稻谷玉米脂肪酸值測(cè)定操作練習(xí)-實(shí)操

1、.稻谷、玉米脂肪酸值測(cè)定操作練習(xí)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目稻谷、玉米脂肪酸值測(cè)定時(shí) 長: 4h目的要求1. 熟悉和掌握脂肪酸值檢驗(yàn)流程；2. 掌握微量滴定管的使用和滴定終點(diǎn)的判斷。練習(xí)重點(diǎn)1. 調(diào)節(jié)配制0.01mol/L氫氧化鉀-乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液所需95%乙醇至中性；2. 0.01mol/L氫氧化鉀-乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的配制；3. 樣品制備：去雜、粉碎、稱量、提取、過濾；4. 脂肪酸值滴定速度控制；5. 滴定終點(diǎn)的判斷；6. 脂肪酸值檢測(cè)結(jié)果的的報(bào)出。練習(xí)難點(diǎn)1. 滴定速度控制； 2. 滴定終點(diǎn)的判斷。 預(yù)習(xí)要點(diǎn)1. 脂肪酸值測(cè)定原理。2. 脂肪酸值測(cè)定方法中對(duì)錘式旋風(fēng)磨的要求有哪些？3. 脂肪酸值測(cè)定用樣品粉碎

2、粒度要求？4. 如何配制脂肪酸值測(cè)定所用0.01mol/L氫氧化鉀-乙醇溶液？5. 如何將稀釋氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液用的95%乙醇溶液調(diào)節(jié)至中性？6. 影響脂肪酸值測(cè)定因素有哪些？7. 脂肪酸值滴定應(yīng)在什么條件下進(jìn)行？8. 脂肪酸值滴定速度應(yīng)如何控制？9. 如何判斷脂肪酸值滴定終點(diǎn)？10. 應(yīng)怎樣報(bào)出脂肪酸值檢測(cè)結(jié)果？實(shí)驗(yàn)原理在一定溫度（1525）條件下，以無水乙醇提取谷物及制品中的游離脂肪酸，用氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，游離脂肪酸與氫氧化鉀發(fā)生中和反應(yīng)，以中和100 g試樣中游離脂肪酸所需氫氧化鉀的毫克數(shù)表示。谷物脂肪酸值測(cè)定的實(shí)質(zhì)是酸堿滴定。但由于谷物成分比較復(fù)雜，溶于乙醇的組分比較多，用乙醇提取游

3、離脂肪酸的同時(shí)，還有其他醇溶性物質(zhì)，如：醇溶蛋白、色素、植酸等也被提取出來，而且提取的游離脂肪酸不是單一的脂肪酸，因此，提取液組分非常復(fù)雜，酸堿滴定也就與通常的強(qiáng)堿滴定單一的弱酸有所不同，是強(qiáng)堿滴定混合弱酸。試 劑與儀器無水乙醇：A.R；1%酚酞-乙醇溶液：1.0g酚酞溶于100 mL 95（V/V）乙醇；不含二氧化碳的蒸餾水：將蒸餾水煮沸10min，加蓋冷卻；0.5mol/L氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液；0.01mol/L氫氧化鉀-乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液。 錘式旋風(fēng)磨：具有風(fēng)門可調(diào)和自清理功能，不易發(fā)熱，粉碎后的樣品一次通過CQ16（40目）篩的達(dá)95%以上；往返式振蕩器，振蕩頻率為100次/min ；微量

4、滴定管：5mL，最小刻度為0.02mL；10mL，最小刻度為0.02mL；移液管：50mL，25mL；天平：感量為0.01g； 具塞錐形瓶：250mL；錐形瓶：150mL。實(shí)驗(yàn)步驟10.01mol/L KOH-乙醇標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的配制準(zhǔn)確移取20mL已經(jīng)標(biāo)定好的0.5mol/L氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用事先調(diào)節(jié)至中性的95（V/V）乙醇稀釋定容至1000mL，盛放于聚乙烯塑料瓶中。臨用前稀釋。（V濃=c稀V稀/c濃）注：需要組織單位提供事先配制并已經(jīng)標(biāo)定的0.5mol/L氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。2試樣制備稻谷試樣的制備：從混合均勻的平均樣品中分取100 g左右，去除雜質(zhì)（保留谷外糙米），得到凈稻谷樣品。

5、用錘式旋風(fēng)磨粉碎，粉碎后的樣品一次通過CQ16（相當(dāng)于40目）篩的應(yīng)達(dá)到95%以上。粉碎樣品（篩上、篩下的全部篩分范圍樣品）經(jīng)充分混合后裝入磨口瓶中備用。 玉米試樣的制備：從混合均勻的平均樣品中分取100 g左右，去除雜質(zhì)，得到凈玉米樣品。用錘式旋風(fēng)磨粉碎，粉碎后的樣品一次通過CQ16（相當(dāng)于40目）篩的應(yīng)達(dá)到95%以上。收集篩上、篩下的全部篩分范圍的粉碎樣品樣品，經(jīng)充分混合后裝入磨口瓶中備用。3. 試樣處理稱取制備好的試樣約10 g，精確到0.01 g，于250 mL具塞磨口錐形瓶中，并用大肚移液管（或同等精度加液器）加入50.0 mL無水乙醇，置于往返式振蕩器上振蕩提取30 min，（振蕩

6、頻率為100次/min）。靜置1 min 2 min，在玻璃漏斗中放入折疊濾紙過濾。棄去最初幾滴濾液，收集濾液25 mL以上。 注：樣品粉碎后應(yīng)在2h內(nèi)進(jìn)行提取。4. 測(cè)定用大肚移液管移取25.0 mL濾液于150 mL錐形瓶中，加50 mL不含二氧化碳的蒸餾水，滴加34滴酚酞指示劑后，用氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至呈微紅色，30 s不消褪為止。記下耗用的氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶的體積（V1）。注1：滴定速度宜先快后慢，不能太慢或太快，一般控制在（68）mL/min，即每秒（23） 滴，滴定液成串不成線。臨近滴定終點(diǎn)時(shí)，要適當(dāng)放慢滴定速度，注意觀察樣液的顏色變化。注2：有的樣品由于受提取液本身顏色的影

7、響，到達(dá)滴定終點(diǎn)時(shí)樣液不可見微紅色，當(dāng)樣液顏色與參照樣液有明顯色差時(shí)，即為滴定終點(diǎn)。5. 空白試驗(yàn)用移液管移取25.0 mL無水乙醇于150 mL錐形瓶中，加50 mL不含二氧化碳的蒸餾水，滴加35滴酚酞指示劑，用氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至呈微紅色，30 s不消褪為止。記下耗用的氫氧化鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液體積（V0）。6. 結(jié)果計(jì)算按公式 計(jì)算結(jié)果。7. 報(bào)出結(jié)果每份試樣取兩個(gè)平行樣進(jìn)行測(cè)定，兩個(gè)測(cè)定結(jié)果之差的絕對(duì)值符合重復(fù)性要求時(shí)，以其平均值為測(cè)定結(jié)果；不符合重復(fù)性要求時(shí)，應(yīng)再取兩個(gè)平行樣進(jìn)行測(cè)定。若4個(gè)結(jié)果的極差不大于n=4的重復(fù)性臨界極差CrR95(4)，則取4個(gè)結(jié)果的平均值作為最終測(cè)試結(jié)果；

8、若4個(gè)結(jié)果的極差大于n=4的重復(fù)性臨界極差CrR95(4)，則取4個(gè)結(jié)果的中位數(shù)作為最終測(cè)試結(jié)果，結(jié)果保留三位有效數(shù)字。實(shí)驗(yàn)記錄1（稻谷）稻谷脂肪酸值測(cè)定記錄樣品名稱編號(hào)試樣質(zhì)量(g)試樣耗標(biāo)液體積（mL）空白耗標(biāo)液體積（mL）制備樣水分（%）脂肪酸值（mg/100g）雙試驗(yàn)差值（mg/100g）四平行極差（mg/100g）脂肪酸值報(bào)出結(jié)果（mg/100g） 注:制備樣水分按13.0%計(jì)。實(shí)驗(yàn)記錄2（玉米）玉米脂肪酸值測(cè)定記錄樣品名稱編號(hào)試樣質(zhì)量(g)試樣耗標(biāo)液體積（mL）空白耗標(biāo)液體積（mL）制備樣水分（%）脂肪酸值（mg/100g）雙試驗(yàn)差值（mg/100g）四平行極差（mg/100g）脂

9、肪酸值報(bào)出結(jié)果（mg/100g） 注:制備樣水分按14.0%計(jì)。思考題1. 脂肪酸值測(cè)定方法中對(duì)錘式旋風(fēng)磨的要求有哪些？答：要求具有風(fēng)門可調(diào)和自清理功能，不易發(fā)熱，粉碎后的樣品一次通過CQ16（40目）篩的達(dá)95%以上。2. 測(cè)定脂肪酸值所用的粉碎樣品是通過CQ16（相當(dāng)于40目）篩的樣品嗎？答：測(cè)定脂肪酸值所用的粉碎樣品不僅僅是通過CQ16（相當(dāng)于40目）篩的篩下物，而是篩上、篩下的全部篩分范圍樣品，也即除了篩下物而外，還應(yīng)該包括殘留在篩上的樣品。3. 脂肪酸值測(cè)定為什么要做空白試驗(yàn)？答：為了消除試劑的影響，減少系統(tǒng)誤差。4. 脂肪酸值滴定應(yīng)在什么條件下進(jìn)行？答：滴定應(yīng)在散射日光或日光型日光

10、燈下對(duì)著光源方向進(jìn)行，光線不能太強(qiáng)或太暗，陽光不能直射；環(huán)境溫度應(yīng)控制在1525之間。5. 脂肪酸值滴定速度應(yīng)如何控制？答：滴定速度宜先快后慢，不能太慢或太快，一般控制在（68）mL/min，即每秒（23） 滴，滴定液成串不成線。臨近滴定終點(diǎn)時(shí)，要適當(dāng)放慢滴定速度，注意觀察樣液的顏色變化。滴定手法應(yīng)盡量一致，振搖速度一致，滴定操作要熟練，整個(gè)滴定過程一氣呵成。6. 如何判斷脂肪酸值滴定終點(diǎn)？答：對(duì)提取液顏色很淺的樣品，可將滴定至微紅色出現(xiàn)視為到達(dá)滴定終點(diǎn)；但有些樣品由于受提取液本身顏色的影響，到達(dá)滴定終點(diǎn)時(shí)樣液不可見微紅色，終點(diǎn)難以判定，可用一個(gè)已加入提取液和去二氧化碳蒸餾水尚未滴定的錐形瓶作參照，當(dāng)被滴定樣液顏色與參照樣液有明顯色差時(shí)，即可視為已到滴定終點(diǎn)。7. 影響脂肪酸值測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確性的因素有哪些？答：脂肪酸值測(cè)定是較低濃度的強(qiáng)堿滴定多種混合弱酸的體系，加之提取液中除了酸性物質(zhì)以外，還有一些其他的醇溶性物質(zhì)如色素等也被提取出來，使提取液本身有一定顏色，而顏色及顏色的深淺因糧食種類和品種的不同而有所不同，從而增加了準(zhǔn)確測(cè)定脂肪酸值的難度。因此，影響脂肪酸值測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確性的因素很多，如：粉碎磨