商品化食品檢測(cè)試劑盒評(píng)價(jià)試點(diǎn)工作匯報(bào)

1、,商品化食品檢測(cè)試劑盒評(píng)價(jià)試點(diǎn)工作匯報(bào),福建出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心 2011年3月 山西,2021/4/13,3,匯報(bào)內(nèi)容,試點(diǎn)評(píng)價(jià)工作的背景 試點(diǎn)評(píng)價(jià)工作介紹 試點(diǎn)評(píng)價(jià)工作規(guī)則 評(píng)價(jià)實(shí)例 鏈霉素elisa試劑盒 菌落總數(shù)試紙片 沙門(mén)氏菌試紙條,2021/4/13,4,試點(diǎn)工作的背景,試劑盒現(xiàn)狀： 在包括檢驗(yàn)檢疫系統(tǒng)在內(nèi)的各行業(yè)廣泛使用，研發(fā)與市場(chǎng)呈快速上升趨勢(shì)，多項(xiàng)相關(guān)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)及行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法已發(fā)布。 面臨問(wèn)題： 缺乏規(guī)范的評(píng)價(jià)制度和市場(chǎng)準(zhǔn)入門(mén)檻，冒牌產(chǎn)品、無(wú)證產(chǎn)品和無(wú)說(shuō)明書(shū)產(chǎn)品屢見(jiàn)不鮮，不同廠家生產(chǎn)的針對(duì)同一目標(biāo)物的產(chǎn)品所得到的結(jié)果差異甚大，質(zhì)量得不到保證，從源頭上存在檢測(cè)結(jié)果不

2、準(zhǔn)確的隱患 。,2021/4/13,5,試點(diǎn)工作的背景,基于目前試劑盒產(chǎn)品的現(xiàn)狀，需要對(duì)試劑盒進(jìn)行規(guī)范管理，以保證用于檢測(cè)的試劑盒性能指標(biāo)滿(mǎn)足相關(guān)要求。 由福建局牽頭，國(guó)家認(rèn)監(jiān)委、湖南局和廣東局共同完成的國(guó)家質(zhì)檢總局科研項(xiàng)目商品化食品檢測(cè)試劑盒評(píng)價(jià)制度的研究于2011年1月通過(guò)鑒定。 項(xiàng)目針對(duì)試劑盒評(píng)價(jià)進(jìn)行了研究，提出評(píng)價(jià)方法與評(píng)價(jià)試點(diǎn)規(guī)則。,2021/4/13,6,試點(diǎn)工作的范圍,在項(xiàng)目完成的基礎(chǔ)上，國(guó)家認(rèn)監(jiān)委科標(biāo)部決定組織開(kāi)展檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中商品化檢測(cè)試劑盒試點(diǎn)評(píng)價(jià)工作； 2011年的試點(diǎn)工作范圍包括： 與食品理化和食品微生物檢測(cè)相關(guān)試劑盒； 截至2010年年底已經(jīng)發(fā)布和已列入計(jì)劃尚未審

3、定且含有試劑盒內(nèi)容的食品專(zhuān)業(yè)檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)； 新立項(xiàng)的尚未送審的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)計(jì)劃項(xiàng)目。,2021/4/13,7,試點(diǎn)工作的組織機(jī)構(gòu),組織機(jī)構(gòu)示意圖,國(guó)家認(rèn)監(jiān)委科標(biāo)部,專(zhuān)家委員會(huì),秘書(shū)處,技術(shù)小組,統(tǒng)計(jì)小組,驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室,2021/4/13,8,試點(diǎn)工作的組織機(jī)構(gòu),主管部門(mén)：國(guó)家認(rèn)監(jiān)委科標(biāo)部 專(zhuān)家委員會(huì)： 組織制定評(píng)價(jià)規(guī)則和評(píng)價(jià)技術(shù)要求并提交主管部門(mén)發(fā)布； 組織制定評(píng)價(jià)機(jī)構(gòu)要求并承擔(dān)評(píng)價(jià)機(jī)構(gòu)技術(shù)能力的審核，同時(shí)提出推薦意見(jiàn)并提交主管部門(mén)； 對(duì)試劑盒評(píng)價(jià)材料進(jìn)行終審，提出最終評(píng)價(jià)意見(jiàn)并提交主管部門(mén)。 秘書(shū)處： 負(fù)責(zé)根據(jù)評(píng)價(jià)規(guī)則要求組織試劑盒評(píng)價(jià)申請(qǐng)受理、安排評(píng)價(jià)機(jī)構(gòu)及相關(guān)工作； 負(fù)責(zé)試劑盒評(píng)價(jià)材料的初

4、審并提交專(zhuān)家委員會(huì)終審； 承辦主管部門(mén)和專(zhuān)家委員會(huì)交辦的其他工作。,2021/4/13,9,試點(diǎn)工作評(píng)價(jià)的依據(jù),商品化食品檢測(cè)試劑盒（簡(jiǎn)稱(chēng)試劑盒）評(píng)價(jià)規(guī)則 規(guī)定了基于實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證的試劑盒評(píng)價(jià)程序； 包括試劑盒申請(qǐng)、審核、實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證、暫停、恢復(fù)、撤銷(xiāo)和注銷(xiāo)評(píng)價(jià)程序； 是試劑盒評(píng)價(jià)活動(dòng)相關(guān)方應(yīng)遵循的程序規(guī)則。 sn/t 2775-2011商品化食品檢測(cè)試劑盒評(píng)價(jià)方法 規(guī)定了商品化食品檢測(cè)試劑盒定義與通用要求； 規(guī)定了定性與定量檢測(cè)試劑盒的技術(shù)指標(biāo)要求； 規(guī)定了對(duì)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室的要求。,2021/4/13,10,試點(diǎn)評(píng)價(jià)工作規(guī)則,對(duì)試劑盒的評(píng)價(jià)步驟包括： （1）申請(qǐng)者準(zhǔn)備相關(guān)數(shù)據(jù)資料； （2）提交評(píng)申請(qǐng)書(shū)

5、； （3）秘書(shū)處組織技術(shù)小組制定評(píng)價(jià)方案并報(bào)專(zhuān)家委員會(huì)審定； （4）確定驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室并進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證； （5）秘書(shū)處匯總驗(yàn)證結(jié)果，組織統(tǒng)計(jì)小組進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析； （7）審核驗(yàn)證結(jié)果； （8）專(zhuān)家委員會(huì)做出最終結(jié)論； （9）上報(bào)國(guó)家認(rèn)監(jiān)委科標(biāo)部確認(rèn)。,2021/4/13,11,試點(diǎn)評(píng)價(jià)工作規(guī)則,評(píng)價(jià)資料提交： 試劑盒生產(chǎn)企業(yè)按照評(píng)價(jià)規(guī)則和sn/t 2775-2011的要求，向秘書(shū)處提交書(shū)面申請(qǐng)與申請(qǐng)資料。,2021/4/13,12,試點(diǎn)評(píng)價(jià)工作規(guī)則,文件審核及評(píng)價(jià)方案設(shè)計(jì)： 秘書(shū)處負(fù)責(zé)對(duì)申請(qǐng)資料進(jìn)行全面技術(shù)審核，對(duì)于審核通過(guò)的產(chǎn)品，秘書(shū)處應(yīng)組建技術(shù)小組和統(tǒng)計(jì)小組，針對(duì)申請(qǐng)?jiān)u價(jià)的試劑盒組織制定評(píng)價(jià)方案，

6、評(píng)價(jià)方案須經(jīng)專(zhuān)家委員會(huì)審核通過(guò)后方可執(zhí)行。,2021/4/13,13,試點(diǎn)評(píng)價(jià)工作規(guī)則,實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證： 承擔(dān)驗(yàn)證工作的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按照具體評(píng)價(jià)方案要求 ，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)證工作，并將驗(yàn)證數(shù)據(jù)匯總交秘書(shū)處。,2021/4/13,14,試點(diǎn)評(píng)價(jià)工作規(guī)則,數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與結(jié)果反饋： 在收集完成所有驗(yàn)證數(shù)據(jù)后,秘書(shū)處負(fù)責(zé)組織統(tǒng)計(jì)小組完成結(jié)果統(tǒng)計(jì)，做出初步結(jié)論； 若初步結(jié)論為否定，秘書(shū)處應(yīng)及時(shí)與申請(qǐng)人聯(lián)系，以及申請(qǐng)人可提供申訴材料； 若需補(bǔ)充數(shù)據(jù)或有其它修改評(píng)價(jià)方案的需要，應(yīng)及時(shí)與申請(qǐng)人和驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室聯(lián)系。,2021/4/13,15,試點(diǎn)評(píng)價(jià)工作規(guī)則,評(píng)價(jià)結(jié)論的發(fā)布： 秘書(shū)處將所有驗(yàn)證數(shù)據(jù)、初步結(jié)論及申訴材料

7、（必要時(shí)）提交專(zhuān)家委員會(huì)進(jìn)行終審，終審后上報(bào)國(guó)家認(rèn)監(jiān)委，由國(guó)家認(rèn)監(jiān)委發(fā)布試點(diǎn)評(píng)價(jià)結(jié)論。,2021/4/13,16,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,鏈霉素酶聯(lián)免疫試劑盒驗(yàn)證項(xiàng)目 線(xiàn)性 選擇性（交叉反應(yīng)率） 基體驗(yàn)證 基體適用性 準(zhǔn)確度/回收率 重現(xiàn)性 檢測(cè)限和定量限 穩(wěn)健性（耐變性） 產(chǎn)品批間變異,2021/4/13,17,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,線(xiàn)性,2021/4/13,18,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,2021/4/13,19,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,選擇性（交叉反應(yīng)率）,2021/4/13,20,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,選擇性（交叉反應(yīng)率）,2021/4/13,21,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施

8、,選擇性（交叉反應(yīng)率）,2021/4/13,22,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,選擇性（交叉反應(yīng)率）,2021/4/13,23,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,基體驗(yàn)證： 基體適用性： 基體適用性 準(zhǔn)確度/回收率 重現(xiàn)性 檢測(cè)限和定量限,2021/4/13,24,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,基體適用性 對(duì)牛奶、雞蛋、蜂蜜、蜂王漿、組織、脂肪進(jìn)行了驗(yàn)證。,2021/4/13,25,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,基體驗(yàn)證： 準(zhǔn)確度/回收率 重現(xiàn)性 檢測(cè)限和定量限,2021/4/13,26,四、驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,2021/4/13,27,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,2021/4/13,28,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)

9、施,穩(wěn)健性（耐變性）：,2021/4/13,29,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,穩(wěn)健性（耐變性）： 計(jì)算各個(gè)因素的影響。各因素的影響結(jié)果如下： 1/4（s+t+u+v）-1/4(w+x+y+z)=a-a=d1=0.059 1/4（s+t+w+x）-1/4(u+v+y+z)=b-b=d2=-0.304 1/4（s+u+w+y）-1/4(t+v+x+z)=c-c=d3=-0.231 1/4（s+t+y+z）-1/4(u+v+w+x)=d-d=d4=1.49 1/4（s+u+x+z）-1/4(t+v+w+y)=e-e=d5=-2.91 通過(guò)將差值di與該分析方法在相同條件下重復(fù)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)偏差相比較，可判

10、斷因素的影響是否顯著。 根據(jù)驗(yàn)證結(jié)果可知，相同條件下重復(fù)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.77，而第5個(gè)因素即底物作用時(shí)間所得到的差值大于2倍的標(biāo)準(zhǔn)偏差，表明底物作用時(shí)間對(duì)結(jié)果有顯著影響，應(yīng)小心進(jìn)行控制。 洗板次數(shù)的差值近于相同條件下重復(fù)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)偏差，也應(yīng)引起注意。,2021/4/13,30,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,驗(yàn)證結(jié)論： 利用試劑盒自帶的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行的線(xiàn)性驗(yàn)證中檢測(cè)結(jié)果良好，相關(guān)系數(shù)高，三日不同試驗(yàn)中，差值變化??； 在藥物選擇性實(shí)驗(yàn)室，與雙氫鏈霉素的交叉反應(yīng)率較低，與其他藥物的交叉反應(yīng)率符合說(shuō)明書(shū)標(biāo)示； 不同基體對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響較大，牛奶和雞蛋的檢測(cè)限基本符合說(shuō)明書(shū)標(biāo)示，但其它基體的檢測(cè)限與說(shuō)明書(shū)標(biāo)

11、示有一定差距。 不同檢測(cè)條件對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響較大，特別是目標(biāo)物含量在檢測(cè)限附近時(shí)。 底物作用時(shí)間對(duì)檢測(cè)結(jié)果有顯著性影響，應(yīng)在檢測(cè)時(shí)小心控制。另外，洗板時(shí)間也應(yīng)引起特別關(guān)注。,2021/4/13,31,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,3m菌落總數(shù)試紙片 基體驗(yàn)證 準(zhǔn)確度和精密度 結(jié)果比較 穩(wěn)健性（耐變性） 批間變異,2021/4/13,32,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,基體驗(yàn)證 生豬肉、午餐肉、生雞肉、牛肉干、雞蛋 、嬰兒配方奶粉、冰激淩、奶油巧克力、巴氏消毒液態(tài)奶、通心粉,2021/4/13,33,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,準(zhǔn)確度和精密度（參比方法：gb 4789.2）,2021/4/13,34,例：驗(yàn)

12、證程序的制定與實(shí)施,準(zhǔn)確度和精密度（參比方法：gb 4789.2）,2021/4/13,35,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,準(zhǔn)確度和精密度（參比方法：gb 4789.2）,2021/4/13,36,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,準(zhǔn)確度和精密度（參比方法：gb 4789.2）,2021/4/13,37,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,準(zhǔn)確度和精密度（參比方法：gb 4789.2）,2021/4/13,38,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,準(zhǔn)確度和精密度（參比方法：gb 4789.2）,2021/4/13,39,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,與參比方法（gb 4789.2）的比較,2021/4/13,40,例：驗(yàn)證程序的

13、制定與實(shí)施,與參比方法（gb 4789.2）的比較,2021/4/13,41,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,與參比方法（gb 4789.2）的比較 采用t檢驗(yàn)方法對(duì)采用基準(zhǔn)方法（gb 4789）與紙片法進(jìn)行比較，每種樣品、每個(gè)水平重復(fù)測(cè)定5次（n=5），自由度f(wàn)=4。 在95%置信水平上t0.05(8)2.306，除生雞肉的低、高水平以及牛肉干的高水平驗(yàn)證所得t值大于t0.05(8)2.306，其余均小，證明無(wú)顯著性差異。,2021/4/13,42,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,穩(wěn)健性（耐變性）,2021/4/13,43,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,穩(wěn)健性（耐變性） 計(jì)算各個(gè)因素的影響。各因素的影響結(jié)果

14、如下： 1/4（s+t+u+v）-1/4(w+x+y+z)=a-a=d1=2.25 1/4（s+t+w+x）-1/4(u+v+y+z)=b-b=d2=-0.75 1/4（s+u+w+y）-1/4(t+v+x+z)=c-c=d3=10.25 1/4（s+t+y+z）-1/4(u+v+w+x)=d-d=d4=7.25 通過(guò)將差值di與該分析方法在相同條件下重復(fù)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)偏差相比較，可判斷因素的影響是否顯著。如果差值大于2倍標(biāo)準(zhǔn)偏差，則該因素的影響是顯著的 根據(jù)驗(yàn)證結(jié)果可知，相同條件下重復(fù)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)偏差為9.81，試驗(yàn)的4個(gè)因素均未大于標(biāo)準(zhǔn)偏差，表明對(duì)結(jié)果無(wú)顯著影響。,2021/4/13,44,例：

15、驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,產(chǎn)品批間變異,2021/4/13,45,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,杜邦沙門(mén)氏菌試紙條 包容性 排它性 基體適用性 穩(wěn)健性（耐變性）,2021/4/13,46,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,包容性： 在天津局所檢測(cè)的100株菌株中，100株檢出、0株未檢出； 在江蘇局所檢測(cè)的共80株菌株中，80株檢出，0株未檢出。,2021/4/13,47,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,2021/4/13,48,四、驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,排它性 在天津局在所檢測(cè)的33株菌株中，33株檢出，0株未檢出； 在江蘇局驗(yàn)證的4種共80株菌中，只有s85的20株檢出，其余均未檢出。,2021/4/13,49

16、,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,2021/4/13,50,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,基體適用性,2021/4/13,51,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,2021/4/13,52,四、驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,基體適用性（以檢出概率表示）,2021/4/13,53,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,穩(wěn)健性（耐變性）,2021/4/13,54,例：驗(yàn)證程序的制定與實(shí)施,穩(wěn)健性（耐變性） 計(jì)算各個(gè)因素的影響。各因素的影響結(jié)果如下： 1/4（s+t+u+v）-1/4(w+x+y+z)=a-a=d1=0.075 1/4（s+t+w+x）-1/4(u+v+y+z)=b-b=d2=-0.025 1/4（s+u+w+y）-1/4(t+v+x+z)=c-c=d3=0.025 1/4（s+t+y+z）-1/4(u+v+w+x)=d-d=d4=0