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文檔簡介
1、三十七基 因 工 程 (30分鐘100分) 1.(141.(14分分)PCR)PCR技術(shù)是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室里的一種常規(guī)手段技術(shù)是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室里的一種常規(guī)手段, ,其原理是利用其原理是利用DNADNA的的 半保留復(fù)制半保留復(fù)制, ,在試管中進(jìn)行在試管中進(jìn)行DNADNA的人工復(fù)制的人工復(fù)制( (如圖所示如圖所示),),在很短的時(shí)間內(nèi)在很短的時(shí)間內(nèi), ,將將DNADNA 擴(kuò)增幾百萬倍甚至幾十億倍擴(kuò)增幾百萬倍甚至幾十億倍, ,使實(shí)驗(yàn)室所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物使實(shí)驗(yàn)室所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物 體。體。 (1)PCR(1)PCR的全稱是的全稱是,94 ,94 高溫使高溫使DNADN
2、A雙鏈打開雙鏈打開, ,這一步是打這一步是打 開鍵開鍵, ,稱為稱為。而這一過程在細(xì)胞內(nèi)是通過。而這一過程在細(xì)胞內(nèi)是通過酶實(shí)現(xiàn)的。酶實(shí)現(xiàn)的。 ( 2 )( 2 ) 當(dāng) 溫 度 降 低 時(shí)當(dāng) 溫 度 降 低 時(shí) , , 引 物 與 模 板引 物 與 模 板 端 結(jié) 合端 結(jié) 合 , , 在 耐 高 溫 的在 耐 高 溫 的 的作用下的作用下, ,引物沿模板延伸引物沿模板延伸, ,此過程中原料是此過程中原料是, ,遵循的遵循的 原則是原則是。 (3)PCR(3)PCR技術(shù)的必要條件除模板、原料、技術(shù)的必要條件除模板、原料、ATPATP、酶以外、酶以外, ,至少還需要三個(gè)條件至少還需要三個(gè)條件, ,
3、即即 液體環(huán)境、適宜的液體環(huán)境、適宜的和和, ,前者由前者由PCRPCR儀自動(dòng)儀自動(dòng) 調(diào)控調(diào)控, ,后者則靠后者則靠來維持。來維持。 (4)DNA(4)DNA的復(fù)制需要引物的復(fù)制需要引物, ,其主要原因是其主要原因是。引物。引物 的實(shí)質(zhì)是的實(shí)質(zhì)是, ,若將若將1 1個(gè)個(gè)DNADNA分子拷貝分子拷貝1010次次, ,則需要在緩沖則需要在緩沖 溶液中至少加入溶液中至少加入個(gè)引物。個(gè)引物。 【解析解析】(1)PCR(1)PCR全稱是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)全稱是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),94 ,94 高溫使高溫使DNADNA雙鏈打開雙鏈打開, ,這一步是這一步是 打開氫鍵打開氫鍵, ,稱為變性。這一過程在細(xì)胞內(nèi)是通過解
4、旋酶實(shí)現(xiàn)的。稱為變性。這一過程在細(xì)胞內(nèi)是通過解旋酶實(shí)現(xiàn)的。 (2)(2)當(dāng)溫度降至當(dāng)溫度降至55 55 時(shí)時(shí), ,引物與模板鏈引物與模板鏈33端結(jié)合。加熱至端結(jié)合。加熱至72 ,72 ,在耐高溫的在耐高溫的 TaqDNATaqDNA聚合酶的作用下聚合酶的作用下, ,引物沿模板鏈延伸引物沿模板鏈延伸, ,此過程中原料是此過程中原料是4 4種脫氧核苷酸種脫氧核苷酸, , 遵循的原則是堿基互補(bǔ)配對。遵循的原則是堿基互補(bǔ)配對。 (3)PCR(3)PCR技術(shù)必要條件除模板、原料、酶、技術(shù)必要條件除模板、原料、酶、ATPATP外外, ,至少還需要液體環(huán)境至少還需要液體環(huán)境, ,適宜的適宜的 溫度和溫度和p
5、H,pH,前者由前者由PCRPCR儀自動(dòng)調(diào)控儀自動(dòng)調(diào)控, ,后者靠緩沖液來維持。后者靠緩沖液來維持。 (4)DNA(4)DNA復(fù)制需要引物的主要原因是復(fù)制需要引物的主要原因是DNADNA聚合酶不能從頭開始合成聚合酶不能從頭開始合成DNA,DNA,只能從只能從33 端延伸端延伸DNADNA鏈。引物的實(shí)質(zhì)是單鏈鏈。引物的實(shí)質(zhì)是單鏈RNARNA或單鏈或單鏈DNADNA分子。在分子。在DNADNA分子擴(kuò)增時(shí)分子擴(kuò)增時(shí), ,需要需要 2 2種引物種引物, ,由于新合成的鏈都需要引物作為復(fù)制的起點(diǎn)由于新合成的鏈都需要引物作為復(fù)制的起點(diǎn), ,故所需的引物數(shù)目等于故所需的引物數(shù)目等于 新合成的新合成的DNAD
6、NA鏈的數(shù)目鏈的數(shù)目, ,即即2 22 210 10-2=2 -2=211 11-2 -2。 答案答案: :(1)(1)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)氫變性解旋多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)氫變性解旋 (2)3(2)3Taq DNATaq DNA聚合酶聚合酶4 4種脫氧核苷酸種脫氧核苷酸 堿基互補(bǔ)配對堿基互補(bǔ)配對 (3)(3)溫度溫度pHpH緩沖液緩沖液 (4)DNA(4)DNA的復(fù)制不能從頭開始的復(fù)制不能從頭開始,DNA,DNA聚合酶只能從引物的聚合酶只能從引物的33端延伸端延伸DNADNA鏈單鏈鏈單鏈 RNARNA或者單鏈或者單鏈DNADNA分子分子2 211 11-2 -2 2.(152.(15分分)()(創(chuàng)新性創(chuàng)新性
7、打靶技術(shù)打靶技術(shù))(2021)(2021東三省三校聯(lián)考東三省三校聯(lián)考) )基因打靶技術(shù)是指利基因打靶技術(shù)是指利 用外源性用外源性DNADNA與細(xì)胞與細(xì)胞DNADNA的相同或相似序列的相同或相似序列, ,在特定位點(diǎn)上進(jìn)行替換在特定位點(diǎn)上進(jìn)行替換, ,從而改變從而改變 細(xì)胞遺傳特性的方法。該技術(shù)可應(yīng)用于解決人體對移植的豬器官產(chǎn)生的免疫細(xì)胞遺傳特性的方法。該技術(shù)可應(yīng)用于解決人體對移植的豬器官產(chǎn)生的免疫 排斥反應(yīng)排斥反應(yīng), ,即利用基因打靶技術(shù)對豬細(xì)胞即利用基因打靶技術(shù)對豬細(xì)胞1,31,3半乳糖苷轉(zhuǎn)移酶基因進(jìn)行改半乳糖苷轉(zhuǎn)移酶基因進(jìn)行改 造造, ,以消除以消除1,31,3半乳糖苷轉(zhuǎn)移酶引起的免疫排斥。
8、其主要過程如下半乳糖苷轉(zhuǎn)移酶引起的免疫排斥。其主要過程如下: : 第一步第一步: :從豬囊胚中分離出胚胎干細(xì)胞。從豬囊胚中分離出胚胎干細(xì)胞。 第二步第二步: :在與靶基因在與靶基因( (需要改造的基因需要改造的基因) )相同的外源性相同的外源性DNADNA上上, ,插入新霉素抗性基插入新霉素抗性基 因因, ,構(gòu)建打靶載體。構(gòu)建打靶載體。 第二、三步示意圖第二、三步示意圖(6(61010表示不同的基因片段表示不同的基因片段) ) 第三步第三步: :打靶載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞打靶載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞, ,與細(xì)胞與細(xì)胞DNADNA中的靶基因進(jìn)行替換。中的靶基因進(jìn)行替換。 第四步第四步: :改造后的胚胎干細(xì)
9、胞篩選、增殖等。改造后的胚胎干細(xì)胞篩選、增殖等。 回答下列問題回答下列問題: : (1)(1)上述改造過程中的靶基因是上述改造過程中的靶基因是, ,插入新霉素抗性插入新霉素抗性 基因的過程中需要用到的酶有基因的過程中需要用到的酶有, ,插入新霉素抗性插入新霉素抗性 基因的目的是基因的目的是( (答出答出2 2點(diǎn)點(diǎn)) )。 (2)(2)基因打靶技術(shù)依據(jù)的遺傳學(xué)原理是基因打靶技術(shù)依據(jù)的遺傳學(xué)原理是。 【解析解析】(1)(1)據(jù)題干分析據(jù)題干分析, ,基因改造過程中基因改造過程中“靶基因靶基因”是豬細(xì)胞的是豬細(xì)胞的-1,3-1,3半乳半乳 糖苷轉(zhuǎn)移酶基因糖苷轉(zhuǎn)移酶基因; ;打靶載體的構(gòu)建過程相當(dāng)于基
10、因工程基本操作步驟中的打靶載體的構(gòu)建過程相當(dāng)于基因工程基本操作步驟中的“目目 的基因的獲取的基因的獲取”, ,所以需要限制酶和所以需要限制酶和DNADNA連接酶連接酶, ,插入新基因的目的是破壞靶基插入新基因的目的是破壞靶基 因因, ,使靶基因不能表達(dá)和起篩選作用。使靶基因不能表達(dá)和起篩選作用。 (2)(2)據(jù)題干信息分析可知據(jù)題干信息分析可知, ,該項(xiàng)技術(shù)能精準(zhǔn)定位進(jìn)行基因改造是因?yàn)榇虬休d體該項(xiàng)技術(shù)能精準(zhǔn)定位進(jìn)行基因改造是因?yàn)榇虬休d體 導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞, ,與含有同源序列的與含有同源序列的DNADNA分子重新組合分子重新組合, ,發(fā)生置換發(fā)生置換, ,即基因重組。即基因重組。 答
11、案答案: :(1)(1)(豬細(xì)胞的豬細(xì)胞的)1,3)1,3半乳糖苷轉(zhuǎn)移酶基因限制酶和半乳糖苷轉(zhuǎn)移酶基因限制酶和DNADNA連接酶破連接酶破 壞靶基因壞靶基因, ,使靶基因不能表達(dá)使靶基因不能表達(dá); ;起篩選作用起篩選作用 (2)(2)基因重組基因重組 3.(113.(11分分)(2021)(2021蚌埠模擬蚌埠模擬) )引起人類產(chǎn)生埃博拉出血熱的埃博拉病毒引起人類產(chǎn)生埃博拉出血熱的埃博拉病毒(EBOV),(EBOV), 是一種單鏈?zhǔn)且环N單鏈RNARNA病毒病毒, ,某研究團(tuán)隊(duì)利用其跨膜表面糖蛋白某研究團(tuán)隊(duì)利用其跨膜表面糖蛋白(GP),(GP),以重組腺病毒為以重組腺病毒為 載體采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)研
12、發(fā)了埃博拉疫苗。請回答下列問題載體采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)研發(fā)了埃博拉疫苗。請回答下列問題: : (1)(1)為了判斷是否感染為了判斷是否感染EBOV,EBOV,采用逆轉(zhuǎn)錄采用逆轉(zhuǎn)錄PCRPCR技術(shù)進(jìn)行核酸檢測技術(shù)進(jìn)行核酸檢測, ,具體過程是先具體過程是先 將待測樣本將待測樣本RNARNA逆轉(zhuǎn)錄成逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,cDNA,再以再以cDNAcDNA為模板進(jìn)行擴(kuò)增為模板進(jìn)行擴(kuò)增, ,則逆轉(zhuǎn)錄成則逆轉(zhuǎn)錄成cDNAcDNA的過的過 程中所需的原料是程中所需的原料是, PCR, PCR的原理是的原理是, , 其中所需要的酶是其中所需要的酶是。 (2)(2)基因表達(dá)載體構(gòu)建時(shí)基因表達(dá)載體構(gòu)建時(shí), ,需要用同種限制
13、酶切割目的基因和運(yùn)載體需要用同種限制酶切割目的基因和運(yùn)載體, ,其目的是其目的是 。 通 常 運(yùn) 載 體 上 帶 有 抗 生 素 的 抗 性 基 因。 通 常 運(yùn) 載 體 上 帶 有 抗 生 素 的 抗 性 基 因 , , 其 作 用 是其 作 用 是 。 (3)(3)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入人的胚胎腎細(xì)胞所采用的方法是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入人的胚胎腎細(xì)胞所采用的方法是, ,培養(yǎng)胚培養(yǎng)胚 胎腎細(xì)胞需要胎腎細(xì)胞需要COCO2 2, ,其作用是其作用是, ,此基因工程成此基因工程成 功的標(biāo)志是功的標(biāo)志是。 【解析解析】(1)(1)根據(jù)題意分析根據(jù)題意分析, ,以樣本以樣本RNARNA為模板逆轉(zhuǎn)錄成為模板逆轉(zhuǎn)錄成cD
14、NAcDNA的原料是脫氧核苷的原料是脫氧核苷 酸酸;PCR;PCR的原理是體內(nèi)的原理是體內(nèi)DNADNA的復(fù)制的復(fù)制, ,該過程需要耐高溫該過程需要耐高溫DNADNA聚合酶的催化。聚合酶的催化。(2)(2)構(gòu)建構(gòu)建 基因表達(dá)載體時(shí)基因表達(dá)載體時(shí), ,需要用同種限制酶切割目的基因和運(yùn)載體需要用同種限制酶切割目的基因和運(yùn)載體, ,以產(chǎn)生相同的黏性以產(chǎn)生相同的黏性 末端末端, ,利于目的基因和運(yùn)載體連接利于目的基因和運(yùn)載體連接; ;運(yùn)載體上的抗生素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因運(yùn)載體上的抗生素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因, ,可可 以用于篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞。以用于篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞。(3)(3)將重組質(zhì)
15、粒導(dǎo)入人的胚胎腎細(xì)胞將重組質(zhì)粒導(dǎo)入人的胚胎腎細(xì)胞 ( (動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞) )常用顯微注射法常用顯微注射法; ;培養(yǎng)胚胎腎細(xì)胞需要一定的氣體條件培養(yǎng)胚胎腎細(xì)胞需要一定的氣體條件, ,培養(yǎng)箱中培養(yǎng)箱中 COCO2 2的作用是維持培養(yǎng)液的的作用是維持培養(yǎng)液的pHpH相對穩(wěn)定相對穩(wěn)定; ;該研究團(tuán)隊(duì)利用其跨膜表面糖蛋白該研究團(tuán)隊(duì)利用其跨膜表面糖蛋白(GP),(GP), 以重組腺病毒為載體采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)研發(fā)了埃博拉疫苗以重組腺病毒為載體采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)研發(fā)了埃博拉疫苗, ,因此因此, ,此基因工程成功此基因工程成功 的標(biāo)志是受體細(xì)胞產(chǎn)生跨膜表面糖蛋白的標(biāo)志是受體細(xì)胞產(chǎn)生跨膜表面糖蛋白(GP)(GP)。
16、答案答案: :(1)4(1)4種脫氧核苷酸體內(nèi)種脫氧核苷酸體內(nèi)DNADNA的復(fù)制耐熱的的復(fù)制耐熱的DNADNA聚合酶聚合酶(Taq(Taq酶酶) ) (2)(2)產(chǎn)生相同的黏性末端產(chǎn)生相同的黏性末端, ,利于目的基因和運(yùn)載體連接便于篩選出含有目的利于目的基因和運(yùn)載體連接便于篩選出含有目的 基因的受體細(xì)胞基因的受體細(xì)胞 (3)(3)顯微注射法維持培養(yǎng)液的顯微注射法維持培養(yǎng)液的pHpH相對穩(wěn)定受體細(xì)胞產(chǎn)生跨膜表面糖蛋白相對穩(wěn)定受體細(xì)胞產(chǎn)生跨膜表面糖蛋白 (GP)(GP) 4.(154.(15分分)(2021)(2021桂林模擬桂林模擬)L-)L-肉堿具有參與脂肪氧化、抗疲勞、延遲患阿爾肉堿具有參與
17、脂肪氧化、抗疲勞、延遲患阿爾 茨海默綜合癥等功能。據(jù)報(bào)道大腸桿菌能將巴豆甜菜堿轉(zhuǎn)化成茨海默綜合癥等功能。據(jù)報(bào)道大腸桿菌能將巴豆甜菜堿轉(zhuǎn)化成L-L-肉堿肉堿, ,但效率但效率 較低??蒲腥藛T通過基因工程將較低??蒲腥藛T通過基因工程將BCDBCD基因、基因、F F基因以及基因以及T T基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞 內(nèi)以提高內(nèi)以提高L-L-肉堿的轉(zhuǎn)化率。實(shí)驗(yàn)過程及結(jié)果如圖所示肉堿的轉(zhuǎn)化率。實(shí)驗(yàn)過程及結(jié)果如圖所示, ,分析并回答下列問題分析并回答下列問題: : (1)(1)實(shí)驗(yàn)過程中用實(shí)驗(yàn)過程中用PCRPCR技術(shù)獲得目的基因技術(shù)獲得目的基因,PCR,PCR反應(yīng)體系需要加入的有機(jī)物有反應(yīng)體系
18、需要加入的有機(jī)物有DNADNA 模板、模板、dNTPdNTP、耐高溫、耐高溫DNADNA聚合酶和聚合酶和。實(shí)驗(yàn)過程中不能將。實(shí)驗(yàn)過程中不能將BCDBCD基因、基因、 F F基因以及基因以及T T基因直接導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)基因直接導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞內(nèi), ,而是構(gòu)建重組質(zhì)粒后再導(dǎo)入大腸桿而是構(gòu)建重組質(zhì)粒后再導(dǎo)入大腸桿 菌菌, ,原因是原因是, ,并能遺傳給下一代。圖中兩個(gè)重組質(zhì)粒目并能遺傳給下一代。圖中兩個(gè)重組質(zhì)粒目 的基因的首端都含有啟動(dòng)子的基因的首端都含有啟動(dòng)子T7,T7T7,T7是是識別和結(jié)合的部位識別和結(jié)合的部位, , 能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄。能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄。 (2)(2)將重組質(zhì)粒將重組質(zhì)粒1 1
19、和重組質(zhì)粒和重組質(zhì)粒2 2導(dǎo)入大腸桿菌時(shí)導(dǎo)入大腸桿菌時(shí), ,應(yīng)用應(yīng)用處理大腸桿處理大腸桿 菌菌, ,使細(xì)胞處于使細(xì)胞處于的感受態(tài)。的感受態(tài)。 (3)(3)為了篩選出同時(shí)含有為了篩選出同時(shí)含有BCDBCD基因、基因、F F基因以及基因以及T T基因的大腸桿菌基因的大腸桿菌, ,實(shí)驗(yàn)的思路是實(shí)驗(yàn)的思路是 。 (4)(4)研究發(fā)現(xiàn)巴豆甜菜堿轉(zhuǎn)化成研究發(fā)現(xiàn)巴豆甜菜堿轉(zhuǎn)化成L-L-肉堿是一個(gè)可逆反應(yīng)過程肉堿是一個(gè)可逆反應(yīng)過程, ,得到的工程菌在得到的工程菌在 含有巴豆甜菜堿培養(yǎng)基中培養(yǎng)含有巴豆甜菜堿培養(yǎng)基中培養(yǎng)2 2小時(shí)后小時(shí)后,L-,L-肉堿的含量基本穩(wěn)定肉堿的含量基本穩(wěn)定, ,此時(shí)可以此時(shí)可以 ,
20、,以提高產(chǎn)量。以提高產(chǎn)量。 【解析解析】(1)(1)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR),(PCR),是一種體外迅速擴(kuò)增是一種體外迅速擴(kuò)增DNADNA片段的技術(shù)片段的技術(shù), ,它能它能 以極少量的以極少量的DNADNA為模板為模板, ,在幾小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬份的在幾小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬份的DNADNA拷貝。它可看作是生拷貝。它可看作是生 物體外的特殊物體外的特殊DNADNA復(fù)制復(fù)制,PCR,PCR的最大特點(diǎn)是能將微量的的最大特點(diǎn)是能將微量的DNADNA大幅增加。大幅增加。PCRPCR反應(yīng)體反應(yīng)體 系需要加入的有機(jī)物有系需要加入的有機(jī)物有DNADNA模板、模板、dNTPdNTP、耐高溫、耐高溫D
21、NADNA聚合酶和聚合酶和( (兩種兩種) )引物。由引物。由 于目的基因無法直接在受體細(xì)胞中表達(dá)于目的基因無法直接在受體細(xì)胞中表達(dá), ,因此為了使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)因此為了使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn) 定存在定存在, ,能夠表達(dá)能夠表達(dá), ,實(shí)驗(yàn)過程中不能將實(shí)驗(yàn)過程中不能將BCDBCD基因、基因、F F基因以及基因以及T T基因直接導(dǎo)入大腸基因直接導(dǎo)入大腸 桿菌細(xì)胞內(nèi)桿菌細(xì)胞內(nèi), ,而是構(gòu)建重組質(zhì)粒后再導(dǎo)入大腸桿菌而是構(gòu)建重組質(zhì)粒后再導(dǎo)入大腸桿菌, ,并能遺傳給下一代。圖中并能遺傳給下一代。圖中 兩個(gè)重組質(zhì)粒目的基因的首端都含有啟動(dòng)子兩個(gè)重組質(zhì)粒目的基因的首端都含有啟動(dòng)子T7,T7T7,T7
22、是是RNARNA聚合酶識別和結(jié)合的聚合酶識別和結(jié)合的 部位部位, ,能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄。能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄。(2)(2)使體外重組的使體外重組的DNADNA分子轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞內(nèi)分子轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞內(nèi), ,主要是主要是 借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑。一般將受體大腸桿菌用借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑。一般將受體大腸桿菌用CaCa2+ 2+處理 處理, ,使細(xì)胞處使細(xì)胞處 于易于吸收周圍環(huán)境中于易于吸收周圍環(huán)境中DNADNA分子的感受態(tài)分子的感受態(tài), ,使含有目的基因的重組質(zhì)粒容易進(jìn)使含有目的基因的重組質(zhì)粒容易進(jìn) 入受體細(xì)胞。入受體細(xì)胞。(3)(3)重組質(zhì)粒重組質(zhì)粒1 1上含有上含有BCDBCD基因、基因、T
23、 T基因及卡那霉素抗性基因基因及卡那霉素抗性基因, ,重組重組 質(zhì)粒質(zhì)粒2 2上含有上含有F F基因、基因、T T基因及氯霉素抗性基因基因及氯霉素抗性基因, ,因此在同時(shí)含有卡那霉素和氯因此在同時(shí)含有卡那霉素和氯 霉素培養(yǎng)基上挑選單克隆大腸桿菌霉素培養(yǎng)基上挑選單克隆大腸桿菌, ,就是同時(shí)含有就是同時(shí)含有BCDBCD基因、基因、F F基因以及基因以及T T基因基因 的大腸桿菌。的大腸桿菌。(4)(4)研究發(fā)現(xiàn)巴豆甜菜堿轉(zhuǎn)化成研究發(fā)現(xiàn)巴豆甜菜堿轉(zhuǎn)化成L-L-肉堿是一個(gè)可逆反應(yīng)過程肉堿是一個(gè)可逆反應(yīng)過程, ,在在 可逆反應(yīng)中可逆反應(yīng)中, ,減少生成物濃度減少生成物濃度, ,可使反應(yīng)向正方向進(jìn)行。因此
24、得到的工程菌在可使反應(yīng)向正方向進(jìn)行。因此得到的工程菌在 含有巴豆甜菜堿培養(yǎng)基中培養(yǎng)含有巴豆甜菜堿培養(yǎng)基中培養(yǎng)2 2小時(shí)后小時(shí)后,L-,L-肉堿的含量基本穩(wěn)定肉堿的含量基本穩(wěn)定, ,此時(shí)可以及時(shí)此時(shí)可以及時(shí) 移除產(chǎn)物移除產(chǎn)物( (更換培養(yǎng)液更換培養(yǎng)液),),使反應(yīng)向生成使反應(yīng)向生成L-L-肉堿的方向進(jìn)行肉堿的方向進(jìn)行, ,以提高產(chǎn)量。以提高產(chǎn)量。 答案答案: :(1)(1)(兩種兩種) )引物使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在引物使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在, ,能夠表達(dá)能夠表達(dá)( (使目的使目的 基因在受體細(xì)胞中完成轉(zhuǎn)化基因在受體細(xì)胞中完成轉(zhuǎn)化) )RNARNA聚合酶聚合酶 (2)Ca(2)Ca
25、2+ 2+易于吸收周圍環(huán)境中 易于吸收周圍環(huán)境中DNADNA分子分子 (3)(3)在同時(shí)含有卡那霉素和氯霉素培養(yǎng)基上挑選單克隆大腸桿菌在同時(shí)含有卡那霉素和氯霉素培養(yǎng)基上挑選單克隆大腸桿菌 (4)(4)及時(shí)移除產(chǎn)物及時(shí)移除產(chǎn)物( (更換培養(yǎng)液更換培養(yǎng)液),),使反應(yīng)向生成使反應(yīng)向生成L-L-肉堿的方向進(jìn)行肉堿的方向進(jìn)行 【加固訓(xùn)練加固訓(xùn)練】 浙江大學(xué)農(nóng)學(xué)院喻景權(quán)教授課題組研究發(fā)現(xiàn)浙江大學(xué)農(nóng)學(xué)院喻景權(quán)教授課題組研究發(fā)現(xiàn), ,一種植物激素一種植物激素油菜素內(nèi)油菜素內(nèi) 酯能促進(jìn)農(nóng)藥在植物體內(nèi)的降解和代謝。用油菜素內(nèi)酯處理后酯能促進(jìn)農(nóng)藥在植物體內(nèi)的降解和代謝。用油菜素內(nèi)酯處理后, ,許多參與農(nóng)藥許多參與
26、農(nóng)藥 降解的基因降解的基因( (如如P450P450基因和紅霉素抗性基因基因和紅霉素抗性基因) )的表達(dá)和酶活性都得到提高的表達(dá)和酶活性都得到提高, ,在這在這 些基因些基因“指導(dǎo)指導(dǎo)”下合成的蛋白酶能把農(nóng)藥逐漸轉(zhuǎn)化為水溶性物質(zhì)或低毒甚至下合成的蛋白酶能把農(nóng)藥逐漸轉(zhuǎn)化為水溶性物質(zhì)或低毒甚至 無毒物質(zhì)無毒物質(zhì), ,有的則被直接排出體外。某課題組進(jìn)一步進(jìn)行了如下的實(shí)驗(yàn)操作有的則被直接排出體外。某課題組進(jìn)一步進(jìn)行了如下的實(shí)驗(yàn)操作, , 請回答下列問題請回答下列問題: : (1)(1)獲得油菜素內(nèi)酯合成酶基因的方法有獲得油菜素內(nèi)酯合成酶基因的方法有_。 步驟用步驟用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增基因時(shí)用到的耐高
27、溫酶通常是指技術(shù)擴(kuò)增基因時(shí)用到的耐高溫酶通常是指; ;步驟用步驟用 到的酶有到的酶有。 (2)(2)圖中導(dǎo)入重組質(zhì)粒的方法是圖中導(dǎo)入重組質(zhì)粒的方法是, ,在導(dǎo)入之前需用一定濃度在導(dǎo)入之前需用一定濃度 的的處理受體細(xì)菌。處理受體細(xì)菌。 (3)(3)導(dǎo)入重組質(zhì)粒導(dǎo)入重組質(zhì)粒2 2以后以后, ,往往還需要進(jìn)行檢測和篩選往往還需要進(jìn)行檢測和篩選, ,可用可用制成探針制成探針, , 檢測是否導(dǎo)入了重組基因檢測是否導(dǎo)入了重組基因, ,在培養(yǎng)基中加入在培養(yǎng)基中加入可將含有目的可將含有目的 基因的細(xì)胞篩選出來?;虻募?xì)胞篩選出來。 (4)(4)請你為該課題命名請你為該課題命名:_:_。 【解析解析】進(jìn)行基因工
28、程操作時(shí)進(jìn)行基因工程操作時(shí), ,首先要獲取目的基因首先要獲取目的基因, ,其方法有多種其方法有多種: :從從cDNAcDNA文文 庫中獲取、從基因組文庫中獲取、人工合成目的基因或庫中獲取、從基因組文庫中獲取、人工合成目的基因或PCRPCR擴(kuò)增技術(shù)等。在構(gòu)擴(kuò)增技術(shù)等。在構(gòu) 建基因表達(dá)載體的過程中建基因表達(dá)載體的過程中, ,用到的工具酶有限制酶和用到的工具酶有限制酶和DNADNA連接酶。圖中的受體連接酶。圖中的受體 細(xì)胞是細(xì)菌細(xì)胞是細(xì)菌, ,故用感受態(tài)細(xì)胞法導(dǎo)入基因表達(dá)載體故用感受態(tài)細(xì)胞法導(dǎo)入基因表達(dá)載體, ,導(dǎo)入后導(dǎo)入后, ,需檢測和篩選。從需檢測和篩選。從 圖中可以看出圖中可以看出, ,最終是
29、通過對照實(shí)驗(yàn)來檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因細(xì)菌對土壤中殘留農(nóng)藥的分最終是通過對照實(shí)驗(yàn)來檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因細(xì)菌對土壤中殘留農(nóng)藥的分 解能力。解能力。 答案答案: :(1)(1)從從cDNAcDNA文庫中獲取、從基因組文庫中獲取、人工合成目的基因或文庫中獲取、從基因組文庫中獲取、人工合成目的基因或PCRPCR 擴(kuò)增技術(shù)擴(kuò)增技術(shù)( (任選其中兩項(xiàng)即可任選其中兩項(xiàng)即可) )TaqDNATaqDNA聚合酶限制酶和聚合酶限制酶和DNADNA連接酶連接酶 (2)(2)感受態(tài)細(xì)胞法感受態(tài)細(xì)胞法CaClCaCl2 2溶液溶液 (3)(3)紅霉素抗性基因紅霉素紅霉素抗性基因紅霉素 (4)(4)探究油菜素內(nèi)酯能否促進(jìn)土壤中農(nóng)藥的分解探究油菜
30、素內(nèi)酯能否促進(jìn)土壤中農(nóng)藥的分解 5.(115.(11分分)(2021)(2021河北模擬河北模擬) )膠原蛋白廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、化妝品、化工原料等膠原蛋白廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、化妝品、化工原料等 領(lǐng)域領(lǐng)域, ,科研人員開展利用家蠶生產(chǎn)人膠原蛋白的研究。請回答下列問題科研人員開展利用家蠶生產(chǎn)人膠原蛋白的研究。請回答下列問題: : (1)(1)家蠶核型多角體病毒家蠶核型多角體病毒(BmNPV)(BmNPV)專性寄生于鱗翅目昆蟲專性寄生于鱗翅目昆蟲, ,將人膠原蛋白基因與將人膠原蛋白基因與 重組后重組后, ,構(gòu)建構(gòu)建。體外克隆目的基因的方法是。體外克隆目的基因的方法是。 (2)BmNPV(2)BmNPV的的
31、p10p10基因是極強(qiáng)的啟動(dòng)子基因是極強(qiáng)的啟動(dòng)子, ,將目的基因連接在將目的基因連接在p10p10基因的下游基因的下游, ,目的目的 是是。目的基。目的基 因與因與p10p10基因連接時(shí)基因連接時(shí), ,斷裂與連接的化學(xué)鍵都是斷裂與連接的化學(xué)鍵都是。 (3)(3)重組重組BmNPVBmNPV感染家蠶幼蟲后感染家蠶幼蟲后, ,在幼蟲淋巴液中提取蛋白質(zhì)在幼蟲淋巴液中提取蛋白質(zhì), ,用用的方法的方法 檢測目的基因是否成功表達(dá)。相比于大腸桿菌檢測目的基因是否成功表達(dá)。相比于大腸桿菌, ,選擇家蠶作為人膠原蛋白的生選擇家蠶作為人膠原蛋白的生 物反應(yīng)器物反應(yīng)器, ,其優(yōu)點(diǎn)是其優(yōu)點(diǎn)是 。 【解析解析】(1)(
32、1)因?yàn)橐驗(yàn)锽mNPVBmNPV專性寄生于鱗翅目昆蟲專性寄生于鱗翅目昆蟲, ,故將目的基因與故將目的基因與BmNPVBmNPV基因重組基因重組, , 構(gòu)建基因表達(dá)載體構(gòu)建基因表達(dá)載體, ,更有利于將目的基因?qū)爰倚Q細(xì)胞。更有利于將目的基因?qū)爰倚Q細(xì)胞。PCRPCR是指在體外復(fù)制特是指在體外復(fù)制特 定定DNADNA片段片段, ,可在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因??稍诙虝r(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因。 (2)(2)啟動(dòng)子位于基因的首端啟動(dòng)子位于基因的首端, ,它是它是RNARNA聚合酶識別和結(jié)合的部位聚合酶識別和結(jié)合的部位, ,能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn) 錄。將目的基因與運(yùn)載體連接時(shí)錄。將目的基因與運(yùn)載體連接時(shí)
33、, ,限制酶和限制酶和DNADNA連接酶作用的都是兩個(gè)核苷酸之連接酶作用的都是兩個(gè)核苷酸之 間的磷酸二酯鍵。間的磷酸二酯鍵。 (3)(3)檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì), ,可用抗原可用抗原- -抗體雜交的方法。大腸桿菌為抗體雜交的方法。大腸桿菌為 原核細(xì)胞原核細(xì)胞, ,家蠶為真核生物家蠶為真核生物, ,家蠶細(xì)胞中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體會(huì)對人膠原蛋白進(jìn)家蠶細(xì)胞中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體會(huì)對人膠原蛋白進(jìn) 行加工行加工, ,與人體內(nèi)表達(dá)的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能更相似。與人體內(nèi)表達(dá)的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能更相似。 答案答案: :(1)BmNPV(1)BmNPV基因基因表達(dá)載體基因基因表達(dá)載體PC
34、RPCR技術(shù)技術(shù) (2)(2)使目的基因在使目的基因在p10p10基因的驅(qū)動(dòng)下高效表達(dá)磷酸二酯鍵基因的驅(qū)動(dòng)下高效表達(dá)磷酸二酯鍵 (3)(3)抗原抗原- -抗體雜交家蠶細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體會(huì)對人膠原蛋白進(jìn)行加工抗體雜交家蠶細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體會(huì)對人膠原蛋白進(jìn)行加工, , 使表達(dá)的膠原蛋白與人的膠原蛋白的結(jié)構(gòu)和功能相似使表達(dá)的膠原蛋白與人的膠原蛋白的結(jié)構(gòu)和功能相似 6.(116.(11分分)(2021)(2021衡水模擬衡水模擬) )我國一科研團(tuán)隊(duì)將小麥液泡膜我國一科研團(tuán)隊(duì)將小麥液泡膜NaNa+ +/K/K+ +逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 基因基因(TaNHX2(TaNHX2基因基因) )轉(zhuǎn)移到
35、水稻細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移到水稻細(xì)胞內(nèi), ,獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽水稻新品種?;卮鹣芦@得了轉(zhuǎn)基因耐鹽水稻新品種?;卮鹣?列有關(guān)問題列有關(guān)問題: : (1)(1)獲取目的基因的方法很多。若已知獲取目的基因的方法很多。若已知TaNHX2TaNHX2基因序列基因序列, ,可以用可以用擴(kuò)擴(kuò) 增該基因。首先根據(jù)序列設(shè)計(jì)、合成增該基因。首先根據(jù)序列設(shè)計(jì)、合成并投入反應(yīng)體系并投入反應(yīng)體系, ,同時(shí)同時(shí), ,還需要還需要 放入放入dNTPdNTP、目的基因、目的基因、TaqTaq酶等。還可以人工合成酶等。還可以人工合成TaNHX2TaNHX2基因。如圖基因。如圖1 1表示人表示人 工合成的兩條若干個(gè)堿基的工合成的兩條若干個(gè)堿基
36、的DNADNA單鏈單鏈, ,兩條鏈通過兩條鏈通過1818個(gè)堿基對形成部分雙鏈個(gè)堿基對形成部分雙鏈DNADNA 片段片段, ,再利用再利用KlenowKlenow酶補(bǔ)平酶補(bǔ)平, ,獲得雙鏈獲得雙鏈DNADNA。從功能看。從功能看,Klenow,Klenow酶是一種酶是一種 酶。酶。 (2)(2)圖圖2 2是是3 3種限制酶的識別與酶切位點(diǎn)示意圖種限制酶的識別與酶切位點(diǎn)示意圖, ,構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí), ,經(jīng)經(jīng)BamH BamH 酶切割得到的目的基因可以與圖酶切割得到的目的基因可以與圖3 3所示質(zhì)粒被所示質(zhì)粒被酶切后的產(chǎn)物連接酶切后的產(chǎn)物連接, , 理由是理由是。連。連 接后的重組
37、質(zhì)粒接后的重組質(zhì)粒( (填填“能能”“”“不能不能”或或“不一定能不一定能”) )被被BamH BamH 切切 割。割。 (3)(3)基因表達(dá)載體通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化作用基因表達(dá)載體通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化作用, ,就可以使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞就可以使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞, ,并將并將 其其, ,使目的基因的遺傳特性得使目的基因的遺傳特性得 以穩(wěn)定維持和表達(dá)。以穩(wěn)定維持和表達(dá)。 (4)(4)小麥與水稻差異很大小麥與水稻差異很大, ,但通過基因重組后但通過基因重組后, ,水稻卻能夠合成小麥的蛋白質(zhì)水稻卻能夠合成小麥的蛋白質(zhì), , 這是因?yàn)檫@是因?yàn)椤?【解析解析】(1)(1)擴(kuò)增目的基因常采用擴(kuò)增目的基因常采用P
38、CRPCR技術(shù)技術(shù); ;需要根據(jù)設(shè)計(jì)序列合成引物需要根據(jù)設(shè)計(jì)序列合成引物; ;從圖從圖 中看出中看出KlenowKlenow酶的作用是以酶的作用是以DNADNA分子的一條鏈為模板分子的一條鏈為模板, ,以脫氧核苷酸為原料合以脫氧核苷酸為原料合 成成DNADNA分子分子, ,催化磷酸二酯鍵的形成催化磷酸二酯鍵的形成, ,所以是一種所以是一種DNADNA聚合酶。聚合酶。 (2)(2)由圖由圖2 2可知可知,BamH ,BamH 酶和酶和Sau3A Sau3A 酶兩種酶切割片段產(chǎn)生的黏性末端互補(bǔ)酶兩種酶切割片段產(chǎn)生的黏性末端互補(bǔ), , 故經(jīng)故經(jīng)BamH BamH 酶切割得到的目的基因可以與圖酶切割得
39、到的目的基因可以與圖3 3所示質(zhì)粒被所示質(zhì)粒被Sau3A Sau3A 酶切割后酶切割后 的產(chǎn)物連接。連接后的重組質(zhì)??赡苄纬刹煌男蛄械漠a(chǎn)物連接。連接后的重組質(zhì)??赡苄纬刹煌男蛄? ,所以不一定能再被所以不一定能再被BamH BamH 切割。切割。 (3)(3)基因表達(dá)載體通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化作用基因表達(dá)載體通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化作用, ,就可以使目的基因進(jìn)入某植物根細(xì)胞就可以使目的基因進(jìn)入某植物根細(xì)胞, , 并將其插入植物細(xì)胞的染色體并將其插入植物細(xì)胞的染色體DNADNA上上, ,使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和 表達(dá)。表達(dá)。 (4)(4)小麥與水稻差異很大小麥與水稻
40、差異很大, ,但小麥和水稻共用一套遺傳密碼但小麥和水稻共用一套遺傳密碼, ,故通過基因重組后故通過基因重組后, , 水稻能夠合成小麥的蛋白質(zhì)。水稻能夠合成小麥的蛋白質(zhì)。 答案答案: :(1)PCR(1)PCR技術(shù)引物技術(shù)引物DNADNA聚合聚合 (2)Sau3A(2)Sau3ABamHBamH和和Sau3ASau3A兩種酶切割片段產(chǎn)生的黏性末端互補(bǔ)不一定兩種酶切割片段產(chǎn)生的黏性末端互補(bǔ)不一定 能能 (3)(3)插入植物細(xì)胞的染色體插入植物細(xì)胞的染色體DNADNA上上(4)(4)水稻和小麥共用一套遺傳密碼水稻和小麥共用一套遺傳密碼 7.(117.(11分分) )科學(xué)家通過利用科學(xué)家通過利用PCR
41、PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造定點(diǎn)突變技術(shù)改造RubiscoRubisco酶基因酶基因, ,提高了光合作提高了光合作 用過程中用過程中RubiscoRubisco酶對酶對COCO2 2的親和力的親和力, ,從而顯著提高了植物的光合作用速率。請從而顯著提高了植物的光合作用速率。請 回答下列問題回答下列問題: : (1)PCR(1)PCR過程所依據(jù)的原理是過程所依據(jù)的原理是, ,利用利用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前 提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列, ,以便根據(jù)這一序列合成以便根據(jù)這一序列合成; ; 擴(kuò)增過程需要加入擴(kuò)增過程需要加入酶。酶。
42、(2)(2)啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNADNA片段片段, ,其作用是其作用是。目的基因能。目的基因能 在不同生物體內(nèi)正常表達(dá)原來的蛋白質(zhì)在不同生物體內(nèi)正常表達(dá)原來的蛋白質(zhì), ,說明整個(gè)生物界說明整個(gè)生物界。 PCRPCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于定點(diǎn)突變技術(shù)屬于的范疇。的范疇。 (3)(3)可利用定點(diǎn)突變的可利用定點(diǎn)突變的DNADNA構(gòu)建基因表達(dá)載體。常用構(gòu)建基因表達(dá)載體。常用法將基法將基 因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞, ,還需用到植物細(xì)胞工程中的還需用到植物細(xì)胞工程中的技術(shù)技術(shù) 來最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。來最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。 【解析解析】(1)PCR(1)PCR
43、依據(jù)的原理是依據(jù)的原理是DNADNA雙鏈復(fù)制雙鏈復(fù)制, ,在用在用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因前要依技術(shù)擴(kuò)增目的基因前要依 據(jù)一段已知目的基因的脫氧核苷酸序列合成引物據(jù)一段已知目的基因的脫氧核苷酸序列合成引物; ;擴(kuò)增過程需要加入耐高溫的擴(kuò)增過程需要加入耐高溫的 DNADNA聚合聚合( (或或TaqDNATaqDNA聚合聚合) )酶。酶。 (2)(2)啟動(dòng)子是啟動(dòng)子是RNARNA聚合酶識別和結(jié)合的部位聚合酶識別和結(jié)合的部位, ,可驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出可驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA;mRNA;因生物界因生物界 共用一套遺傳密碼共用一套遺傳密碼, ,所以目的基因可以在不同細(xì)胞內(nèi)表達(dá)合成相同蛋白質(zhì)。所以目的基因
44、可以在不同細(xì)胞內(nèi)表達(dá)合成相同蛋白質(zhì)。 (3)(3)常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞, ,借助于植物組織培養(yǎng)技借助于植物組織培養(yǎng)技 術(shù)術(shù), ,獲得轉(zhuǎn)基因植物。獲得轉(zhuǎn)基因植物。 答案答案: :(1)DNA(1)DNA雙鏈復(fù)制引物耐高溫的雙鏈復(fù)制引物耐高溫的DNADNA聚合聚合( (或或TaqDNATaqDNA聚合聚合) ) (2)RNA(2)RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位聚合酶識別和結(jié)合的部位, ,可驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出可驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNAmRNA共用一套密碼子共用一套密碼子 蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程 (3)(3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化植物組織培養(yǎng)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化植物組織
45、培養(yǎng) 8.(128.(12分分) )弓形蟲病是全球性分布和流行的人畜共患病弓形蟲病是全球性分布和流行的人畜共患病, ,弓形蟲寄生在人和動(dòng)物弓形蟲寄生在人和動(dòng)物 的有核細(xì)胞內(nèi)的有核細(xì)胞內(nèi), ,危害嚴(yán)重。近年來危害嚴(yán)重。近年來, ,隨著對弓形蟲相關(guān)基因和抗原結(jié)構(gòu)的研究隨著對弓形蟲相關(guān)基因和抗原結(jié)構(gòu)的研究 的不斷深入的不斷深入, ,弓形蟲基因工程疫苗的研發(fā)取得了重大進(jìn)展??茖W(xué)家發(fā)現(xiàn)弓形蟲基因工程疫苗的研發(fā)取得了重大進(jìn)展。科學(xué)家發(fā)現(xiàn), ,弓形弓形 蟲蟲DNADNA中有一段中有一段P30P30基因基因, ,該基因突變會(huì)使弓形蟲的侵染能力顯著下降。據(jù)此該基因突變會(huì)使弓形蟲的侵染能力顯著下降。據(jù)此, , 他
46、們構(gòu)建了弓形蟲他們構(gòu)建了弓形蟲P30P30基因的乳酸乳球菌表達(dá)質(zhì)?;虻娜樗崛榍蚓磉_(dá)質(zhì)粒L2Ps-P30-T (L2Ps-P30-T (表達(dá)載體表達(dá)載體) )。 請回答有關(guān)基因工程疫苗的問題。請回答有關(guān)基因工程疫苗的問題。 (1)(1)弓形蟲與乳酸乳球菌相比較弓形蟲與乳酸乳球菌相比較, ,弓形蟲的弓形蟲的DNADNA主要以主要以和和 的形式存在。的形式存在。 (2)(2)基因工程中基因工程中, ,檢測弓形蟲檢測弓形蟲DNADNA或疫苗目的基因可采用的方法是或疫苗目的基因可采用的方法是 雜交技術(shù)。雜交技術(shù)。 (3)(3)如果表達(dá)質(zhì)粒如果表達(dá)質(zhì)粒L2Ps-P30-TL2Ps-P30-T在乳酸乳球菌中的表達(dá)產(chǎn)物在乳酸乳球菌中的表達(dá)產(chǎn)物, ,能使小鼠對弓形蟲能使小鼠對弓形蟲 感染具有免疫力感染具有免疫力, ,該表達(dá)產(chǎn)物屬于該表達(dá)產(chǎn)物屬于( (填填“抗原抗原”或或“抗體抗體”) )。該表達(dá)。該表達(dá) 質(zhì)粒除了具有質(zhì)粒除了具有L2Ps-P30-TL2Ps-P30-T、抗生素基因外、抗生素基因外, ,還必須具有的結(jié)構(gòu)是還必須具有的結(jié)構(gòu)是_ _。 (4)(4)科學(xué)家還發(fā)現(xiàn)科學(xué)家還發(fā)現(xiàn), ,一類一類MIC2MIC2
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