臨床血液學(xué)檢驗(yàn)：15 止凝血功能實(shí)驗(yàn)室檢查

1、Tests of thrombus and haemostasisTests of thrombus and haemostasis 止凝血功能實(shí)驗(yàn)室檢查止凝血功能實(shí)驗(yàn)室檢查 與臨床應(yīng)用與臨床應(yīng)用 基 礎(chǔ) 理 論基 礎(chǔ) 理 論 Tests of thrombus and haemostasis 凝血過程凝血過程(Coagulation pathway) Tests of thrombus and haemostasis 基 礎(chǔ) 理 論基 礎(chǔ) 理 論 纖溶系統(tǒng)纖溶系統(tǒng)(Fibrinolytic system) Tests of thrombus and haemostasis 基 礎(chǔ) 理 論基

2、礎(chǔ) 理 論 纖溶系統(tǒng)纖溶系統(tǒng)(Fibrinolytic system) Tests of thrombus and haemostasis 一一. 血管壁檢測(cè)血管壁檢測(cè) 三三. 凝血功能檢測(cè)凝血功能檢測(cè) 四四. 抗凝系統(tǒng)檢測(cè)抗凝系統(tǒng)檢測(cè) 二二. 血小板檢測(cè)血小板檢測(cè) 五五. 纖溶活性檢測(cè)纖溶活性檢測(cè) 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 血管壁檢測(cè)血管壁檢測(cè) 一、毛細(xì)血管抵抗力試驗(yàn)（一、毛細(xì)血管抵抗力試驗(yàn)（capillary resistance capillary resistance test, CRTtest, CRT），毛細(xì)血管脆性試驗(yàn)，束臂試驗(yàn)），毛細(xì)血管脆性試驗(yàn)，束

3、臂試驗(yàn) 原理：原理：對(duì)毛細(xì)血管施加壓力，觀察血管壁、血管對(duì)毛細(xì)血管施加壓力，觀察血管壁、血管 內(nèi)皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、 血小板綜合止血作用血小板綜合止血作用 參考值：參考值：5cm5cm直徑圓圈內(nèi)，男性直徑圓圈內(nèi)，男性55個(gè)出血點(diǎn)，個(gè)出血點(diǎn)， 女性及兒童女性及兒童1010個(gè)出血點(diǎn)個(gè)出血點(diǎn) 臨床意義：臨床意義：抵抗力減弱：血管病變；血小板減少；抵抗力減弱：血管病變；血小板減少； 血小板功能異常；血管性血友病血小板功能異常；血管性血友病 篩檢試驗(yàn)篩檢試驗(yàn) 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 CRT (capillary resistance test) 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí)

4、驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 二、出血時(shí)間（二、出血時(shí)間（Bleeding TimeBleeding Time，BTBT）測(cè)定）測(cè)定 原理：原理：皮膚毛細(xì)血管刺破，出血自然停止所需的時(shí)間。皮膚毛細(xì)血管刺破，出血自然停止所需的時(shí)間。 主要受血小板數(shù)量和功能影響，主要受血小板數(shù)量和功能影響， 其次受血管壁完整性和收縮功能影響，其次受血管壁完整性和收縮功能影響， 凝血因子影響較小凝血因子影響較小 參考值：參考值：標(biāo)準(zhǔn)化出血時(shí)間測(cè)定器法（標(biāo)準(zhǔn)化出血時(shí)間測(cè)定器法（template template bleeding time,TBT)bleeding time,TBT) 6.9 6.92.1min, 2.1m

5、in, 超過超過9min9min為異常為異常 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 Tests of thrombus and haemostasis 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 標(biāo)準(zhǔn)化出血時(shí)間測(cè)定器法測(cè)定（標(biāo)準(zhǔn)化出血時(shí)間測(cè)定器法測(cè)定（TBT） 臨床意義：臨床意義：出血時(shí)間延長(zhǎng)見于出血時(shí)間延長(zhǎng)見于 1 1 血小板明顯減少：原發(fā)或繼發(fā)性血小板減少血小板明顯減少：原發(fā)或繼發(fā)性血小板減少 性紫癜；性紫癜； 2 2 血小板功能異常：血小板無力癥；血小板功能異常：血小板無力癥； 3 3 嚴(yán)重缺乏血漿有關(guān)因子：嚴(yán)重缺乏血漿有關(guān)因子： vWDvWD、DICDIC；

6、4 4 血管異常：遺傳性出血性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥；血管異常：遺傳性出血性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥； 5 5 藥物影響：乙酰水楊酸藥物影響：乙酰水楊酸 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 血管性血友病因子抗原測(cè)定（血管性血友病因子抗原測(cè)定（vWFvWF：AgAg） 血管性血友病因子活性測(cè)定（血管性血友病因子活性測(cè)定（vWFvWF：A A） 血漿凝血酶調(diào)節(jié)蛋白抗原測(cè)定（血漿凝血酶調(diào)節(jié)蛋白抗原測(cè)定（TMTM：AgAg） 血漿內(nèi)皮素血漿內(nèi)皮素-1-1測(cè)定測(cè)定(ET-1)(ET-1) 血漿血漿 6-6-酮酮- -前列腺素前列腺素 F F1 1 測(cè)定測(cè)定 （PGIPGI2 2的降解產(chǎn)物）的降解產(chǎn)物）

7、診斷試驗(yàn)診斷試驗(yàn) 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 血管性血友病因子抗原測(cè)定（血管性血友病因子抗原測(cè)定（vWF：Ag） 血管性血友病因子活性測(cè)定（血管性血友病因子活性測(cè)定（vWF：A） vWD的分型診斷的分型診斷 vWF:Ag、 vWF:A和和F VIII:C正常正常 排除排除vWD血友病血友病A vWF:Ag、 vWF:A和和FVIII:C有一項(xiàng)降低有一項(xiàng)降低 vWF:A / vWF:Ag和和FVIII:C/ vWF:Ag接近接近1.0 vWD I型型 vWF:A / vWF:Ag 0.7 vWD2A、2B、2M型型 FVIII:C / vWF:Ag 0.7 vWD2N亞

8、型和血友病亞型和血友病A 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 血小板檢測(cè)血小板檢測(cè) 一、血小板計(jì)數(shù)一、血小板計(jì)數(shù)(platelet count,PC)(platelet count,PC) 參考值：參考值： （100-300100-300） 10109 9/L/L 檢測(cè)方法：檢測(cè)方法： 顯微鏡計(jì)數(shù)顯微鏡計(jì)數(shù) 血細(xì)胞分析儀血細(xì)胞分析儀 篩檢試驗(yàn)篩檢試驗(yàn) 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 1 1 減少：減少：100100 10109 9/L/L （1 1）生成障礙：）生成障礙：再障、放射線損傷、白血病、骨髓纖維化等再障、放射線損傷、白血病、骨髓纖維化等 （2

9、2）破壞或消耗增加：）破壞或消耗增加： a a 免疫破壞：血小板自身抗體、過敏性藥物損傷免疫破壞：血小板自身抗體、過敏性藥物損傷 b b 消耗亢進(jìn)：消耗亢進(jìn)：DICDIC； c c 血小板自身異常：先天性血小板減少癥血小板自身異常：先天性血小板減少癥 2 2 增加：增加：400400 10109 9/L/L （1 1）原發(fā)增多：）原發(fā)增多：慢粒、真紅細(xì)胞增多癥、原發(fā)血小板增多癥慢粒、真紅細(xì)胞增多癥、原發(fā)血小板增多癥 （2 2）反應(yīng)性增多：急慢性炎癥、缺鐵性貧血、腫瘤）反應(yīng)性增多：急慢性炎癥、缺鐵性貧血、腫瘤 臨床意義臨床意義： 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 血清析出血清

10、析出 血小板功能血小板功能 纖維蛋白原纖維蛋白原 數(shù)量數(shù)量 血漿異常蛋白血漿異常蛋白 影響影響 因素因素 CRT (clot retraction test) 二、血塊收縮試驗(yàn)（二、血塊收縮試驗(yàn)（clot retraction test，CRT） 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 血小板相關(guān)免疫球蛋白血小板相關(guān)免疫球蛋白 血小板粘附試驗(yàn)血小板粘附試驗(yàn) 血小板聚集試驗(yàn)血小板聚集試驗(yàn) 血小板激活的分子標(biāo)志物血小板激活的分子標(biāo)志物 1 1、 - -血小板球蛋白（血小板球蛋白（ -TG-TG） 血小板第血小板第4 4因子（因子（PF4PF4）測(cè)定）測(cè)定 2 2、P-P-選擇素選擇素

11、 3 3、血漿血栓烷、血漿血栓烷B2B2（TXB2TXB2）測(cè)定）測(cè)定 診斷試驗(yàn)診斷試驗(yàn) 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 （一）血小板相關(guān)免疫球蛋白測(cè)定（一）血小板相關(guān)免疫球蛋白測(cè)定 （platelet associated immunoglobulin, PAIg） PAIgGPAIgG、PAIgMPAIgM和和PAIgAPAIgA ELISA ELISA法測(cè)定法測(cè)定 PAIgPAIg增高，增高，見于見于ITPITP、同種免疫性血小板減少性紫、同種免疫性血小板減少性紫 癲及藥物免疫性血小板減少性紫癲等。癲及藥物免疫性血小板減少性紫癲等。 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn)

12、 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 （二）血小板粘附試驗(yàn)（二）血小板粘附試驗(yàn) 計(jì)算：計(jì)算： 臨床意義：臨床意義： 見于血管性血友病，巨見于血管性血友病，巨PLT綜合征，綜合征，BM增生，抑制劑使用增生，抑制劑使用 見于高凝狀態(tài)，血栓病見于高凝狀態(tài)，血栓病 （platelet adhesion test, PAdT） 粘附前PLT-粘附后PLT 粘附率= 粘附前PLT 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 （三）血小板聚集試驗(yàn)（三）血小板聚集試驗(yàn) 原理：原理： 誘聚劑誘聚劑 PRP PAgT 臨床意義：臨床意義： 見于血小板無力癥，尿毒癥，見于血小板無力癥，尿毒癥，BM增生，增生，plt抑制劑

13、使用抑制劑使用 見于高凝狀態(tài)，血栓病見于高凝狀態(tài)，血栓病 透光度透光度 ADP，腎上腺素，凝，腎上腺素，凝 血酶，膠原，花生四烯血酶，膠原，花生四烯 酸，瑞斯托霉素酸，瑞斯托霉素 T A （platelet aggregation test, PAgT） 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 Chrono-logChrono-log 血小板聚集血小板聚集儀 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 血小板聚集曲線與血小板血小板聚集曲線與血小板 狀態(tài)對(duì)應(yīng)示意圖狀態(tài)對(duì)應(yīng)示意圖 Tests of thrombus and haemostasis （四）（四） 血小板激活的

14、分子標(biāo)志物血小板激活的分子標(biāo)志物 1 1、 - -血小板球蛋白（血小板球蛋白（ -TG-TG） 血小板第血小板第4 4因子（因子（PF4PF4）測(cè)定）測(cè)定 2 2、P-P-選擇素選擇素(P- selectin, GMP-140)(P- selectin, GMP-140) 3 3、血漿血栓烷、血漿血栓烷B2B2（TXBTXB2 2）測(cè)定）測(cè)定 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 凝血功能檢測(cè)凝血功能檢測(cè) 1.1.外源性凝血途徑的綜合檢查外源性凝血途徑的綜合檢查 血漿凝血酶原時(shí)間血漿凝血酶原時(shí)間 （Prothrombin Time, PTProthrombin Time, PT

15、） 2.2.內(nèi)源性凝血途徑的綜合檢查內(nèi)源性凝血途徑的綜合檢查 活化部分凝血活酶時(shí)間活化部分凝血活酶時(shí)間 （Activated Partial Activated Partial Thromboplastin Time, APTTThromboplastin Time, APTT） 篩檢試驗(yàn)篩檢試驗(yàn) Sysmex CA7000 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 Tests of thrombus and haemostasis 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 全自動(dòng)凝血分析儀全自動(dòng)凝血分析儀 一、血漿凝血酶原時(shí)間一、血漿凝血酶原時(shí)間 （prothromb

16、in time, PT ） PTPT延長(zhǎng)常見于參與外源性凝延長(zhǎng)常見于參與外源性凝 血系統(tǒng)的凝血因子缺乏血系統(tǒng)的凝血因子缺乏：遺傳：遺傳 性因子性因子缺乏、嚴(yán)重肝病、缺乏、嚴(yán)重肝病、DICDIC等。等。 Tests of thrombus and haemostasis 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 全自動(dòng)凝血分析儀全自動(dòng)凝血分析儀 PT Tests of thrombus and haemostasis 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 PT結(jié)果的報(bào)告方式結(jié)果的報(bào)告方式 全自動(dòng)凝血分析儀全自動(dòng)凝血分析儀 Tests of thrombus and h

17、aemostasis 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 國際標(biāo)準(zhǔn)化比值國際標(biāo)準(zhǔn)化比值 全自動(dòng)凝血分析儀全自動(dòng)凝血分析儀 Tests of thrombus and haemostasis 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 PT結(jié)果的臨床應(yīng)用結(jié)果的臨床應(yīng)用 全自動(dòng)凝血分析儀全自動(dòng)凝血分析儀 Tests of thrombus and haemostasis APTT延長(zhǎng)常見于參與內(nèi)源延長(zhǎng)常見于參與內(nèi)源 性凝血系統(tǒng)的凝血因子缺乏性凝血系統(tǒng)的凝血因子缺乏： 血友病、血友病、DIC、嚴(yán)重肝病等、嚴(yán)重肝病等 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 全

18、自動(dòng)凝血分析儀全自動(dòng)凝血分析儀 二、活化的部分凝血活酶時(shí)間二、活化的部分凝血活酶時(shí)間 （activated partial thromboplastin time, APTT） ） Tests of thrombus and haemostasis 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 全自動(dòng)凝血分析儀全自動(dòng)凝血分析儀 APTT APTT結(jié)果的臨床應(yīng)用結(jié)果的臨床應(yīng)用 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 全自動(dòng)凝血分析儀全自動(dòng)凝血分析儀 Tests of thrombus and haemostasis 纖維蛋白原濃度測(cè)定（纖維蛋白原濃度測(cè)定（Fbg)Fbg)

19、凝血因子凝血因子VIIIVIII、IXIX、XIXI、XIIXII活性測(cè)定活性測(cè)定 凝血因子凝血因子II II、V V、VIIVII、X X活性測(cè)定活性測(cè)定 凝血因子凝血因子XIIIXIII定性試驗(yàn)定性試驗(yàn) 凝血酶生成分子標(biāo)志物凝血酶生成分子標(biāo)志物 診斷試驗(yàn)診斷試驗(yàn) 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 Tests of thrombus and haemostasis 血漿纖維蛋白原測(cè)定血漿纖維蛋白原測(cè)定 （fibrinogen, Fbg ） 全自動(dòng)凝血分析儀全自動(dòng)凝血分析儀 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 Tests of thrombus and h

20、aemostasis Fbg測(cè)定的臨床意義測(cè)定的臨床意義 全自動(dòng)凝血分析儀全自動(dòng)凝血分析儀 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 血漿因子血漿因子、活性測(cè)定活性測(cè)定 受檢血漿分別與乏因子受檢血漿分別與乏因子IIII、V V、VIIVII、X X因子的基質(zhì)血漿混合因子的基質(zhì)血漿混合 ，再加兔腦粉浸出液和，再加兔腦粉浸出液和CaCa2+ 2+，測(cè) ，測(cè)PTPT FII:C:97.7%FII:C:97.7%16.7%,16.7%, FV:C:102.4% FV:C:102.4%30.9%30.9% FVII:C:103% FVII:C:103%17.3%17.3% FX:C:103%

21、 FX:C:103%19.0%19.0% II:C II:C 、V:C V:C 、 VII:C VII:C 、 X:C X:C 主要用于肝臟受損檢查主要用于肝臟受損檢查; ; VII:C VII:C 下降下降: :肝病早期發(fā)生；肝病早期發(fā)生； V:C V:C 在肝損傷、肝移植中應(yīng)用較多在肝損傷、肝移植中應(yīng)用較多 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 凝血因子的測(cè)定凝血因子的測(cè)定 （coagulation factor） 血漿因子血漿因子VIIIVIII、IXIX、XIXI、XIIXII活性測(cè)定活性測(cè)定 受檢血漿分別加入乏因子受檢血漿分別加入乏因子VIIIVIII、IXIX、XI

22、XI、XIIXII因子因子 的基質(zhì)血漿，白陶土腦磷脂懸液和的基質(zhì)血漿，白陶土腦磷脂懸液和CaCa2+ 2+，測(cè) ，測(cè)APTTAPTT FVIII:C:103% FVIII:C:103%25.7%, FIX:C:98.1%25.7%, FIX:C:98.1%30.4%30.4% FXI:C:100% FXI:C:100%18.4%, FXII:C:92.418.4%, FXII:C:92.420.7%20.7% 減低見于：減低見于： FVIII:CFVIII:C：血友病甲（重型：血友病甲（重型1%, 1%, 中型中型2 25%5%，輕型，輕型6 625%25%， 亞臨床型亞臨床型 262645%

23、45%）；血管性血友?。唬?；血管性血友病；VIIIVIII因子抗體、因子抗體、DICDIC FIX:C: FIX:C: 血友病乙；肝病、維生素血友病乙；肝病、維生素K K缺乏、缺乏、DICDIC、口服抗凝劑、口服抗凝劑 FXI:C: FXI:C: 因子因子XIXI缺乏、肝病、缺乏、肝病、DICDIC FXII:C FXII:C：先天性：先天性XIIXII因子缺乏癥、肝病、因子缺乏癥、肝病、DIC DIC 、某些血栓疾病、某些血栓疾病 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 凝血酶生成分子標(biāo)志物檢測(cè)原理凝血酶生成分子標(biāo)志物檢測(cè)原理 F F1+2 1+2： ：反映凝血酶生成總量及凝血

24、酶原酶活性反映凝血酶生成總量及凝血酶原酶活性 凝血酶原凝血酶原 凝血酶凝血酶 F F1+21+2 FPAFPA：代表凝血酶生成后對(duì)纖維蛋白原水解能力代表凝血酶生成后對(duì)纖維蛋白原水解能力 纖維蛋白原纖維蛋白原 非連接性纖維蛋白單體非連接性纖維蛋白單體 FPAFPA、FPBFPB SFMCSFMC：反映凝血酶作用后纖維蛋白單體的形成反映凝血酶作用后纖維蛋白單體的形成 TATTAT：反映凝血酶被抗凝血酶中和的程度反映凝血酶被抗凝血酶中和的程度 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 Tests of thrombus and haemostasis 凝血酶時(shí)間（凝血酶時(shí)間（thromb

25、in time, TT)thrombin time, TT) 甲苯胺藍(lán)糾正試驗(yàn)甲苯胺藍(lán)糾正試驗(yàn) 病理性抗凝物質(zhì)的篩檢試驗(yàn)病理性抗凝物質(zhì)的篩檢試驗(yàn) 病理性抗凝物質(zhì)的診斷試驗(yàn)病理性抗凝物質(zhì)的診斷試驗(yàn) 狼瘡抗凝物質(zhì)測(cè)定狼瘡抗凝物質(zhì)測(cè)定 抗心磷脂抗體測(cè)定抗心磷脂抗體測(cè)定 抗凝血酶活性測(cè)定抗凝血酶活性測(cè)定( AT)( AT) 蛋白蛋白C C活性測(cè)定活性測(cè)定 游離蛋白游離蛋白S S抗原和總蛋白抗原和總蛋白S S抗原測(cè)定抗原測(cè)定 凝血酶凝血酶- -抗凝血酶復(fù)合物測(cè)定抗凝血酶復(fù)合物測(cè)定 生理性抗凝因子檢測(cè)生理性抗凝因子檢測(cè) 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 抗凝系統(tǒng)檢測(cè)抗凝系統(tǒng)檢測(cè) in

26、Blood in Plasma without without without IX XIII XII X IX VIII VII V IV III II I IX XIII XII X IX VIII VII V IV III II I TT Reagent Fibrin Measurement Clotting Time Thrombin Normal Range 16-18s 37 I II Blood Sampling Trisodium Citrate 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 凝血酶時(shí)間凝血酶時(shí)間 （thrombin time, TT) 臨床意義：臨床意

27、義： （1 1）反映是否存在抗凝物質(zhì)；）反映是否存在抗凝物質(zhì)； （2 2）反映纖維蛋白原質(zhì)和量。）反映纖維蛋白原質(zhì)和量。 臨床應(yīng)用：臨床應(yīng)用： （1 1）TTTT延長(zhǎng)：延長(zhǎng)：DICDIC、先天性低（無）纖維蛋白原血癥、原發(fā)、先天性低（無）纖維蛋白原血癥、原發(fā) 性纖溶、肝??；肝素或類肝素物質(zhì)增多、性纖溶、肝??；肝素或類肝素物質(zhì)增多、FDPFDP增多等增多等 （2 2）TTTT縮短：縮短：異常蛋白血癥或巨球蛋白血癥、標(biāo)本異常蛋白血癥或巨球蛋白血癥、標(biāo)本44放置放置 過久、組織液混入血漿等過久、組織液混入血漿等 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 Antithrombin Hepa

28、rin Thrombin (過剩量) （酶） （血漿） Heparin Antithrombin Heparin Thrombin (過剩量)Thrombin (殘存部分) （失活） AAAAAA （合成基質(zhì)） AAAAAA 比色定量（405nm） + + + pNA pNA Antithrombin 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 抗凝血酶檢測(cè)抗凝血酶檢測(cè) （antithrombin , AT) 發(fā)色底物法發(fā)色底物法 參考值：參考值：活性活性 108.5108.55.3%5.3% 臨床意義：臨床意義： (1)AT(1)AT活性與抗原測(cè)定是臨床評(píng)估高凝狀態(tài)的良好活性與抗原

29、測(cè)定是臨床評(píng)估高凝狀態(tài)的良好 指標(biāo)指標(biāo), ,尤其是活性下降尤其是活性下降 (2)(2)先天性先天性ATAT缺乏的分型依據(jù)缺乏的分型依據(jù) CRMCRM- -: :抗原和活性同時(shí)下降抗原和活性同時(shí)下降 CRMCRM+ +: :抗原正常抗原正常, ,活性下降活性下降 (3)(3)疑難疑難DCIDCI診斷時(shí)診斷時(shí),AT,AT下降具有診斷價(jià)值下降具有診斷價(jià)值 (4)(4)肝素抗凝抵抗時(shí)肝素抗凝抵抗時(shí), ,注意檢測(cè)注意檢測(cè)ATAT 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 Tests of thrombus and haemostasis D-DimerD-Dimer測(cè)定測(cè)定 纖維蛋白（原）降

30、解產(chǎn)物纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物 (FDP) (FDP) 血漿硫酸魚精蛋白副凝固試驗(yàn)（血漿硫酸魚精蛋白副凝固試驗(yàn)（3P3P試驗(yàn)）試驗(yàn)） 優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間 組織型纖溶酶原激活劑（組織型纖溶酶原激活劑（t-PAt-PA）測(cè)定測(cè)定 纖溶酶原（纖溶酶原（PLGPLG）活性測(cè)定活性測(cè)定 纖溶酶原激活抑制纖溶酶原激活抑制-1-1（PAI-1PAI-1）活性測(cè)定活性測(cè)定 纖溶酶纖溶酶- -抗纖溶酶復(fù)合物（抗纖溶酶復(fù)合物（PAPPAP）測(cè)定測(cè)定 纖溶活性檢測(cè)纖溶活性檢測(cè) 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 血漿纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物測(cè)定血漿纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物測(cè)定 fibrin

31、(ogen) degradation products, FDP 參考值參考值 小于小于5mg/L ？ 什麼是什麼是FDP FDP陽性或增高見于陽性或增高見于 原發(fā)性纖溶、原發(fā)性纖溶、DIC、血栓形成及溶栓等。、血栓形成及溶栓等。 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 血漿血漿D-二聚體（二聚體（D-dimer, DD ） 正常值正常值 陰性陰性(乳膠凝集法乳膠凝集法) 0-256g/L（ELISA法）法） DD是繼發(fā)性纖溶的標(biāo)志是繼發(fā)性纖溶的標(biāo)志 在繼發(fā)性纖溶（如在繼發(fā)性纖溶（如 DIC）為陽性）為陽性 在原發(fā)性纖溶為陰性。在原發(fā)性纖溶為陰性。 ？什麼是繼發(fā)性纖溶什麼是繼發(fā)性

32、纖溶 和原發(fā)性纖溶和原發(fā)性纖溶 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 D-D陰性是排除深靜脈血栓（陰性是排除深靜脈血栓（DVT）和肺血栓栓塞（）和肺血栓栓塞（PE）的重要試驗(yàn)）的重要試驗(yàn) 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 Cross-linked fibrin degradation products originating from the natural breakdown of the fibrin clot network Direct marker of fibrinolysis (plasmin generation) Indirect mark

33、er of coagulation (thrombin generation) Increased level of D-dimer is an indicator of the formation of a blood clot somewhere in the circulation Sensitive marker of acute thrombosis Not specific for an acute thrombus; thrombin generation also occurs due to Surgery Trauma Infection Inflammation Pregn

34、ancy / post-partum Cross-linked Fibrin Degradation Products (D-dimer) 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 47 “To safely exclude PE, the sensitivity should approach 100% because for every 2% decrease in sensitivity, 1 per 1000 patients studied will die of recurrent PE as a result of inappropriately withholdin

35、g anticoagulant therapy” Kruip, et al. Arch Intern Med 2002; 162: 1631-5. 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 Bates 等靜脈血栓形成測(cè)定等靜脈血栓形成測(cè)定D-Dimer的價(jià)值（的價(jià)值（2001）：）： 4個(gè)大學(xué)醫(yī)學(xué)治療中心，個(gè)大學(xué)醫(yī)學(xué)治療中心，595例疑為靜脈血栓癥者，例疑為靜脈血栓癥者， D-Dimer陽性似然比（陽性似然比（+LR）較低（）較低（1.32.2），）， 表明表明DD 試驗(yàn)陽性不能作為靜脈血栓癥的納入診斷。試驗(yàn)陽性不能作為靜脈血栓癥的納入診斷。 D-Dimer陰性似然比（陰性似然比（

36、-LR）為）為0.00.25，表明，表明DD陰性陰性 則可作為靜脈血栓癥排除診斷。則可作為靜脈血栓癥排除診斷。 循證檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)進(jìn)展循證檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)進(jìn)展 D-Dimer的評(píng)價(jià)和應(yīng)用的評(píng)價(jià)和應(yīng)用 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 “英國血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)血栓與止血分會(huì)英國血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)血栓與止血分會(huì)”（2004）：）： D-Dimer 陰性，可用于排除陰性，可用于排除VTE的診斷，而不必再作影像的診斷，而不必再作影像 學(xué)檢查。學(xué)檢查。 Bounameaux H研究研究ELISA法法D-Dimer檢測(cè)對(duì)急診肺栓塞檢測(cè)對(duì)急診肺栓塞 （PE）患者（）患者（2003） 結(jié)果：結(jié)果： D-

37、Dimer檢測(cè)對(duì)急診檢測(cè)對(duì)急診PE患者靈敏度高、特異性患者靈敏度高、特異性 低，對(duì)年齡超過低，對(duì)年齡超過70歲的患者，歲的患者， D-Dimer的診斷特異性更的診斷特異性更 低（低（14%） 結(jié)論：結(jié)論： D-Dimer檢測(cè)仍不能作為診斷檢測(cè)仍不能作為診斷PE的獨(dú)立試驗(yàn)，的獨(dú)立試驗(yàn)， 而而只能作為整體診斷的一部分。只能作為整體診斷的一部分。 實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目實(shí) 驗(yàn) 室 檢 驗(yàn) 項(xiàng) 目 Sysmex CA7000 STA-R Evolution ACL TOP 止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化 止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化 儀器設(shè)計(jì)基礎(chǔ)儀器設(shè)計(jì)基礎(chǔ) 儀器設(shè)計(jì)原理儀器設(shè)計(jì)原理

38、 生生 物物 學(xué)學(xué) 方方 法法 血漿中凝血因子激活，纖維蛋白原血漿中凝血因子激活，纖維蛋白原 變?yōu)槔w維蛋白，發(fā)生物理特性變化變?yōu)槔w維蛋白，發(fā)生物理特性變化 透射比濁法透射比濁法 散射比濁法散射比濁法 ：血漿透明度的改變血漿透明度的改變 ：纖維蛋白的導(dǎo)電性：鉤方法纖維蛋白的導(dǎo)電性：鉤方法 ：纖維蛋白的產(chǎn)生，血漿粘度增加纖維蛋白的產(chǎn)生，血漿粘度增加 磁珠法磁珠法 止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化 in Blood in Plasma PT Reagent Fibrin III Extrinsic System Measure Clotting Time without Tissue Facto

39、r Calcium (Ca2+) without without Normal Range 11-13 sec IX 37癈癈 Ca2+, PL Ca2+, PL XIII XII X IX VIII VII V IV III II I IV IX XIII XII X IX VIII VII V IV III II I VIIIII X V II I Blood Sampling Trisodium Citrate 止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化 37 37 散亂光散亂光 散射光強(qiáng)度增加散射光強(qiáng)度增加 光源光源 光源光源 透過光透過光 透射光強(qiáng)度減少透射光強(qiáng)度減少 透射光透射光 散射光

40、散射光 凝固反應(yīng)凝固反應(yīng) 的進(jìn)行的進(jìn)行 凝固反應(yīng)凝固反應(yīng) 的進(jìn)行的進(jìn)行 凝固反應(yīng)凝固反應(yīng) 的進(jìn)行的進(jìn)行 凝固反應(yīng)凝固反應(yīng) 的進(jìn)行的進(jìn)行 檢檢出部出部 檢檢出部出部 止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化 方法方法2 電磁石電磁石 高高頻頻波波高高頻頻波波 37 凝固反應(yīng)的進(jìn)行凝固反應(yīng)的進(jìn)行 血漿與試劑血漿與試劑 磁珠振動(dòng)磁珠振動(dòng) 電磁石電磁石 粘稠度粘稠度的的 増加増加 磁珠振幅減少磁珠振幅減少 方法方法1 磁珠磁珠 傳感器傳感器 血漿血漿與試劑與試劑 粘稠度粘稠度的的 増加増加 側(cè)面圖側(cè)面圖上面圖上面圖 傳感器的檢出磁珠傳感器的檢出磁珠 位置的改變位置的改變 37 凝固反應(yīng)的進(jìn)行凝固反應(yīng)的進(jìn)行

41、 止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化 生生 物物 化化 學(xué)學(xué) 方方 法法 激活的凝血因子皆為酶，可激活特異的分解底物而顯色激活的凝血因子皆為酶，可激活特異的分解底物而顯色 對(duì)酶的檢測(cè)：對(duì)酶的檢測(cè)：即在含酶的樣品中直接加入產(chǎn)色底物。即在含酶的樣品中直接加入產(chǎn)色底物。 對(duì)酶原的檢測(cè)：對(duì)酶原的檢測(cè)：必須先用激活劑將酶原激活使其位點(diǎn)暴露必須先用激活劑將酶原激活使其位點(diǎn)暴露, , 再加入基質(zhì)再加入基質(zhì), ,使酶將產(chǎn)色物質(zhì)上的顯色物質(zhì)使酶將產(chǎn)色物質(zhì)上的顯色物質(zhì)( (PNAPNA) )裂解下來裂解下來 對(duì)酶抑制物檢測(cè)：對(duì)酶抑制物檢測(cè)：首先往加入待測(cè)樣品加入過量對(duì)應(yīng)酶，首先往加入待測(cè)樣品加入過量對(duì)應(yīng)酶， 中

42、和該抑制物剩余的酶可裂解基質(zhì)產(chǎn)生中和該抑制物剩余的酶可裂解基質(zhì)產(chǎn)生 PNAPNA 儀器儀器 設(shè)計(jì)設(shè)計(jì) 原理原理 儀器設(shè)計(jì)基礎(chǔ)儀器設(shè)計(jì)基礎(chǔ) 止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化 凝血酶（血漿）凝血酶（血漿） 產(chǎn)色底物產(chǎn)色底物 多肽多肽+ + PNAPNA 加過量的激活劑加過量的激活劑 蛋白蛋白C C 活化蛋白活化蛋白C C 產(chǎn)色底物產(chǎn)色底物 多肽多肽+ + PNAPNA 止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化 Antithrombin Heparin Thrombin (過剩量) Heparin Antithrombin III Heparin Thrombin (過剩量)Thrombin AAA

43、AAA （合成基質(zhì)） AAAAAA pNA pNA Antithrombin 止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化 免免 疫疫 學(xué)學(xué) 方方 法法 利用抗凝（凝血）因子與抗體利用抗凝（凝血）因子與抗體 結(jié)合反應(yīng)，血漿發(fā)生濁度變化結(jié)合反應(yīng)，血漿發(fā)生濁度變化 直接濁度分析直接濁度分析 乳膠比濁分析乳膠比濁分析 儀器設(shè)計(jì)基礎(chǔ)儀器設(shè)計(jì)基礎(chǔ): : 儀器設(shè)計(jì)原理儀器設(shè)計(jì)原理 止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化 散色光比濁法散色光比濁法 透射光比濁法透射光比濁法 乳膠標(biāo)記抗體乳膠標(biāo)記抗體 + + 血漿 血漿D-Dimer D-Dimer反應(yīng) 反應(yīng) 止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化止凝血試驗(yàn)的自動(dòng)化 自動(dòng)血凝分析檢測(cè)參數(shù)、方法與參考值自動(dòng)血凝分析檢測(cè)參數(shù)、方法與參考值 分析參數(shù)分析參數(shù) 凝固法凝固法 產(chǎn)色法產(chǎn)色法 免疫法免疫法 參考值參考值 PT 11-14sec, INR 2-4 APTT 28-40sec FIB 2-4g/L TT 21sec vWF 50-160% II 70-120% V 65-130% VII 70-120% X 70-120% VIII 80-120% IX 60-150% XI 70-140% XII 80-130%