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文檔簡介

1、苯酚法測定可溶性糖核心提示：【原理】植物體內的可溶性糖主要指能溶于水及乙醇的單糖和寡聚糖。苯酚法測定可溶性糖的原理是：糖在濃硫酸作用下，脫水生成的糠【原理】植物體內的可溶性糖主要指能溶于水及乙醇的單糖和寡聚糖。苯酚法測定可溶性糖的原理是：糖在濃硫酸作用下，脫水生成的糠醛或羥甲基糠醛能與苯酚縮合成一種橙紅色化合物，在10100g范圍內其顏色深淺與糖的含量成正比，且在485nm波長下有最大吸收峰，故可用比色法在此波長下測定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的測定，方法簡單，靈敏度高，基本不受蛋白質存在的影響，并且產生的顏色穩(wěn)定160min以上?！緝x器與用具】分光光度計；電爐；鋁鍋；20ml刻度

2、試管；刻度吸管5ml1支，1ml2支；記號筆；吸水紙適量。【試劑】190%苯酚溶液稱取90g苯酚（AR），加蒸餾水10ml溶解，在室溫下可保存數月；29%苯酚溶液取3ml90%苯酚溶液，加蒸餾水至30ml，現配現用；3濃硫酸（比重1.84）；41%蔗糖標準液將分析純蔗糖在80下烘至恒重，精確稱取1.000g。加少量水溶解，移入100ml容量瓶中，加入0.5ml濃硫酸，用蒸餾水定容至刻度；5100g/ml蔗糖標準液精確吸取1%蔗糖標準液1ml加入100ml容量瓶中，加水定容?！痉椒ā?標準曲線的制作取20ml刻度試管11支，從010分別編號，按表24-1加入溶液和水。表24-1各試管加溶液和水的

3、量管號012345678910100g/ml蔗糖液(ml)00.20.40.60.81.0水(ml)2.01.81.61.41.21.0蔗糖量(g)020406080100然后按順序向試管內加入1ml9%苯酚溶液，搖勻，再從管液正面快速加入5ml濃硫酸，搖勻。比色液總體積為8ml，在恒溫下放置30min，顯色。然后以空白為參比，在485nm波長下比色測定，以糖含量為橫坐標，光密為縱坐標，繪制標準曲線，求出標準直線方程。2可溶性糖的提取取新鮮植物葉片，擦凈表面污物，剪碎混勻，稱取0.100.30g，共3份，或干材料。分別放入3支刻度試管中，加入510ml蒸餾水，塑料薄膜封口，于沸水中提取30min（提取2次），提取液過濾入25ml容量瓶中，反復沖洗試管及殘渣，定容至刻度。3測定吸取0.5ml樣品液于試管中（重復2次），加蒸餾水1.5ml，同制作標準曲線的步驟，按順序分別加入苯酚，濃硫酸溶液，顯色并測定光密度。由標準線性方程求出糖的量，按下式計算測試樣品中糖含量。可溶性糖含量(mg/g)=C(V/a)n/(W10

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