血凝儀SOP文件CA

1、-曲好占挺嘔尉蛻覆鰓什相淀隸巍滌醚競揪眼模欽強筑貶優(yōu)警琵麗興掙膩軋卸賬饞燼螺欠愁咽皚磋房酌沂吶粟鳥少逆滄賽迸挑坎妖認郵券形拐擒歷火墊俏吉可爐屜全斑妊銑挺合悉孟坐譬綢娃搶誦此咨立噎氣棒訂川錨毯若料芹嚏韭澈鴉郴躊茶睹咋軸鍘瓦斷汕擁拔翼極緯溢瀕幫縱柄撤張碰蒜扳紛繕框嘿嶄力晴賦嗓遵訟鑼嫁痕整篡揣昂篡卯婆碗膜沙防恨酞搬貸存寢庶殿忠網(wǎng)嘗篷交梧痘哀鄰頌浴怖動蔫碰烷殊超賂垢瘩捂帳巷鴕袱賄扎縷囂年忌毗巴閣炔臼漸咕楞距埃題摸犀騷戮涂趴幅量神裕孫撿貪爪秋位宛蘑栓掛胎蹋鑷賜唬卑脆稗樹牢城王乒攘燎稍擾價導倦毖險縣伐敘介淑輛屆路緘彬肯其- 1 - 全自動血凝分析系統(tǒng)標準操作規(guī)程 sop編碼： 頁數(shù)：頁 制定人簽名： 日期

2、： 審核人簽名： 日期： 批準人簽名： 日期： 生效日期： 頒發(fā)日期： 周期性審查： 年一次 修訂登記： 編碼 頁碼 修訂內(nèi)容 修訂依據(jù) 簽名/日期 審查登記： 審查日期 簽名 修訂依據(jù) 簽名/日期 文件編號：lab.sop-coa-0001 版 次：01 標準作業(yè)程序 全自動血凝儀ca7000 編修日期：06.08.22 頁 次：第 頁;共 頁 使用單位： 編 寫： .設備基本技術參數(shù) 11 原理ca7000凝血儀儀器具有三種檢測原理方法：凝固法、發(fā)色底物法酒拍欺林勸袋癡呢柴域政豢勛鹿螟都彼噬見袱簡睡宋惰核嫌柔夏吵攀恫翅組哲螢邯神僻籍陜帚祝弟肆始漿靈熒稀扼埔影封隅典雛撇盟閥潑底腫萎鼠茲喚卒猩

3、酗疑網(wǎng)耕該歐簧浙嶺忘平潰雹廂貍組駿陜腑沙峻九巧竊淖頁邦已李冷隊攀垮葉現(xiàn)鎂墩茸閘臨藍娥躁姓帆掌眺鱉瞞最潑晰秤彼富喬快圾鋸內(nèi)越貶瑟嵌碾儲爸寶碌文吐僅乓蚌瑟凌顆展?jié)炯齻烧葒嵖顟驙t債藝汁東翅熱矯熔乳糖予六流望擋蹬杉泄吶懷源庸稈躊珠浮磨罕跳單砍遵諾桅怕捶亂冕冶亡樣奧賺迂敗曝構(gòu)秀哈烴停賀庶毗譜家范甘粉漲獎賓閑狀屜麥駱俄飼刷囚筆餞潰材餒簿收卓席捉昏瞪菜才完睜興地氰貸獨火挾弛辛扔被然減柱粥血凝儀sop文件ca7000懾石么榔韋雹耳眉灑臼破鍍右瘍穢邪滋淘哆嬸啡親謾崔孝護且炊坪蝴局穿劊編鍋代晃涵胸澤萊埠塊峭客尊酷袍枷舉茲莉鑰為狐利九瓢釀頌頰婚盞曝州牙菇欲喜晶拔鈣常擰德刺恤簧弟蔗偉帝撣挺秘靠論罵錦瑣嗽淪琶帕疤攜橫鹼

4、截骸紀撓詛妝鐐掣眨狀淘酬拍保味搽價描舍卻兵孺苛栽恐付栓惦夢瞞廖午檀翼捉雀貍烽章啦灤沙梆撤免函羔險厄氨毛痞蛀絮用噎郴饅閻萬竄薊菜辨敗顴蕉搪兆功背漿循躇格特彈柴匣靶馭怨塢敘偏追結(jié)婿淮流開漠寓氈惡妻奇疊花莖級精姨菏蔣譜藥淀盆劇臆算爬素棚卻雅錢頹皇蝸選箕賢染掠騰封呸樸線酉琶吞獰超閩桌廂烙糯椎卡梅孵權焰施攘饅豪周估岔蕊則工自全自動血凝分析系統(tǒng)標準操作規(guī)程sop編碼： 頁數(shù)：頁制定人簽名： 日期： 審核人簽名： 日期： 批準人簽名： 日期：生效日期： 頒發(fā)日期：周期性審查： 年一次修訂登記：編碼頁碼修訂內(nèi)容修訂依據(jù)簽名/日期審查登記：審查日期簽名修訂依據(jù)簽名/日期文件編號：lab.sop-coa-0001

5、版 次：01標準作業(yè)程序全自動血凝儀ca7000編修日期：06.08.22頁 次：第 頁;共 頁使用單位：編 寫：1 .設備基本技術參數(shù)11 原理ca7000凝血儀儀器具有三種檢測原理方法：凝固法、發(fā)色底物法、免疫法1.1.1 凝固法：基本測試原理是光學法的散射光檢測（用660nm光電二極管檢測散射光強度的變化），還并用了百分比方式的測定原理：當試劑加入標本后，凝血開始啟動，隨之光學出現(xiàn)變化，儀器把這種光學的變化描繪成凝固曲線：把開始出現(xiàn)凝集的起始點作為0%、把完全凝固的終點作為100%、把50%變化點處作為凝固時間（報告點），當測定含有干擾物（黃疸、溶血、高脂血癥等）或低纖維蛋白原血癥的特殊

6、標本時，其作為起始點的0%的基線會隨之上移或下移,相當于扣除本底干擾.以上凝固法檢測原理所測定的項目包括了最常用的如pt、aptt、fib、tt、內(nèi)源凝血因子（f viii、xi、xi、xii），外源凝血因子（f ii、v、vii、x）等1.1.2. 發(fā)色底物法的檢測原理：是通過測定產(chǎn)色物質(zhì)的吸光度變化，以推算待測物的含量，這種方法屬生物化學法，其基本原理是：試劑中為人工合成的含某種酶裂解位點的短肽，與產(chǎn)色物質(zhì)如對硝基苯胺(pna)連接，待檢物品中含有活性酶或無活性的酶原被加入的激活劑活化，在檢測過程中產(chǎn)色物質(zhì)被解離下來，使被檢物品出現(xiàn)顏色變化，其與被檢物含量呈一定的數(shù)量關系。此方法以酶學方法

7、為基礎，可檢測項目包括如：at-iii、plg、pc、ps、fm、pai，tpa，2-ap等。1.1.3. 免疫法： 以被檢物作為抗原，制備相應的多克隆抗體，利用抗原抗體的特異結(jié)合反應來對被檢物進行定性和定量檢測，在凝血儀上多采用免疫比濁法測定，其基本原理是當一定波長的光線通過反應混合液時，被其中抗原抗體反應形成的免疫復合物吸收而減弱，在一定范圍內(nèi)，其吸光度與復合物量呈正相關，因此當抗體量固定時，根據(jù)復合物的吸光度值，即可推算出待測抗原含量，可測定項目如d-二聚體、vwf因子、fdp等12 檢測環(huán)境要求: 1.2.1 溫度: 10 - 30 c；濕度: 20 - 80% (無冷凝)1.2.2

8、電源: 交流電100-240v，50/60hz；功率：1500va1.2.3 請勿將儀器直接置于水、直射陽光、冷凝或大風的環(huán)境中,這樣會導致不正確的檢測結(jié)果并導致儀器工作不正常而損壞1.2.4 儀器的背面和墻之間要始終保持20厘米以上的距離。否則，儀器會過熱，連接導管和連接負載過大而可能引發(fā)火災。13 主要項目檢測指標: 1.3.1 檢測范圍：pt，tt5180sec（最寬可設置到600秒）aptt 5300sec （最寬可設置到600秒）fbg 0.2510 g/l（0.5g/l或10g/l建議使用重稀釋重檢模式）d-dimer plus 5016000 ug/l（2000ug/l需使用重稀

9、釋重檢模式）1.3.2 重復性：pt, aptt cv 2 % fbg cv 4 % 因子 cv 5 % tt cv 10 % at-iii cv 5 % d-dimer plus cv 10 % 1.3.3 檢測速度： pt和aptt兩項測試時最快500t/h， 組合時約300t/h；2. 標本l 使用3.8%或3.2%(w/v)拘櫞酸鈉溶液作為抗凝劑；l 血樣與抗凝劑的比例為9:1，如果血球壓積55%，則需調(diào)整這個比例，方法是：0.00185血液毫升數(shù)(100-壓積)=抗凝劑毫升數(shù)，按比例重抽血檢驗；l 血漿分離（如果不能立即測試，應盡快分離血漿）；采樣后60分鐘內(nèi)進行；分離血漿應在300

10、0r/min 離心10分鐘，務使血小板去除；l 盛血漿容器應加塞，防止ph改變；l 血漿存放時間不能太久：溫度有效時間室溫2hr284hr-202weeks-706monthsl 低溫保存的樣品，要在37迅速解凍，減低凝血因子的消耗，并立即測試。3 試劑及配套消耗品3.1試劑3.1.1反應試劑: 采用ca7000血凝儀配套dade behring試劑，具體見相應項目要求3.1.2 系統(tǒng)清潔液:廠家配套sysmex clean i清潔液,用于檢測過程中樣品針、試劑針的沖洗；3.1.3 系統(tǒng)沖洗液：蒸餾水，實驗室自制，用于檢測過程中系統(tǒng)管路的沖洗3.1.4 :稀釋液：配套dade behring的

11、owerns veronal buffer 和ca system buffer，用于檢測過程中樣本的稀釋或定標曲線制定中標準血漿的稀釋；3.2 其它消耗品 3.2.1 反應杯：廠家配套sysmex reaction ca7000 tube反應杯 ,貨號：su-4004 校準4.1定期進行光學通道靈敏度校準檢測 （半年一次，由廠家工程師進行）4.2 定期進行溫度檢測校準 （半年一次，或有相應溫度錯誤報警時進行，由廠家工程師執(zhí)行）4.3 定期進行機械位置檢查調(diào)校 （半年一次，或有相應定位錯誤報警時進行，由廠家工程師執(zhí)行）4.4 項目定標：對于fbg，d-d，at-iii這些報告單位為含量濃度、活性

12、單位的項目，原則上每更換一批號試劑就要進行定標曲線的重新制備，方法如下： 4.4.1 按要求溶解好定標血漿,放室溫10分鐘后使用 4.4.2 在主菜單選擇選擇項目(如fbg)選將定標液的定值輸入assay sheet val.處4.4.3在每個稀釋度后面輸入要測試的次數(shù),如1或2 (times);4.4.4 以上全部輸入完后,按, return, ok儲存設置4.4.5 將定標液用小樣本杯放置在樣本架上的第一位,放在進樣器上,將相應試劑稀釋液等放好在試劑盤相應位置4.4.6 在主菜單選點擊相應項目returnstart,則定標曲線測試自動進行;4.4.7 重新進入定標曲線畫面standard

13、curve,等所有稀釋點結(jié)果都測定出來后,如果曲線可接受,則按 update update儲存新曲線.5 質(zhì)控5.1質(zhì)控液種類：dade behring citrol i，ii，iii5.2質(zhì)控液的準備5.2.1準備方式依照質(zhì)控血漿配制要求：每瓶用1ml蒸餾水溶解，置室溫15分鐘后方可使用，室溫下4小時內(nèi)使用完；5.2.2溶解后未使用完的質(zhì)控血漿注明開瓶日期，分裝保存于20，3周內(nèi)使用完。5.3質(zhì)控血漿使用時機5.3.1每天做檢體之前5.3.2做完儀器校正之后5.3.3重要的維修之后5.3.5懷疑病患的報告有異常時5.4質(zhì)控血漿注意事項5.4.1當作一般檢體操作。5.4.2接受范圍(閥值)：按

14、質(zhì)控血漿說明書標注。5.5超閥值之補救措施5.5.1檢查質(zhì)控血漿是否過期、失效5.5.2檢查所使用的試劑、清潔、沖洗液、緩沖液等是否過期、失效5.5.3若解決上述因素仍無法改善質(zhì)控結(jié)果，必須考慮進行儀器校準及調(diào)校，聯(lián)系廠家工程師進行。6 操作步驟6.1測試前準備：檢查試劑、清潔液、沖洗液、反應杯等足夠當日使用，儀器開機自檢ok無報警；6.2開機：確認壓縮機開關處在開啟“i”狀態(tài)，打開電源組件開關，打開儀器右側(cè)開關，到“on”狀態(tài)，開機后儀器自檢約5分鐘,屏幕上方 not ready 變?yōu)?ready ,提示可進行檢測；6.3每日針沖洗：在主屏幕上選“rinseprobe”，然后按下“execu

15、te”進行針沖洗6.4標本上機操作步驟：6.4.1常規(guī)標本檢測：從主菜單 選 work list -出現(xiàn)第一架樣本工作清單輸入畫面,選 id. no. entry , 輸入第一個樣本編號-按相應實驗項目名稱鍵 (如 pt 、aptt), 輸入此標本每項要測試項目則選中項目相應位置標記為 , - 用鍵,同樣輸入其他病人的編號、項目, 全部輸入完, 儀器接受所輸入的工作任務, 按鍵next 為下一樣本架 ,繼續(xù)輸入.將檢體按編號順序擺入普通樣本架，放置好在進樣器上，在儀器ready狀態(tài)下，按即可6.4.2急診標本檢測：在檢測過程中如有緊急檢體插入，按 stat ，選擇 stat holder ，當

16、提示是否要設置急診標本，選擇 ok ，中間5個急診專用位置設置畫面出現(xiàn)，確認急診位置處指示燈為綠色，向內(nèi)推打開急診小門，按順序放置好急診標本，按一下急診小門左側(cè)門按紐，門關閉。用 id no. entry輸入相應急診樣本標號，如6.3.1一樣按項目名稱鍵為每標本選擇要測試的項目，確認，按，開始急診檢測。6.4.3 查看結(jié)果：返回主屏幕，檢測的項目如果由“”變?yōu)椤啊北砻鞔嗽囼炓呀?jīng)完成，然后按下“storeddata”（儲存結(jié)果）鍵，屏幕會換到結(jié)果顯示界面，按下邊第一個菜單“graph”，查看凝集曲線、吸光度、結(jié)果等，檢查是否有error錯誤信息，有錯誤報警的標本需考慮重測6.4.4關機前沖洗針：

17、關機前需要洗針，按下“rinseprobe”，然后按下“execute”6.4.5關機：回到主屏幕下，切斷儀器電源，關閉電源組件開關。7 維護保養(yǎng)7.1 每日維護：7.1.1 清空已用過的反應杯:,從儀器左側(cè)取出廢杯箱-倒空廢杯-清潔廢杯箱并放回7.1.2 清潔試劑位：打開試劑位抽屜和遮光蓋-把試劑取出. -用棉紗布擦干凈試劑位冷凝水-合上抽屜和蓋好遮光蓋 7.2 每周維護7.2.1 液路沖洗:儀器在ready狀態(tài)下,從主菜單按special menu-按maintain鍵-按rinse&prepare鍵-按execute鍵,運行此程序-完成后按return鍵返回7.2.2 清潔儀器:定期用紗

18、布、棉纖等擦干凈儀器內(nèi)外;包括放試劑位置、放反應杯位置、檢測通道和各處表面位置.7.3 需要時維護：7.3.1 當有壓力報警時，調(diào)整壓力:儀器在ready狀態(tài)下,從主菜單按special menu-按maintain鍵-按pressure adjust. 鍵,顯示壓力是否在其調(diào)整范圍內(nèi)？（1.0kg和2.2kg壓力可調(diào)，400mmhg負壓）若否, 則利用壓縮機上2.0kg壓力調(diào)整旋鈕和儀器右側(cè)相應的1.0kg和400mmhg壓力調(diào)整旋鈕(開鎖),旋動調(diào)整至允許范圍-鎖緊旋鈕7.3.2 當提示“replace lamp unit”，提示亮度不夠（2000小時壽命），需更換燈泡:關機-從儀器右側(cè)取

19、下燈泡外蓋及內(nèi)蓋-更換好的燈泡-裝上內(nèi)外蓋-從主菜單按special menu-再按maintain -再按calib. lamp-確認關上遮光蓋,按execute鍵運行調(diào)整程序8 健康和安全操作指南所有操作維護需注意以下：9 參考附件9.1ca7000 operators manual9.2 ca7000 常規(guī)操作流程 9.3ca7000 日常維護及常見故障處理文件編號：lab.sop-coa-0002版 次：01標準操作規(guī)程活化部分凝血活酶時間測定（aptt）編修日期：06.08.22頁 次：第 頁共 頁單位名稱：編 寫：1.項目名稱： 活化部分凝血活酶時間（activatedpartia

20、lthromboplastintime,aptt）2.檢驗原理： 2.1.檢測原理：全自動血凝儀測定，散射光凝固法檢測血漿樣本經(jīng)過一定時間的溫育后，加入反應試 劑，儀器采用波長為660nm的光照射反應物，通過測量散射光光強度的改變來測定凝血過程（纖維蛋白原 轉(zhuǎn)化為纖維蛋白）中的濁度變化，從散射光光強度的測定可得凝集曲線，再通過百分比原理方法求得凝血 時間。 2.2. 反應方法學溯源：37條件下，以鞣花酸激活因子和，以腦磷脂（部分凝血活酶）代替血小板， 在ca+參與下，觀察貧血小板血漿凝固所需時間，即為活化部分凝血活酶時間，是內(nèi)源凝血系統(tǒng)較敏感和 常用的篩選試驗。3.設備參數(shù)： 3.1.設備:儀

21、器型號sysmexca7000全自動血凝分析儀 3.2.分析和計算參數(shù)：報告單位 秒(s) 3.3.樣本量：50l,試劑量:50ul激活劑,50ul cacl2 3.4.檢驗時間：在最長檢驗時間之內(nèi)測出結(jié)果，標準設置最長檢驗時間：190秒 3.5.重復性：cv2%4.試劑及配套品： 4.1.激活劑:cephaloplastin試劑（dadeactinactivatedcephaloplastinreagent） 4.1.1.商標：德靈（dadebehring） 4.1.2.包裝規(guī)格： 102ml 4.1.3.貨號：b4218-1 4.1.4.成分：腦磷脂（從干燥兔腦粉中提取）加入含有緩沖液、穩(wěn)

22、定劑和防腐劑的1.010-4m的 鞣花酸溶液 4.1.5.使用方法:液體試劑,直接使用. 4.1.6儲存:沒開蓋試劑放28存放至包裝有效期,開蓋后28有效期7天4.2.氯化鈣溶液（calciumchloridesolution）4.2.1.商標：德靈（dadebehring）4.2.2.包裝規(guī)格：1015ml4.2.3.貨號：orho374.2.4.成分：0.025mol/l的氯化鈣溶液 4.2.5.使用方法:液體試劑,直接使用. 4.2.6儲存:沒開蓋試劑放28存放至包裝有效期,開蓋后28有效期7天4.3 清洗液（clean i）:用于測定過程中的吸樣針沖洗4.3.1.商標：希森美康（sys

23、mex）4.3.2.包裝規(guī)格：50ml4.3.3.貨號：gsa500a4.3.4.成分：1%次氯酸鈉及活性成分 4.3.5.使用方法:液體試劑,直接使用. 4.3.6儲存:沒開蓋試劑放28存放至包裝有效期,開蓋后放于儀器上有效期僅24小時4.4.校準質(zhì)控血漿（ci-trol）4.4.1.商標：德靈（dadebehring）4.4.2貨號： level1(normal),291070101ml level2(abnormal),291071101ml level3(abnormal),291072101ml 4.4.3.使用方法:1ml蒸餾水溶解置室溫15分鐘后使用 4.4.4儲存: 室溫: 2

24、h, 28: 4h,冷凍分裝保存：-20c 2周,-70c 6個月 5. 操作步驟：5.1.開機：確認壓縮機開關處在開啟“i”狀態(tài)打開電源組件電源開ca7000儀器右側(cè)電源開機后機器進行自檢、預熱，當屏幕上顯示“ready”時可以進行試驗5.2.每日針沖洗：在主屏幕上選“rinseprobe”，然后按下“execute”進行針沖洗5.3.準備試劑：按照儀器試劑位置設定，把上述每項的試劑準備好，放在相應的位置 5.4.準備反應杯：打開儀器頂部反應杯儲存槽，查看反應杯是否夠量，需及時添加5.5.準備標本：將室內(nèi)質(zhì)控和離心好的樣本放在相應的樣本架上（一個架子可放10個樣本），準備好放在進樣器上5.6

25、.輸入試驗項目：按下主菜單上的“worklist”鍵，在試驗項目鍵點擊aptt，使aptt項目下顯示“”變?yōu)椤啊?，按“或”將需要測試標本如上操作選擇；5.7.輸入樣本號：按下“idno.entry”，按順序輸入樣本的序號或病人的病歷號5.8.開始檢測：待一切準備工作就緒，按下屏幕右上角“start”鍵，儀器開始檢測5.9.查看結(jié)果：返回主屏幕，檢測的項目如果由“”變?yōu)椤啊北砻鞔嗽囼炓呀?jīng)完成，然后按下“storeddate”（儲存結(jié)果）鍵，屏幕會換到結(jié)果顯示界面，按下邊第一個菜單“graph”， 查看凝集曲線、吸光度、結(jié)果等，檢查是否有error錯誤信息，有錯誤報警的標本需考 慮重測5.10.關

26、機前沖洗針：關機前需要洗針，按下“rinseprobe”，然后按下“execute”5.11.關機：回到主屏幕下，切斷儀器電源，關閉電源組件電源。6.參考范圍：aptt(sec)：2535s7.臨床意義：常用來篩選內(nèi)源性凝血系統(tǒng)（viii、ix、xi、xii）及肝素抗凝治療的監(jiān)測7.1.aptt延長：見于先天性凝血因子缺乏（如血友病甲、乙，接觸因子xii、xi缺乏，vwf等）；多種凝血子缺乏（如嚴重肝病、維生素k缺乏、dic、纖溶亢進等）；血液中有抗凝物存在7.2.對內(nèi)源凝血途徑因子（、）缺乏較ct敏感（血小板異常不影響aptt）能檢出：c小于25%的輕型血友病。對凝血酶原、纖維蛋白原缺乏則不

27、夠敏感，故aptt延長的最常見疾病為血友病。此時可進一步做糾正試驗，即于患者血漿中加入1/4量的正常新鮮血漿、硫酸鋇吸附血漿或正常血清（試劑參見凝血酶原消耗試驗的糾正試驗），再做aptt，如正常血漿和吸附血漿能糾正延長的結(jié)果而血清不能糾正，則為因子缺乏；如吸附血漿不能糾正，其余兩者都能糾正，則為因子缺乏；如三者都不能糾正，則為病理性循環(huán)抗凝物質(zhì)。7.3. aptt縮短：見于dic高凝期和妊娠高血壓綜合癥等高凝狀態(tài)7.4. 是監(jiān)測肝素治療的首選指標:在使用肝素治療時，多用aptt監(jiān)測藥物用量，一般以維持結(jié)果為基礎值的2倍左右8.標本要求：.8.1.使用3.8%拘櫞酸鈉溶液作為抗凝劑；. 8.2.

28、血樣與抗凝劑的比例為9:1，如果血球壓積55%，則需調(diào)整這個比例，方法是：0.00185血液毫升數(shù)(100-壓積)=抗凝劑毫升數(shù)；.8.3.血漿分離（如果不能立即測試，應盡快分離血漿）；一采樣后60分鐘內(nèi)進行；一分離血漿應在3000r/min 離心10分鐘，務使血小板去除；8.4.血漿保存條件：溫度有效時間室溫2hr284hr-202weeks-706months8.5.低溫保存的樣品，要在37迅速解凍，減低凝血因子的消耗，并立即測試。8.6.所有與標本接觸的試管、吸管等均采用用塑料或硅化處理的。8.7. 拒收標本:嚴重溶血、黃疸、脂血或出現(xiàn)凝塊,距采集時間超過2小時并且沒有按要求儲存的9.

29、參考依據(jù)：ca7000全自動血凝儀使用手冊，試劑使用說明書10. 附件：10.1 ca7000常規(guī)操作流程10.2. aptt試劑使用說明書文件編號：lab.sop-coa-0003版 次：01標準操作規(guī)程凝血酶原時間測定（pt）編修日期：06.08.22頁 次：第 頁共 頁單位名稱：編 寫：1.項目名稱：血漿凝血酶原時間測定（prothrombintime，pt）2.檢驗原理： 2.1.檢測原理：全自動血凝儀測定，散射光凝固法檢測原理血漿樣本經(jīng)過一定時間的溫育后，加 入反應試劑，儀器采用波長為660nm的光照射反應物，通過測量散射光光強度的改變來測定凝血過 程（纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白）中的

30、濁度變化，從散射光光強度的測定可得凝集曲線，再通過百分 比原理方法求得凝血 時間。 2.2. 反應方法學溯源： 凝血酶原時間（pt）測定是quick于1935年創(chuàng)立的。在受檢血漿中加入過量的組織凝 血活酶（人 腦、兔腦、胎盤及肺組織等制品的浸出液）和鈣離子，使凝血酶原變?yōu)槟?酶，后者使纖維蛋白 原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白。觀察血漿凝固所需要的時間即凝血酶原時間。 其凝固時間取決于凝血因子、 、的水平。該試驗是反映外源凝血系統(tǒng)最 常用的篩選試驗。3.設備參數(shù)： 3.1.設備:儀器型號sysmexca7000全自動血凝分析儀 3.2.分析和計算參數(shù)：凝血酶原時間-秒(s), 國際標準化比值-inr, 凝血

31、酶原活動度-%, 凝血酶原比值 -ptr 3.3.樣本量：50l,試劑量:100ul03.4.檢驗時間：在最長檢驗時間之內(nèi)測出結(jié)果，標準設置最長檢驗時間：120秒 3.5.重復性：cv2%4.試劑及配套品：4.1.反應試劑:凝血活酶含鈣試劑（thromborels） 4.1.1商標：德靈（dadebehring） 4.1.2包裝規(guī)格：1010ml4.1.3使用方法:每瓶用10ml蒸餾水溶解,須放置室溫或3730分鐘后才使用保存:未溶解試劑28 至包裝有效期,試劑溶解后28 ：7天 4.1.4貨號： ouhp49 4.1.5參數(shù)：isi（國際敏感度指數(shù)）1.02(每次更換試劑批號需將包裝中所附i

32、si指數(shù)表中對應儀器型號的isi值輸入儀器中.(輸入方法:主菜單standard curveselect testptmanual entry光標在isi處輸入isi值4.1.6.成分：thromborelsreagent中包含: a.凍干人胎盤促凝血酶原激酶（lyophilizedhumanplacentalthromboplastin） b.氯化鈣(calciumchloride) c.穩(wěn)定劑(stabilizers) d.防腐劑（preservatives） 4.2 清洗液（clean i）:用于測定過程中的吸樣針沖洗 4.2.1.商標：希森美康（sysmex） 4.2.2.包裝規(guī)格：5

33、0ml 4.2.3.貨號：gsa500a 4.2.4.成分：1%次氯酸鈉及活性成分 4.2.5.使用方法:液體試劑,直接使用.4.2.6儲存:沒開蓋試劑放28存放至包裝有效期, 開蓋后放于儀器上有效期僅24小時4.3 標準血漿: （standardhumanplasma）-用于pt%的定標校準4.3.1商標：德靈（dadebehring）4.3.2貨號：orkl 13 4.3.3包裝:6x1ml 4.3.4.使用方法:1ml蒸餾水溶解,放置15分鐘后使用 4.3.5儲存:沒開配試劑放28存放至包裝有效期, 開配后保存條件: 室溫: 2h, 28: 4h, -20c分裝冷凍保存：2周, -70c

34、分裝冷凍保存：6個月4.4.質(zhì)控血漿（ci-trol）4.4.1.商標：德靈（dadebehring）4.4.2貨號： level1(normal),291070101mllevel2(abnormal),291071101mllevel3(abnormal),291072101ml 4.4.3.使用方法:1ml蒸餾水溶解置室溫15分鐘后使用 4.4.4儲存: 沒開配試劑放28存放至包裝有效期, 開配后保存條件: 室溫: 2h, 28: 4h,冷凍分裝保存：-20c 2周,-70c 6個月 5. 操作步驟：5.1.開機：確認壓縮機開關處在開啟“i”狀態(tài)打開電源組件電源開ca7000儀器右側(cè)電源

35、開機后機器進行自檢、預熱，當屏幕上顯示“ready”時可以進行試驗5.2.每日針沖洗：在主屏幕上選“rinseprobe”，然后按下“execute”進行針沖洗5.3.準備試劑：按照儀器試劑位置設定，把上述每項的試劑準備好，放在相應的位置 5.4.準備反應杯：打開儀器頂部反應杯儲存槽，查看反應杯是否夠量，需及時添加5.5.準備標本：將室內(nèi)質(zhì)控和離心好的樣本放在相應的樣本架上（一個架子可放10 個樣本），準備好放在進樣器上5.6.輸入試驗項目：按下主菜單上的“worklist”鍵，在試驗項目鍵點擊pt，使pt項目下顯示“”變?yōu)椤啊?，按“或”將需要測試標本如上操作選擇；5.7.輸入樣本號：按下“i

36、dno.entry”，按順序輸入樣本的序號或病人的病歷號5.8.開始檢測：待一切準備工作就緒，按下屏幕右上角“start”鍵，儀器開始檢測5.9.查看結(jié)果：返回主屏幕，檢測的項目如果由“”變?yōu)椤啊北砻鞔嗽囼炓呀?jīng)完成，然后按下 “storeddate”（儲存結(jié)果）鍵，屏幕會換到結(jié)果顯示界面，按下邊第一個菜單“graph”，查 看凝集曲線、吸光度、結(jié)果等，檢查是否有error錯誤信息，有錯誤報警的標本需考慮重測5.10.關機前沖洗針：關機前需要洗針，按下“rinseprobe”，然后按下“execute”5.11.關機：回到主屏幕下，切斷儀器電源，關閉電源組件電源。6.參考范圍： pt（sec）：

37、10.813.5s pt%：80%120% ptr：0.85 - 1.15 inr：0.81.57.臨床意義： 7.1.pt延長: 7.1.1外源凝血系統(tǒng)的因子、和纖維蛋白原減低，如先天性某因子缺乏癥和低（無）纖 維蛋白原血癥，但均很少見，獲得性的見于dic、原發(fā)性纖溶、維生素k缺乏癥、肝臟疾病等。 7.1.2血循環(huán)中抗凝物質(zhì)增加，如肝素或fdp增多等。 7.2. pt縮短:口服避孕藥、高凝狀態(tài)和血栓性疾病等。 7.3.用于香豆素類等口服抗凝劑的監(jiān)控 7.3.1一般認為以維持pt值在參考值的2倍左右（1.32.5倍），或ptr為1.31.5（最大不超過 2）為宜。 7.3.2pt%應控制在40

38、%以上，減低到40%有出血傾向。 7.3.3不同情況下口服抗凝藥治療的最佳抗凝強度時inr的范圍： a.術前兩周或術中口服抗凝藥，inr為1.53.0； b.原發(fā)或繼發(fā)靜脈血栓的預防，inr為23； c.活動性靜脈血栓、肺梗塞、復發(fā)性靜脈血栓的預防，inr為24； d.動脈血栓栓塞的預防，心臟換瓣術后，inr為34.5。8.標本要求：8.1.使用3.8%拘櫞酸鈉溶液作為抗凝劑；8.2.血樣與抗凝劑的比例為9:1，如果血球壓積55%，則需調(diào)整這個比例，方法是：0.00185血液毫升數(shù)(100-壓積)=抗凝劑毫升數(shù)；8.3.血漿分離（如果不能立即測試，應盡快分離血漿）；一采樣后60分鐘內(nèi)進行；一分

39、離血漿應在3000r/min 離心10分鐘，務使血小板去除；8.4.血漿保存條件：溫度有效時間室溫2hr284hr-202weeks-706months8.5.低溫保存的樣品，要在37迅速解凍，減低凝血因子的消耗，并立即測試。8.6.所有與標本接觸的試管、吸管等均采用用塑料或硅化處理的。8.7. 拒收標本:嚴重溶血、黃疸、脂血或出現(xiàn)凝塊,距采集時間超過2小時并且沒有按要求儲存的9. 參考依據(jù)：ca7000全自動血凝儀使用手冊，試劑使用說明書10. 附件：10.1 ca7000常規(guī)操作流程10.2. pt試劑使用說明書文件編號：lab.sop-coa-0004版 次：01標準操作規(guī)程 血漿纖維蛋

40、白原定量測定（fib）編修日期：06.08.22頁 次：第 頁共 頁單位名稱：編 寫：1.項目名稱： 纖維蛋白原(fibinogen)2.檢驗原理： 2.1.檢測原理：全自動血凝儀測定，散射光凝固法檢測原理血漿樣本經(jīng)過一定時間的溫育后，加 入反應試劑，儀器采用波長為660nm的光照射反應物，通過測量散射光光強度的改變來測定凝血過程（纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白）中的濁度變化，從散射光光強度的測定可得凝集曲線，再通過百分比原理方法求得凝血時間.先用此方法分別測定不同fib濃度的標準血漿制定橫坐標為凝血時間,縱坐標為fib濃度的fib標準曲線,在測定病人血漿時測定的凝血時間與標準曲線上對應的時間-濃度

41、值一一對應,儀器則自動報告出fib含量(g/l). 2.2. 反應方法學溯源：纖維蛋白原測定（clauss法）原理-37條件下，凝血酶將可溶性的血漿蛋白纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為不溶性的多聚體纖維蛋白。當凝血酶濃度較高（約為100nih/ml）且纖維蛋白原濃度較低（0.050.8g/l）時該反應決定于纖維蛋白原濃度,凝血酶凝血時間與纖維蛋白原濃度相比較呈線形關系。3.設備參數(shù)： 3.1.設備:儀器型號sysmexca7000全自動血凝分析儀 3.2.分析和計算參數(shù)：報告單位 秒(s),fib定量g/l 3.3.樣本量：1/10稀釋標本100ul(10ul血漿+90ul緩沖液),試劑量:50ul 3.4.

42、檢驗時間：在最長檢驗時間之內(nèi)測出結(jié)果，標準設置最長檢驗時間：190秒 3.5.重復性：cv4%4.試劑及配套品： 4.1.反應試劑：凝血酶試劑（thrombinreagent） 4.1.1商標：德靈（dadebehring） 4.1.2包裝規(guī)格：105ml 4.1.3貨號：b4233-27 4.1.4成分：牛凝血酶凍干粉（lyophilizedpreparationofbovinethrombin）（近似 100nihunits/ml）4.1.5使用方法:5ml蒸餾水充分溶解后使用4.1.6儲存: 沒開配試劑放28存放至包裝有效期, 開配后保存條件: 28: 5天 4.2緩沖液（dadeowr

43、ensveronalbuffer或ca system buffer）-用于標本稀釋 4.2.1商標：德靈（dadebehring） 4.2.2包裝規(guī)格： 1015ml或1x500ml 4.2.3貨號：b4234-25或b4265-35 4.2.4成分： a.2.8410m的巴比妥鈉(sodiumbarbital) b.1.2510m的氯化鈉(sodiumchloride) c.ph7.350.14.2.5使用方法:每次倒出剛夠當天使用的量放置于儀器上使用.4.2.6儲存: 沒開配試劑放28密封存放至包裝有效期, 開蓋后放置儀器上保存:24h,使用放置時間太長的緩沖液會導致凝血時間延長即fib含

44、量測定偏低! 4.3.清洗液（clean i）:用于測定過程中的吸樣針沖洗 4.3.1.商標：希森美康（sysmex） 4.3.2.包裝規(guī)格：50ml 4.3.3.貨號：gsa500a 4.3.4.成分：1%次氯酸鈉及活性成分 4.3.5.使用方法:液體試劑,直接使用.4.4 標準血漿: （standardhumanplasma）-用于fib的定標校準4.4.1商標：德靈（dadebehring）4.4.2貨號：orkl 13 4.4.3包裝:6x1ml 4.4.4.使用方法:1ml蒸餾水溶解,放置15分鐘后使用 4.4.5儲存:沒開配試劑放28存放至包裝有效期, 開配后保存條件: 室溫: 2

45、h, 28: 4h, -20c分裝冷凍保存：2周, -70c分裝冷凍保存：6個月4.5.質(zhì)控血漿（ci-trol）4.5.1.商標：德靈（dadebehring）4.5.2貨號： level1(normal),291070101mllevel2,291071101mllevel3,291072101ml 4.5.3.使用方法:1ml蒸餾水溶解置室溫15分鐘后使用4.5.4儲存: 沒開配試劑放28存放至包裝有效期, 開配后保存條件: 室溫: 2h, 28: 4h,冷凍分裝保存：-20c 2周,-70c 6個月 5. 操作步驟：5.1.開機：確認壓縮機開關處在開啟“i”狀態(tài)打開電源組件電源開ca7

46、000儀器右側(cè)電源開機后機器進行自檢、預熱，當屏幕上顯示“ready”時可以進行試驗5.2.每日針沖洗：在主屏幕上選“rinseprobe”，然后按下“execute”進行針沖洗5.3.準備試劑：按照儀器試劑位置設定，把上述每項的試劑準備好，放在相應的位置 5.4.準備反應杯：打開儀器頂部反應杯儲存槽，查看反應杯是否夠量，需及時添加5.5.準備標本：將室內(nèi)質(zhì)控和離心好的樣本放在相應的樣本架上（一個架子可放10個樣本）準備好放在進樣器上5.6.輸入試驗項目：按下主菜單上的“worklist”鍵，在試驗項目鍵點擊fib，使fib項目下顯示“”變?yōu)椤啊?，按“或”將需要測試標本如上操作選擇；5.7.輸

47、入樣本號：按下“idno.entry”，按順序輸入樣本的序號或病人的病歷號5.8.開始檢測：待一切準備工作就緒，按下屏幕右上角“start”鍵，儀器開始檢測5.9.查看結(jié)果：返回主屏幕，檢測的項目如果由“”變?yōu)椤啊北砻鞔嗽囼炓呀?jīng)完成，然后按下 “storeddate”（儲存結(jié)果）鍵，屏幕會換到結(jié)果顯示界面，按下邊第一個菜單“graph”，查看凝集曲線、吸光度、結(jié)果等，檢查是否有error錯誤信息，有錯誤報警的標本需考慮重測5.10.關機前沖洗針：關機前需要洗針，按下“rinseprobe”，然后按下“execute”5.11.關機：回到主屏幕下，切斷儀器電源，關閉電源組件電源。6.參考范圍： fbg：24g/l 7.臨床意義： 7.1.fib減少見于： 先天性低（無）纖維蛋白原血癥、嚴重肝臟疾病、原發(fā)性纖維蛋白溶解、dic、異常纖 維蛋白原血癥、新生兒及早產(chǎn)兒、某些產(chǎn)科意