色譜純度HPLC分析方法驗證報告樣式

1、色譜純度分析方法驗證報告目錄設(shè)備驗證方案歷史記錄色譜純度分析方法驗證報告批準 -31. 驗證目的 -42. 色譜純度分析方法 -42.1 儀器 -42.2 試劑 -42.3 標準品 -42.4 色譜條件 -42.5 溶液配制 -52.6 進樣操作 -53. 方法驗證 -63.1 專屬性 -63.2 系統(tǒng)適用性試驗 -93.3 精密度 -93.4 線性及范圍 -113.5 準確度 -173.6 檢測限及定量限 -204驗證評價及結(jié)論 -215. 附件 -21色譜純度分析方法驗證報告批準對本驗證方案批準表示同意其驗證項目和可接受標準、驗證方法和本方案內(nèi)的各種表格格式、內(nèi)容。在執(zhí)行本方案的過程中可能

2、會遇到阻礙本方案精確地完成的缺陷。較小的偏差可以在偏差報告內(nèi)陳述。較大的偏差，如，方法的修改，測試/評估參數(shù)，接受標準等只有在附帶有經(jīng)過批準的補充材料的情況下才予以承認。所有經(jīng)批準的偏差報告和補充材料都應附在批準前的驗證報告內(nèi)。方案起草簽名日期質(zhì)檢中心方案審核簽名日期質(zhì)檢中心qc總工程師質(zhì)量部qa方案批準簽名日期質(zhì)量副總1摘要我們按照usp30專論的方法測定的色譜純度。方法的原理是采用hplc方法，在233nm檢測波長下測定，以為參考標準，進行色譜純度的定量分析。該方法用于原料藥在放行及穩(wěn)定性試驗中色譜純度的測定。經(jīng)評價，實驗室色譜純度的條件，包括色譜柱、流動相、檢測波長、進樣量、濃度等條件完

3、全與usp專論規(guī)定的一致。雜質(zhì)a, c, d，以及雜質(zhì)xa、雜質(zhì)xb和雜質(zhì)xc是實際存在和潛在的雜質(zhì)。為了評價實驗室的儀器、人員、環(huán)境等能否滿足色譜純度測定的要求，按照ich指南q2a和q2b的要求，對分析方法進行了驗證，驗證的項目包括專屬性、系統(tǒng)適用性試驗、精密度、線性、范圍、準確度、定量限和檢測限, 驗證結(jié)果表明，每個驗證項目均符合驗證標準。usp色譜純度的分析方法適合于原料藥中雜質(zhì)的測定和控制。驗證結(jié)果摘要如下：a. 專屬性：溶劑對雜質(zhì)的測定沒有干擾，與相鄰雜質(zhì)xa和雜質(zhì)d的分離度依次為21.1和13.2, 較相鄰的雜質(zhì)d和雜質(zhì)a的分離度為1.8，雜質(zhì)xb和xc的分離度為1.6，均大于1

4、.5，表明與每個雜質(zhì)以及每個雜質(zhì)之間分離度均符合要求。b. 系統(tǒng)適用性試驗：在系統(tǒng)適用性溶液的色譜圖中，3-苯甲?；郊姿岷偷姆蛛x度r為13.3，大于4；以峰計算色譜柱的理論塔板數(shù)n為20328，大于2250；峰的拖尾因子t為 0.83，小于2.0；標準溶液連續(xù)進樣6次，其主峰面積的rsd為0.51%，小于5%。c. 精密度：標準溶液重復進樣6次，在重復性項下，雜質(zhì)c, 雜質(zhì)xa, , 雜質(zhì)d, 雜質(zhì)a, 雜質(zhì)xb和雜質(zhì)xc峰面積的rsd依次為0.24%, 0.41%, 0.51%, 0.54%, 0.21%, 1.6%和0.86%, 均小于5%；在中間精密度項下測得的rsd依次為0.20%,

5、 0.23%, 0.60%, 0.60%, 0.24%, 1.1%和0.49%, 均小于5%；f-test結(jié)果表明，每個組分的f值均小于f0值5.05, 表明方法的中間精密度和重復性之間的精密度無顯著性差異。d. 線性和范圍：雜質(zhì)a的含量在0.02%0.24%的范圍時，它的線性方程為y=153.713x-0.214，相關(guān)系數(shù)為0.99996；雜質(zhì)c的含量在0.02%0.24%的范圍時，它的線性方程為y=62.854x-0.236，相關(guān)系數(shù)為0.9999; 雜質(zhì)d的含量在0.02%0.24%的范圍時，它的線性方程為y=27.520x-0.423，相關(guān)系數(shù)為0.9999; 雜質(zhì)xa的含量在0.02

6、%0.24%的范圍時，它的線性方程為y=86.007x-0.725，相關(guān)系數(shù)為0.9999; 雜質(zhì)xb的含量在0.02%0.24%的范圍時，它的線性方程為y=13.160x-0.325，相關(guān)系數(shù)為0.9997; 雜質(zhì)xc的含量在0.02%0.25%的范圍時，它的線性方程為y=65.240x-1.546，相關(guān)系數(shù)為0.9998; 代表其它雜質(zhì)的含量在0.02%0.25%的范圍時，它的線性方程為y=33.579x-0.558，相關(guān)系數(shù)為0.9998; 每個雜質(zhì)的相關(guān)系數(shù)均大于0.999, 表明它們的峰面積與濃度均呈線性關(guān)系。e. 準確度：雜質(zhì)a、雜質(zhì)c、雜質(zhì)d、雜質(zhì)xa、雜質(zhì)xb、雜質(zhì)xc和的回收

7、率依次為99.4%, 99.2%, 98.5%, 99.0%, 98.7%, 98.5%和100.5%，回收率的rsd依次為1.2%, 1.8%, 1.4%, 1.8%, 2.9%, 2.5%和2.4%；每個雜質(zhì)的回收率均介于95.0%105.0%之間。f. 定量限和檢測限：雜質(zhì)a、雜質(zhì)c、雜質(zhì)d、雜質(zhì)xa、雜質(zhì)xb、雜質(zhì)xc和的檢測限依次為0.0002%, 0.0002%, 0.002%, 0.0004%, 0.005%, 0.001%, 它們的定量限依次為0.001%, 0.001%, %, 0.002%, 0.02%, 0.005%,結(jié)果表明，方法的靈敏度適合雜質(zhì)的檢測和控制。2. 分析

8、方法usp30專論2.1 儀器：高效液相色譜儀 agilent 1100 hplc2.2試劑：a. 乙腈 (色譜純)b. 磷酸二氫鉀 (分析純)c. 純化水2.3 標準品：a. 標準品b. 3-苯甲?；郊姿?.4色譜條件：a) 色譜柱：ymc pack ods-a，4.6mm150mm，3m；b) ph3.5緩沖液：稱取68.0g磷酸二氫鉀，用水溶解并稀釋至1000ml，用磷酸調(diào)ph值為3.500.05，過濾。c) 流動相：水-乙腈- ph3.5緩沖液=550:430:20配制方法：用適宜的量筒分別量取過濾的水550ml，乙腈430ml和ph3.5緩沖液20ml，于一合適的試劑瓶中，充分混勻

9、。在超聲波上脫氣10分鐘。也可按照待測樣品的數(shù)量，按照比例配制適量的流動相。d) 檢測波長：233nm；e) 流速：1.0ml/min；f) 進樣量：20l。2.5 溶液制備a) 系統(tǒng)適用性溶液：量取0.5ml標準貯備溶液和3-苯甲?；郊姿豳A備溶液1.0ml至10ml容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，混合均勻。和3-苯甲?；郊姿岬臐舛纫来渭s為0.01mg/ml和0.005mg/ml。3-苯甲?；郊姿豳A備溶液：稱取3-苯甲?；郊姿針藴势?.0mg，置100ml容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，混合均勻。b) 標準溶液：標準貯備溶液：稱取標準品約10.0mg，置50ml容量瓶中，加流動相溶解

10、并稀釋至刻度，混合均勻。精密量取1.0ml至100ml容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，混合均勻。濃度約為0.002mg/ml。c) 供試溶液：稱取樣品約100mg，精密稱定，置100ml棕色容量瓶中，加適量流動相，用超聲波使溶解，放冷至室溫，用流動相稀釋至刻度，混合均勻。該溶液制備應避光操作。2.6 進樣操作2.6.1儀器準備按照高效液相色譜儀操作規(guī)程準備儀器，設(shè)定流速為1.0ml/min，設(shè)定檢測器波長為233nm。待儀器平衡后，開始進樣操作。2.6.2系統(tǒng)適用性試驗：系統(tǒng)平衡后，取系統(tǒng)適用性溶液進樣，記錄色譜圖，3-苯甲?；郊姿岷偷南鄬ΡＡ魰r間依次為0.8和1.0；3-苯甲?；郊姿岷偷姆?/p>

11、離度r至少為4。以峰計算色譜柱的理論塔板數(shù)n，應不少于2250；峰的拖尾因子t，不大于2.0。標準溶液連續(xù)進樣6次，記錄色譜圖，其主峰面積的rsd5%。2.6.3空白測試：取流動相進樣，記錄色譜圖。在樣品的測試中忽略溶劑峰。2.6.4樣品測定取供試品溶液進樣，記錄色譜圖至主峰保留時間的7倍，以峰面積計算雜質(zhì)的含量。2.6.5計算公式：按公式 (1)計算中單個雜質(zhì)含量；按公式 (2)計算中總雜質(zhì)的含量。單個雜質(zhì)含量 (%) 公式 (1)總雜質(zhì)含量 (%) 公式 (2)式中：ws標準品的重量，mg；wi的樣品的重量，mg；ai樣品色譜圖中單個雜質(zhì)的峰面積；as標準溶液中主峰的峰面積。pusp標準品

12、的含量樣品色譜圖中總雜質(zhì)的峰面積，等于a總面積a。2.6.6 結(jié)果判定：供試品中單個雜質(zhì)不大于0.2%，總雜質(zhì)不大于1.0%。3方法驗證3.1專屬性3.1.1空白測試:取溶劑流動相進樣，記錄色譜圖，做為空白，確定溶劑對雜質(zhì)測定有無干擾，在樣品測定圖譜中溶劑峰應忽略。色譜圖見kp0-blank000000.d。3.1.2單個雜質(zhì)的定性3.1.2.1雜質(zhì)定性溶液：依次取“3.4.1.1雜質(zhì)標準貯備液”項下雜質(zhì)a、雜質(zhì)c、雜質(zhì)d和雜質(zhì)xa、雜質(zhì)xb、雜質(zhì)xc的標準貯備溶液2.0ml，各至一個25ml容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，混合均勻。3.1.2.2取每個雜質(zhì)溶液分別進樣，記錄色譜圖。記錄每個雜質(zhì)

13、的保留時間，用保留時間對每個雜質(zhì)進行定性，結(jié)果填寫在表1-1。按照保留時間順序，雜質(zhì)c, xa, d, a, xb, xc的保留時間依次為2.218min, 5.168min, 11.402min,12.019min, 17.191min, 17.960min。它們的色譜圖見kp0-000001.d，kp0-000003.d，kp0-000005.d，kp0-000006.d，kp0-000008.d，kp0-000009.d。表1-1 各雜質(zhì)的定性雜質(zhì)名稱濃度（g/ml）保留時間（min）雜質(zhì)c8.02.218雜質(zhì)d8.211.402雜質(zhì)a8.012.0193.1.3 雜質(zhì)和的分離度測試以重

14、復性項下的色譜圖進行評價，記錄各組分的出峰順序和保留時間，并計算相鄰組分之間的分離度r，數(shù)據(jù)見表1-2。色譜圖見kp0-000014.d。3.1.4加入已知雜質(zhì)的分離度測試3.1.4.1溶液制備稱取樣品10mg，加入線性項下標準貯備溶液(10g/ml) 2.0ml, 再加入流動相溶解并稀釋至10ml，混合均勻。3.1.4.2測定：取該溶液進樣，記錄色譜圖，記錄各組分的出峰順序和保留時間，計算它們的相對保留時間(rrt)（為1.0）和相鄰組分之間的分離度r，數(shù)據(jù)見表1-3。色譜圖見kp0-000026.d。表1-2 雜質(zhì)和分離度測試出峰順序名稱保留時間（min）分離度r1雜質(zhì)c2.218-2雜質(zhì)

15、xa5.21621.037.78612.44雜質(zhì)d11.47613.35雜質(zhì)a12.0691.8表1-3 加入已知雜質(zhì)的分離度測試出峰順序名稱保留時間（min）rrt分離度r1雜質(zhì)c2.2120.28-2雜質(zhì)xa5.2100.6721.137.7951.012.64雜質(zhì)d11.4751.4713.25雜質(zhì)a12.0661.551.83.1.6專屬性評價標準1) 溶劑對雜質(zhì)的測定無明顯干擾；2）雜質(zhì)a和雜質(zhì)d的分離度不小于1.0；其它每個相鄰組分之間的分離度r均應大于1.5；3.1.7 驗證結(jié)果及評價 溶劑對雜質(zhì)的測定沒有干擾，與相鄰雜質(zhì)xa和雜質(zhì)d的分離度依次為21.1和13.2, 較相鄰的雜

16、質(zhì)d和雜質(zhì)a的分離度為1.8，雜質(zhì)xb和xc的分離度為1.6，均大于1.5，表明與每個雜質(zhì)以及每個雜質(zhì)之間分離度均符合要求。方法的專屬性符合驗證標準。3.2系統(tǒng)適用性試驗3.2.1按照色譜純度分析方法進行：3.2.2分離度：系統(tǒng)平衡后，取系統(tǒng)適用性溶液進樣，記錄色譜圖，3-苯甲?；郊姿岷偷南鄬ΡＡ魰r間依次約為0.8和1.0；計算3-苯甲?；郊姿岷偷姆蛛x度。以峰計算色譜柱的理論塔板數(shù)n和拖尾因子t。色譜圖見kp0-000039.d。3.2.4重復性標準溶液連續(xù)進樣6次，記錄色譜圖，計算主峰面積的rsd。測定數(shù)據(jù)和結(jié)果見表2-1。色譜圖見kp0-000040.dkp0-000045.d。3.2

17、.3驗證合格標準1） 以峰計算色譜柱的理論塔板數(shù)n，應不少于2250；2） 峰的拖尾因子t，不大于2.0；3） 3-苯甲?；郊姿岷偷姆蛛x度r至少為4；4） 標準溶液連續(xù)進樣6次，其主峰面積的rsd5%。3.2.4系統(tǒng)適用性試驗結(jié)果及評價： 在系統(tǒng)適用性溶液的色譜圖中，3-苯甲?；郊姿岷偷姆蛛x度r為13.3，大于4；以峰計算色譜柱的理論塔板數(shù)n為20328，大于2250；峰的拖尾因子t為 0.83，小于2.0；標準溶液連續(xù)進樣6次，其主峰面積的rsd為0.51%，小于5%。方法的系統(tǒng)適用性試驗符合驗證標準。表2-1 系統(tǒng)適用性試驗數(shù)據(jù)no.123456平均值峰面積67.9368.3867.7

18、668.7568.1668.1268.18標準偏差s0.35rsd0.51%分離度r13.3理論塔板數(shù)n20328拖尾因子t0.833.3 精密度3.3.1 重復性3.3.1.1以方法規(guī)定的色譜條件，取線性項下no.5線性標準溶液，連續(xù)進樣6次，記錄色譜圖，計算各組分峰面積的平均值、標準偏差s和rsd。以rsd評價方法的重復性。數(shù)據(jù)及結(jié)果見表3-1。色譜圖見kp0-000014.dkp0-000019.d。3.3.1.2驗證合格標準：標準溶液連續(xù)重復6次進樣，各組分峰面積的相對標準偏差 rsd5%。3.3.1.3重復性驗證結(jié)果及評價標準溶液重復進樣6次，雜質(zhì)c, 雜質(zhì)xa, , 雜質(zhì)d, 雜質(zhì)

19、a峰面積的rsd依次為0.24%, 0.41%, 0.51%, 0.54%, 0.21%, 1.6%和0.86%, 均小于5%, 方法的重復性符合標準。3.3.2 中間精密度另日，由另外一個化驗員，按照線性項下no.5線性標準溶液的制備方法配制相同濃度的溶液，在相同的儀器上連續(xù)進樣6次，記錄色譜圖。計算各組分峰面積的平均值、標準偏差s和rsd，以rsd評價方法的中間精密度，數(shù)據(jù)及結(jié)果見表3-2。色譜圖見kp0-000014.dkp0-000019.d。3.3.2.2驗證合格標準：標準溶液連續(xù)重復6次進樣，各組分峰面積的相對標準偏差 rsd5%。3.3.2.3中間精密度驗證結(jié)果及評價標準溶液重復

20、進樣6次，雜質(zhì)c, 雜質(zhì)xa, , 雜質(zhì)d, 雜質(zhì)a峰面積的rsd依次為0.20%, 0.23%, 0.60%, 0.60%, 0.24%, 1.1%和0.49%, 均小于5%；方法的中間精密度符合標準。3.3.3精密度的顯著性評價使用f-檢驗的方法，評價在精密度方面，方法的重復性和中間精密度有無顯著性差異。3.3.3.1步驟(1) 取各組分重復性和中間精密度項下的峰面積的標準偏差s;(2) 選擇顯著性水平=0.05；(3) 從表3-1和表3-2獲得峰面積的標準偏差s，確定s1和s2（s1s2）；(4) 計算 f 值， f = s12/s22；(5) 計算自由度 (n2-1,n1-1)=(5,

21、 5)，n2n16；(6) 查閱在=0.05，自由度為(5,5)，單側(cè)檢驗的f05.05；(7) 數(shù)據(jù)和結(jié)果見表3-3。3.3.3.2驗證合格標準每個組分的f應小于f0，即表明方法的重復性和中間精密度之間無顯著性差異。3.3.3.3驗證結(jié)果及評價每個組分的f應小于f0，表明方法中間精密度和重復性之間的精密度無顯著性差異。3.3.4精密度驗證結(jié)果及評價標準溶液重復進樣6次，在重復性項下，雜質(zhì)c, 雜質(zhì)xa, , 雜質(zhì)d, 雜質(zhì)a, 雜質(zhì)xb和雜質(zhì)xc峰面積的rsd依次為0.24%, 0.41%, 0.51%, 0.54%, 0.21%, 1.6%和0.86%, 均小于5%；在中間精密度項下測得的

22、rsd依次為0.20%, 0.23%, 0.60%, 0.60%, 0.24%, 1.1%和0.49%, 均小于5%；f-test結(jié)果表明，每個組分的f值均小于f0值5.05, 表明方法的中間精密度和重復性之間的精密度無顯著性差異。方法的精密度符合驗證標準。表3-1 重復性試驗數(shù)據(jù)組分峰面積平均值srsd123456雜質(zhì)c125.75126.03126.08126.63126.27125.99126.130.2970.24%雜質(zhì)xa 170.09170.75170.79170.99171.92169.98170.750.7010.41%72.3071.5871.8372.1872.6372.2

23、272.120.3690.51%雜質(zhì)d55.7255.8155.8056.0155.9955.1855.750.3020.54%雜質(zhì)a308.44307.59308.16308.36307.76306.72307.840.6410.21%表3-2 中間精密度試驗數(shù)據(jù)組分峰面積平均值s rsd123456雜質(zhì)c126.28126.15126.07126.60126.30126.70126.350.2490.20%雜質(zhì)xa 170.92171.07171.30170.39171.52171.17171.060.3870.23%72.7072.1872.5871.6772.1571.6772.160

24、.4360.60%雜質(zhì)d56.5756.3355.6156.3556.1256.4356.240.3400.60%雜質(zhì)a309.00308.71308.40309.97308.92310.23309.200.7280.24%表3-3 重復性和中間精密度有無顯著性差異的評價組分名稱重復性的s中間精密度的sf=s12/s22（s1s2）接受標準f0結(jié)論雜質(zhì)c0.2970.2491.425.05合格雜質(zhì)xa 0.7010.3873.285.05合格0.3690.4361.405.05合格雜質(zhì)d0.3020.3401.275.05合格雜質(zhì)a0.6410.7281.295.05合格3.4 線性及范圍3.

25、4.1 溶液制備3.4.1.1標準貯備液分別精密稱取以下標準品：雜質(zhì)a、雜質(zhì)c、雜質(zhì)d、雜質(zhì)xa、雜質(zhì)xb、雜質(zhì)xc和標準品適量，分別至一個容量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，混合均勻，得到每個組分的標準貯備液。每個成分的濃度均約為0.10mg/ml。（備注：為保證線性范圍，濃度應充分精確，并根據(jù)含量折純）。3.4.1.2標準貯備溶液(a)：分別量取每個雜質(zhì)和的標準貯備液各5.0ml,至一個50.0ml容量瓶中，用流動相稀釋至刻度，混合均勻。每個組分的濃度均約為10g/ml。3.4.1.3標準溶液分別取標準貯備溶液(a) 0.5ml, 1.0ml, 2.0ml, 4.0ml, 5.0ml, 6

26、.0ml各至一個25.0ml容量瓶，用流動相稀釋至刻度，混合均勻，得到no.1no.6標準溶液。每個雜質(zhì)和的濃度范圍均約為0.24 g/ml，相當于雜質(zhì)含量在0.02%0.24%。3.4.2 測定分別取no.1no.6標準溶液，分別進樣，每個濃度連續(xù)進2次，記錄色譜圖至最后一個組分出峰為止。濃度、峰面積及實驗結(jié)果見表4-1表4-7。3.4.3 線性回歸以各組分峰面積平均值對其濃度（g/ml），使用origin 5.0軟件進行線性回歸，得到各組分的標準曲線，線性方程及相關(guān)系數(shù)r。線性測試數(shù)據(jù)及結(jié)果見表4-14-7。3.4.4驗證合格標準：在每個組分的線性范圍內(nèi)，各組分峰面積與濃度均應呈線性關(guān)系，

27、相關(guān)系數(shù)r0.999。3.4.5線性驗證結(jié)果及評價雜質(zhì)a的含量在0.02%0.24%的范圍時，它的線性方程為y=153.713x-0.214，相關(guān)系數(shù)為0.99996；雜質(zhì)c的含量在0.02%0.24%的范圍時，它的線性方程為y=62.854x-0.236，相關(guān)系數(shù)為0.9999; 雜質(zhì)d的含量在0.02%0.24%的范圍時，它的線性方程為y=27.520x-0.423，相關(guān)系數(shù)為0.9999; 雜質(zhì)xa的含量在0.02%0.24%的范圍時，它的線性方程為y=86.007x-0.725，相關(guān)系數(shù)為0.9999; 代表其它雜質(zhì)的含量在0.02%0.25%的范圍時，它的線性方程為y=33.579x

28、-0.558，相關(guān)系數(shù)為0.9998; 每個雜質(zhì)的相關(guān)系數(shù)均大于0.999, 表明它們的峰面積與濃度均呈線性關(guān)系。方法的線性和范圍符合驗證標準。表4-1 線性測試的數(shù)據(jù)和結(jié)果溶液no.雜質(zhì) a濃度(g/ml)峰面積平均峰面積1210.200031.0330.9631.0020.400062.7462.3362.5330.8000121.46120.51120.9941.600243.78245.15244.4552.000309.36306.51307.9462.400367.92370.63369.28范圍(g/ml)0.22.4范圍(%)0.020.24線性方程y=153.713x-0.2

29、14相關(guān)系數(shù)r0.99996回歸直線linear regression for data of impurity a:y = a + b * xparametervalueerror-a-0.214131.00483b153.712810.67848-rsdnp-0.999961.3626160.0001-表4-2 線性測試的數(shù)據(jù)和結(jié)果溶液no.雜質(zhì) c濃度(g/ml)峰面積平均峰面積1210.200012.7412.7212.7320.400025.6725.6325.6530.800048.7948.9948.8941.60099.3599.6499.5052.000126.15125.5

30、7125.8662.400150.63151.51151.07范圍(g/ml)0.22.4范圍(%)0.020.24線性方程y=62.854x-0.236相關(guān)系數(shù)r0.9999回歸直線linear regression for data of impurity c:y = a + b * xparametervalueerror-a-0.236050.64896b62.853550.43819-rsdnp-0.99990.8800360.0001-3.5 準確度3.5.1 以中間精密度項下no.5線性標準溶液為標準，按照以下公式，計算線性項下no.2no.6溶液中每個組分的回收率，并計算平均回

31、收率。未知雜質(zhì)的回收率以的進行評價。 回收率測試數(shù)據(jù)及結(jié)果見表5-15-7。3.5.2計算公式：回收率（%）=注：ai：no.2no.6線性標準溶液中每個組分的平均峰面積； asi：no.5線性標準溶液中每個組分的平均峰面積；ci：no.2no.6線性標準溶液中每個組分的濃度，g/ml.csi：no.5線性標準溶液中每個組分的濃度，g/ml.3.5.3可接受標準：每個組分的平均回收率：95.0%105.0%。3.5.4準確度驗證結(jié)果及評價雜質(zhì)a、雜質(zhì)c、雜質(zhì)d、雜質(zhì)xa、雜質(zhì)xb、雜質(zhì)xc和的回收率依次為99.4%, 99.2%, 98.5%, 99.0%, 98.7%, 98.5%和100.5%，回收率的rsd依次為1.2%, 1.8%, 1.4%, 1.8%, 2.9%, 2.5%和2.4%；每個雜質(zhì)的回收率均介于95.0%105.0%之間。方法的準確度符合驗證標準。表5-1雜質(zhì)a回收率測定數(shù)據(jù)和結(jié)果標準溶液濃度csi (g/ml)2.000標準平均峰面積asi309.20溶液no.23456濃度ci (g/ml)0.40000.80001.6002.0002.400