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1、第十二章 蛋白質(zhì)的生物合成 一、知識(shí)要點(diǎn) (一)蛋白質(zhì)生物合成體系的重要組分 蛋白質(zhì)生物合成體系的重要組分主要包括mRNA 、tRNA 、rRNA、有關(guān)的酶以及幾十種蛋白質(zhì)因子。其中,mRNA是蛋白質(zhì)生物合成的直接模板。tRNA的作用體現(xiàn)在三個(gè)方面:3CCA接受氨基酸;反密碼子識(shí)別mRNA鏈上的密碼子;連接多肽鏈和核糖體。rRNA和幾十種蛋白質(zhì)組成合成蛋白質(zhì)的場(chǎng)所核糖體。 遺傳密碼的特點(diǎn):無標(biāo)點(diǎn)性、無重疊性;通用性和例外;簡(jiǎn)并性;變偶性。 (二)蛋白質(zhì)白質(zhì)生物合成的過程 蛋白質(zhì)生物合成的過程分四個(gè)步驟:氨基酸活化、肽鏈合成的起始、延伸、終止和釋放。 其中,氨基酸活化即氨酰tRNA的合成,反應(yīng)由
2、特異的氨酰tRNA合成酶催化,在胞液中進(jìn)行。氨酰tRNA合成酶既能識(shí)別特異的氨基酸,又能辯認(rèn)攜帶該氨?;囊唤M同功受體tRNA分子。 肽鏈合成的起始對(duì)于大腸桿菌等原核細(xì)胞來說,是70S起始復(fù)合物的形成。它需要核糖體30S和50S亞基、帶有起始密碼子AUG的mRNA、fMet-tRNA、起始因子IF、IF、IF3f 122+的參加。 和Mg和21 000的蛋白質(zhì))以及GTP(分子量分別為10 000、80 000肽鏈合成的延伸需要70S起始復(fù)合物、氨酰-tRNA、三種延伸因子:一種是熱不穩(wěn)定的2+。Mg EF-G以及GTP和EF-Tu,另一種是熱穩(wěn)定的EF-Ts,第三種是依賴GTP的肽鏈合成的終
3、止和釋放需要三個(gè)終止因子RF、RF、RF蛋白的參與。 312比較真核細(xì)胞蛋白質(zhì)生物合成與原核細(xì)胞的不同。 (三)蛋白質(zhì)合成后的修飾 蛋白質(zhì)合成后的幾種修飾方式:氨基末端的甲酰甲硫氨酸的切除、肽鏈的折疊、氨基酸殘基的修飾、切去一段肽鏈。 二、習(xí) 題 (一)(一)名詞解釋 1密碼子(codon) 2反義密碼子(synonymous codon) 3反密碼子(anticodon) 4變偶假說(wobble hypothesis) 5移碼突變(frameshift mutant) 6氨基酸同功受體(isoacceptor) 7反義RNA(antisense RNA) 8信號(hào)肽(signal pepti
4、de) 9簡(jiǎn)并密碼(degenerate code) 10核糖體(ribosome) 11多核糖體(poly some) 12氨?;课?aminoacyl site) 13肽酰基部位(peptidy site) 14肽基轉(zhuǎn)移酶(peptidyl transferase) 15氨酰- tRNA合成酶(amino acy-tRNA synthetase) 16蛋白質(zhì)折疊(protein folding) 17核蛋白體循環(huán)(polyribosome) 18鋅指(zine finger) 19亮氨酸拉鏈(leucine zipper) 20順式作用元件(cis-acting element) 21反
5、式作用因子(trans-acting factor) 22螺旋-環(huán)-螺旋(helix-loop-helix) (二)英文縮寫符號(hào)1IF(initiation factor): 2EF(elongation factor): 3RF(release factor): 4hnRNA(heterogeneous nuclear RNA): 5fMet-tRNA: f 6Met-tRNA: i (三) 填空題 1蛋白質(zhì)的生物合成是以_作為模板,_作為運(yùn)輸氨基酸的工具,_作為合成的場(chǎng)所。 2細(xì)胞內(nèi)多肽鏈合成的方向是從_端到_端,而閱讀mRNA的方向是從_端到_端。 3核糖體上能夠結(jié)合tRNA的部位有_部
6、位,_部位。 4蛋白質(zhì)的生物合成通常以_作為起始密碼子,有時(shí)也以_作為起始密碼子,以_,_,和_作為終止密碼子。 5SD序列是指原核細(xì)胞mRNA的5端富含_堿基的序列,它可以和16SrRNA的3端的_ 序列互補(bǔ)配對(duì),而幫助起始密碼子的識(shí)別。 6原核生物蛋白質(zhì)合成的起始因子(IF)有_種,延伸因子(EF)有_種,終止釋放(RF) 有_種;而真核生物細(xì)胞質(zhì)蛋白質(zhì)合成的延伸因子通常有_種,真菌有_種,終止釋放因子有_種。 7原核生物蛋白質(zhì)合成中第一個(gè)被摻入的氨基酸是_。 8無細(xì)胞翻譯系統(tǒng)翻譯出來的多肽鏈通常比在完整的細(xì)胞中翻譯的產(chǎn)物要長(zhǎng),這是因?yàn)開。 9已發(fā)現(xiàn)體內(nèi)大多數(shù)蛋白質(zhì)正確的構(gòu)象的形成需要_的
7、幫助。 10分子伴侶通常具_(dá)酶的活性。 11蛋白質(zhì)內(nèi)含子通常具有_酶的活性。 12某一tRNA的反密碼子是GGC,它可識(shí)別的密碼子為_和_。 13環(huán)狀RNA不能有效地作為真核生物翻譯系統(tǒng)的模板是因?yàn)開。 14在真核細(xì)胞中,mRNA是由_經(jīng)_合成的,它攜帶著_。它是由_降解成的,大多數(shù)真核細(xì)胞的mRNA只編碼_。 15生物界總共有_個(gè)密碼子。其中_個(gè)為氨基酸編碼;起始密碼子為_;終止密碼子為_,_,_。 16氨酰- tRNA合成酶對(duì)_和_均有專一性,它至少有兩個(gè)識(shí)別位點(diǎn)。 17原核細(xì)胞內(nèi)起始氨酰- tRNA為_ _;真核細(xì)胞內(nèi)起始氨酰- tRNA為 _。 18原核生物核糖體50S亞基含有蛋白質(zhì)合
8、成的_部位和_部位,而mRNA結(jié)合部位_。 19許多生物核糖體連接于一個(gè)mRNA形成的復(fù)合物稱為_。 20肽基轉(zhuǎn)移酶在蛋白質(zhì)生物合成中的作用是催化_和_。 21核糖體_亞基上的_協(xié)助識(shí)別起始密碼子。 22延長(zhǎng)因子G又稱_,它的功能是_,但需要_。 23ORF是指_,已發(fā)現(xiàn)最小的ORF只編碼_個(gè)氨基酸。 24基因表達(dá)包括_和_。 25遺傳密碼的特點(diǎn)有方向性、連續(xù)性_和_。 26氨酰- tRNA合成酶利用_供能,在氨基酸_基上進(jìn)行活化,形成氨基酸AMP中間復(fù)合物。 27原核生物肽鏈合成啟始復(fù)合體由mRNA _和_組成。 28真核生物肽鏈合成啟始復(fù)合體由mRNA _和_組成。 29肽鏈延伸包括進(jìn)位_
9、和_三個(gè)步驟周而復(fù)始的進(jìn)行。 。_和_原核生物肽鏈合成后的加工包括3031鏈霉素和卡那霉素能與核蛋白體_亞基結(jié)合,改變其構(gòu)象,引起_導(dǎo)致合成的多肽鏈一級(jí)結(jié)構(gòu)改變。 32氯霉素能與核蛋白體_亞基結(jié)合,抑制_酶活性,從而抑制蛋白質(zhì)合成。 33乳糖操縱子的控制區(qū)啟動(dòng)子上游有_結(jié)合位點(diǎn),當(dāng)此位點(diǎn)與_結(jié)合時(shí),轉(zhuǎn)錄可增強(qiáng)一千倍左右。 34真核生物蛋白質(zhì)因子與DNA相互作用的基元較常見的有_和_。 35乳糖操縱子的誘導(dǎo)物是_,色氨酸操縱子的輔阻遏物是_。 36分泌性蛋白質(zhì)多肽鏈合成后的加工包括_、剪裁和天然構(gòu)象的形成。 37Ras癌基因的產(chǎn)物是_,src癌基因的產(chǎn)物是_。 (四)選擇題 1預(yù)測(cè)一下哪一種氨酰
10、- tRNA合成酶不需要有較對(duì)的功能: A甘氨酰- tRNA合成酶 B丙氨酰- tRNA合成酶 C精氨酰- tRNA合成酶 D谷氨酰- tRNA合成酶 2某一種tRNA的反密碼子是5UGA3,它識(shí)別的密碼子序列是: AUCA BACU CUCG DGCU 3為蛋白質(zhì)生物合成中肽鏈延伸提供能量的是: AATP BCTP CGTP DUTP 4一個(gè)N端氨基酸為丙氨酸的20肽,其開放閱讀框架至少應(yīng)由多少核苷酸殘基組成: A60 B63 C66 D69 5在蛋白質(zhì)生物合成中tRNA的作用是: A將一個(gè)氨基酸連接到另一個(gè)氨基酸上 B把氨基酸帶到mRNA指定的位置上 C增加氨基酸的有效濃度 D將mRNA連
11、接到核糖體上 6下列對(duì)原核細(xì)胞mRNA的論述那些是正確的: A原核細(xì)胞的mRNA多數(shù)是單順反子的產(chǎn)物 B多順反子mRNA在轉(zhuǎn)錄后加工中切割成單順反子mRNA C多順反子mRNA翻譯成一個(gè)大的蛋白質(zhì)前體,在翻譯后加工中裂解成若干成熟的蛋白質(zhì) D多順反子mRNA上每個(gè)順反子都有自己的起始和終止密碼子;分別翻譯成各自的產(chǎn)物 7在蛋白質(zhì)分子中下面所列舉的氨基酸哪一種最不容易突變? AArg BGlu CVal DAsp 8根據(jù)擺動(dòng)學(xué)說,當(dāng)一個(gè)tRNA分子上的反密碼子的第一個(gè)堿基為次黃嘌呤時(shí),它可以和mRNA密碼子的第三位的幾種堿基配對(duì): A1 B2 C3 D4 9以下有關(guān)核糖體的論述哪項(xiàng)是不正確的:
12、A核糖體是蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所 B核糖體小亞基參與翻譯起始復(fù)合物的形成,確定mRNA的解讀框架 C核糖體大亞基含有肽基轉(zhuǎn)移酶活性 D核糖體是儲(chǔ)藏核糖核酸的細(xì)胞器 10關(guān)于密碼子的下列描述,其中錯(cuò)誤的是: A每個(gè)密碼子由三個(gè)堿基組成 B每一密碼子代表一種氨基酸 C每種氨基酸只有一個(gè)密碼子 D有些密碼子不代表任何氨基酸 11如果遺傳密碼是四聯(lián)體密碼而不是三聯(lián)體,而且tRNA反密碼子前兩個(gè)核苷酸處于擺動(dòng)的位置,那么蛋白質(zhì)正常合成大概需要多少種tRNA: A約256種不同的tRNA B150250種不同的tRNA C與三聯(lián)體密碼差不多的數(shù)目 D取決于氨酰-tRNA合成酶的種類 12擺動(dòng)配對(duì)是指下列哪個(gè)堿基
13、之間配對(duì)不嚴(yán)格: A反密碼子第一個(gè)堿基與密碼子第三個(gè)堿基 反密碼子第三個(gè)堿基與密碼子第一個(gè)堿基BC反密碼子和密碼子第一個(gè)堿基 D反密碼子和密碼子第三個(gè)堿基 13在蛋白質(zhì)合成中,把一個(gè)游離氨基酸摻入到多肽鏈共須消耗多少高能磷酸鍵: A1 B2 C3 D4 14蛋白質(zhì)的生物合成中肽鏈延伸的方向是: AC端到N端 B從N端到C端 C定點(diǎn)雙向進(jìn)行 DC端和N端同時(shí)進(jìn)行 15核糖體上A位點(diǎn)的作用是: A接受新的氨基酰-tRNA到位 B含有肽機(jī)轉(zhuǎn)移酶活性,催化肽鍵的形成 C可水解肽酰tRNA、釋放多肽鏈 D是合成多肽鏈的起始點(diǎn) 16蛋白質(zhì)的終止信號(hào)是由: AtRNA識(shí)別 B轉(zhuǎn)肽酶識(shí)別 C延長(zhǎng)因子識(shí)別 D以
14、上都不能識(shí)別 17下列屬于順式作用元件的是: A啟動(dòng)子 B結(jié)構(gòu)基因 C RNA聚合酶 D 錄因子 18下列屬于反式作用因子的是: A啟動(dòng)子 B增強(qiáng)子 C終止子 D轉(zhuǎn)錄因子 19下列有關(guān)癌基因的論述,哪一項(xiàng)是正確的: A癌基因只存在病毒中 B細(xì)胞癌基因來源于病毒基因 C癌基因是根據(jù)其功能命名的 D細(xì)胞癌基因是正?;虻囊徊糠?20下列何者是抑癌基因 Aras基因 Bsis基因 CP基因 Dsrc基因 53(五)是非判斷題 ( )1由于遺傳密碼的通用性真核細(xì)胞的mRNA可在原核翻譯系統(tǒng)中得到正常的翻譯。 ( )2核糖體蛋白不僅僅參與蛋白質(zhì)的生物合成。 ( )3在翻譯起始階段,有完整的核糖體與mRN
15、A的5端結(jié)合,從而開始蛋白質(zhì)的合成。 ( )4所有的氨酰-tRNA的合成都需要相應(yīng)的氨酰-TRNA合成酶的催化。 ( )5EF-Tu的GTPase 活性越高,翻譯的速度就越快,但翻譯的忠實(shí)性越低。 ( )6在蛋白質(zhì)生物合成中所有的氨酰-tRNA都是首先進(jìn)入核糖體的A部位。 ( )7tRNA的個(gè)性即是其特有的三葉草結(jié)構(gòu)。 ( )8從DNA分子的三聯(lián)體密碼可以毫不懷疑的推斷出某一多肽的氨基酸序列,但氨基酸序列并不能準(zhǔn)確的推導(dǎo)出相應(yīng)基因的核苷酸序列。 ( )9與核糖體蛋白相比,rRNA僅僅作為核糖體的結(jié)構(gòu)骨架,在蛋白質(zhì)合成中沒有什么直接的作用。 ( )10多肽鏈的折疊發(fā)生在蛋白質(zhì)合成結(jié)束以后才開始。
16、 ( )11人工合成多肽的方向也是從N端到C端。 ( )12核糖體活性中心的A位和P位均在大亞基上。 ( )13蛋白質(zhì)合成過程中所需的能量都由ATP直接供給。 ( )14每個(gè)氨酰-tRNA進(jìn)入核糖體的A位都需要延長(zhǎng)因子的參與,并消耗一分子GTP。 ( )15每種氨基酸只能有一種特定的tRNA與之對(duì)應(yīng)。 ( )16密碼子與反密碼子都是由AGCU 4種堿基構(gòu)成的。 ( )17泛素是一種熱激蛋白。 ( )18原核細(xì)胞新生肽鏈N端第一個(gè)殘基為fMet;真核細(xì)胞新生肽鏈N端為Met。 ( )19蛋白質(zhì)合成過程中,肽基轉(zhuǎn)移酶起轉(zhuǎn)肽作用核水解肽鏈作用。 ( )20色氨酸操縱子中存在衰減子,故此操縱系統(tǒng)有細(xì)調(diào)
17、節(jié)功能。 (六)問答題 7GTP 能夠抑制真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成,但不抑制原核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成?相反什么1m人工合成的SD序列能夠抑制原核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成,但不抑制真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)合成? 遺傳密碼如何編碼?有哪些基本特性?23簡(jiǎn)述tRNA在蛋白質(zhì)的生物合成中是如何起作用的? 4mRNA遺傳密碼排列順序翻譯成多肽鏈的氨基酸排列順序,保證準(zhǔn)確翻譯的關(guān)鍵是什么? 5述真核生物反式作用因子與DNA靶區(qū)和RNA聚合酶相互作用的基本方式。 6癌基因異常激活有哪些方式? 7簡(jiǎn)述抑癌基因與癌變的關(guān)系。 三、參考答案 (一) (一)名詞解釋 ? 11密碼子(codon):存在于信使RNA中的三個(gè)相鄰的核苷酸順序,
18、是蛋白質(zhì)合成中某一特定氨基酸的密碼單位。密碼子確定哪一種氨基酸叁入蛋白質(zhì)多肽鏈的特定位置上;共有64個(gè)密碼子,其中61個(gè)是氨基酸的密碼,3個(gè)是作為終止密碼子。 22同義密碼子(synonym codon):為同一種氨基酸編碼的幾個(gè)密碼子之一,例如密碼子UUU和UUC 二者都為苯丙氨酸編碼。 33反密碼子(anticodon):在轉(zhuǎn)移RNA反密碼子環(huán)中的三個(gè)核苷酸的序列,在蛋白質(zhì)合成中通過互補(bǔ)的堿基配對(duì),這部分結(jié)合到信使RNA的特殊密碼上。 44變偶假說(Wobble hypothesis):克里克為解釋tRNA分子如何去識(shí)別不止一個(gè)密碼子而提出的一種假說。據(jù)此假說,反密碼子的前兩個(gè)堿基(3端)
19、按照堿基配對(duì)的一般規(guī)律與密碼子的前兩個(gè)(5端)堿基配對(duì),然而tRNA反密碼子中的第三個(gè)堿基,在與密碼子上3端的堿基形成氫鍵時(shí),則可有某種程度的變動(dòng),使其有可能與幾種不同的堿基配對(duì)。 55移碼突變(frame-shift mutation):一種突變,其結(jié)果為導(dǎo)致核酸的核苷酸順序之間的正常關(guān)系發(fā)生改變。移碼突變是由刪去或插入一個(gè)核苷酸的點(diǎn)突變構(gòu)成的,在這種情況下,突變點(diǎn)以前的密碼子并不改變,并將決定正確的氨基酸順序;但突變點(diǎn)以后的所有密碼子都將改變。且將決定錯(cuò)誤的氨基酸順序。 6氨基酸同功受體(isoacceptor):每一個(gè)氨基酸可以有多過一個(gè)tRNA作為運(yùn)載工具,這些tRNA稱為該氨基酸同功
20、受體。 7反義RNA(antisense RNA):具有互補(bǔ)序列的RNA。反義RNA可以通過互補(bǔ)序列與特定的mRNA相結(jié)合,結(jié)合位置包括mRNA 結(jié)合核糖體的序列(SD序列)和起始密碼子AUG,從而抑制mRNA 的翻譯。又稱干擾mRNA 的互補(bǔ)RNA。 88信號(hào)肽(signal peptide): 信號(hào)肽假說認(rèn)為,編碼分泌蛋白的mRNA在翻譯時(shí)首先合成的是N 末端帶有疏水氨基酸殘基的信號(hào)肽,它被內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的受體識(shí)別并與之相結(jié)合。信號(hào)肽經(jīng)由膜中蛋白質(zhì)形成的孔道到達(dá)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)腔,隨即被位于腔表面的信號(hào)肽酶水解,由于它的引導(dǎo),新生的多肽就能夠通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜進(jìn)入腔內(nèi),最終被分泌到胞外。翻譯結(jié)束后,核糖體亞
21、基解聚、孔道消失,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜又恢復(fù)原先的脂雙層結(jié)構(gòu)。 9. 簡(jiǎn)并密碼(degenerate codon):或稱同義密碼子(synonym codon),為同一種氨基酸編碼幾個(gè)密碼子之一,例如密碼子UUU和UUC二者都為苯丙氨酸編碼。 10.核糖體(ribosome): 核糖體是很多亞細(xì)胞核蛋白顆粒中的一個(gè),由大約等量的RNA 和蛋白質(zhì)所組成,是細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所。每個(gè)核糖核蛋白體在外形上近似圓形,直徑約為20nm。由兩個(gè)不相同的亞基組成,這兩個(gè)亞基通過鎂離子和其它非共價(jià)鍵地結(jié)合在一起。已證實(shí)有四類核糖核蛋白體(細(xì)菌、植物、動(dòng)物和線粒體)它們以其單體的、亞單位的和核糖核蛋白體RNA的沉降系數(shù)相
22、區(qū)別。細(xì)菌核蛋白體含有約50個(gè)不同的蛋白質(zhì)分子和3個(gè)不同的RNA分子。小的亞單位含有約20個(gè)蛋白質(zhì)分子和1個(gè)RNA分子。大的亞單位含有約30個(gè)蛋白質(zhì)分子和2個(gè)RNA 分子。核蛋白體有兩個(gè)結(jié)合轉(zhuǎn)移RNA的部位(部位和部位),并且也能附上信使RNA,簡(jiǎn)寫為Rb。 11多核糖體(polysome):在信使核糖核酸鏈上附著兩個(gè)或更多的核糖體。 12氨酰基部位(aminoacyl site):在蛋白質(zhì)合成過程中進(jìn)入的氨酰-tRNA結(jié)合在核蛋白體上的部位。 13肽酰基部位(peptidy site):指在蛋白質(zhì)合成過程中,當(dāng)下一個(gè)氨?;D(zhuǎn)移RNA接到核糖核蛋白體的氨基部位時(shí),肽酰tRNA所在核蛋白體上的結(jié)
23、合點(diǎn)。 14肽基轉(zhuǎn)移酶(peptidyl transferase):蛋白質(zhì)合成中的一種酶。它能催化正在增長(zhǎng)的多肽核糖核蛋白體亞單位中的蛋白50S鏈與下一個(gè)氨基酸之間形成肽鍵。在細(xì)菌中此酶是質(zhì)之一。 15氨酰-tRNA合成酶(amino acy-tRNA synthetase):催化氨基酸激活的偶聯(lián)反應(yīng)的酶,先是一種氨基酸連接到AMP生成一種氨酰腺苷酸,然后連接到轉(zhuǎn)移RNA分子生成氨酰-tRNA分子。 16蛋白質(zhì)折疊(protein folding):蛋白質(zhì)的三維構(gòu)象,稱為蛋白質(zhì)的折疊。是由蛋白質(zhì)多肽鏈的氨基酸順序所決定的。不同的蛋白質(zhì)有不同的氨基酸順序,也就各自按照一定的方式折疊而成該蛋白質(zhì)獨(dú)
24、有的天然構(gòu)象。這個(gè)蛋白質(zhì)折疊是在自然條件下自發(fā)進(jìn)行的,在生物體內(nèi)條件下,它是在熱力學(xué)上最穩(wěn)定的形式。多肽鏈在核糖體上一面延長(zhǎng),一面自發(fā)地折疊成其本身獨(dú)有的構(gòu)象。當(dāng)肽鏈終止延長(zhǎng)并從核糖體上脫落時(shí),它也就折疊成天然的三維結(jié)構(gòu)。 17核蛋白體循環(huán)(polyribosome):是指已活化的氨基酸由tRNA轉(zhuǎn)運(yùn)到核蛋白體合成多肽鏈的過程。 18鋅指(zine finger):是調(diào)控轉(zhuǎn)錄的蛋白質(zhì)因子中與DNA結(jié)合的一種基元,它由大約30個(gè)氨基酸殘基的肽段與鋅螯合形成的指形結(jié)構(gòu),鋅以4個(gè)配位鍵與肽鏈的Cys或His殘基結(jié)合,指形突起的肽段含12-13個(gè)氨基酸殘基,指形突起嵌入DNA的大溝中,由指形突起或其附
25、近的某些氨基酸側(cè)鏈與DNA的堿基結(jié)合而實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)合。 19亮氨酸拉鏈(leucine zipper):這是真核生物轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白與蛋白質(zhì)及與DNA結(jié)合的基元之一。兩個(gè)蛋白質(zhì)分子近處C 端肽段各自形成兩性-螺旋,-螺旋的肽段每隔7個(gè)氨基酸殘基出現(xiàn)一個(gè)亮氨酸殘基,兩個(gè)-螺旋 的疏水面互相靠攏,兩排亮氨酸殘基疏水側(cè)鏈排列成拉鏈狀形成疏水鍵使蛋白質(zhì)結(jié)合成二聚體,-螺旋的上游富含堿性氨基酸(Arg 、Lys)肽段借Arg 、Lys 側(cè)鏈基團(tuán)與DNA的堿基互相結(jié)合而實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)與DNA的特異結(jié)合。 20順式作用元件(cis-acting element):真核生物DNA的轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子和增強(qiáng)子等序列,
26、合稱順式作用元件。 21反式作用因子(trans-acting factor):調(diào)控轉(zhuǎn)錄的各種蛋白質(zhì)因子總稱反式作用因子。 22螺旋環(huán)螺旋(helix-loop-helix):這種蛋白質(zhì)基元由兩個(gè)兩性螺旋通過一個(gè)肽段連結(jié)形成螺旋環(huán)螺旋結(jié)構(gòu),兩個(gè)蛋白質(zhì)通過兩性螺旋的疏水面互相結(jié)合,與DNA的結(jié)合則依靠此基元附近的堿性氨基酸側(cè)鏈基團(tuán)與DNA的堿基結(jié)合而實(shí)現(xiàn)。 (二) (二)英文縮寫符號(hào) ? 1IF(initiation factor):原核生物蛋白質(zhì)合成的起始因子。 2EF(elongation factor):原核生物蛋白質(zhì)合成的延伸因子。 3RF(release factor):原核生物蛋白質(zhì)
27、合成的終止因子(釋放因子)。 4hnRNA(heterogeneous nuclear RNA):核不均一RNA。 5fMet-tRNA:原核生物蛋白質(zhì)合成的第一個(gè)氨?;D(zhuǎn)移RNA。 f 6Met-tRNA:真核生物蛋白質(zhì)合成的第一個(gè)氨酰基轉(zhuǎn)移RNA。 i (三) (三)填空題 1mRNA;tRNA;核糖體 2N端C端;5端3端 3P位點(diǎn);A位點(diǎn)。 4AUG;GUG;UAA;UAG; UGA 5嘌呤;嘧啶 63;3;3;2;3;1 7甲酰甲硫氨酸 8沒有經(jīng)歷后加工,如剪切 9分子伴侶 10 ATPase 11核酸內(nèi)切酶 12GCU;GCC 13缺乏帽子結(jié)構(gòu),無法識(shí)別起始密碼子 ;一條多肽鏈hn
28、RNA的遺傳信息;DNA;轉(zhuǎn)錄;DNA141564;61;AUG;UAA;UAG;UGA 16氨基酸;tRNA 17 fMet-tRNA ;Met-tRNA 18氨酰基;肽?;?;大小亞基的接觸面上 19多核糖體 20肽鍵的形成;肽鏈從tRNA上分離出來 21小亞基;16SRNA 22移位酶;催化核糖體沿mRNA移動(dòng); GTP 23開放的閱讀框架;7 24轉(zhuǎn)錄;翻譯 25簡(jiǎn)并性;通用性 26ATP;羧 fMet .fMet-tRNA核蛋白體;70S27iMet Met-tRNA80S核蛋白體;2829轉(zhuǎn)肽、移位 30剪裁;天然構(gòu)象的形成 3130S;讀碼錯(cuò)誤 3250S;肽基轉(zhuǎn)移 33分解代謝基
29、因活化蛋白;CAP-cAMP復(fù)合物 34鋅指、亮氨酸拉鏈 35別乳糖、色氨酸 36信號(hào)肽的水解切除 37P21蛋白;PP60蛋白 (四) (四)選擇題 1A:甘氨酸是20種基本氨基酸中唯一的一個(gè)不具旋光性的氨基酸,甘氨酰- tRNA合成酶很容易將它與其他的氨基酸分開,不會(huì)出現(xiàn)誤載的情況。 2A:讀碼順序均為53。 3C:肽鏈延伸包括進(jìn)位、成肽、移位三個(gè)步驟,進(jìn)位、移位分別消耗一分子GTP。 4C:該開放的閱讀框架由203(起始密碼子)+3(終止密碼子)=66個(gè)核苷酸組成。 5B:TRNA分子的3端的堿基順序是CCA,“活化”的氨基酸的羧基連接到3末端腺苷的核糖3-OH上,形成氨酰-tRNA。
30、6D: 7A:4種氨基酸中Arg的同義密碼子最多,為6個(gè),因此堿基突變對(duì)它的影響最少。 8C:根據(jù)擺動(dòng)學(xué)說,如果反密碼子的第一個(gè)堿基為次黃嘌呤時(shí),它可以與U、C、或A配對(duì)。 9D:核糖體是儲(chǔ)藏核糖核酸的細(xì)胞器。 10C: 11C: 12A: 13D:活化時(shí)消耗一分子ATP中兩個(gè)高能磷酸鍵;延伸時(shí)消耗兩分子GTP。 14B:第一個(gè)氨基酸的氨基和第二個(gè)氨基酸的羧基形成肽鍵,所以蛋白質(zhì)合成方向是NC。 15A: 16D:蛋白質(zhì)終止過程是終止因子RF和RF識(shí)別mRNA上的終止密碼子。 2117A:真核生物DNA的轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子和增強(qiáng)子等序列,合稱順式作用元件。 18D:調(diào)控轉(zhuǎn)錄的各種蛋白質(zhì)因子總稱反式作用
31、因子。 19D: 20C: (五) (五)是非判斷題 序列,因此在原核細(xì)胞翻譯系統(tǒng)中,不能有效地翻SD端無5的mRNA錯(cuò):真核細(xì)胞1譯。 2對(duì):核糖體蛋白質(zhì)可在核糖外參與復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、后加工等過程。 3錯(cuò):核糖體需要解離成大小兩個(gè)亞基才能夠與mRNA結(jié)合,啟動(dòng)翻譯。 4錯(cuò):某些生物缺乏谷氨冬酰胺-tRNA合成酶或天冬酰胺酰-tRNA合成酶,相應(yīng)的Gln-tRNAAsn-tRNAGlnAsn的合成先是由谷氨酰-tRNA合成酶或天冬氨酰-tRNA合成酶催化形誤載的Glu-tRNAGlnAsp-tRNAAsn,再經(jīng)過酰胺化反應(yīng)生成Gln-tRNA或Asn-tRNAAsn。 5對(duì):EF-Tu的GTPas
32、e 活性越高,允許密碼子和反密碼子校對(duì)的時(shí)間就越短,因而忠實(shí)性就降低,而翻譯的速度反而提高。 6錯(cuò):起始tRNA進(jìn)入P位點(diǎn)。 7錯(cuò): tRNA是一個(gè)tRNA分子上決定所攜帶氨基酸性質(zhì)的核苷酸序列和阻止其它氨基酸被攜帶的核苷酸序列。不同種的tRNA的個(gè)性是不同的。 8錯(cuò):從DNA的核苷酸序列并不能始終根據(jù)三聯(lián)體密碼推斷出某一蛋白質(zhì)的氨基酸序列,這是因?yàn)槟承┑鞍踪|(zhì)的翻譯經(jīng)歷再次程序化的解碼,而且大多數(shù)真核細(xì)胞的蛋白質(zhì)基因?yàn)閿嗔鸦颉?9錯(cuò):越來越多的證據(jù)表明rRNA在翻譯中,決不是僅僅充當(dāng)組裝核糖體的結(jié)構(gòu)骨架作用,它能主動(dòng)參與蛋白質(zhì)的合成,如作為ribozyme發(fā)揮作用。 10錯(cuò):多數(shù)多肽鏈的折疊與肽鏈延伸反應(yīng)同時(shí)進(jìn)行。 11錯(cuò):人工合成多肽的方向正好與體內(nèi)的多肽鏈延伸的方向相反,是從C端到N端。 12錯(cuò):核糖體活性中心的A位和P位均在大亞基上。 13錯(cuò):蛋白質(zhì)合成過程中所需的能量都由ATP直接供給。 14對(duì):每個(gè)氨酰-tRNA進(jìn)入核糖體的A位都需要延長(zhǎng)因子的參與,并消耗一分子GTP。 15錯(cuò):每種氨基酸只能有一種特定的tRNA與之對(duì)應(yīng)。 16錯(cuò):反密碼子中含有胸腺嘧啶堿基(T)。 17對(duì):泛素是一種熱激蛋白,它在溫度升高的情
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