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文檔簡(jiǎn)介
1、HPV分型檢測(cè)的介紹 1 2 3 HPV分型檢測(cè)的介紹 HPV分型檢測(cè)的介紹 1.1 宮頸癌的概況宮頸癌的概況 v 宮頸癌是目前威脅女性健康的主要疾病,在全世界范圍內(nèi) 也是導(dǎo)致女性死亡的第二大癌癥。 v 世界上每世界上每2 2分鐘就有一位婦女死于宮頸癌。分鐘就有一位婦女死于宮頸癌。 v 我國(guó)宮頸癌兩率很高,屬于最嚴(yán)重的腫瘤之一。(每年有 15萬(wàn)新發(fā)病例,每年約有10萬(wàn)名婦女死于宮頸癌)。 v 發(fā)病年齡一般在4060歲。 v 與公共衛(wèi)生狀況直接相關(guān)。 HPV分型檢測(cè)的介紹 上世紀(jì)70年代末, Harald zur Hausen 首先提出人乳頭 瘤病毒(HPV)可能 是宮頸癌的致癌 病毒; 1.2
2、 宮頸癌與宮頸癌與HPV的研究歷程的研究歷程 1977年,Laverty 在電鏡中觀察到 宮頸癌活檢組織 中存在人乳頭瘤 病毒顆粒; 1989年左右, Keerti Shah等發(fā) 現(xiàn)99.7%99.7%的宮頸癌的宮頸癌 與與HPVHPV感染有關(guān)感染有關(guān), 證實(shí)了宮頸癌與 HPV感染有直接關(guān) 系; HPV的感染使宮頸癌的相對(duì)危險(xiǎn)性增加250倍 HPV分型檢測(cè)的介紹 v1995年 國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu) (IARC) 專(zhuān)題討論會(huì)通過(guò): HPV感染是宮頸癌的主要感染是宮頸癌的主要 原因原因; v2005年 IARC/WHO推薦HPV 檢測(cè)可以用于宮頸癌 篩查; HPV分型檢測(cè)的介紹 v2008年10月6日
3、公布Harald zur Hausen獲諾貝爾生 理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。 哈拉爾德楚爾豪森 HPV分型檢測(cè)的介紹 1.3 宮頸癌的致病因素宮頸癌的致病因素 HPV分型檢測(cè)的介紹 v 性接觸傳播:性接觸傳播: 丈夫陰莖HPV的存在可使妻子宮頸受染的危險(xiǎn)增加9 倍;相同的HPV型別可以在性伴侶中檢出;與此相 反,處女通常是檢測(cè)不到HPV感染。 v 非性直接接觸感染:非性直接接觸感染:通過(guò)接觸病變部位及病人 分泌物感染; v 間接接觸:間接接觸:通過(guò)病人的衣物和用品感染; v 母嬰傳播:母嬰傳播:在分娩過(guò)程中通過(guò)產(chǎn)道直接接觸傳播, 還可以通過(guò)血液、羊水及胎盤(pán)傳播,或者可能通過(guò) 嬰兒出生后與攜帶HPV的母親密
4、切接觸傳染。 1.4 HPV的傳播途徑的傳播途徑 HPV分型檢測(cè)的介紹 HPV分型檢測(cè)的介紹 HPV感染潛伏期與發(fā)病期感染潛伏期與發(fā)病期 v 低危型HPV感染平均持續(xù)時(shí)間是4.8個(gè)月 v 高危型HPV感染平均持續(xù)時(shí)間是8個(gè)月 v HPV感染的最常見(jiàn)的結(jié)局是沒(méi)有明顯的臨床表現(xiàn),絕大部 分會(huì)被機(jī)體免疫力自動(dòng)清除 v 只有持續(xù)持續(xù)的高危型高危型的HPV感染才會(huì)發(fā)生癌前病變或?qū)m頸癌。 v 一般平均8-24月可發(fā)生輕度、中度和重度的宮頸癌前病 變(CIN1、CIN2和CIN3);再平均5-10年才可發(fā)生浸 潤(rùn)癌,只要早查早治,是完全可以避免死于宮頸癌的。 唯一病因明確唯一病因明確 唯一可以早期預(yù)防和治療
5、唯一可以早期預(yù)防和治療 唯一可以徹底根除的癌癥唯一可以徹底根除的癌癥 HPV分型檢測(cè)的介紹 1.5 HPV病毒學(xué)知識(shí)病毒學(xué)知識(shí) v 小環(huán)狀雙鏈DNA病毒,約8Kb v 顆粒直徑為5055nm,無(wú)包膜 v 由72個(gè)病毒殼粒包被 v 在自然界中穩(wěn)定性好,廣泛分布 v 較高的種依賴性 v 嗜上皮性,在基底層細(xì)胞中潛伏 v 在鱗狀上皮細(xì)胞中復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯、 增殖 HPV(human papillomavirus)是一組病毒的總稱是一組病毒的總稱 HPV分型檢測(cè)的介紹 早期區(qū)早期區(qū)(early region, E) 含有E1、E2、E4、E5、E6、E7共6 個(gè)基因, 是維持病毒復(fù)制、編碼病毒蛋白、維
6、持細(xì)胞內(nèi)病毒的高拷貝數(shù)的基因 晚期區(qū)晚期區(qū)(late region, L) 長(zhǎng)控制區(qū)長(zhǎng)控制區(qū)(long control region, LCR) HPV分型檢測(cè)的介紹 HPV16 L1: 主要衣 殼蛋白,是 疫苗研發(fā)的 主要成分 L2: 次要衣殼蛋 白,是抗體的主 要識(shí)別位點(diǎn) E4:結(jié)合并破壞中表層細(xì)胞角蛋 白網(wǎng),形成中表層細(xì)胞的挖空外觀 HPV 的主要致癌基因 n E6 通過(guò)抑制p53而阻斷凋亡 n E7 通過(guò)抑制pRB使細(xì)胞周期失控 E2:負(fù)性調(diào)節(jié) E6和E7,維持 凋亡和細(xì)胞周期 的調(diào)控 病毒整合時(shí)會(huì)破 壞E2基因的結(jié) 構(gòu),導(dǎo)致失活 X p53 是一種核蛋白,負(fù)向調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化。是
7、一種核蛋白,負(fù)向調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化。p53的的 降解失活阻礙了細(xì)胞對(duì)降解失活阻礙了細(xì)胞對(duì)DNA損傷的反應(yīng),由此導(dǎo)致細(xì)胞遺損傷的反應(yīng),由此導(dǎo)致細(xì)胞遺 傳學(xué)性狀改變的積累,進(jìn)而產(chǎn)生惡變的基因型。傳學(xué)性狀改變的積累,進(jìn)而產(chǎn)生惡變的基因型。 pRB是重要的抑癌基因,直接參與細(xì)胞周期的調(diào)控。是重要的抑癌基因,直接參與細(xì)胞周期的調(diào)控。 pRB功能失效,改變了細(xì)胞生長(zhǎng)周期的調(diào)控機(jī)制,使細(xì)功能失效,改變了細(xì)胞生長(zhǎng)周期的調(diào)控機(jī)制,使細(xì) 胞永生化,并對(duì)惡性病變的防御機(jī)制進(jìn)一步影響。胞永生化,并對(duì)惡性病變的防御機(jī)制進(jìn)一步影響。 HPV分型檢測(cè)的介紹 1.6 HPV的侵入、復(fù)制和釋放的侵入、復(fù)制和釋放 侵入:侵入:
8、病毒 微創(chuàng)口 微創(chuàng)口 皮膚黏膜表層 感染感染 (副)基底層細(xì)胞 附加體形式附加體形式 在宿主細(xì)胞核內(nèi)復(fù)制 復(fù)制:復(fù)制:依賴于上皮細(xì)胞的分化,在基底層上層細(xì)胞中開(kāi)始復(fù)制 釋放:釋放:在表皮細(xì)胞中完成裝配并釋放完整病毒顆粒。當(dāng)表皮細(xì)胞脫落時(shí),在皮膚表 面可發(fā)現(xiàn)病毒顆粒。 HPV分型檢測(cè)的介紹 1.7 宮頸組織與宮頸組織病變宮頸組織與宮頸組織病變 HPV分型檢測(cè)的介紹 輕度不典型增生(CIN): 中度不典型增生(CIN )重度不典型增生(CIN ) :是一組病變的統(tǒng)稱,包括宮頸不典型增生和原位癌, 為宮頸浸潤(rùn)癌的癌前期病變。 通常將CIN分為3級(jí),以輕/中/重級(jí)不典型增生來(lái)區(qū)分 HPV分型檢測(cè)的介紹
9、 正常宮頸正常宮頸 感染感染 清除清除 HPV 感染感染 演進(jìn)演進(jìn) 消退消退 癌前病變癌前病變癌癌 浸潤(rùn)浸潤(rùn) 一過(guò)性一過(guò)性HPV感染感染持續(xù)性持續(xù)性HPV感染感染 E 7 E 6 E 2E6 E7 E 2 HPV分型檢測(cè)的介紹 一過(guò)性一過(guò)性HPV感染感染持續(xù)性持續(xù)性HPV感染感染 LSILHSIL CIN CIN CIN Very mild /mild dysplasiaModerate dysplasia S e v e r e dysplasia In situ carcinoma I n v a s i v e carcinoma HPV溫和輕微的激活宿主細(xì)胞的遺 傳學(xué)變化 HPV嚴(yán)重的
10、破壞宿主的遺傳學(xué)平衡 E6和E7低水平的表達(dá),以維持病毒 基因組的復(fù)制和宿主細(xì)胞的生長(zhǎng) E6和E7高水平表達(dá),宿主細(xì)胞凋亡被阻斷,細(xì)胞周期失控, 宿主細(xì)胞開(kāi)始發(fā)生惡變 E2負(fù)責(zé)E6、E7的負(fù)調(diào)控。保持宿主 細(xì)胞的分化和成熟;確保能夠產(chǎn)生 完成的病毒顆粒 E2基因在病毒DNA整合入宿主基因組時(shí)被破壞,導(dǎo)致失去對(duì) E6和E7的負(fù)調(diào)控的能力 在上皮分化的終末階段 L1和L2基因開(kāi)始表達(dá)并組裝形成 病毒衣殼完整的病毒顆粒從宿主 細(xì)胞內(nèi)釋放出來(lái) 大量E4 聚集溶解宿主細(xì)胞骨架蛋 白呈現(xiàn)挖空細(xì)胞的外觀 在宿主細(xì)胞發(fā)生惡變時(shí) 細(xì)胞核的異形性:倍體的增多或非整倍體的出現(xiàn) 細(xì)胞分裂活性:持續(xù)增生 喪失分化能力:
11、不同程度的細(xì)胞不成熟性 HPV分型檢測(cè)的介紹 1.8 HPV感染引起的疾病感染引起的疾病 HPV分型檢測(cè)的介紹 疾病疾病感染感染HPV型別型別 扁平疣扁平疣 3、10、27、28、41 尋常疣尋常疣1、2、4、7、27、29、40、54 疣狀表皮發(fā)育不良疣狀表皮發(fā)育不良 5、8、12、14、15、17、19、25、38、46、 47、49、50 尖銳濕疣尖銳濕疣6、11、16、18、31、33、34、35、39、51 宮頸上皮內(nèi)瘤宮頸上皮內(nèi)瘤6、11、 16、18、31、33、35、43、44、51、 56、58、61 浸潤(rùn)性宮頸癌浸潤(rùn)性宮頸癌16、18、31、33、 35、39、45、51、
12、52、56、 58、59、68 陰莖癌陰莖癌16、18 女陰癌女陰癌16、18 HPV分型檢測(cè)的介紹 HPV分型檢測(cè)的介紹 HPV分型檢測(cè)的介紹 2.1 乳頭瘤病毒的分類(lèi)依據(jù)乳頭瘤病毒的分類(lèi)依據(jù) 主要以病毒基因組中L1區(qū)的DNA同源性作為分類(lèi)依據(jù): v 屬屬:病毒全基因組DNA同源性23%43%;同時(shí)病毒基因 組L1區(qū)DNA同源性在60%以下; v 種種:病毒基因組L1區(qū)DNA同源性介于60%70%; v 型型:病毒基因組L1區(qū)DNA同源性介于71%89%; v 亞型及變異株亞型及變異株:L1區(qū)DNA同源性在90%100%。 HPV分型檢測(cè)的介紹 HPV的型別的型別 v 目前已發(fā)現(xiàn)超過(guò)型別的人
13、乳頭瘤病毒(HPV)。 v 依據(jù)與生殖道腫瘤相關(guān)性,將HPV分為: HPV分型檢測(cè)的介紹 2.2 HPV分型檢測(cè)的意義分型檢測(cè)的意義 (1)預(yù)測(cè)受檢者發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)度,確定篩查間隔)預(yù)測(cè)受檢者發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)度,確定篩查間隔 女性感染HPV16或18型患宮頸癌及癌前病變的風(fēng)險(xiǎn) HPV分型檢測(cè)的介紹 對(duì)丹麥哥本哈根11088名登記在冊(cè)的婦女進(jìn)行了為 期數(shù)年的跟蹤隨訪研究,對(duì)受檢人群進(jìn)行了宮頸細(xì)胞涂 片檢查、HPV檢測(cè)和組織病理檢查。 該研究中假定連續(xù)兩次HPV檢測(cè)陰性的危險(xiǎn)系數(shù)為 1.0,各種持續(xù)感染情況的危險(xiǎn)系數(shù)是其與1.0的比值。 Susanne K Kjaer,et al. Type specifi
14、c persistence of high risk human papillomavirus (HPV) as indicator of high grade cervical squamous intraepithelial lesions in young women:population based prospective follow up study. BMJ VOLUME 325 14 SEPTEMBER 2002 (2)區(qū)分持續(xù)(重復(fù))感染與一過(guò)性感染)區(qū)分持續(xù)(重復(fù))感染與一過(guò)性感染 HPV分型檢測(cè)的介紹 HPV持續(xù)感染的危險(xiǎn)性評(píng)定持續(xù)感染的危險(xiǎn)性評(píng)定 持續(xù)感染情況 (相隔2
15、年) 致非典型鱗狀 上皮細(xì)胞的危 險(xiǎn)系數(shù) 致宮頸低度病變 的危險(xiǎn)系數(shù) 致宮頸高度病變 的危險(xiǎn)系數(shù) 連續(xù)兩次檢測(cè)都為 陰性 1.01.01.0 第一次第二次都為 陽(yáng)性,但感染型別 不同 16.873.2192.7 第一次第二次都為 陽(yáng)性,感染型別至 少有一種相同 沒(méi)有病例117.9813.0 HPV分型檢測(cè)的介紹 v 對(duì)巴西1611名婦女在4個(gè)月間隔2次檢測(cè)HPV,HPV16、 18持續(xù)陽(yáng)性致HSIL風(fēng)險(xiǎn)性大于其他高危型HPV持續(xù)陽(yáng) 性。(Nicolas F. Schlecht, et.al. JAMA. 2001; 286(24): 3106-3114. ) 宮頸癌的必要條件 高危型的HPV感
16、染 HPV持續(xù)感染 HPV分型檢測(cè)的介紹 (3)區(qū)分單一感染和多重感染)區(qū)分單一感染和多重感染 v 早期的文獻(xiàn)報(bào)道,HPV的多重感染與宮頸癌直接相關(guān)。 v 現(xiàn)在越來(lái)越多的報(bào)道發(fā)現(xiàn),HPV的多重感染與宮頸癌之 間,不存在顯著性的關(guān)系。 v 例如:一個(gè)病人的HPV檢測(cè)結(jié)果是18、51的多重感染, 但隨訪后18型被免疫清除了,只有51型,由于51型的風(fēng) 險(xiǎn)低,那么繼續(xù)隨訪并給予相應(yīng)的干預(yù)即可。 v 如果采用定量的方法,兩次結(jié)果的載量都很高,沒(méi)有型 別的輔助,很容易就會(huì)判讀為高危亞型持續(xù)感染而給予 過(guò)度的治療。 HPV分型檢測(cè)的介紹 (4)針對(duì)不同型別的感染采取不同的處理方案)針對(duì)不同型別的感染采取不
17、同的處理方案 v 據(jù)統(tǒng)計(jì)約有70%以上的生育年齡的婦女都曾有HPV感染 v 90%以上婦女能自動(dòng)清除HPV感染 v 宮頸癌是一種常見(jiàn)感染常見(jiàn)感染的罕見(jiàn)結(jié)局罕見(jiàn)結(jié)局 v 相同細(xì)胞及組織學(xué)類(lèi)型HPV陽(yáng)性與陰性要區(qū)別對(duì)待 v 不同HPV感染型別要區(qū)別對(duì)待 例如:建議HPV16,18型的患者直接進(jìn)行陰道鏡檢查;而對(duì)于其 他型別的感染,要結(jié)合細(xì)胞學(xué)診斷,一般不需要采取任何治療 方法,但需要按時(shí)隨訪。 HPV分型檢測(cè)的介紹 2.3 HPV分型檢測(cè)的應(yīng)用分型檢測(cè)的應(yīng)用 篩查篩查 陰道鏡適應(yīng)癥陰道鏡適應(yīng)癥 ASCUS分流分流 宮頸病變隨訪宮頸病變隨訪 指導(dǎo)疫苗的使用指導(dǎo)疫苗的使用 HPV分型檢測(cè)的介紹 (1)
18、篩查)篩查 v 從癌前病變發(fā)展到宮頸癌需要多年的時(shí)間(58年以上), 而且病情的發(fā)展具有可逆性具有可逆性。如果篩查和治療的及時(shí)、 徹底,病變就會(huì)消失,身體恢復(fù)健康。反之,就會(huì)朝癌癥 發(fā)展。 HPV分型檢測(cè)的介紹 HPV+細(xì)胞學(xué) 陰道鏡檢查 組織學(xué)診斷 宮頸病變的三階梯診斷技術(shù)是在國(guó)內(nèi)廣泛推行的針對(duì) 宮頸癌及宮頸癌前病變的規(guī)范化診治流程。 由HPV檢測(cè)、宮頸細(xì)胞學(xué)、陰道鏡與組織病理學(xué)組成: 宮頸病變的三階梯診斷宮頸病變的三階梯診斷 HPV分型檢測(cè)的介紹 篩查方法:篩查方法: 敏感性差、假陰性率高(2%50%)、 假陽(yáng)性率高、漏診多。 可重復(fù)性差,受閱片人主觀影響。 敏感度、準(zhǔn)確性有所提高 用途廣
19、泛 沒(méi)有改變傳統(tǒng)的閱片方式,與人為主 觀因素直接相關(guān)。 靈敏度高、特異性強(qiáng)(均高于95%) 可預(yù)測(cè)宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)陰性預(yù)測(cè)值高 (99.9%) HPV分型檢測(cè)的介紹 HPV和細(xì)胞學(xué)檢測(cè)在子宮頸癌篩查中的對(duì)比和細(xì)胞學(xué)檢測(cè)在子宮頸癌篩查中的對(duì)比 對(duì)比項(xiàng)目對(duì)比項(xiàng)目HPV DNA檢測(cè)檢測(cè)細(xì)胞學(xué)(巴氏細(xì)胞學(xué)(巴氏/液基)檢測(cè)液基)檢測(cè) 檢測(cè)方法檢測(cè)方法分子生物學(xué)形態(tài)學(xué) 檢測(cè)病變程度檢測(cè)病變程度 HPV潛伏期、感染期、亞臨床期、 臨床癥狀期、癌癥相關(guān)期 臨床癥狀期、癌癥相關(guān)期 敏感度敏感度 98以上,可以檢查出在PAP檢測(cè) 中表現(xiàn)為假陰性的婦女 專(zhuān)家水平為80-85 陰性預(yù)測(cè)值陰性預(yù)測(cè)值 99以上,一次檢測(cè)陰
20、性可3-5年 內(nèi)處于安全期 低 準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度高低 客觀性客觀性 客觀的檢測(cè)方法,不受人為因素的 影響,結(jié)果可靠。 主觀檢測(cè)方法,無(wú)法避免主觀的 人為因素的干擾,結(jié)果有一定的 可疑性。 重復(fù)性重復(fù)性目前重復(fù)性最好的HPV檢測(cè) 因取材、制片、閱片等客觀因素 的影響,重復(fù)性差。 經(jīng)濟(jì)效益經(jīng)濟(jì)效益 陰性者不用多次重復(fù)檢查,因此是 最經(jīng)濟(jì)的檢測(cè)。 需多次重復(fù)檢查,經(jīng)濟(jì)與心理負(fù) 擔(dān)過(guò)重 檢測(cè)風(fēng)險(xiǎn)檢測(cè)風(fēng)險(xiǎn) 低,給醫(yī)生可靠的依據(jù),給患者安 心的答復(fù) 高面臨醫(yī)療糾紛 HPV分型檢測(cè)的介紹 最佳篩查方案最佳篩查方案 HPV分型檢測(cè)的介紹 一般篩查方案一般篩查方案 HPV分型檢測(cè)的介紹 2006/11 第第18屆屆
21、FIGO會(huì)議正式提出:會(huì)議正式提出: v 現(xiàn)在的各種細(xì)胞學(xué)技術(shù)與巴氏涂片相比并沒(méi)有提高宮頸癌 的早期檢出率; v 在WHO的協(xié)調(diào)下,南非和美國(guó)的研究提示,有條件的地 區(qū)應(yīng)以為首選。 HPV分型檢測(cè)的介紹 HPV-DNA檢測(cè)檢測(cè) 陰性陰性陽(yáng)性陽(yáng)性 篩查篩查 1次次/35年年 液基細(xì)胞學(xué)檢查液基細(xì)胞學(xué)檢查 篩查,篩查,1次次/6月月1年年 正常正常異常異常 陰道鏡陰道鏡/組織學(xué)檢查組織學(xué)檢查 16+/18+ 2006 consensus guidelines for management of women with abnormal cervical cancer screening tests
22、推薦的子宮頸癌篩查方案推薦的子宮頸癌篩查方案 HPV分型檢測(cè)的介紹 適合篩查的人群適合篩查的人群 v 任何有三年以上性行為或三年以上性行為或21歲以上有性行為歲以上有性行為的婦女均為篩 查對(duì)象(因?yàn)?1歲以下子宮頸癌患者極為罕見(jiàn),而且從 HPV感染到CIN需要3-8年時(shí)間) v 高危人群:有多個(gè)性伴侶、性生活過(guò)早、HIV/HPV感染、 免疫功能低下、衛(wèi)生條件差/性保健知識(shí)缺乏的婦女 v 對(duì)決定妊娠的婦女,在妊娠前妊娠前應(yīng)進(jìn)行HPV檢查 HPV分型檢測(cè)的介紹 (2)陰道鏡適應(yīng)癥)陰道鏡適應(yīng)癥 v 波特蘭的一項(xiàng)研究表明,30歲細(xì)胞學(xué)陰性的女性中, HPV16或或18陽(yáng)性陽(yáng)性的女性在10年隨訪中出現(xiàn)
23、CIN3的比率分 別為21%和和18%。與此相比,其他高危型HPV陽(yáng)性的女性 中,CIN3的風(fēng)險(xiǎn)性僅1.5%。 v 不同型別致CIN3的風(fēng)險(xiǎn)不同。 2009年,美國(guó)陰道鏡和宮頸病理學(xué)會(huì)(簡(jiǎn)稱年,美國(guó)陰道鏡和宮頸病理學(xué)會(huì)(簡(jiǎn)稱ASCCP) 發(fā)布了發(fā)布了HPV 基因分型檢測(cè)指南,明確指出基因分型檢測(cè)指南,明確指出: 30婦女,婦女, 細(xì)胞學(xué)未見(jiàn)上皮內(nèi)病變和惡性細(xì)胞,細(xì)胞學(xué)未見(jiàn)上皮內(nèi)病變和惡性細(xì)胞,HPV16,18建議建議 陰道鏡;其他陰道鏡;其他HPV高危型,則在高危型,則在12個(gè)月后重復(fù)個(gè)月后重復(fù)HPV DNA檢測(cè)和細(xì)胞學(xué)檢查。(檢測(cè)和細(xì)胞學(xué)檢查。(American Society for Co
24、lposcopy and Cervical Pathology, 2009) HPV分型檢測(cè)的介紹 (3)ASCUS分流分流(atypical squamous cells of unknown significance 診斷意義不明的不典型鱗狀上皮細(xì)胞) v 直接陰道鏡檢查或多點(diǎn)病理活檢,引起創(chuàng)傷和過(guò)度診治( 40-60%) v 重復(fù)細(xì)胞學(xué)檢查,有25%失訪率,此外復(fù)檢會(huì)增加病人經(jīng) 濟(jì)及精神負(fù)擔(dān) 457例細(xì)胞學(xué)診斷為ASCUS/LSIL,進(jìn)行HPV檢測(cè)和活檢: LSIL且高危HPV陽(yáng)性陽(yáng)性者,22.7%為CIN II/III; LSIL但高危HPV陰性者,僅1%為CIN II/III。 Le
25、e Nak-Woo, et al., Is the Human Papillomavirus Test in Combination With the Papanicolaou Test Useful for Management of Patients With Diagnoses of Atypical Squamous Cells of Undetermined Significance/Low-Grade Squamous Intraepithelial Lesions? Arch Pathol Lab Med, 2001, 125:1453 HPV檢測(cè)為目前的檢測(cè)為目前的最優(yōu)方法最優(yōu)
26、方法。 HPV檢測(cè)陰性,可列入常規(guī)篩查人群;檢測(cè)陰性,可列入常規(guī)篩查人群; HPV檢測(cè)陽(yáng)性,則考慮配合陰道鏡檢查。檢測(cè)陽(yáng)性,則考慮配合陰道鏡檢查。 HPV分型檢測(cè)的介紹 (4)宮頸病變隨訪)宮頸病變隨訪 v 據(jù)瑞典的一項(xiàng)研究,針對(duì)完成宮頸錐切術(shù)后,術(shù)后隨訪結(jié) 果有26例CIN復(fù)發(fā);22例未復(fù)發(fā)。術(shù)后3個(gè)月用PCR方法檢 測(cè)宮頸細(xì)胞涂片HPV,其中: 26例復(fù)發(fā)者:25例為HPV陽(yáng)性 22例對(duì)照組:全部為HPV陰性 v 實(shí)驗(yàn)說(shuō)明:宮頸病變治療后檢測(cè)HPV-DNA,可預(yù)測(cè)殘余 病變、估計(jì)療效。 Chua, K.L., Hjerpe, A. Human papillomavirus analysis
27、 as a prognostic marker following conization of the cervix uteri. Gynecol Oncol, 1997, 66(1): 108-113 HPV分型檢測(cè)的介紹 術(shù)后術(shù)后HPV-DNA檢測(cè)檢測(cè) 陰性陰性陽(yáng)性陽(yáng)性 病灶切除干凈或病灶切除干凈或 沒(méi)有再次感染沒(méi)有再次感染 相同基因型相同基因型 新的新的HPV感染感染有殘留病灶或有殘留病灶或 重復(fù)感染重復(fù)感染 不同基因型不同基因型 宮頸病變治療后的隨訪宮頸病變治療后的隨訪 HPV分型檢測(cè)的介紹 (5)指導(dǎo)疫苗的使用)指導(dǎo)疫苗的使用 v HPV感染后可以激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生特異性體液免疫和細(xì)胞免疫
28、 v 針對(duì)衣殼蛋白(L1)的IgG和IgA中和抗體在病毒感染的 早期較為重要-預(yù)防性疫苗 v 針對(duì)早期蛋白(E6E7)的細(xì)胞免疫反應(yīng)對(duì)最終清除病毒 可能更為重要-治療性疫苗 默沙東:Gardasil(6、11、16、18) 43.94% 葛蘭素史克: Cervarix(16、18) 26.47% 約約200種種HPV HPV分型檢測(cè)的介紹 中國(guó)中國(guó)HPV數(shù)據(jù)庫(kù)的目的和意義數(shù)據(jù)庫(kù)的目的和意義 v 收集積累HPV不同型別感染數(shù)據(jù)和中國(guó)HPV 基因研究資料,形成具有中國(guó)特色的開(kāi)放 數(shù)據(jù)平臺(tái)。 v 應(yīng)用網(wǎng)絡(luò)信息技術(shù),對(duì)HPV流行趨勢(shì)開(kāi)展 長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)。 v 積極探索HPV與宿主、基因多態(tài)性及與腫 瘤的發(fā)生
29、發(fā)展演變的關(guān)系。 v 解決宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)瘤等重大科學(xué)問(wèn)題。 v 指導(dǎo)適合中國(guó)人群HPV治療性和預(yù)防性疫苗的研制。 v 為制定宮頸癌相關(guān)的公共衛(wèi)生政策提供理論基礎(chǔ)。 HPV分型檢測(cè)的介紹 HPV分型檢測(cè)的介紹 屬于分子醫(yī)學(xué)范疇,是 。 v具有高靈敏度、高特異性的特點(diǎn)。 3.1 實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理 HPV分型檢測(cè)的介紹 v 將PCR和低密度基因芯片技術(shù)結(jié)合成綜合工作平臺(tái),具 有高效、快速、靈敏、準(zhǔn)確的特點(diǎn)。 HPV分型檢測(cè)的介紹 3.2 宮頸細(xì)胞樣本的采集宮頸細(xì)胞樣本的采集 v 月經(jīng)期不可采集標(biāo)本。(減少給受檢者的損傷) v 月經(jīng)正常婦女,在月經(jīng)來(lái)潮后1018天為最佳檢查時(shí)間 v 不可在碘試
30、驗(yàn)和醋酸試驗(yàn)之后采集樣本。(可能會(huì)抑制 PCR反應(yīng)) v 檢查前48小時(shí)內(nèi)不要作陰道沖洗,不要用避孕藥膏等陰 道內(nèi)用藥物。(可能會(huì)抑制PCR反應(yīng)) v 檢查前48小時(shí)最好不要行性生活。(一過(guò)性假陽(yáng)性) v 樣本采集后,注意避免交叉污染。 HPV分型檢測(cè)的介紹 u子宮頸的鱗狀上皮細(xì)胞與 柱狀上皮細(xì)胞的連接處(轉(zhuǎn) 化帶,Transformation Zone) 是HPV的易感部位。 uHPV-DNA檢測(cè)樣本是子宮子宮 頸轉(zhuǎn)化帶的脫落細(xì)胞頸轉(zhuǎn)化帶的脫落細(xì)胞。 HPV分型檢測(cè)的介紹 被檢者脫掉褲子,然后按醫(yī)生指示仰 臥于一張檢查床上。 由醫(yī)生以窺陰器或陰道張開(kāi)器暴露宮 頸。 然后使用專(zhuān)用的 置于宮頸口采集標(biāo)本。(最好在取樣 前先用棉簽擦去宮頸分泌物) HPV分型檢測(cè)的介紹 將專(zhuān)用宮頸刷置于宮頸口,輕 輕搓動(dòng)宮頸刷使其旋轉(zhuǎn)5圈。 慢慢取出宮頸刷,將其放入標(biāo)有病人編號(hào)的取樣管中,取樣管內(nèi)已加有專(zhuān) 用細(xì)胞保存液,折斷其刷頭入管中,擰緊瓶蓋。 HPV分型檢測(cè)的介紹 樣品收集中注意事項(xiàng):樣品收集中注意事項(xiàng): v 取樣管上標(biāo)簽的名稱須與患者一一對(duì)應(yīng)。 v 使用凱普專(zhuān)用取樣器及保存液,可抑制細(xì)菌
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