404.A處理對(duì)李果實(shí)采后品質(zhì)和生理變化的影響探討 論文

1、 大學(xué)本科生畢業(yè)論文 題 目：o3處理對(duì)李果實(shí)采后品質(zhì)和生理變化的影響探討 姓 名： 學(xué) 院： 生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院 專 業(yè)： 生物工程 班 級(jí)： 學(xué) 號(hào)： 指導(dǎo)教師： 2010年 5 月 20 日目錄中文摘要1英文摘要1前言2一材料和方法21 試驗(yàn)材料22 測(cè)定指標(biāo)及方法22.1 特性測(cè)定22.2 酶的測(cè)定43 試劑與儀器設(shè)備73.1試劑73.2 儀器74 數(shù)據(jù)差異性分析8二結(jié)果與分析81 o3對(duì)采后李果實(shí)品質(zhì)的影響81.1 o3對(duì)李果實(shí)硬度的影響91.2 o3處理對(duì)李果實(shí)可溶性固形物ssc的影響91.3 o3處理對(duì)李果實(shí)總糖的影響91.4 o3處理對(duì)李果實(shí)ta的影響101.5 o3處理對(duì)李果

2、實(shí)褐變度的影響111.6 o3處理對(duì)李果實(shí)花青素的影響112 o3對(duì)李果實(shí)膜脂氧化、抗氧化酶及ppo活性的影響122.1 o3對(duì)李果實(shí)mda含量的影響132.2 o3對(duì)李果實(shí)pod活性的影響132.3 o3對(duì)李果實(shí)ppo活性的影響142.4 o3對(duì)李果實(shí)sod活性的影響152.5 o3對(duì)李果實(shí)pal活性的影響16三結(jié)論與討論161. o3處理與李果實(shí)品質(zhì)的關(guān)系172. o3處理對(duì)不同品種李果實(shí)膜脂氧化的影響173. o3處理對(duì)不同品種李果實(shí)抗氧化酶活性的影響174. o3處理對(duì)不同品種李果實(shí)ppo活性的影響185. 不同o3處理對(duì)李果實(shí)貯藏效果的影響18致謝19參考文獻(xiàn)20o3處理對(duì)李果實(shí)采后

3、品質(zhì)和生理變化的影響 摘要：本文以安哥諾和黑寶石李為研究材料，通過測(cè)定和觀察不同o3條件下李果實(shí)貯藏不同時(shí)間的特性變化，明確出最佳o3處理?xiàng)l件，獲得最佳間歇時(shí)間，提高李果實(shí)耐貯性。o3可抑制呼吸強(qiáng)度，減少氧分消耗；降解消除乙烯等有害氣體，形成霉菌等微生物抑制劑；抑制殺滅病菌，防止腐爛生霉。結(jié)果表明：o3-10d是比較適宜的o3處理?xiàng)l件。明顯降低了黑寶石李果實(shí)的腐爛，減緩果實(shí)硬度和可滴定酸含量的下降, 能有效抑制sod活性的下降，pal活性作為李果實(shí)的抗性指標(biāo)，果實(shí)的活性也能在貯藏末期維持在相對(duì)較高的水平，表現(xiàn)出較高水平的抗逆性，增長了果實(shí)的存儲(chǔ)周期，能夠達(dá)到抑制果實(shí)ppo活性增加的效果，減緩果

4、實(shí)衰老進(jìn)程。關(guān)鍵詞：李，o3，貯藏，sod，ppo effect of ozone on quality and physiological change of plum fruit abstract：in this paper, angeleno and black gem plum fruit for research materials, through the determination and the effects of different conditions, plum fruit o3 fruit storage characteristics of different ti

5、me changes, clearly the best o3 treatment conditions, the best interval time and increasing plum fruit storability. o3 inhibit respiration, reducing oxygen consumption; degradation to eliminate harmful gases such as ethylene, the formation of mold and other microorganisms inhibitor; inhibition to ki

6、ll bacteria and prevent mildew rot.the results showed that: o3-10d is the best o3 treatment conditions. significantly reduced the friar plum fruit rot, reduce fruit firmness and titratable acid content decreased, can inhibit the sod activity decreased, pal activity as indicators of resistance of fru

7、its, fruit of the activity can also be maintained at relatively high end store level, showing a high level of resistance, an increase of the storage period of fruit， to achieve inhibition of ppo activity of fruit effect and slow down the senescence process.keywords: plum，o3，storage，sod，ppo 李是溫帶果樹中適應(yīng)

8、性較強(qiáng)的一種，屬薔薇科、李亞科、李屬。成熟于高溫季節(jié)且皮薄汁多，在常溫下生理代謝旺盛，極易腐爛變質(zhì)而造成經(jīng)濟(jì)損失，故在常溫下不耐貯藏1。o3是一種在常溫下不穩(wěn)定的淡藍(lán)色氣體，可抑制呼吸強(qiáng)度，減少氧分消耗；降解消除乙烯等有害氣體，形成霉菌等微生物抑制劑；抑制殺滅病菌，防止腐爛生霉。但o3處理對(duì)李果實(shí)采后品質(zhì)及相關(guān)生理變化的研究未見報(bào)道。因此，本文以安哥諾和黑寶石李為研究材料，在課題組2008年的研究基礎(chǔ)上2-6，進(jìn)一步探討o3的間歇處理時(shí)間對(duì)李果實(shí)貯藏效果的影響，為該技術(shù)的應(yīng)用提供更完善的理論依據(jù)。一、 材料和方法1試驗(yàn)材料試驗(yàn)材料黑寶石李于2009年8月10日購買于南京三叉河果蔬批發(fā)市場(chǎng)；安哥

9、諾李于2009年9月22日采自北京平谷區(qū)，當(dāng)天空運(yùn)回江蘇省農(nóng)科院果蔬保鮮與加工實(shí)驗(yàn)室。選擇無病蟲害、無機(jī)械傷，大小均勻的果實(shí)，01.5預(yù)冷24h后裝入氣調(diào)保鮮箱，密封保存，利用o3發(fā)生器產(chǎn)生臭氧，每15 d取樣一次，每處理取10個(gè)果實(shí)用于各項(xiàng)品質(zhì)指標(biāo)的測(cè)定。2 測(cè)定指標(biāo)及方法2.1特性測(cè)定2.1.1硬度 每次測(cè)定10個(gè)果實(shí),用刀片在果實(shí)最大橫徑處切去對(duì)應(yīng)兩側(cè)1cm2的果皮后，在去皮處用硬度計(jì)分別測(cè)定果實(shí)硬度，去掉最大值和最小值后取平均值。2.1.2可溶性固形物含量（ssc） 采用糖量計(jì)測(cè)定，每次測(cè)定10個(gè)果實(shí)，在果實(shí)最大橫徑處取樣測(cè)定，去掉最大值和最小值后取平均值。2.1.3 總糖 采用蒽酮比

10、色法2.1.4 可滴定酸（ta） naoh滴定法測(cè)定，參考李錫香等（1994）2.1.5 褐變度取果肉10g，加入12ml無水乙醇，勻漿后3000rpm離心20min，取上清液測(cè)420nm下的od值。2.1.6 總酚取果肉5g，加入10ml無水乙醇和15ml10%三氯乙酸研漿后靜置30min，再取清夜離心3000rpm5min，取上清液0.2ml于試管加入0.8ml10%三氯乙酸和5ml的lin-酚混勻，30水浴10min，加入0.5ml的lin混勻，30水浴30min后測(cè)量500nm下的吸光度。2.1.7 果膠取樣5g（不需要研磨）置于150ml的三角瓶中，加入50ml無水乙醇，沸水浴30m

11、in，除去糖分及其他物質(zhì)，用濾紙過濾，棄去濾液，沉淀放入原三角瓶中，加入40ml水，水浴5030min，以此溶解可溶性果膠，過濾，用少量水洗滌濾紙和沉淀，濾液移入50ml容量瓶中加水定容，此為可溶性果膠夜。沉淀放入原三角瓶中，加100ml 0.5m濃硫酸在沸水浴上加熱1h以水解原果膠，冷卻后移入100ml容量瓶中，加水定容，此為原果膠測(cè)定液。吸取可溶性果膠和原果膠液各0.1ml加入到0.9ml蒸餾水中，沿壁加濃硫酸6ml，混勻后沸水浴20min，冷卻，各加入0.5ml 0.15%咔唑乙醇溶液搖勻，在暗處放置2h后測(cè)530nm處吸光值。2.1.8 花青素提取液為乙腈乙酸=964取樣10g加入提取

12、液20ml后勻漿于30靜置1h，取上清液13000rpm離心10min，取離心液1ml加入ph4.5的0.4m醋酸鈉緩沖液2ml后搖勻，于525nm處測(cè)吸光值。2.2 酶的測(cè)定2.2.1丙二醛含量（mda）的測(cè)定提取液的制備：取10g去皮果肉，加0.5g聚乙烯吡咯烷酮（pvpp）于20ml 0.2mol/l磷酸緩沖液（ph=6.4）中冰浴研磨，4冰凍離心機(jī)1.3104rpm離心20min，取上清液測(cè)定酶活性。mda含量的測(cè)定：參照李合生等7的方法，略有改進(jìn)。取1.0ml粗酶提取液加入3.0ml0.5%的硫代巴比妥酸（tba，用20%的三氯乙酸配成）溶液中，混勻后在沸水浴中煮沸20min，迅速用

13、自來水冷卻并在1104g離心機(jī)中離心10min。取上清液在450nm、532nm和600nm波長下分別測(cè)定光密度值，并按下式計(jì)算mda含量：mda含量（molg-1）= 6.45(a532-a600)-0.56a450 *v*a/wa式中a：反應(yīng)液總量（4ml）； v：提取液總量（ml）； a：測(cè)定用提取液體積（ml）；w：樣品鮮重(g)。2.2.2 多酚氧化酶（ppo）活性的測(cè)定 參考湯章城8的方法，有改進(jìn)。粗酶液的提取同2.2.1。酶活性的測(cè)定：將0.1mol/l的鄰苯二酚溶液在30保溫，取該溶液3ml，迅速加入粗酶提取液0.2ml，保證反應(yīng)溫度為30，加酶液后5s開始掃描，記錄20s內(nèi)3

14、98nm處吸光值變化，以od398變化0.01表示一個(gè)酶活性單位（），每處理重復(fù)3次。酶的比活0.01od398g-1min-1= (od*d)/(0.01*fw*t)式中fw：樣品鮮重（g）； t：反應(yīng)時(shí)間（min）； d：稀釋倍數(shù)。2.2.3 過氧化物酶（pod）活性的測(cè)定粗酶液的提取同2.2.1。酶活性的測(cè)定：按照putter（1974）的方法，略有修改：將0.1ml粗酶提取液加入2ml 0.05mol/l愈創(chuàng)木酚（用0.2mol/l ph=6.4的磷酸緩沖液配成）中，在30水浴中平衡5min，然后加1ml 0.2%h2o2（用0.2mol/l ph=6.4的磷酸緩沖液配成）混勻，1mi

15、n后掃描1min內(nèi)470nm處吸光值變化，以每分鐘od470變化0.01表示一個(gè)酶活性單位（），每處理重復(fù)3次。酶活性（g-1min-1）= (od470* vt)/（w* vt *0.01*t）式中w：樣品鮮重（g）； t:反應(yīng)時(shí)間（min）； vt：提取酶液總體積（ml）；vs：測(cè)定時(shí)取用酶液體積（ml）。2.2.4超氧化物歧化酶（sod）活性的測(cè)定粗酶液的提取：采用氮藍(lán)四唑（nbt）光還原法9，稱取果肉10g，加入20ml0.05mol/l（ph=7.8，含1%pvpp）的磷酸緩沖液，冰浴研磨，于4下8500rpm離心20min，分離出的上清液即為粗酶液。酶活性測(cè)定：取質(zhì)地相同，透明度好

16、的試管若干，一支對(duì)照組，一支空白組，分別加入0.05mol/l磷酸緩沖液（ph7.8）1.5ml，0.13mol/l met、750mol/l nbt、100mol/l edta-na2、20mol/l核黃素各0.3ml和0.5ml的蒸餾水，對(duì)照和空白均以1ml 0.05mol/l ph=7.8的磷酸緩沖液代替粗酶液，混勻后將一只對(duì)照管置于暗處，其他各管置于4000lx光源下反應(yīng)20min（30,要求各管受光情況一致，溫度高則時(shí)間縮短，反之延長。)。反應(yīng)結(jié)束后，用黑紙遮光終止反應(yīng)。以遮光的空白組調(diào)零，測(cè)定560nm處各管的吸光度，公式如下：sod活性= （a0-as）*vt/（a0*0.18*

17、fw*v1)式中ao：對(duì)照管abs； as：樣品管abs； fw：樣品質(zhì)量（g）； vt：提取液總體積20ml； vl：反應(yīng)液體積1ml。 sod的總活性以每克鮮重酶單位（）來表示，以1min內(nèi)od560減少0.1個(gè)單位為一個(gè)酶活單位。2.2.5 苯丙氨酸解氨酶（pal）活性的測(cè)定酶液的提取：分別稱取果肉5.0g，加10ml 含5mm/l巰基乙醇的0.05m ph8.8硼酸鹽緩沖液和少許聚乙烯吡咯烷酮（0.5g除去酚類物質(zhì)毒害，防止醌顏色干擾），在冰浴中研磨充分，離心前在-20冰箱預(yù)冷2min，然后在高速冷凍離心機(jī)上離心4下20min（20000r/min），取上清夜置于4冰箱中保存。用于苯丙

18、氨酸解氨酶（pal）活性的測(cè)定。酶活性的測(cè)定：在小試管中依次加入0.1m ph8.8硼酸鹽緩沖液1ml，0.02m的l-苯丙氨酸1ml，酶液1ml，對(duì)照即將酶液改為蒸餾水1ml，蒸餾水0.5ml，30下水浴60min，加6m的hcl 1.0ml終止反應(yīng)（離心除去沉淀），測(cè)定290nm波長下測(cè)od值，以每小時(shí)在290nm處吸光度變化0.001為一個(gè)酶活性單位。校正管用蒸餾水代替酶液。酶活單位=od值*vt/（0.01*v1*t*fw）。2.2.6 纖維素酶參考魏文毅和曾秀麗的方法，有改進(jìn)。酶液的提?。喝?0個(gè)果實(shí)，均勻取樣10g，加入20ml酶提取液（6%nacl,內(nèi)含0.6%edta，1%pv

19、pp）進(jìn)行研磨，1.13103g離心10min，上清液即為酶液。dns比色法：取酶液0.2ml，40預(yù)熱3min，加入0.51%羧甲基纖維素鈉溶液1.0ml，對(duì)照為ph 4.0 檸檬酸緩沖液，40恒溫反應(yīng)30min后加入0.8ml 3，5-二硝基水楊酸溶液（dns），沸水浴5min，冷卻后取0.1ml加入到2.4ml水中混勻，540nm下測(cè)分光。以每分鐘每克鮮樣40分解羧甲基纖維素鈉產(chǎn)生1ug葡萄糖為一個(gè)纖維素酶活性單位（u），重復(fù)三次取平均值。葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線制作：準(zhǔn)確稱取經(jīng)105烘至恒重的無水葡萄糖250mg，溶于蒸餾水中，定容至250ml，配成0.1%標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液。分別吸取上述各溶液2.

20、0、4.0、6.0、8.0、10.0ml，分別定容至50ml.再分別吸取上述溶液各2.5ml于試管中，各加2.5mldns于試管，煮沸5min（另做1管對(duì)照，取2.5ml蒸餾水，加2.5mldns（用來終止反應(yīng)）同樣煮沸5min）冷卻后在540nm下測(cè)定。記錄各管的od值，以od值為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液含糖的mg數(shù)為橫坐標(biāo)繪制曲線。2.2.7多聚半乳糖醛酸酶(pg)酶液的提取同2.2.6。dns比色法：取酶液1ml,37預(yù)熱3min,加0.5% 、ph 4.0果膠溶液2.0ml，對(duì)照為ph 4.0醋酸緩沖液，37恒溫反應(yīng)30min后加入1.5mldns，沸水浴5min，用水定容至10m

21、l，540nm下測(cè)分光。已d-（+）半乳糖醛酸作標(biāo)準(zhǔn)曲線，以每分鐘每克鮮樣37分解果膠產(chǎn)生1ug的游離半乳糖醛酸為一個(gè)果膠酶活性單位（u）。重復(fù)三次取平均d-（+）半乳糖醛酸作標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:準(zhǔn)確配置d-（+）半乳糖醛酸溶液（0.1mg/ml）為標(biāo)準(zhǔn)樣按下表在各試管中加樣。組分0123456標(biāo)準(zhǔn)樣（ml）00.20.40.60.811.2蒸餾水（ml）54.84.64.44.243.8dns（ml）5555555在沸水浴中加熱5min,冷卻后取0.1ml加入到3.9ml水中混勻，540nm下測(cè)分光，用0號(hào)管調(diào)零，以od540nm橫坐標(biāo)，半乳糖醛酸量為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.2.8果膠酯酶(pe

22、)酶液的提取2.2.6naoh滴定法：取酶液0.2ml,37預(yù)熱3min,加0.5%果膠1ml，對(duì)照為ph4.0醋酸緩沖液，37恒溫反應(yīng)30min，加入0.8mldns，沸水浴5min，冷卻后取0.1ml加入到3.9ml水中混勻。540nm下測(cè)定分光。3 試劑與儀器設(shè)備3.1試劑所采用的化學(xué)試劑均為化學(xué)純或分析純。3.2 儀器1）uv1102紫外/可見分光光度計(jì)（上海天美科學(xué)儀器有限公司）2）dkb-1915型低溫恒溫槽（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）3）hh-4恒溫水浴鍋（金壇市杰瑞爾電器有限公司）4）gzx-250bs-光照培養(yǎng)箱（上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司）5）sigma 3k15高速冷凍

23、離心機(jī)（made in germany）6）ika t18basic高速分散機(jī)（made in germany） 7）lw-011臭氧發(fā)生器（南京綠氧環(huán)?？萍加邢薰荆? 數(shù)據(jù)差異性分析 所有數(shù)據(jù)用spss軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，采用anova進(jìn)行鄧肯氏多重差異分析（p0.05）。二、 結(jié)果與分析1、 o3對(duì)采后李果實(shí)品質(zhì)的影響1.1 o3對(duì)李果實(shí)硬度的影響圖1a為o3處理后貯藏期間安哥諾李硬度的變化情況。貯藏0至20d內(nèi)，o3-0d，o3-10d和o3-20d處果實(shí)硬度呈現(xiàn)升高的趨勢(shì)且高于對(duì)照組，20d至40d內(nèi)o3-10d處理的果實(shí)硬度發(fā)生顯著下降并低于對(duì)照組，60d處o3-10d和o3-20d

24、處理的果實(shí)硬度顯著高于對(duì)照組，80d至100d內(nèi)果實(shí)硬度都明顯下降，100d至120d內(nèi)o3-0d處理的果實(shí)硬度顯著增加，可能與果實(shí)發(fā)生不可逆硬化有關(guān)，o3-10d和o3-20d處理果實(shí)的硬度變化較平緩?？梢姡琽3-10d處理有利于緩解果實(shí)的衰老進(jìn)程。圖1b為o3處理后貯藏期間黑寶石李硬度的變化情況?？傮w表現(xiàn)為下降的趨勢(shì)，貯藏0到105d內(nèi)各處理和對(duì)照果實(shí)的硬度均明顯下降，105至105+3d內(nèi)果實(shí)的硬度均呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，各處理處果實(shí)硬度和對(duì)照組硬度差異都不顯著。 圖1 o3處理對(duì)采后李果實(shí)硬度的影響，a-安哥諾，b-黑寶石1.2 o3處理對(duì)李果實(shí)可溶性固形物ssc的影響可溶性固形物指果汁中能溶

25、于水的糖、酸、維生素、礦物質(zhì)等。李果實(shí)的可溶性固形物主要由糖、酸等物質(zhì)組成，其含量高低可作為評(píng)價(jià)李品質(zhì)及保鮮效果的指標(biāo)。圖2a為不同o3處理對(duì)安哥諾李ssc的影響。在整個(gè)貯藏過程中，ssc一直處于波動(dòng)性變化狀態(tài)。貯藏020d內(nèi)，各處理和對(duì)照果實(shí)的ssc均增加，20d處各處理的果實(shí)ssc差異性均不顯著。20至40d內(nèi)，o3-0d和o3-20d處理果實(shí)的ssc顯著增長，而此時(shí)，o3-10d處理和ck果實(shí)的ssc出現(xiàn)下降，且o3-10d處理下降幅度較大。貯藏40至80d內(nèi)，o3-0d處理果實(shí)的ssc先下降后升高，o3-10d，o3-20d處理和對(duì)照果實(shí)的ssc則均下降。貯藏80至120d內(nèi)o3-0d

26、處理果實(shí)ssc平緩上升，變化不顯著。其他處理果實(shí)ssc均是先上升后下降，至貯藏120d時(shí)，o3-0d處理果實(shí)的ssc顯著高于o3-10d，o3-20d和ck處理的果實(shí)ssc。圖2b為不同o3處理對(duì)黑寶石李ssc的影響。與安哥諾李比較，黑寶石李果實(shí)的ssc變化波動(dòng)要少，大致上表現(xiàn)為下降。0至15d內(nèi)各處理和對(duì)照組果實(shí)的ssc均增長，o3-10d和o3-20d差異性不顯著但是較o3-0d和對(duì)照組差異性顯著。15至60d整體呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，且在60d各處理的ssc均出現(xiàn)了最高值。60至105+3d內(nèi)o3-10d處理表現(xiàn)為下降，o3-0d和ck處理果實(shí)的ssc變化不顯著，60至105d內(nèi)o3-20d處理

27、果實(shí)的ssc表現(xiàn)為下降，105至105+3d內(nèi)表現(xiàn)為升高。105d處各處理果實(shí)的ssc為cko3-0do3-10do3-20d，且o3-0d，o3-10d，o3-20d之間的差異性顯著。abssc（%）ssc（%）貯藏天數(shù)（d）貯藏天數(shù)（d）圖2 o3處理對(duì)采后李果實(shí)ssc的影響，a-安哥諾，b-黑寶石1.3 o3處理對(duì)李果實(shí)總糖的影響圖3是不同o3處理對(duì)李果實(shí)總糖含量的影響，由圖3a可看出，各處理總糖含量均有高峰出現(xiàn)，但出現(xiàn)的時(shí)間和峰值存在差異，除o3-10d處理在貯藏60d時(shí)達(dá)到峰值外其它處理均在20d達(dá)到峰值，o3-0d和o3-20d的峰值均高于ck的峰值，之后總體呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)。至10

28、0到120d各處理果實(shí)的總糖顯著增加，在120d處總糖含量依次為o3-10do3-0dcko3-20d,且差異性顯著。由圖3b可看出，貯藏0至15d時(shí)各處理果實(shí)的總糖均顯著增加，15至30d內(nèi)ck，o3-0d，o3-10d處理果實(shí)的總糖均表現(xiàn)為增加的趨勢(shì)，o3-20d處理表現(xiàn)為下降趨勢(shì)。30至45d內(nèi)各處理的果實(shí)總糖均顯著下降，其中ck下降最為顯著，與果實(shí)后熟作用有關(guān)。45至105d內(nèi)各處理果實(shí)的總糖變化波動(dòng)較大，總體表現(xiàn)為ck總糖較小。在105d處各處理的果實(shí)總糖為cko3-0do3-20do3-10d,且差異性顯著。圖3 o3處理對(duì)采后李果實(shí)總糖的影響，a-安哥諾，b-黑寶石1.4 o3處

29、理對(duì)李果實(shí)ta的影響李果實(shí)采后體內(nèi)的酸作為呼吸底物會(huì)被大量消耗。圖4 a為安哥諾李o3處理后貯藏條件下ta含量的變化情況，隨著貯藏時(shí)間的延長o3處理和對(duì)照果實(shí)的ta含量總體均呈下降趨勢(shì)。0至 20d內(nèi)o3-0d和o3-10d處理果實(shí)的ta增長到最大值，20至80d內(nèi)o3-10d處理果實(shí)的ta顯著高于其他處理的ta，在80d處各處理果實(shí)的ta為o3-10do3-20do3-0dck。80至120d內(nèi)o3-0d，o3-20d和ck處理果實(shí)的ta表現(xiàn)為下降趨勢(shì)，o3-10d處理果實(shí)的ta先顯著下降后緩慢升高。在120d處各處理果實(shí)的ta為cko3-10do3-0do3-20d,o3-10d和o3-0

30、d處理果實(shí)的ta差異不顯著。由圖4b可看出，隨著貯藏時(shí)間的延長o3處理和對(duì)照果實(shí)的ta含量均呈下降趨勢(shì)。而且各組處理間變化各不相關(guān)，下降的速率在不同貯藏時(shí)期也不同，總體來說后期下降都較為平緩，0-15d內(nèi)各處理果實(shí)的ta含量均快速下降。貯藏15d時(shí)各處理果實(shí)的ta含量依次為o3-20do3-10dcko3-0d，各ta含量差異性顯著。15-30d內(nèi)o3-0d處理果實(shí)的ta呈增長趨勢(shì)，30-105d內(nèi)各處理果實(shí)的ta均呈下降趨勢(shì)，后期下降緩慢，在105d處各處理的ta含量依次為o3-0do3-10do3-20dck,o3-0d和o3-10d之間差異性不顯著，與o3-20d和ck差異性顯著。 圖4

31、 o3處理對(duì)采后李果實(shí)總酸的影響，a-安哥諾，b-黑寶石1.5 o3處理對(duì)李果實(shí)褐變度的影響圖5是不同o3處理對(duì)李果實(shí)褐變度的影響，由圖5a可看出，0-40d內(nèi)各處理果實(shí)的褐變度呈現(xiàn)增長趨勢(shì)，且o3-10d和o3-20d處理果實(shí)的褐變度增長較為顯著，40d處各處理褐變度依次為o3-10do3-20dcko3-0d,且差異性較為顯著。60-80d內(nèi)各處理果實(shí)的褐變度顯著下降，80-100d內(nèi)各處理果實(shí)的褐變度又顯著增長，在100-120d內(nèi)o3-20d，o3-0d，o3-10d處理的果實(shí)褐變度均發(fā)生緩慢增長，對(duì)照組褐變度顯著下降，在120d處各處理褐變度依次為o3-20do3-0do3-10dc

32、k，o3-0d和o3-10d褐變度差異性不顯著。由圖5b可看出，隨著時(shí)間的延長各處理果實(shí)的差異性總體呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)，0-30d內(nèi)各處理果實(shí)的褐變度緩慢降低，在30d處各處理褐變度o3-10d顯著小于其余各值，之后開始緩慢增長，增長趨勢(shì)各不相同。105d處各處理褐變度依次為o3-0do3-20do3-10dck,且差異性顯著。 圖5 o3處理對(duì)采后李果實(shí)褐變度的影響，a-安哥諾，b-黑寶石1.6 o3處理對(duì)李果實(shí)花青素的影響圖6是不同o3處理對(duì)李果實(shí)花青素的影響，由圖6a可看出，0-20d內(nèi)各處理果實(shí)花青素均顯著增長，而對(duì)照組變化較為顯著，60-80d內(nèi)o3-0d和o3-20d果實(shí)花青素呈現(xiàn)增長

33、趨勢(shì)，o3-10d和ck處理果實(shí)花青素呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，在處理100d處o3-0d，o3-10d，o3-20d處理果實(shí)的花青素呈現(xiàn)峰行變化，出現(xiàn)最低峰值，差異性不顯著，120d處各處理果實(shí)的花青素依次為o3-0dcko3-10do3-20d,o3-10d和ck差異性不顯著。 由圖6b可看出，總體花青素含量呈上升趨勢(shì)，各處理的變化趨勢(shì)各部相同，總體來看o3-20d處理果實(shí)的花青素較其他處理偏高。 圖6 o3處理對(duì)采后李果實(shí)花青素的影響，a-安哥諾，b-黑寶石2、 o3對(duì)李果實(shí)膜脂氧化、抗氧化酶及ppo活性的影響果實(shí)中清除自由基的體系較復(fù)雜，其中某一種酶或某一物質(zhì)的變化并不能代表機(jī)體總保護(hù)能力的變化。

34、mda的積累受3個(gè)因素的影響：o2濃度、不飽和脂肪酸(底物)含量和組織總的清除自由基能力10。陳清西等11指出，清除自由基是保護(hù)酶系統(tǒng)的主要功能，因此該酶系統(tǒng)與mda存在較大的相關(guān)性，但各種保護(hù)酶活性與mda含量的相關(guān)度又不相同。sod活性與mda含量相關(guān)度最大，且呈負(fù)相關(guān)。pod活性與之呈一定的正相關(guān)，cat活性與之相關(guān)較不明顯。而mda積累的速率可表示組織中總的清除自由基能力的大小。mda積累越多，表明組織的保護(hù)能力越弱。有關(guān)研究表明sod、cat、pod等抗氧化酶12-14的活性與植物抗性和衰老有關(guān)。sod能在植物衰老過程中清除組織中的活性氧，維持活性氧代謝的平衡，保護(hù)膜結(jié)構(gòu)，因而能延緩

35、衰老；果實(shí)衰老時(shí)sod活性下降與mda含量增加，意味著體內(nèi)清除活性氧能力的下降和膜脂過氧化作用的加強(qiáng)。cat催化分解組織中高濃度的h2o2，從而使h2o2控制在較低水平，降低h2o2產(chǎn)生oh對(duì)機(jī)體造成的危害。pod催化組織中低濃度的h2o2氧化其它底物，用以清除過氧化物和h2o2。果實(shí)衰老時(shí)pod活性下降，也會(huì)導(dǎo)致pod清除過氧化物毒害能力的下降，內(nèi)源清除活性氧能力的減弱與膜脂過氧化產(chǎn)物的積累表明，蘋果、荔枝果實(shí)的衰老與活性氧的傷害有關(guān)，pod活性變化可作為果實(shí)衰老的一個(gè)標(biāo)志15。只有sod、cat、pod三者活性協(xié)調(diào)一致，才能使自由基維持在一個(gè)低水平，延緩果實(shí)衰老，所以將上述3種酶統(tǒng)稱為保護(hù)

36、酶系統(tǒng)16。2.1 o3對(duì)李果實(shí)mda含量的影響由圖7 a可看出，整個(gè)貯藏期內(nèi)安哥諾李果實(shí)的mda含量呈先上升后下降趨勢(shì)，其間有一個(gè)含量高峰，而對(duì)照處理的高峰出現(xiàn)得最早，比其它處理早20至60d，說明對(duì)照處理容易較早出現(xiàn)組織衰老、保護(hù)能力變?nèi)醯默F(xiàn)象。在貯藏60至80d期間，處理和對(duì)照果實(shí)的mda含量均下降，o3-0d處理果實(shí)的mda含量最高，可能是果實(shí)在長期的低溫脅迫條件下導(dǎo)致果實(shí)出現(xiàn)后熟代謝障礙而致，o3處理可減輕低溫脅迫對(duì)果實(shí)貯藏效果的影響。120d處o3-20d處理果實(shí)的mda含量較低。圖7 b 可看出，o3-0d處理果實(shí)的mad含量峰值出現(xiàn)較其他處理晚15d，90-105d內(nèi)各處理果實(shí)

37、的mda均出現(xiàn)顯著降低，對(duì)照果實(shí)的mda含量出現(xiàn)增加，且在105d處各處理果實(shí)的mda依次為cko3-0do3-10do3-20d。在回溫期間各處理果實(shí)的mda均增加，說明o3處理能抑制果實(shí)衰老。圖7 o3處理對(duì)采后李果實(shí)mda的影響，a-安哥諾，b-黑寶石2.2 o3對(duì)李果實(shí)pod活性的影響pod是一個(gè)對(duì)環(huán)境十分敏感的保護(hù)酶，一定程度的環(huán)境脅迫，會(huì)使pod活性升高以減輕或清除脅迫因素17。因此pod活性變化可以在一定程度上反映果實(shí)成熟衰老的情況。由圖8a可知，安哥諾李在整個(gè)貯藏期，o3-0d處理李果實(shí)的pod活性僅在貯藏60d時(shí)出現(xiàn)了一次高峰，而其他處理的酶活性則有兩次高峰。至貯藏20d，除

38、o3-20d處理的果實(shí)pod活性為降低，其余處理的酶活性均有不同程度的上升，其中以ck處理上升的最少。在貯藏60d時(shí)，各處理均出現(xiàn)了第一個(gè)pod活性的高峰。在貯藏的60至80d期間，各處理均呈不同的下降趨勢(shì)。在貯藏80至100d期間，o3-10d，o3-20d，ck果實(shí)的pod活性又增長并出現(xiàn)了第二次高峰，其后又保持回落至貯藏結(jié)束；貯藏的80至100d，o3-0d處理的酶活性保持平緩的上升，其他處理的pod活性則顯著增長，形成第二次活性高峰18。在整個(gè)貯藏期間，各處理的果實(shí)pod活性均有顯著的差異(p0.01)。至貯藏120d時(shí)，各處理果實(shí)的pod活性依次為o3-0do3-20dcko3-10

39、d?？傮w看來，整個(gè)貯藏過程中o3-0d處理果實(shí)的pod活性顯著高于對(duì)照，而第二次pod活性增長高峰出現(xiàn)較ck處理出現(xiàn)得晚，表明該處理對(duì)果實(shí)的衰老有一定的延緩作用。由圖b 可看出，在整個(gè)貯藏過程中總體呈先下降后上升的趨勢(shì)。在貯藏15d時(shí)，ck處理果實(shí)pod活性與其他處理相比有極明顯的差異(p0.01)，且各組活性均顯著上升。在貯藏60d處各處理果實(shí)的pod活性出現(xiàn)最低谷，且cko3-0do3-10do3-20d。o3-10d處理果實(shí)的pod活性在整個(gè)貯藏期間出現(xiàn)了兩次高峰。吳彩娥等報(bào)道，植物體中存在兩種pod機(jī)制：一種在遇逆境或衰老初期即表達(dá)，表現(xiàn)為保護(hù)效應(yīng)，能增加果實(shí)的耐藏性；另一種是在逆境后

40、期或衰老后期被啟動(dòng)，表現(xiàn)為傷害效應(yīng)。因此可以初步斷定，o3-10d處理的第一次pod活性高峰為保護(hù)效應(yīng)，是果實(shí)后熟的標(biāo)志，第二次則為傷害效應(yīng)，是果實(shí)開始衰老的標(biāo)志。而o3-10d處理的果實(shí)pod活性在貯藏的后期又緩慢上升，說明該處理抑制了果實(shí)在貯藏后期的快速衰老。在整個(gè)貯藏期間，o3-0d與o3-20d處理的果實(shí)pod活性變化趨勢(shì)基本與對(duì)照組類同。圖8 o3處理對(duì)采后李果實(shí)pod的影響，a-安哥諾，b-黑寶石2.3 o3對(duì)李果實(shí)ppo活性的影響ppo是一類廣泛存在的含銅金屬酶類19,其通常被認(rèn)為是引起果蔬產(chǎn)品采后褐變的重要酶。由9 a可看出，安哥諾李貯藏前20d，各處理果實(shí)ppo活性總體呈上升

41、趨勢(shì)，變化幅度較大。在貯藏40d時(shí)o3-0d處理果實(shí)的ppo活性高于其它處理，但方差分析表明其與各處理之間差異不顯著。貯藏20至40d內(nèi)，除o3-0d處理的ppo活性有顯著的上升，其他各處理的果實(shí)ppo活性均呈下降趨勢(shì)。在貯藏的40至60d內(nèi)，除o3-0d處理外，各處理果實(shí)ppo活性均出現(xiàn)上升。貯藏100至120d內(nèi)，除o3-20d其余處理酶活性均呈下降趨勢(shì)，各處理果實(shí)的ppo活性依次為o3-20dcko3-0do3-10d。圖9 b可看出，整個(gè)貯藏的前中期，各處理果實(shí)ppo活性除o3-0d處理出現(xiàn)一次高峰，其余出現(xiàn)兩次活性高峰值。在貯藏的30-45d內(nèi)o3-0d處理果實(shí)的ppo活性顯著下降，

42、其他處理果實(shí)的活性上升并出現(xiàn)高峰。45-105d內(nèi)各處理果實(shí)的活性總體表現(xiàn)為緩慢下降的趨勢(shì)，回溫期間果實(shí)的活性出現(xiàn)顯著升高，在105d時(shí)各處理活性依次為o3-10do3-20do3-0dck。 圖9 o3處理對(duì)采后李果實(shí)ppo的影響，a-安哥諾，b-黑寶石2.4 o3對(duì)李果實(shí)sod活性的影響 圖10是不同o3處理對(duì)李果實(shí)sod活性的影響，由圖11a可看出，40-60d內(nèi)各處理果實(shí)的sod活性均下降，說明其對(duì)果實(shí)自由基清除的能力在減弱；貯藏60d時(shí)，o3-0d，ck，o3-10d處理果實(shí)的sod活性菌下降至最低谷，而在之后的貯藏過程中，果實(shí)的sod活性總體升高，這可能與集體后熟誘導(dǎo)相關(guān)；貯藏20

43、-100d內(nèi)o3-20d處理果實(shí)的sod活性變化比較平緩，課件這期間果實(shí)仍對(duì)自由基有一定的清除能力。說明前期果實(shí)sod活性反應(yīng)的是果實(shí)對(duì)自由基的清除能力，而后期其活性的增加是受機(jī)體衰老誘導(dǎo)的結(jié)果。可見，o3處理均可延緩果實(shí)的衰老進(jìn)程。在貯藏120d時(shí)，o3-0d、o3-10d和o3-20d處理果實(shí)的sod活性均高于對(duì)照，o3-10d果實(shí)的sod活性則最低，各處理間差異明顯。 圖10 o3處理對(duì)采后李果實(shí)sod的影響，a-安哥諾，b-黑寶石2.5 o3對(duì)李果實(shí)pal活性的影響圖11是不同o3處理對(duì)李果實(shí)pal活性的影響，由圖11a可看出，貯藏過程中的安哥諾李果實(shí)pal活性基本呈倒l形變化的趨勢(shì)。

44、在貯藏0-20d內(nèi)各處理果實(shí)的pal活性均顯著升高，之后呈現(xiàn)平穩(wěn)變化。20-40d內(nèi)o3-0d，o3-10d，o3-20d處理果實(shí)的pal活性變化幅度較小，對(duì)照組顯著升高后急劇下降，出現(xiàn)一個(gè)最高峰值。在120d處各處理果實(shí)的pal活性依次為o3-10dcko3-02do3-0d。 圖11 o3處理對(duì)采后李果實(shí)pal的影響，a-安哥諾三、結(jié)論與討論果實(shí)在采后貯藏過程中其外觀品質(zhì)、內(nèi)部品質(zhì)、營養(yǎng)品質(zhì)以及風(fēng)味品質(zhì)的特征隨著時(shí)間的推移均會(huì)下降，只是不同品質(zhì)特征下降的程度不同，不同貯藏條件品質(zhì)特征下降的速度不同。李果實(shí)在采后貯藏過程中，可滴定酸、可溶性固形物和硬度總體呈下降趨勢(shì)，可見，貯藏期間李果實(shí)的營

45、養(yǎng)成分同樣是以消耗和分解為主，這與前人的研究相一致。1、o3處理與李果實(shí)品質(zhì)的關(guān)系o3處理可有效抑制果實(shí)品質(zhì)下降，試驗(yàn)表明，o3處理延緩了安哥諾李果實(shí)可滴定酸的消耗過程，較好的保持了果實(shí)硬度，減少和防止了一些生理病害的發(fā)生，從而維持了較好的果實(shí)品質(zhì)。o3處理亦明顯降低了黑寶石李果實(shí)的腐爛，減緩果實(shí)硬度和可滴定酸含量的下降，然而o3處理對(duì)黑寶石李果實(shí)可溶性固形物和總糖含量的影響不明顯。說明不同的李品種對(duì)o3處理的反應(yīng)不同，關(guān)于適合黑寶石的o3處理時(shí)間有待進(jìn)一步優(yōu)化。不同o3處理貯藏條件下，可溶性糖含量變化趨勢(shì)基本一致，可溶性糖含量與采后相比略有升高而后又降低，可能是采收時(shí)李果實(shí)成熟度較低，由于果

46、實(shí)內(nèi)水解酶的活化，使淀粉大分子化合物降解為糖，致使可溶性糖含量上升，貯藏后期糖作為呼吸基質(zhì)被大量消耗，從而使可溶性糖含量下降。2、o3處理對(duì)不同品種李果實(shí)膜脂氧化的影響mda是膜脂過氧化的一個(gè)重要指標(biāo)。試驗(yàn)結(jié)果表明整個(gè)貯藏期內(nèi)安哥諾李果實(shí)的mda含量呈先上升后下降趨勢(shì)，其間有一個(gè)含量高峰，而對(duì)照處理的高峰出現(xiàn)得最早，比其它處理早20至60d，說明對(duì)照處理容易較早出現(xiàn)組織衰老、保護(hù)能力變?nèi)醯默F(xiàn)象。在貯藏60至80d期間，處理和對(duì)照果實(shí)的mda含量均下降，o3-0d處理果實(shí)的mda含量最高，可能是果實(shí)在長期的低溫脅迫條件下導(dǎo)致果實(shí)出現(xiàn)后熟代謝障礙而致，o3處理可減輕低溫脅迫對(duì)果實(shí)貯藏效果的影響。1

47、20d處o3-20d處理果實(shí)的mda含量較低。3、o3處理對(duì)不同品種李果實(shí)抗氧化酶活性的影響從本試驗(yàn)結(jié)果看，保護(hù)酶系統(tǒng)中的三種酶必須協(xié)調(diào)一致才能很好地起到消除自由基的作用，而保護(hù)酶活性高峰的出現(xiàn)可以作為判斷果實(shí)采后成熟或衰老的標(biāo)志。試驗(yàn)所用兩個(gè)品種的李果實(shí)采后初期的sod活性比較高，而pod活性較低，這與徐曉靜等的報(bào)道一致20。隨著果實(shí)采后的生理變化，自由基的產(chǎn)生，mda開始積累，同時(shí)也開始消耗sod，誘導(dǎo)pod產(chǎn)生，此時(shí)起清除自由基作用主要是sod，即sod在此階段是以消耗為主的，故活性下降，而pod則主要是被誘導(dǎo)產(chǎn)生，活性呈上升趨勢(shì)。o3處理對(duì)保護(hù)酶有間接和直接的影響。首先，o3處理能直接

48、降低各種酶的活性；其次，o3處理狀態(tài)下果實(shí)成熟衰老進(jìn)程放慢，產(chǎn)生的自由基少，故消耗和誘導(dǎo)的保護(hù)酶也少。從本試驗(yàn)結(jié)果看，保護(hù)酶sod活性高低可作為果實(shí)抗衰老能力的指標(biāo)。整個(gè)黑寶石李的貯藏過程中，o3-20d處理果實(shí)的sod活性顯著低于對(duì)照，o3-0d和o3-10d處理果實(shí)的sod活性則較對(duì)照高。且該酶活性在兩種李果實(shí)的貯藏后期呈下降趨勢(shì)，說明o3處理貯藏能有效抑制sod活性的下降，減緩果實(shí)衰老進(jìn)程21-23。pal活性作為李果實(shí)的抗性指標(biāo)，在適宜的o3處理貯藏下，安哥諾李的o3-10d處理果實(shí)的pal活性在貯藏60至120d內(nèi)仍能保持高于對(duì)照，而黑寶石李的o3-0d、o3-10d和o3-20d處

49、理果實(shí)的活性也能在貯藏末期維持在相對(duì)較高的水平，表現(xiàn)出較高水平的抗逆性，增長了果實(shí)的存儲(chǔ)周期。4、o3處理對(duì)不同品種李果實(shí)ppo活性的影響o3處理可以有效地抑制李果實(shí)貯藏后期ppo活性的升高，進(jìn)而達(dá)到減輕果實(shí)酶促褐變的發(fā)生，但o3處理下黑寶石李果實(shí)的褐變差異并不完全是由ppo酶促反應(yīng)造成的。試驗(yàn)結(jié)果表明，在黑寶石李貯藏0至15d內(nèi)，各處理貯藏果實(shí)ppo活性均有一定的升高?？梢?，通過o3處理可以有效地抑制貯藏后期ppo活性的升高，進(jìn)而達(dá)到減輕果實(shí)酶促褐變的發(fā)生。方差分析表明，在整個(gè)貯藏期間各o3處理與對(duì)照間沒有明顯的差異，即o3處理對(duì)黑寶石李果實(shí)ppo活性的影響不明顯24。貯藏并回溫后，o3-0

50、d、o3-10d、o3-20d處理ppo活性變化較大。而對(duì)于安哥諾李的試驗(yàn)說明，o3-10d處理在貯藏前期能夠達(dá)到抑制果實(shí)ppo活性增加的效果；在中期其抑制效果又有所減弱，但酶活性仍低于對(duì)照處理；在貯藏后期，其ppo活性高于對(duì)照組，并漸漸下降至對(duì)照處理之下。o3-20d處理在整個(gè)貯藏期間的果實(shí)ppo活性與對(duì)照組沒有差異，可見這種處理對(duì)抑制安哥諾李ppo活性的效果不明顯。o3-0d處理的ppo活性在貯藏的前中期迅速增加，并明顯高于其他處理，在后期又逐漸降低至一般水平。o3-0d處理為前期ppo活性增幅最大，又是酶活性降低最明顯的處理，其不穩(wěn)定性非試驗(yàn)所需的最佳效果。5、不同o3處理對(duì)李果實(shí)貯藏效

51、果的影響o3處理延長果實(shí)貯藏期的主要原理是：o3是一種在常溫下不穩(wěn)定的淡藍(lán)色氣體，可抑制呼吸強(qiáng)度，減少氧分消耗25；降解消除乙烯等有害氣體，形成霉菌等微生物抑制劑；抑制殺滅病菌，防止腐爛生霉。從兩種李果實(shí)的試驗(yàn)各項(xiàng)指標(biāo)可以得出，o3-10d是比較適宜的o3處理?xiàng)l件。致謝轉(zhuǎn)眼間，我的大學(xué)畢業(yè)論文寫作工作已經(jīng)接近尾聲?；叵脒@幾個(gè)月的寫作歷程，在此，我要特別感謝導(dǎo)師 對(duì)此次論文寫作的熱情關(guān)懷和悉心指導(dǎo)。無論是在論文的選題、構(gòu)思和數(shù)據(jù)的處理方面，還是在論文的研究方法以及成文定稿方面，我都得到了導(dǎo)師悉心細(xì)致的教誨和無私的幫助。尤其是她廣博的學(xué)識(shí)、開闊的視野、敏銳的思維、深厚的學(xué)術(shù)素養(yǎng)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)態(tài)度和一

52、絲不茍的工作作風(fēng)使我終生受益，在此表示真誠地感謝和深深的敬意。另外，我還要特別感謝 省農(nóng)科院農(nóng)產(chǎn)品加工所 對(duì)我實(shí)驗(yàn)以及論文寫作的指導(dǎo)，她為我完成這篇論文提供了巨大的幫助。感謝果蔬保鮮課題組的老師在我實(shí)驗(yàn)完成過程中提供的各項(xiàng)幫助。感謝大學(xué)四年中教授我寶貴專業(yè)知識(shí)的各位老師和同學(xué)，感謝我的家人對(duì)我的全力支持。感謝所有關(guān)心、支持、幫助過我的良師益友。最后，向在百忙中抽出時(shí)間對(duì)本文進(jìn)行評(píng)審并提出寶貴意見的各位專家表示衷心地感謝！ 參考文獻(xiàn)： 1 陽世斌,張百超.李果采后生理及貯藏技術(shù)j.中國果品研究,1994,3:27-28.2lidong，lurie susan，zhou hong-weieffect of l-methylcyclopropene on ripening of caninoapricots and royal zee plumsjpostharvest biology and technology，2002，24(2):135-1453張銀志，孫秀蘭，劉興華，等低溫脅迫和變溫處理對(duì)李子生理代謝的影響j食品科學(xué)，2003，24(2):134-138.4 abdi n, meglasson w b，holford p，et alrespons