維生素類藥物含量測定

1、藥品檢驗技術課程單元教學設計情境：維生素類藥物的分析（09） 任務：維生素類藥物含量測定(04) 教學目標設計序號5上課地點理實一體化教室授課形式講授、學生操作練習教 學 目 標技能目標知識目標能夠依據(jù)藥典，對維生素B1進行檢驗、對維生素C進行檢驗、對維生素E進行檢驗。維生素類藥物含量測定及方法教 學 重 點維生素B1的含量測定、維生素C的含量測定、維生素E的含量測定教 學 難 點同學們能過根據(jù)藥典對維生素類藥物含量進行測定能力訓練任務及案例同學們根據(jù)藥典對維生素類藥物進行檢驗，通過實驗研究同學們更好的掌握了維生素類藥物測定原理和操作技能教學進程設計（下面各格均可合并）步驟教學內(nèi)容教學方法教學

2、手段學生活動時間分配基礎知識講解維生素類藥物的檢查方法及原理教師舉例、點評、歸納概括引出知識點。任務引導同學們做好課堂筆記，掌握課堂重點20分鐘案例分析維生素E的含量測定同學們分組實驗研究25分鐘維生素B1含量測定中國藥典中，用非水滴定法測定原料藥，用紫外分光光度法測定片劑及注射液。1非水滴定法（1）原理 維生素B1分子中含有兩個堿性的已成鹽的伯胺和季銨基團，在非水溶液中（在醋酸汞存在下），均可與高氯酸作用。根據(jù)滴定過程中所消耗高氯酸的量即可計算維生素B1的含量。（2）方法 取本品約0.12g，精密稱定，加冰醋酸20mL微熱使溶解，放冷至室溫，加醋酐30mL，照電位滴定法（附錄 A），用高氯酸

3、滴定液（0.1mol/L）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當于16.86mg的 C12H17ClN4OSHCl。（3）計算含量（%）= （10-1）式中，V樣品測定所消耗滴定液的體積，mL；V0空白試驗所消耗滴定液的體積，mL；T滴定度，其值為16.86mg/mL；F濃度換算因數(shù)；W取樣量，g。2紫外分光光度法（1）原理 維生素B1結(jié)構中含有共軛體系，具有紫外吸收，其鹽酸溶液的最大吸收波長為246nm，可用于含量測定。中國藥典中收載的維生素B1片劑及注射液，均采用本法測定含量。（2）維生素B1片的測定方法。取本品20片，精密稱定，研細，精密稱取適量

4、（約相當于維生素B125mg），置100mL量瓶中，加鹽酸溶液（91000）約7mL，振搖15分鐘使維生素B1溶解，加鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度，搖勻，用干燥濾紙濾過，精密量取續(xù)濾液5mL，置另一100mL量瓶中，再加鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見分光光度法（附錄 A），在 246nm的波長處測定吸光度，按C12H17ClN4OSHCl的吸收系數(shù)（）為421計算，即得。計算。含量占標示量百分率(%)= （10-2）式中，A供試品溶液的吸光度；吸收系數(shù)；W稱取樣品量，g；平均片重，g；式中，標示量的單位為mg/片。（3）維生素B1注射液的測定方法。精密量取本品適量（約

5、相當于維生素B150mg），置200mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，精密量取5mL，置100mL量瓶中，加鹽酸溶液（91000）稀釋至刻度。照紫外-可見分光光度法（附錄 A），在246nm的波長處測定吸光度，按C12H17ClN4OSHCl的吸收系數(shù)（）為421計算，即得。計算。含量占標示量百分率(%)= （10-3）式中，A供試品溶液的吸光度；吸收系數(shù)；V取樣量，mL； 式中，標示量的單位為mg/mL。維生素C含量測定維生素C的含量測定大多是基于其具有較強的還原性，可被不同氧化劑定量氧化。因容量分析法（滴定分析法）簡便、快速，結(jié)果準確，被各國藥典所采用，如碘量法、2,6-二氯靛酚法等。此外

6、，維生素C的含量測定方法還包括熒光分析法、分光光度法、電位滴定法、高效液相色譜法等。1碘量法（1）原理 維生素C在醋酸酸性條件下，可被碘定量氧化。反應式如下： 當用碘滴定液滴定維生素C時，所滴定的碘被維生素C還原為碘離子，隨著滴定過程中維生素C被完全氧化，過量的碘可使含指示劑（淀粉）的溶液產(chǎn)生藍色，即為滴定終點。根據(jù)所消耗碘滴定液的體積，即可計算維生素C的含量。（2）方法 取本品約0.2g，精密稱定，加新沸過的冷水100mL與稀醋酸10mL使溶解，加淀粉指示液1mL，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液顯藍色并在30秒鐘內(nèi)不褪。每1mL碘滴定液（0.05mol/L）相當于8.806

7、mg的C6H8O6。（3）注意事項滴定須在醋酸酸性溶液中進行。因在酸性溶液中，可延緩空氣中的氧氣氧化維生素C的速度。但樣品溶于稀酸后仍需立即進行滴定。加新沸過的冷水目的是減少水中溶解的氧氣對測定的影響。中國藥典中，維生素C原料藥、片劑、顆粒劑、沸騰片及注射液的含量測定，均采用本法。為消除制劑中輔料對測定的干擾，滴定前須進行必要的處理。如，片劑溶解后應濾過，取續(xù)濾液進行測定；注射液測定時，需加入2mL丙酮，以消除抗氧劑NaHSO3的干擾。22,6-二氯靛酚法（1）原理 維生素C可在酸性溶液中，用2,6-二氯靛酚標準液滴定，至溶液顯玫瑰紅色時即為終點。根據(jù)所消耗2,6-二氯靛酚標準液的體積，即可計

8、算維生素C的含量。（2）方法（以維生素C注射液為例） 精密量取本品適量（約相當于維生素C 50mg），置100mL量瓶中，加偏磷酸-醋酸試液20mL，用水稀釋至刻度，搖勻；精密量取稀釋液適量（約相當于維生素C 2mg）置50mL錐形瓶中，加偏磷酸-醋酸試液5mL，用2,6-二氯靛酚滴定液滴定至溶液顯玫瑰紅色，并持續(xù)5s不褪色；另取偏磷酸-醋酸試液5.5mL，加水15mL，用2,6-二氯靛酚滴定液滴定，作空白試驗校正。以2,6-二氯靛酚滴定液對維生素C滴定度計算，即可。（3）注意事項 快速滴定可減少干擾組分的影響。該方法非維生素C的專屬反應，其它還原性物質(zhì)的存在對測定有干擾。但相比較而言，維生素

9、C的氧化速度要快于其它組分，故宜快速滴定。2,6-二氯靛酚滴定液不宜長時間保存。由于2,6-二氯靛酚滴定液不夠穩(wěn)定，貯存時易緩慢分解，故2,6-二氯靛酚滴定液不宜長時間保存，其濃度最好在用前標定。本法的專屬性優(yōu)于碘量法，常用于含維生素C的制劑及食品的分析。維生素E含量測定氣相色譜法維生素E的含量測定方法很多，包括氣相色譜法、高效液相色譜法、熒光分光光度法、鈰量法、比色法等。中國藥典采用氣相色譜法測定維生素E的含量，該法簡便、快速、專屬性強，特別適合于維生素E制劑的分析。維生素E的沸點為350，雖然很高，但仍可不經(jīng)衍生化直接用氣相色譜法測定其含量。該法具有高選擇性，可分離維生素E及其異構體，故可選擇性測定維生素E的含量。測定時采用內(nèi)標法，使測定更簡便，定量結(jié)果與進樣量無關，操作條件變化時對測定結(jié)果影響很小。1色譜條件載氣為氮氣；以硅酮（OV-17）為固定相，涂布于經(jīng)酸洗并硅烷化處理的硅藻土或高分子多孔微球（80100目）上，涂布密度為2%，或以HP-1毛細管柱（100二甲基聚硅氧烷）為分析柱；柱溫為265；進樣口溫度應高于柱溫3050；檢測器采用氫火焰離子化檢測器。2系統(tǒng)適用性試驗理論塔板數(shù)（n）按維生素E峰計算應不低于500（填充柱）或5000（毛細管柱）；維生素E峰與內(nèi)標物質(zhì)峰的分離度應符合要求。3校正因子的測定取正三十二烷適量，加正己烷溶解并稀釋成每1mL中含1.