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文檔簡(jiǎn)介

1、第一章第一章 血液標(biāo)本采集與處理血液標(biāo)本采集與處理 臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù) 第二十一章第二十一章 感染性疾病及其感染性疾病及其 免疫檢測(cè)免疫檢測(cè) 李 濤 目 錄 第一節(jié) 概述 第二節(jié) 細(xì)菌感染性疾病 第三節(jié) 真菌感染性疾病 第四節(jié) 病毒感染性疾病 第五節(jié) TORCH感染 第六節(jié) 寄生蟲感染 第七節(jié) 其他病原體感染 第一節(jié)第一節(jié) 概述概述 重點(diǎn)提示 感染和感染性疾病 機(jī)體對(duì)病原體入侵的呼應(yīng)方式 感染性疾病的免疫學(xué)標(biāo)志物及其運(yùn)用 先天性感染、TORCH綜合征和性傳播疾病 感染和感染性疾病 感染是病原體和人體之間相互作用、相互斗爭(zhēng),導(dǎo)致 機(jī)體發(fā)生病理改動(dòng)的過程。 感染性疾病是指病原體破壞機(jī)體正常機(jī)能后產(chǎn)

2、生的各 種感染病癥。 機(jī)體對(duì)病原體入侵的呼應(yīng)方式 分為固有免疫和順應(yīng)性免疫。根據(jù)機(jī)體的反響不同, 免疫應(yīng)對(duì)分為維護(hù)性免疫應(yīng)對(duì)和變態(tài)反響。根據(jù)參與成分 和功能不同,免疫應(yīng)對(duì)分為體液免疫和細(xì)胞免疫。 感染性疾病的免疫學(xué)標(biāo)志物及其運(yùn)用 包括特異性標(biāo)志物和非特異性標(biāo)志物。特異性標(biāo)志物 主要是抗原、抗體和特異性免疫細(xì)胞。非特異性標(biāo)志物指 感染性疾病在內(nèi)的多種疾病均可引起其升高的標(biāo)志物。 特異性抗原是直接診斷目的;IgM抗體常作為感 染早期的間接診斷目的;IgG抗體是流行病學(xué)調(diào)查的目 的,也是機(jī)體主要的維護(hù)性抗體。 先天性感染、TORCH綜合征和性傳播疾病 先天性感染:胎兒在母體內(nèi)遭到的感染,又稱宮內(nèi)感

3、染。 TORCH綜合征:TOX、CMV、RV、HSV等病原體引起宮內(nèi) 感染時(shí),可導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎、畸形、發(fā)育異常,或出現(xiàn)智 力低下、視聽妨礙等嚴(yán)重后果。 性傳播疾?。嚎梢越?jīng)過親密接觸傳播的傳染病。 第二節(jié)第二節(jié) 細(xì)菌感染性疾病細(xì)菌感染性疾病 重點(diǎn)提示 非特異性標(biāo)志物:降鈣素原、C-反響蛋白、白細(xì)胞介 素6 鏈球菌感染:ASO 沙門菌感染:肥達(dá)實(shí)驗(yàn) 結(jié)核分枝桿菌感染:抗TB抗體和結(jié)核感染T細(xì)胞 幽門螺旋桿菌感染:抗Hp抗體、Hp尿素酶 一、非特異性標(biāo)志物 降鈣素原:全身性細(xì)菌、真菌和寄生蟲感染時(shí),PCT 異常增高,且與感染的嚴(yán)重程度及預(yù)后相關(guān),常用ELISA 和CLIA檢測(cè)。 C-反響蛋白: 細(xì)菌

4、感染時(shí)CRP10mg/L。可作為細(xì)菌 感染與病毒感染的鑒別診斷目的。 白細(xì)胞介素-6:IL-6目前主要用于感染性疾病的輔助 診斷,常用ELISA和CLIA檢測(cè)細(xì)胞外IL-6,用FCM檢測(cè)細(xì)胞 內(nèi)IL-6。 鏈球菌感染 ASO增高見于A族鏈球菌感染。常用速率散射免疫比濁 、ELISA等方法檢測(cè),其中速率散射免疫比濁試劑可在全 自動(dòng)生化分析儀上運(yùn)用。 沙門菌感染 肥達(dá)實(shí)驗(yàn) 傷寒沙門菌抗O凝集效價(jià)1:80、抗H1:160、副傷 寒沙門菌抗H1:80才有診斷意義。 結(jié)核分枝桿菌感染 常用檢驗(yàn)工程有抗TB抗體和結(jié)核感染T細(xì)胞。 抗TB抗體常用ELISA和ICGT檢測(cè),結(jié)核感染T細(xì)胞 運(yùn)用T-SPOT T

5、B檢測(cè)。 抗TB抗體多呈弱陽性反響。T-SPOT TB檢測(cè)結(jié) 核激活的特異性T細(xì)胞分泌的IFN-,可防止接種 BCG的影響。二者均不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染 。 幽門螺旋桿菌感染 常用檢驗(yàn)工程有抗Hp抗體和Hp尿素酶??贵w常用 ELISA、IBT和ICGT檢測(cè)。抗原常用ELISA和ICGT檢測(cè) 。 未進(jìn)展Hp根治的人群,抗體陽性反響思索Hp感染 ;進(jìn)展過Hp根治的人群,抗體陽性反響需求鑒別既往 感染與復(fù)發(fā)感染。 Hp抗原檢測(cè)陽性反響結(jié)合臨床病癥可診斷Hp感染 。 第三節(jié)第三節(jié) 真菌感染性疾病真菌感染性疾病 重點(diǎn)提示 常用檢驗(yàn)工程有G實(shí)驗(yàn)和GM實(shí)驗(yàn),常用ELISA和CLIA檢 測(cè)。 G實(shí)驗(yàn)在念珠

6、菌、曲霉菌、肺孢子菌、鐮刀菌、地霉 菌、組織胞漿菌、毛孢子菌等感染中均可升高。透析、鏈 球菌敗血癥、輸入蛋白或運(yùn)用香菇多糖和磺胺類藥物可導(dǎo) 致假陽性反響。 GM實(shí)驗(yàn)在隱球菌屬、曲霉菌屬、青霉/擬青霉等感染 中均可升高。哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林-克拉維酸、 食物中的GM抗原、腸道中定值的曲霉釋放GM進(jìn)入血液循環(huán) 可導(dǎo)致假陽性反響。 第四節(jié)第四節(jié) 病毒感染性疾病病毒感染性疾病 重點(diǎn)提示 病毒和病毒感染 肝炎病毒感染 呼吸道病毒感染 輪狀病毒感染 EB病毒感染 人類免疫缺陷病毒感染 病毒和病毒感染 病毒侵入機(jī)體后可引起病毒去除或病毒感染,取決于 侵入病毒的毒力和數(shù)量以及機(jī)體的易感性和免疫外形。病

7、 毒侵入機(jī)體并在體細(xì)胞內(nèi)增殖的過程稱為病毒感染。 肝炎病毒感染-分型與傳播途徑 典型的肝炎病毒有五種亞型,分別是HAV、HBV、HCV、HDV 和HEV。 傳播途徑分別是:HAV和HEV經(jīng)過污染的食物和水,HBV和 HCV經(jīng)過血液、性途徑和母嬰途徑等,HDV在HBV感染人群中傳 播。 肝炎病毒感染-HAV感染 常用檢驗(yàn)工程是抗-HAV IgM??笻AV IgM是近期感染 的標(biāo)志。抗HAV IgG具有維護(hù)性,是流行病學(xué)調(diào)查的目的 。 肝炎病毒感染-HBV感染1 HBV的抗原抗體系統(tǒng)包括HBsAg與抗-HBs、HBeAg與抗- HBe、HBcAg與抗-HBc、PreS1Ag與抗-PreS1、Pre

8、S2Ag與抗 -PreS2。 肝炎病毒感染-HBV感染2 HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc五項(xiàng)俗稱乙 肝五項(xiàng)或乙肝兩對(duì)半。HBsAg、抗-HBs和HBeAg常用雙抗夾 心法檢測(cè),抗-HBe和抗-HBc常用競(jìng)爭(zhēng)抑制法檢測(cè),抗-HBc IgM常用捕獲法檢測(cè)。 肝炎病毒感染-HBV感染3 臨床意義HBsAg HBV感染后首先出現(xiàn)HBsAg,是早期診斷的目的。 窗口期或S基因突變可出現(xiàn)HBsAg陰性反響。 定量分析HBsAg用于動(dòng)態(tài)評(píng)價(jià)患者病情和抗病毒治療 效果有非常重要的價(jià)值。 HBsAg轉(zhuǎn)陰并出現(xiàn)抗-HBs是HBV感染治療的最終目的。 肝炎病毒感染-HBV感染4 臨床意義

9、抗-HBs 抗-HBs是HBV維護(hù)性抗體的一種,血清濃度大于 10mIU/ml才有維護(hù)作用。 陽性反響見于HBV感染恢復(fù)期、既往感染或乙肝疫苗 接種后。 肝炎病毒感染-HBV感染5 臨床意義HBeAg HBeAg普通僅見于HBsAg陽性者,陽性反響表示HBV傳 染性較強(qiáng),患者處于高感染低應(yīng)對(duì)期。 肝炎病毒感染-HBV感染6 臨床意義抗-HBe 抗-HBe可長(zhǎng)期存在,無維護(hù)作用。HBeAg消逝伴抗- HBe出現(xiàn)稱為HBeAg的血清轉(zhuǎn)換。 肝炎病毒感染-HBV感染7 臨床意義抗-HBc 抗-HBc IgM是HBV急性感染的早期目的和病毒復(fù)制標(biāo) 志。 抗-HBc IgG是既往感染的標(biāo)志,現(xiàn)癥感染也可

10、出現(xiàn)。 肝炎病毒感染-HCV感染 常用檢驗(yàn)工程有抗-HCV和HCV中心抗原,常用 ELISA和CLIA檢測(cè)。 臨床意義:抗-HCV不是維護(hù)性抗體,僅作為HCV 感染的標(biāo)志物之一,不能區(qū)分現(xiàn)癥感染與既往感染。 HCV中心抗原檢測(cè)是HCV感染的直接證據(jù),實(shí)踐上可以 用于HCV現(xiàn)癥感染的判別。 肝炎病毒感染-HEV感染 HEV均為急性感染。常用檢驗(yàn)工程有抗HEV IgG和 抗HEV IgM,檢測(cè)方法主要是ELISA。普通以為抗HEV IgM是早期感染的目的。 呼吸道病毒感染1 常見病毒:流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞 病毒和冠狀病毒。 高危病毒:高致病性禽流感病毒H5N1、SARS 冠狀病毒。 呼

11、吸道病毒感染2 人流感病毒:特異性抗原在感染早期即可呈陽性 反響,具有診斷價(jià)值。 禽流感病毒:H5N1被稱為高致病性禽流感,IgM 抗體檢測(cè)用于近期感染的輔助診斷。 呼吸道病毒感染3 副流感病毒感染:IgG抗體無維護(hù)作用??乖?于早期診斷,IgM抗體用于近期感染的輔助診斷。 呼吸道合胞病毒感染:RSV抗原用于早期診斷, IgM抗體用于近期感染的輔助診斷。 呼吸道病毒感染4 SARS冠狀病毒引起SARS,急性期傳染性強(qiáng),埋伏 期傳染性低,康復(fù)后無傳染性。急性期到恢復(fù)期出現(xiàn) IgM抗體或者IgG抗體效價(jià)增長(zhǎng)4倍以上,提示有近期 感染。 輪狀病毒感染 經(jīng)糞-口途徑傳播,引起嬰幼兒和成人急性胃腸 炎

12、和腹瀉??乖瓩z測(cè)用于早期診斷和疫情監(jiān)測(cè)。IgM 抗體用于早期輔助診斷。 EB病毒感染 EBV抗原有EA、VCA、MA、NA和LMP。初次感染后,體 內(nèi)首先出現(xiàn)抗VCA抗體和抗MA抗體,其后出現(xiàn)抗EA抗體, 恢復(fù)期出現(xiàn)抗NA抗體。 IgA抗體與鼻咽癌關(guān)系親密,IgM抗體、短期存在的 IgG抗體和異嗜性抗體用于感染傳染性單核細(xì)胞增多癥的 輔助診斷。 人類免疫缺陷病毒感染1 HIV主要經(jīng)性接觸、血液和母嬰傳播,分為HIV-1和 HIV-2兩個(gè)型,臨床以HIV-1型最常見。 抗體檢測(cè)是HIV感染診斷的金規(guī)范,RNA和抗原檢測(cè)可 以發(fā)現(xiàn)窗口期感染者,CD4+和CD8+ T淋巴細(xì)胞檢測(cè)可用于 感染者免疫情

13、況評(píng)價(jià)。 人類免疫缺陷病毒感染2 常用檢驗(yàn)工程有抗-HIV、抗-HIV抗體確認(rèn)實(shí)驗(yàn)、HIV 抗原抗體結(jié)合檢測(cè)和HIV p24抗原??贵w初篩常用ELISA和 CLIA,抗體確認(rèn)常用IBT。 人類免疫缺陷病毒感染3 初篩實(shí)驗(yàn) 初篩實(shí)驗(yàn)陽性反響,用原有試劑和另外一種不 同原理或廠家的試劑,或另外兩種不同原理或 不同廠家的試劑進(jìn)展復(fù)檢實(shí)驗(yàn)。兩種試劑均呈陰性 反響,那么報(bào)告抗-HIV陰性;如均呈陽性反 響,或一陰一陽,需送艾滋病確證明驗(yàn)室進(jìn)展確證 明驗(yàn)。 人類免疫缺陷病毒感染4 確認(rèn)實(shí)驗(yàn) 確認(rèn)實(shí)驗(yàn)運(yùn)用HIV-1/2混合型試劑進(jìn)展檢測(cè), 陰性反響,報(bào)告抗-HIV陰性。陽性反 響,報(bào)告抗-HIV陽性;不是陰

14、性反響, 又不滿足陽性判別規(guī)范,報(bào)告抗-HIV不確定 ,建議4周后隨訪檢測(cè),依然不能確定者,繼續(xù) 隨訪到8周。 第五節(jié)第五節(jié) TORCH TORCH感染感染 重點(diǎn)提示 弓形蟲感染 風(fēng)疹病毒感染 巨細(xì)胞病毒感染 單純皰疹病毒感染 弓形蟲和風(fēng)疹病毒感染 TOX感染:可引起先天性TOX病。新生兒IgM陽性反響 提示宮內(nèi)感染。雙份血清IgG效價(jià)增高4倍以上或IgG低親 和力,提示近期感染。 RV感染:可導(dǎo)致先天性RV綜合征。孕齡期母親篩查從 未感染過RV的個(gè)體,注射疫苗,使其獲得免疫力,建議在 懷孕前檢測(cè)??筊V IgM作為近期感染的目的,新生兒IgM 陽性反響提示宮內(nèi)RV感染。抗RV IgG單獨(dú)陽性

15、反響提示既 往感染,與抗RV IgM同時(shí)陽性反響,提示有近期感染。 巨細(xì)胞病毒和單純皰疹病毒感染 CMV感染:假設(shè)妊娠3個(gè)月內(nèi)發(fā)生宮內(nèi)感染,可引起流 產(chǎn)、死胎、早產(chǎn)、小頭、智力低下等。新生兒IgM陽性反 響提示宮內(nèi)CMV感染。雙份血清IgG效價(jià)增高4倍以上或IgG 低親和力,可輔助診斷近期活動(dòng)性感染。 HSV感染:有HSV-1和HSV-2兩個(gè)亞型,宮內(nèi)感染可引 起流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎或畸形。新生兒IgM陽性反響提示宮 內(nèi)HSV感染。急性期和恢復(fù)期雙份血清IgG效價(jià)增高4倍以 上,提示有HSV近期感染。 第六節(jié)第六節(jié) 寄生蟲感染寄生蟲感染 重點(diǎn)提示 瘧原蟲感染:外周血中瘧原蟲抗原和特異性抗體檢測(cè) 可

16、輔助診斷瘧原蟲感染,常用ELISA檢測(cè)。 血吸蟲感染:外周血抗原和抗體檢測(cè)可輔助診斷血吸 蟲感染,常用ELISA和COPT檢測(cè)。 絲蟲感染:抗原和抗體檢測(cè)用于輔助診斷。 豬囊尾蚴感染:免疫學(xué)檢測(cè)對(duì)病原學(xué)和影像學(xué)不能確 診的可疑患者有重要意義。 第七節(jié)第七節(jié) 其他病原體感染其他病原體感染 重點(diǎn)提示 梅毒螺旋體感染 支原體感染 衣原體感染 立克次體感染 梅毒螺旋體感染1 TP感染后機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體和非特異性抗體兩類。 前者檢測(cè)抗TP抗體,常用ELISA、CLIA和PA檢測(cè)。后者檢 測(cè)反響素,常用RPR和TRUST檢測(cè)。 梅毒螺旋體感染2 臨床意義 支原體、衣原體和立克次體感染 支原體感染:檢測(cè)抗原可用于早期診斷。急性期和恢 復(fù)期雙份血清抗體效價(jià)增高4倍以上,提示有支原體近期 感染。 衣原體感染:直接抗原可用于早期診斷。急性期和恢 復(fù)期雙份血清抗體效價(jià)增高4倍以

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