效率低?；颈惶蕴?四、注射用水的制備技術(shù),可編輯ppt,13,多效蒸餾水機 特點：耗能低、 產(chǎn)量高、 質(zhì)量優(yōu)。 氣壓式蒸餾水器 它是以輸入部分外界能量而

6、將低溫?zé)崮苻D(zhuǎn)化為高溫?zé)崮艿脑韥砩a(chǎn)蒸餾水,可編輯ppt,14,2. 反滲透法(reverse osmosis) 一般情況下，一級反滲透裝置能除去一價離子90-95%，二價離子98-99%，同時能除去微生物和病毒，但除去氯離子的能力達不到藥典要求；二級反滲透裝置能徹底除去氯離子,可編輯ppt,15,3、綜合法制備注射用水,自來水,砂濾過器,活性碳過濾器,細(xì)濾過器,電滲析裝置（或反滲透裝置,陽離子 樹脂床,脫氣塔,陰離子 樹脂床,混合樹脂床,蒸餾水機,熱貯水器80C,注射用水,可編輯ppt,16,4.注射用水的收集保存,2009年GMP規(guī)定采用 70保溫循環(huán)。 注射用水的貯藏和輸送系統(tǒng)的清潔：8

7、0以上的注射用水在系統(tǒng)中循環(huán)0.5h以上，并同時開啟各用水點及排放閥門3次以上，每次15s，一周一次。 5.注射用水的檢查,可編輯ppt,17,二、液體的過濾技術(shù),一）過濾是利用過濾介質(zhì)截留液體中混懸的固體顆粒而達到固液分離的操作。 （二）過濾機制與影響因素 過濾機制 介質(zhì)過濾和濾餅過濾 介質(zhì)過濾 過濾作用：依靠截介質(zhì)的攔截作用 過濾方式：表面過濾顆粒被截留在介質(zhì)表面上 深層過濾顆粒被截留在介質(zhì)孔道內(nèi),可編輯ppt,18,濾餅過濾 過濾時，固體粒子聚集在過濾介質(zhì)表面形成濾餅。 濾餅：起攔截作用 過濾介質(zhì)：支撐濾餅的作用 目標(biāo)物： 濾餅層或濾液,可編輯ppt,19,影響過濾的因素 過濾速度：單位

8、時間通過單位面積的濾液量。 V=Pr4t/8 L 影響濾速（vV/t）的因素：P，v；r，v； ，v；L，v 增加濾速的方法：介質(zhì)上方加壓或介質(zhì)下方減壓；升溫；預(yù)濾；使雜質(zhì)顆粒變粗等,可編輯ppt,20,三）過濾器和過濾裝置,根據(jù)所施加的外加力分為 重力過濾器、真空過濾器、壓力過濾器 根據(jù)操作方式分為 間歇和連續(xù)過濾器 根據(jù)過濾介質(zhì)分為 砂濾棒、垂熔玻璃、微孔濾膜、板框過濾器等。 砂濾棒(硅藻土濾棒和多孔素瓷濾棒) 特點：適于低粘度藥液；價廉易得，但易脫砂，對藥液的吸附性強，難清洗，適用于大生產(chǎn)中的脫炭,可編輯ppt,21,垂熔玻璃濾器(垂熔玻璃漏斗、濾器和濾棒) 使用完畢用水抽洗，并以1%-

9、2%硝酸鈉硫酸液浸泡處理。 微孔濾膜過濾器 理化性質(zhì)：熱穩(wěn)定性和化學(xué)性能穩(wěn)定。 膜材質(zhì)：醋酸纖維濾膜、硝酸纖維濾膜、聚酰胺 濾膜、聚四氟乙烯濾膜等 用途：注射劑精濾和除菌過濾 優(yōu)點：孔徑小，截留能力強；孔徑大小均勻，不易泄漏；濾速快；濾膜無介質(zhì)的遷移；無交叉污染。 缺點：易堵塞，有些濾膜化學(xué)性質(zhì)不理想。 規(guī)格：孔徑 0.22 0.45 0.8m 應(yīng)用：一般注射液的過濾：0.650.8m 除菌過濾 0.22m,可編輯ppt,22,其他過濾器如超濾裝置、鈦濾器、多孔聚乙烯燒管過濾器等。 在注射液生產(chǎn)中，一般采用二級過濾： 預(yù)濾(砂濾棒、垂熔玻璃漏斗、板框式壓濾機或預(yù)濾膜)精濾(濾膜,可編輯ppt,

10、23,板框式壓濾機(多用于注射劑預(yù)濾,面積大，截留量多，可用于粘性大、濾餅可壓縮的各種物料的過濾，特別適用于含少量微粒的待濾液，在注射劑生產(chǎn)中多用于預(yù)濾，缺點是裝配和清洗麻煩，容易滴漏,可編輯ppt,24,四）常見的過濾方式,高位靜壓過濾 適用于生產(chǎn)量不大、缺乏加壓或減壓設(shè)備的情況。 壓力穩(wěn)定 濾速慢 減壓過濾 過濾介質(zhì)下部減壓的操作，稱抽濾 加壓過濾 壓力穩(wěn)定、濾速快、質(zhì)量好、產(chǎn)量高，多用于藥廠大量生產(chǎn),可編輯ppt,25,1. 熱原 熱原（pyrogens）：注射后能引起人體特殊致熱反應(yīng)的物質(zhì)，是微生物產(chǎn)生的一種內(nèi)毒素。 產(chǎn)生來源：大多數(shù)細(xì)菌（革蘭氏陰性桿菌致熱能力最強）、霉菌、病毒。 組

11、成：熱原=內(nèi)毒素（endotoxin）=脂多糖(lipopolysaccharide) 、磷脂、蛋白質(zhì) 致熱反應(yīng)：產(chǎn)生發(fā)冷、寒戰(zhàn)、體溫升高、惡心嘔吐等不良反應(yīng)，有時體溫可升至40，嚴(yán)重者出現(xiàn)昏迷、虛脫，甚至有生命危險,三、熱原的去除技術(shù),可編輯ppt,26,2. 熱原的性質(zhì),1) 耐熱性 601h無影響，100不降解，18034h、20060min、25030-45min或6501min可使熱原徹底破壞。在通常注射劑的熱壓滅菌中不易被破壞。 (2) 濾過性 體積15nm之間，一般濾器均不可通過，但活性炭可以吸附熱原。 (3) 吸附性 多孔性活性炭可吸附熱原 (4)水溶性 磷脂結(jié)構(gòu)上連接有多糖，

12、熱原可溶。 (5)不揮發(fā)性 熱原本身不揮發(fā)，但在蒸餾時，可隨水蒸汽霧滴帶入蒸餾水。 （6）其它 能被強酸強堿、強氧化劑、某些表面活性劑、超聲波破壞,可編輯ppt,27,3.熱原的主要污染途徑,1)注射用水：是熱原污染的主要來源(蒸餾器結(jié)構(gòu)不合理，操作不當(dāng)，注射用水貯藏時間過長都會污染熱原。)； (2)原輔料,如葡萄糖因貯存年久包裝損壞致污染熱原。 (3)由于室內(nèi)衛(wèi)生條件差，操作時間長，裝置不密閉，均增加污染細(xì)菌的機會，而可能產(chǎn)生熱原； (4)從容器、用具、管道和裝置等帶入，因此在生產(chǎn)中對這些容器用具等物要認(rèn)真處理，合格后方能使用。 (5)有時輸液本身不含熱原，但仍發(fā)現(xiàn)熱原反應(yīng)。這往往是由于輸液

13、器具(如輸液吊瓶、膠皮管等)污染所致,可編輯ppt,28,4. 熱原的去除方法,1.高溫法：根據(jù)熱原的熱不穩(wěn)定性。對于注射用的針筒或其他玻璃器皿，在洗滌干燥后，于250加熱30分鐘以上，可以破壞熱原 2.酸堿法：玻璃容器、用具還可用重鉻酸鉀硫酸清潔液或稀氫氧化鈉處理，可將熱原破壞 3.吸附法：常用的吸附劑有活性炭，活性炭對熱原有較強的吸附作用，同時有助濾脫色作用，故在注射劑中使用較廣。常用量0.1%0.5%;還可用活性炭與白陶土合用除去熱原 4.蒸餾法 利用熱原的不揮發(fā)性,可編輯ppt,29,5.離子交換法：可靠性不強。國內(nèi)有用#301弱堿性陰離子交換樹脂10%與#122弱酸性陽離子交換樹脂8

14、%成功地除去丙種胎盤球蛋白注射液中的熱原. 6.凝膠過濾法：國內(nèi)有用二乙氨基乙基葡聚糖凝膠(分子篩)制備無熱原去離子水 7.反滲透法：通過三醋酸纖維膜除去熱原. 我國該技術(shù)還不成熟，只能用于原水處理。 8.超濾法；3.015nm超濾膜。 9.其他方法如二次以上濕熱滅菌，或適當(dāng)提高滅菌溫度和時間，以及微波等,可編輯ppt,30,四、滲透壓調(diào)節(jié)技術(shù),1.等滲與等張的概念 (1)等滲溶液(isoosmotic solution)：系指與血漿滲透壓相等的溶液，屬于物理化學(xué)概念。 注入機體內(nèi)的液體一般要求等滲，否則易產(chǎn)生刺激性或溶血等。 低滲溶液紅細(xì)胞破裂，溶血現(xiàn)象 高滲溶液紅細(xì)胞萎縮 肌內(nèi)注射可耐受0

15、.53個等滲度的溶液，靜脈輸液要求等滲，脊髓腔內(nèi)注射必須調(diào)節(jié)至等滲,可編輯ppt,31,2)等張溶液(isotonic solution)：系指滲透壓與紅細(xì)胞膜張力相等的溶液，屬于生物學(xué)概念。 在等張溶液中既不會發(fā)生紅細(xì)胞體積改變，更不會發(fā)生溶血。 等滲溶液不一定等張，等張溶液不一定等滲。 在新產(chǎn)品的試制中，即使所配的溶液為等滲溶液，為了安全用藥，亦應(yīng)進行溶血試驗，必要時加入氯化鈉、葡萄糖等調(diào)節(jié)成等張溶液,可編輯ppt,32,2.滲透壓的調(diào)節(jié)方法,常用的滲透壓調(diào)節(jié)方法：冰點降低數(shù)據(jù)法和氯化鈉等滲當(dāng)量法。 (1)冰點降低數(shù)據(jù)法 一般情況下，血漿冰點值為-0.52，根據(jù)物理化學(xué)原理，任何溶液的冰點

16、降到-0.52，即與血漿等滲。 W=(0.52-a)/b 式中，W為配制等滲溶液需加入等滲調(diào)節(jié)劑的百分含量； a為藥物溶液的冰點下降度數(shù)； b為用以調(diào)節(jié)的等滲劑1%溶液的冰點下降度數(shù),可編輯ppt,33,例1 配制2%的鹽酸普魯卡因溶液100ml，用氯化鈉調(diào)節(jié)等滲，求所需氯化鈉的加入量。 查表可知，2%的鹽酸普魯卡因溶液的冰點下降度數(shù)a=0.122=0.24；1%氯化鈉溶液的冰點下降度數(shù)b=0.58，代入上式得： W=(0.52-0.24)/0.58=0.48% 即配制2%的鹽酸普魯卡因溶液100ml，需加入氯化鈉0.48g調(diào)節(jié)等滲,可編輯ppt,34,例3 下列處方欲制成等滲溶液需加多少Na

17、Cl? 氯霉素 20g NaCl 適量 注射用水 加至1000ml (已知：1%（g/ml）氯霉素水溶液的冰點下降值為0.06,可編輯ppt,35,例4 配制2鹽酸普魯卡因溶液500ml,用氯化鈉調(diào)節(jié)等滲，求所需氯化鈉的加入量。 （已知1普魯卡因溶液的冰點下降度為0.12,可編輯ppt,36,例5 配制含2鹽酸普魯卡因和1利多卡因溶液500ml,用氯化鈉調(diào)節(jié)等滲，求所需氯化鈉的加入量。 （已知1普魯卡因溶液的冰點下降度為0.12 ， 1利多卡因溶液的冰點下降度為0.15,可編輯ppt,37,2)氯化鈉等滲當(dāng)量法 系指與1g藥物呈等滲的氯化鈉質(zhì)量。 例 配制2%的鹽酸麻黃堿溶液200ml，欲使其

18、等滲，求需加入的氯化鈉或葡萄糖的量。 查表可知，1g鹽酸麻黃堿的氯化鈉等滲當(dāng)量0.28；無水葡萄糖的氯化鈉等滲當(dāng)量0.18，則： 氯化鈉的量=（0.9-0.282）200/100=0.68g 葡萄糖的量=0.68/0.18=3.78g, 或=(5%/0.9%)0.68=3.78g 即配制2%的的鹽酸麻黃堿溶液200ml，需加入氯化鈉0.68g或無水葡萄糖3.78g調(diào)節(jié)等滲,可編輯ppt,38,例1 已知1普魯卡因溶液的氯化鈉等滲當(dāng)量為0.18，配制2普魯卡因溶液500ml,需加入多少克氯化鈉？ （1g鹽酸普魯卡因= 0.18 g NaCl，0.9%NaCl = 血漿滲透壓） w =( 0.9

19、2*0.18)*500/100 = (0.9 0.36)*5,可編輯ppt,39,基本概念： 滅菌與無菌制劑：主要是指直接注入體內(nèi)或直接接觸創(chuàng)傷面、粘膜等的一類制劑。 滅菌(sterilization)：應(yīng)用物理或化學(xué)等方法殺滅或除去所有致病和非致病微生物繁殖體和芽孢的手段。 無菌(sterility)：指在任一指定的物體、介質(zhì)或環(huán)境中，不得存在任何活的微生物,五、滅菌與無菌技術(shù),可編輯ppt,40,無菌操作法(aseptic technique)：指在整個操作過程中利用或控制一定的條件，使產(chǎn)品避免被微生物污染的一種操作方法或技術(shù)。 防腐(antisepsis)：用物理或化學(xué)方法抑制微生物的生

20、長與繁殖的手段，亦稱抑菌。對微生物的生長與繁殖具有抑制作用的物質(zhì)稱防腐劑或抑菌劑。 消毒(disinfection)：用物理或化學(xué)方法殺滅或除去病原微生物的手段。對病原微生物具有殺滅或除去作用的物質(zhì)消毒劑,可編輯ppt,41,熱力滅菌法 包括干熱和濕熱滅菌法。 1）、干熱滅菌法（熟悉） 火焰滅菌法：指用火焰直接灼燒滅菌的方法。 適用范圍：此法滅菌迅速、可靠、簡便，適用于耐火焰材質(zhì)(如金屬、玻璃及瓷器等)的物品與用具，不適合于藥物的滅菌,一）物理滅菌法,可編輯ppt,42,干熱空氣滅菌法：指用高溫干熱空氣滅菌的方法。 (1)干熱滅菌條件：一般規(guī)定為160-170，2-4h；170-180，1h以

21、上或250滅菌45min（從滅菌物品全達到特定溫度后開始計時）。 (2)適用范圍：耐高溫的玻璃和金屬制品以及不允許濕氣穿透的油脂類(如油性軟膏基質(zhì)、注射用油等)和耐高溫的粉末化學(xué)藥品等的滅菌。 (3)缺點：在干燥狀態(tài)下，熱穿透力弱，溫度不易均勻，由于滅菌溫度過高，不適用橡膠、塑料及大部分藥品,可編輯ppt,43,2）、濕熱滅菌法,定義：指用在高溫高濕環(huán)境中滅菌的方法。如，利用飽和蒸汽、沸水或流通蒸汽進行滅菌的方法。 優(yōu)點：由于蒸氣比熱大，穿透力強，容易使蛋白變性，同時還有滅菌效率高，操作簡便等優(yōu)點，濕熱滅菌法是應(yīng)用最廣泛的一種滅菌方法。 類別：包括熱壓滅菌法、流通蒸氣滅菌法、煮沸滅菌法和低溫間

22、歇滅菌等方法，根據(jù)藥品性質(zhì)進行選用合適的方法,可編輯ppt,44,1）熱壓滅菌法（掌握） 定義：指用高壓飽和水蒸汽加熱殺滅微生物的方法。本法一般公認(rèn)為最可靠的濕熱滅菌法。 滅菌條件：熱壓滅菌所需的溫度及與溫度相當(dāng)?shù)膲毫皶r間如下: 1) 116，1.7atm(67kPa，7.1kg/cm2)，40min； 2) 121，2.0atm(97kPa，11kg/cm2)，30min； 3) 126，2.4atm(139kPa，14.1kg/cm2)，15min。 適用范圍：耐高溫和耐高壓蒸氣的所有藥物制劑、玻璃和金屬容器、瓷器、橡皮塞、濾膜過濾器等,可編輯ppt,45,2）流通蒸氣滅菌法 定義：指在

23、常壓下，采用100流通蒸氣加熱殺滅微生物的方法。 滅菌條件：常壓下（1.0 atm）， 100流通蒸氣，時間30-60min。 適用范圍：用于消毒及不耐高熱制劑的滅菌。 缺點：不能保證殺滅所有的芽孢，如破傷風(fēng)等厭氣性菌的芽孢，是非可靠的滅菌法。一般作為不耐熱無菌產(chǎn)品的輔助滅菌手段。 制備過程中要盡可能避免污染，這點必須充分注意。目前我國藥廠生產(chǎn)注射劑，特別是1-2ml注射劑及不耐高熱的品種，可考慮采用這種滅菌法,可編輯ppt,46,3）煮沸滅菌法 定義：指將待滅菌物置沸水中加熱滅菌的方法。 滅菌條件：沸水，時間30-60min。 適用范圍：常用于安瓿、注射器、注射針頭等器皿的消毒。 缺點：此法

24、滅菌效果差，必要時加入抑菌劑，如三氯叔丁醇、甲酚等,可編輯ppt,47,4）低溫間歇滅菌法 定義：指將待滅菌物置60-80的水或流通蒸汽中加熱60min，殺滅微生物繁殖體后，在室溫條件下放置24h，讓待滅菌物中的芽孢發(fā)育成繁殖體，再次加熱滅菌、放置，反復(fù)多次，直至殺滅所有芽孢。 適用范圍：適合于不耐高溫、熱敏感物料和制劑。 缺點：費時、工效低、滅菌效果低。加適量抑菌劑，以增加滅菌效力。 應(yīng)用本法滅菌的制劑或藥品，除本身具有抑菌能力者外，須加適量抑菌劑，以增加滅菌效力,可編輯ppt,48,5）影響濕熱滅菌的因素 1)微生物的種類和數(shù)量： 芽孢繁殖體衰老體 每個容器的細(xì)菌數(shù)，控制在10個以內(nèi)為宜；

25、最初菌數(shù)愈少，達到滅菌時間愈短。 整個生產(chǎn)過程應(yīng)盡可能避免微生物污染，盡可能縮短生產(chǎn)過程，并力求在灌封后立即菌。 2)蒸氣性質(zhì)： 蒸氣有飽和、濕飽和、過熱三種,可編輯ppt,49,3)滅菌時間與溫度： 滅菌溫度增高，化學(xué)反應(yīng)速度增加；滅菌時間愈長，起反應(yīng)的藥物愈多。因此，滅菌需要考慮殺死細(xì)菌和保證藥物有效性兩個方面。在能達到滅菌的前提下，盡可能降低滅菌溫度和縮短滅菌時間。 4)介質(zhì)pH： 藥液pH對細(xì)菌的活性也有影響：一般微生物在中性液中耐熱性最大，在堿性溶液中次之，酸性不利于微生物的發(fā)育。所以，一般在生物堿鹽類的注射液，因pH 較低，用流通蒸氣滅菌即可,可編輯ppt,50,定義：指采用過濾法

26、除去微生物的方法。即藥物溶液通過無菌的除菌過濾器，除去活的或死的微生物而得到不含微生物的濾液。屬于機械除菌方法。 濾膜的材質(zhì)分親水性和疏水性兩種，根據(jù)過濾物品的性質(zhì)及過濾目的來選材質(zhì)。 適用范圍：適于對熱不穩(wěn)定的藥物溶液、氣體、水等物品的滅菌,2、過濾除菌,可編輯ppt,51,定義：采用輻射、微波和紫外線殺滅微生物和芽孢的方法。 （1）紫外線滅菌法 定義：采用紫外線（能量）照射殺滅微生物和芽孢的方法。屬于表面滅菌。 滅菌條件：一般用于滅菌的紫外線波長是200-300nm，滅菌力最強的是波長為254nm的紫外線。 適用范圍：紫外線進行直線傳播，其強度與距離平方成比例地減弱，并可被不同的表面反射。

27、適合于照射物表面滅菌、無菌室空氣及蒸餾水的滅菌；不適合于藥液的滅菌及固體物料深部的滅菌,3、射線滅菌法,可編輯ppt,52,普通玻璃可吸收紫外線，因此安瓿中藥物不能用此法滅菌。 紫外線對人體如照射過久，能產(chǎn)生結(jié)合膜炎及皮膚燒灼等現(xiàn)象。一般均在操作前開啟紫外線燈約半小時至一小時，然后進行操作,可編輯ppt,53,2）微波滅菌法 定義：系采用微波(頻率為300MHz-300kMHz)照射產(chǎn)生的熱能殺滅微生物和芽孢的方法。 適用范圍：適合于液體和固體物料，對固體物料具有干燥作用。 特點：微波能穿透到介質(zhì)和物料的深部，表里加熱一致，且具有低溫、常壓、高效、快速(2-3min)、低能耗、無污染、易操作、

28、易維護，產(chǎn)品保質(zhì)期長(可延長1/3以上)等,可編輯ppt,54,3）輻射滅菌法 定義：系采用放射性同位素 (60Co和137Cs)放射的射線殺滅微生物和芽孢的方法。 適用范圍：適合于熱敏物料和制劑，常用于維生素、抗生素、激素、生物制品、中藥材和中藥制劑、醫(yī)療器械、藥用包裝材料及藥用高分子材料等物質(zhì)的滅菌。 特點：不升高產(chǎn)品溫度，穿透力強，滅菌效率高，但設(shè)備貴，有潛在危險性， 對某些藥物(特別是溶液型) 可能產(chǎn)生藥效降低或產(chǎn)生毒性物質(zhì)和發(fā)熱物質(zhì)等,可編輯ppt,55,定義：是指用化學(xué)藥品直接作用于微生物而將其殺滅的方法，同時不應(yīng)損害制品的質(zhì)量。 殺菌劑：對微生物具有觸殺作用的化學(xué)藥品。分為氣體殺

29、菌劑和液體殺菌劑。不能殺死芽孢，僅對繁殖體有效。 影響殺菌效果的因素：微生物的種類與數(shù)量、物體表面狀況、殺菌劑的性質(zhì)。 化學(xué)殺菌的目的：減少微生物的數(shù)目以控制一定的無菌狀態(tài)。 常用的方法：（1）氣體滅菌法和（2）藥液滅菌法,二）化學(xué)滅菌法,可編輯ppt,56,1)氣體滅菌法 定義：指采用氣態(tài)殺菌劑進行滅菌的方法。 適用范圍：適合環(huán)境消毒以及不耐加熱滅菌的醫(yī)用器具、設(shè)備和設(shè)施等的消毒，粉末注射劑。應(yīng)注意殺菌劑的殘留量和與藥物的相互作用。 品種：環(huán)氧乙烷、甲醛、過氧乙酸等,可編輯ppt,57,1) 環(huán)氧乙烷 性質(zhì)：沸點10.9，室溫下為氣體，水中溶解度為1ml水中可溶195ml(20，760mmH

30、g)，易穿透塑料，紙板及固體粉末。暴露于空氣中，環(huán)氧乙烷就可從這些物質(zhì)消散，對大多數(shù)固體呈惰性。 殺菌作用：由于其為烷化劑的性質(zhì)，使菌體蛋白的-COOH、-NH2、-SH、-OH的H，被-CH2-CH2-OH所取代，從而變性失活,可編輯ppt,58,適用范圍：可用于塑料容器、對熱敏感的固體藥物、紙或塑料包裝的藥物、橡膠制品、注射筒、注射針頭、衣著敷料及器械等的滅菌。但是，一些塑料、皮革及橡膠與環(huán)氧乙烷有強親和力，故需長達12-24h通空氣驅(qū)除。 環(huán)氧乙烷具可燃可爆，用時需用惰性氣體二氧化碳或氟利昂稀釋。 環(huán)氧乙烷的吸入毒性較大，與氨相近，但無氨樣的剌激嗅味，損害皮膚及眼粘膜，可產(chǎn)生水泡或結(jié)膜炎

31、，故應(yīng)用時要注意,可編輯ppt,59,2)甲醛 加熱熏蒸甲醛溶液，每立方米空間用40甲醛溶液30 m1，室內(nèi)相對濕度宜高，以增進甲醛氣體滅菌效果。 3)丙二醇 丙二醇用于室內(nèi)空氣滅菌具有不揮發(fā)性和無引火性等特點，滅菌用量為1ml/m3。 4)乳酸 滅菌用量為2ml/m3，殺菌力不及甲醛，但對人無害。 5)過氧乙酸 過氧乙酸用于車間滅菌，效力比相同濃度的甲醛大兩倍半，對粘膜，眼部無剌激性，對木制品、金屬制品、醫(yī)療器械均無影響,可編輯ppt,60,2)藥液滅菌法 定義：指采用殺菌劑溶液進行滅菌的方法。 適用范圍：常應(yīng)用于其他滅菌法的輔助措施，適合于皮膚、無菌器具和設(shè)備的消毒。 常用品種：0.1-0

32、.2新潔爾滅溶液、75乙醇、1聚維酮碘溶液、酚或煤酚皂溶液等。 使用注意：由于化學(xué)殺菌劑常施用于物體表面，也要注意其濃度不要過高，以防其化學(xué)腐蝕作用,可編輯ppt,61,定義：指整個過程控制在無菌條件下進行的一種操作方法，該方法在技術(shù)上并非滅菌操作。 適用范圍：適用于一些不耐熱藥物的注射劑、眼用制劑、皮試液、海綿劑和創(chuàng)傷制劑的制備。 避箘操作：盡量避免微生物污染,三）無菌操作法,可編輯ppt,62,1)無菌操作室的滅菌,無菌操作室的滅菌采用 滅菌和除菌相結(jié)合的方式 流動空氣：采用過濾介質(zhì)除菌法 靜止環(huán)境空氣：采用氣體和液體滅菌法、紫外線空氣滅菌法。 甲醛溶液加熱熏蒸法 氣體滅菌法之一 紫外線滅

33、菌法 用于間歇和連續(xù)操作過程。 液體滅菌法 輔助滅菌方法 臭氧滅菌法 GMP驗證指南推薦的方法。特點：1.不增加消毒設(shè)備；2.可使臭氧迅速擴散到每個角落；3.殺滅空氣凈化系統(tǒng)滋生的霉菌；4.滅菌時間短、操作簡便、效果好,可編輯ppt,63,2)無菌操作,無菌操作場所：無菌操作室層流潔凈工作臺無菌操作柜 無菌操作室要求達到100級空氣凈化的條件。 無菌操作所用的一切用具、材料以及環(huán)境均需按前述滅菌法滅菌。 操作人員進入操作之前要洗澡并換上已經(jīng)滅菌的工作服和清潔的鞋子，不使頭發(fā)等露出來，以免造成污染機會,可編輯ppt,64,3)無菌檢查,藥劑或藥品經(jīng)滅菌或無菌操作法處理后，需經(jīng)無菌檢驗證實已無微生

34、物生存，方能使用。 滅菌效果，應(yīng)以殺死芽孢為標(biāo)準(zhǔn)(細(xì)菌的芽孢具有較強的抗熱力，不易殺死)。 法定的無菌檢查法：包括試管接種法和薄膜過濾法,可編輯ppt,65,滅菌效力？ 主要原因： 滅菌溫度多是測量滅菌器內(nèi)的溫度，不是滅菌物體內(nèi)的溫度； 無菌檢驗方法也在局限性，難以用現(xiàn)行的無菌檢驗法檢出微量的微生物,四）滅菌效力的檢查方法和F0值,可編輯ppt,66,1、D值 （單位： 時間） D值：在一定溫度下殺死被滅菌物品中90微生物所需的滅菌時間；也可定義為降低微生物一個十位數(shù)或一個對數(shù)值（如log100降低到log10）所需的時間。 殺滅微生物速度-時間過程符合一級動力學(xué)過程： dN/dt=-kt，即

35、lgNt=lgN0-kt/2.303 令 D=2.303/kt/（lgN0-lgNt） 當(dāng)lgN0-lgNtlg100-lg101時，D=t/(lg100-lg10) D值因待滅微生物的種類、藥液的配方及性質(zhì)、用作生物指示劑的微生物種類；微生物所接觸的表面的性質(zhì)、滅菌工序（如溫度）等不同而各異,可編輯ppt,67,2、Z值 （單位 溫度） Z值：為D值降低一個對數(shù)值所需升高的溫度數(shù)，即滅菌時間減少到原來的1/10時所需升高的溫度或在相同滅菌時間內(nèi)，殺滅90%的微生物所需要提高的溫度。 滅菌溫度升高，速度常數(shù)k值增大，D值減少。 Z=(T2-T1)/(lgD2-lgD1)即D2/D1=10(T2-T1)/Z 當(dāng)lgD2-lgD11時，即 ZT2-T1 在不同溫度下對特定的微生物在特定介質(zhì)或環(huán)境中求得D值后，再計算Z值。Z值通常在濕熱滅菌時取10，在干熱滅菌時取20,可編輯ppt,68