酒石酸法茶多酚含量測定報告

1、.茶多酚的含量測定實驗組員：趙龍飛 趙奇慧 劉芳 陳小麗一、實驗原理茶多酚能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯，微溶于油脂。對熱、酸較穩(wěn)定，在堿 性條件下易氧化變質(zhì)。酒石酸鐵能與茶多酚生成紫褐色絡(luò)合物，絡(luò)合物溶液顏色的深淺與茶多酚的含量成正 比，絡(luò)合物在 540nm 處有最佳吸收。因此可以用比色方法測定。二、儀器與試劑儀器：分光光度計、天平、1ml 移液槍、100ml 容量瓶*6、100ml 量筒、100ml 燒杯*310ml ep 管試劑：(1)feso47h2o 1.000g，含 4 個結(jié)晶水的酒石酸鉀鈉 5.000g(2) na2hpo412h2o 6.02g ，nah2po4 2h2o

2、 0.50g(2) 兒茶素標(biāo)準(zhǔn)品 10mg三、操作步驟（1） 酒石酸鉀鐵溶液：稱取 feso47h2o 0.100g ，含 4 個結(jié)晶水的酒石酸鉀鈉 0.500g，加蒸餾水溶解后，用蒸餾水稀釋至 100ml。（2） ph7.5 的磷酸緩沖液：6.020g na2hpo412h2o ，0.500g nah2po42h2o， 加蒸餾水溶解后，用蒸餾水稀釋至 100ml。(1) 兒茶素標(biāo)準(zhǔn)液：稱取 10mg 兒茶素，用蒸餾水定容至 10ml，濃度為 1000g/ml。 分別稀釋到 200、400、600、800g/ml，得 5 個濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液。(2) 標(biāo)準(zhǔn)曲線：分別吸取 1ml 標(biāo)準(zhǔn)液，磷酸緩沖液

3、 3ml，酒石酸鉀鐵 1ml 混勻，3000可編輯.轉(zhuǎn)離心 10min。吸取上清液 3ml 加入玻璃比色皿，用分光光度計測定 540nm 處的 od 值三次求平均值，并繪制濃度-od 標(biāo)準(zhǔn)曲線。以蒸餾水代替標(biāo)準(zhǔn)品溶液加入同樣的試劑作空 白對照。(5) 取提取物 10mg，用蒸餾水定容至 10ml。取 1ml，按上述同樣方法測定 540nm 處的 od 值 3 次求平均值。以蒸餾水代替樣品溶液加入同樣的試劑作空白對照。四、計算茶多酚含量 w=c/1000100%c ： 所測吸光度帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線得到樣品中茶多酚濃度 g/ml1000： 樣品濃度 g/ml五、實驗結(jié)果可編輯.吸光度樣品1 23平均濃度

4、含量（%）有機溶劑402.630380.450.449 0.45 0.44966666740.26%萃取法金屬離子330.4490.449 0.449 0.449 402.07015 40.21%沉淀法打孔樹脂466.2168630%醇洗 0.5250.526 0.525 0.52533333346.62%67脫打孔樹脂317.7550350%醇洗 0.3490.349 0.348 0.34866666731.78%33脫打孔樹脂0.1110.111 0.111 0.111 118.03185 11.80%80%醇洗可編輯.脫六、實驗分析由實驗結(jié)果看出， 30%的乙醇提取大孔樹脂法提取的茶多酚的含量是最高的，而其余的溶劑提取法、金屬離子沉淀法，都相對較低。本實驗數(shù)據(jù)不能代表各個提取分離方法的絕 對優(yōu)略，要視各組在實驗過程中的實際操作是否規(guī)準(zhǔn)確。實驗中存在以下問題：1、 標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度過低，吸光值存在負(fù)數(shù)，儀器不夠精密，無法準(zhǔn)確測出對應(yīng)的 od 值。最后修改方案，濃度提高了 20 倍。2、 樣品測定時，同樣濃度，吸光度卻高于標(biāo)準(zhǔn)品，也就是含量超過 100%。經(jīng)過