兔實驗技術(shù)操作

1、、兔的抓取及保定1. 準(zhǔn)備的物品、器械：固定器2. 簡要：（1）徒手抓?。?）保定3. 解說操作: 徒手抓取1）。也用一只手將頸部的被毛和皮膚一起抓住提起，另一只手托住臀部。（如圖 可一手抓住兔肩胛部的皮膚，另一手托住其臀部并將兔的頭部放置于臂彎中，再用前臂支撐兔體。3丿保定 將兔放在操作臺上，用一只手抓住頸背部皮膚（包括兔耳），另一只手壓住腰部（或 后肢）加以保定，可用于肌肉注射、灌胃等操作。將兔放在操作臺上，用左手抓住頸背部皮膚，使兔下半身固定在操作者左臂下方，用 右手環(huán)抱兔前肢，適用于孕兔灌胃等操作。如圖 2。盒式保定法：將兔放入兔保定盒內(nèi)，蓋上蓋，使兔頭露在盒外，便可進(jìn)行采血或注射 給

2、藥等操作。保定板保定：將兔仰臥或俯臥在保定板上，用布帶保定，四肢和頭部也用布帶保定, 即可進(jìn)行心電圖檢查、注射給藥、采血等操作。4. 注意事項蓋兔盒時必須要輕， 不能用力壓， 否則兔脊椎骨很容易骨折， 造成下肢癱瘓。將家兔放回兔籠時，先將臀部及后肢放入籠內(nèi)。抓取時禁止抓提兔耳。抓取要穩(wěn)、準(zhǔn)、柔、快，不可過分用力抓捏腰腹部。兔的采血方法1. 準(zhǔn)備的物品、器械：注射器、采血管、止血帶、酒精棉球、干棉球、保定架 等2. 簡要：耳靜脈采血、耳動脈采血、后肢靜脈采血、心臟采血3. 解說操作耳緣靜脈或耳動脈采血將兔保定于保定器內(nèi)，用酒精棉球擦拭消毒。助手固定兔耳， 并壓迫耳緣靜脈根部，使血管充盈；操作者手

3、持注射器， 針頭沿耳緣靜脈平行刺入血管，慢慢抽取血液。助手固定兔耳，操作者手持注射器，在耳中央動脈末端，使針頭沿血管平行方向刺入動脈，血液即可流入注射器內(nèi)。采血完畢后立即用消毒干棉球壓迫止血。后肢靜脈采血? 兔固定于兔保定架上， 剪去脛部被毛， 股部扎上止血帶， 使脛外側(cè)皮下靜脈充盈。固定靜脈，用左手兩指固定好靜脈，右手取帶有針頭的注射器內(nèi)皮下靜脈平行方向刺入血管， 抽一下針?biāo)?，如血進(jìn)入注射器，表示針頭已刺入血管， 即可取血。取血后要長時間壓迫止血，一般取血量為 25mL。取完后必須用棉球壓迫取血部位止血，時間要略長些，因此處不易止血。如止血不妥，可造成皮下血腫，影響連續(xù)多次取血。心臟采血將兔

4、仰臥保定在保定臺上，胸左側(cè)心臟部位剪毛、酒精棉球或碘伏消毒。在第3、4肋間胸骨左緣3 mm處穿刺，針頭刺入心臟后，持針手可感覺到兔心臟有節(jié)律的跳動，血液會自然進(jìn)入注射器。此時如果抽不到血，可以前后進(jìn)退調(diào)節(jié)針頭位置，切不可使針頭在胸腔內(nèi)亂探，以防刺傷兔的心、肺，可以拔出重新穿刺。采血完畢后立即用干棉球按壓止血。4. 注意事項采血前應(yīng)充分?jǐn)U張血管， 可使用酒精棉球反復(fù)擦拭或使用溫水?dāng)U張或用手指輕彈擴張血管。采血時應(yīng)先從遠(yuǎn)心端開始進(jìn)針，然后逐漸朝近心端推進(jìn)，進(jìn)針角度一般045。采血時應(yīng)注意血液流出是否順暢，若不順暢可用棉球沿血管輕擦，以擴張血管。采血結(jié)束后應(yīng)用干棉球按壓進(jìn)針部位進(jìn)行止血。兔給藥方法1

5、. 準(zhǔn)備的物品、器械： 剃毛器、玻璃紙、紗布、膠布或彈性繃帶、酒精棉球、干 棉球、生理鹽水、注射器等2. 簡要：皮膚給藥、皮下給藥、肌肉給藥、灌胃、靜脈給藥等3. 解說操作皮膚給藥給藥前準(zhǔn)備相關(guān)物品， 包括剃毛器、玻璃紙、紗布、膠布或彈性繃帶、 注射器等。核對動物編號及組別，抓取和保定動物。給藥部位：一般選擇脊柱兩側(cè)背部皮膚，試驗有特別要求除外。給藥前去除背部約3cmx3cm大小的被毛，注意不要損傷皮膚。取相應(yīng)劑量的受試物均勻涂抹在去毛處約X大小的皮膚上，先用一層玻璃紙覆蓋給藥部位， 再用紗布覆蓋， 然后用無刺激性膠布或彈性繃帶固定。 給藥時膠布 的固定的松緊程度應(yīng)合理，應(yīng)確保能將藥物固定于兔

6、皮膚而又不導(dǎo)致動物窒息。固定數(shù)小時后，除去受試物，并用溫水或無刺激性溶劑清潔給藥部位皮膚。 如果實驗需要破損皮膚，則在給藥前，用消毒針在敷藥部位皮膚劃一“井”字， 或用砂紙在敷藥部位皮膚摩擦，以皮膚表層損傷為限。記錄操作時間。 若是長期毒性試驗， 可記錄每組動物給藥開始時間和結(jié)束時間。 如果受試物為固體 /粉劑，敷藥前先用適量水或其它賦形劑調(diào)成糊狀， 以保證藥物與皮膚充分接觸。經(jīng)皮給藥前須將動物給藥部位的毛發(fā)去除干凈， 根據(jù)實驗的要求可使用剃毛器或脫毛藥品進(jìn)行除毛。皮下給藥注射前準(zhǔn)備相關(guān)物品，包括剃毛器、注射器、注射針頭、酒精棉球、干棉球等。核對動物編號及組別，抓取和保定動物。根據(jù)實驗要求，可

7、選擇肩胛間的頸背部或腹部等部位皮膚注射。注射前除去被毛，再用酒精棉球消毒注射部位皮膚。抽取相應(yīng)量的藥液， 排盡針管內(nèi)的空氣； 操作者一手提起家兔的注射部位皮膚，使其皺折成三角體，另一手持注射器自皺折下方刺入皮下，平行進(jìn)針一段距離， 刺入后針頭可左右擺動， 表示已進(jìn)入皮下， 便可緩慢推注， 根據(jù)試驗需要進(jìn)行下一只動物的給藥操作。注射給藥完畢，及時記錄給藥時間。若是長期毒性試驗，可記錄每組動物給藥開始時間和結(jié)束時間。當(dāng)針頭刺入皮下時應(yīng)回抽注射器，避免注射入皮下血管內(nèi)。注射完畢后為避免藥物流出，可用干棉球按壓注射部位數(shù)秒。給藥量：每個注射點常用給藥體積為 mL/kg ，每個注射點最大給藥體積為 kg

8、。肌肉給藥注射前準(zhǔn)備相關(guān)物品，包括剃毛器、注射器、注射針頭、酒精棉球、干棉球等。核對動物編號及組別，抓取和保定動物。由助手一手固定兔兩前肢，另一手固定兩后肢?；蛴霉潭ㄆ鞴潭?。剪去注射部位被毛，用酒精棉球消毒皮膚。抽取相應(yīng)量的藥液，排盡針管內(nèi)的空氣，一次一側(cè)注入量w1 mL/只。股四頭肌注射給藥：操作者一手固定給藥部位， 另一手持注射器垂直刺入肌肉內(nèi)，回抽無血，即可進(jìn)行注射，如果有回血，應(yīng)拔出針頭，更換部位后重新進(jìn)針，避免誤將藥物注射入血液中。 臀部肌肉注射給藥： 操作者一手繃緊注射部位附近皮膚， 另一手持注射器與皮膚 表面成約600角刺入肌肉，針頭刺入深度約1cm如果回抽無血，即可緩慢進(jìn)行 注

9、射；如果有回血，應(yīng)拔出針頭，更換部位后重新進(jìn)針。注射完畢，迅速拔出針頭，用干棉球按住注射部位片刻，以防止藥液漏出。 記錄注射時間。 若是長期毒性試驗， 可記錄每組動物給藥開始時間和結(jié)束時間。 多次肌肉注射給藥時，除試驗特殊要求外，應(yīng)在左右兩側(cè)后肢肌肉輪流注射。應(yīng)注意避免傷及坐骨神經(jīng)。如果進(jìn)行局部刺激性試驗，注射部位應(yīng)相對固定灌胃灌胃前準(zhǔn)備相關(guān)物品，包括注射器、導(dǎo)管、藥液、開口器及裝有清水的燒杯等。核對動物編號及組別，按 SOP-T-Ad-02 抓取和保定動物，使食道伸直。 抽取相應(yīng)量的藥液，排盡針管內(nèi)的空氣。操作者將開口器由兔嘴角插入， 由前向后旋轉(zhuǎn)， 橫放在兔子上下頜之間， 固定在 舌面上；

10、將導(dǎo)管經(jīng)開口器中央的小孔插入， 慢慢沿上腭壁插入食道約 15 cm18cm 達(dá)胃內(nèi)；插入過程要隨時觀察兔的反應(yīng)， 防止導(dǎo)管插入氣管或盤旋于咽部； 導(dǎo)管 通過咽部時，兔會有輕微吞咽動作，但不會劇烈掙扎。 將導(dǎo)管外口端放入清水中片刻， 如水中無氣泡逸出， 即可套上注射器， 開始緩慢 注入藥液，觀察兔若無掙扎，可以迅速注入余下藥液；如清水中有氣泡逸出，表明可能插入氣管內(nèi)，應(yīng)拔出重新插入。注完藥液后，捏住導(dǎo)管外口，拔下注射器，抽 3 mL5 mL 純凈水，然后重新套入導(dǎo)管，注入純凈水，將導(dǎo)管內(nèi)殘留的藥液全部沖入胃內(nèi)。藥液注完后，先迅速拔出導(dǎo)管，然后取出開口器。記錄給藥相關(guān)內(nèi)容，根據(jù)試驗需要進(jìn)行下一只動

11、物的給藥。 一次給藥量：最大給藥體積 15 mL/ kg 。給藥先從溶媒對照組開始， 再從低劑量至高劑量， 最后再進(jìn)行市售品 / 陽性對照 組。靜脈給藥注射前準(zhǔn)備相關(guān)物品，包括保定器、注射器、注射針頭或頭皮針、酒精棉球、干棉球等。核對動物編號及組別，抓取和保定動物。抽取相應(yīng)量的藥液，排盡針管內(nèi)的空氣。 后肢小隱靜脈給藥：用酒精棉球消毒注射部位皮膚，左手壓迫后肢注射部位上 方近心端血管，使血管充盈；右手持注射器，將針頭插入靜脈，回抽若有回血， 左手即放松，緩慢推注藥液。耳緣靜脈給藥： 用酒精棉球輕輕擦拭耳緣靜脈注射部位， 使靜脈清晰可見； 一手 固定耳廓邊緣部位， 另一手持頭皮針或注射器， 針頭斜面朝上， 將針頭由耳尖部 刺入靜脈，見回血后緩慢注入藥液。注射進(jìn)針應(yīng)盡可能從耳緣靜脈遠(yuǎn)心端開始， 如果推注困難、 滴注不暢或注射部位 發(fā)白或局部組織腫脹時， 表明注射失敗， 應(yīng)