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1、會(huì)計(jì)學(xué)1張玉梅醫(yī)學(xué)微生物學(xué)革蘭染色實(shí)驗(yàn)張玉梅醫(yī)學(xué)微生物學(xué)革蘭染色實(shí)驗(yàn)一、原理一、原理1 1、原理、原理鑒別染色法,于1884年由丹麥醫(yī)師Gram創(chuàng)立 G:肽聚糖層較薄,交聯(lián)度低,含較多肽聚糖層較薄,交聯(lián)度低,含較多脂質(zhì),用乙醇等有機(jī)溶劑脫色時(shí)類脂質(zhì)脂質(zhì),用乙醇等有機(jī)溶劑脫色時(shí)類脂質(zhì)融解,增加了細(xì)胞的通透性,薄而松散融解,增加了細(xì)胞的通透性,薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫和碘復(fù)合物的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫和碘復(fù)合物溶出,呈復(fù)染后的紅色。溶出,呈復(fù)染后的紅色。G:細(xì)胞壁厚且結(jié)構(gòu)交聯(lián)致密,用脫色細(xì)胞壁厚且結(jié)構(gòu)交聯(lián)致密,用脫色劑處理時(shí),肽聚糖層孔徑縮小,且不含劑處理時(shí),肽聚糖層孔徑縮小,且不含類脂,
2、通透性降低,結(jié)晶紫和碘復(fù)合物類脂,通透性降低,結(jié)晶紫和碘復(fù)合物牢固結(jié)合在細(xì)胞壁上,呈初染時(shí)的紫色。牢固結(jié)合在細(xì)胞壁上,呈初染時(shí)的紫色。初染初染-媒染媒染-脫色脫色-復(fù)染復(fù)染 G- G+第1頁(yè)/共6頁(yè)3初染:初染:結(jié)晶紫結(jié)晶紫1 1分鐘,水沖甩干;分鐘,水沖甩干;媒染:媒染:盧戈氏碘液盧戈氏碘液1 1分鐘,水沖甩干;分鐘,水沖甩干;脫色脫色:95%酒精酒精30秒鐘,水沖甩干;秒鐘,水沖甩干;復(fù)染復(fù)染:稀釋復(fù)紅稀釋復(fù)紅1 1分鐘,水沖甩干;分鐘,水沖甩干;涂片涂片干燥干燥固定固定染色染色鏡檢鏡檢 取菌取菌NS 二、步驟二、步驟第2頁(yè)/共6頁(yè)4檸檬色葡萄球菌:藍(lán)紫色檸檬色葡萄球菌:藍(lán)紫色G+ 變變 形形 桿桿 菌:菌: 紅色紅色G 檸檬色葡萄球菌檸檬色葡萄球菌 變形桿菌變形桿菌革蘭染色 X1000革蘭染色革蘭染色 X1000X1000三、結(jié)果三、結(jié)果第3頁(yè)/共6頁(yè)u鑒別細(xì)菌u指導(dǎo)臨床用藥指導(dǎo)臨床用藥u研究細(xì)菌的致病性研究細(xì)菌的致病性G+:青霉素、頭孢類等G G- -: :鏈霉素、卡那霉素等鏈霉素、卡那霉素等G G+ +:外毒素外毒素G G- -:內(nèi)毒素內(nèi)毒素四、意義四、意義第4頁(yè)/共6頁(yè)6注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)革蘭氏染色成敗與否與許多因素有關(guān)革蘭氏染色成敗與否與許多因素有關(guān)1 1、菌齡、菌齡2
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