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1、結(jié)核分枝桿菌生物安全危害評估報告一 .危害程度分類(一) 分類等級在衛(wèi)生部公布的 人間傳染的病原微生物名錄 中將其列為第二類病原微生物(危害程度為級) ,屬高致病性病原微生物。(二)不同實驗操作生物安全實驗室級別要求根據(jù)名錄的規(guī)定,在實驗操作涉及結(jié)核桿菌的大量培養(yǎng)、結(jié)核桿菌離心和凍干等易產(chǎn)生氣溶膠的實驗操作以及以結(jié)核桿菌活菌感染的動物實驗,應(yīng)在 BSL-3 或 ABSL-3實驗室進行。臨床樣本的結(jié)核桿菌分離培養(yǎng)、藥物敏感性實驗、生化鑒定、免疫學實驗、 PCR核酸提取、涂片、顯微觀察等初步檢測活動可在BSL-2實驗室進行。對經(jīng)有效方法滅活后不含結(jié)核桿菌活菌材料的分子生物學、 免疫學等實驗可在 B
2、SL-1 實驗室進行。二.背景資料(一)一般生物學特性1. 形態(tài)染色 結(jié)核桿菌細長略彎曲, 端極鈍圓,呈單個或分枝狀排列,無鞭毛和芽孢。結(jié)核桿菌一般常用萎 鈉氏抗酸性染色法染色,結(jié)核桿菌為紅色,其他非抗酸性細菌呈藍色。2.培養(yǎng)特性 結(jié)核桿菌為專性需氧菌。最適 PH6.4-7.0 ,在 35-40 可生長,最適溫度為 35-37 ,在 2%-5%二氧化碳環(huán)境中可促進其生長,在無氧條件下則迅速死亡。(二)在外界環(huán)境的穩(wěn)定性結(jié)核分枝桿菌因細胞壁含大量類脂質(zhì),尤其是具有疏水性蠟樣物質(zhì),對外界環(huán)境及理化因素的抵抗力比一般細菌繁殖體強,因而在外界環(huán)境中相當穩(wěn)定,有利于結(jié)核菌的傳播。(三)致病性和感染數(shù)量1
3、. 致病性 人型結(jié)核桿菌是人類結(jié)核病的病原菌2. 感染數(shù)量 在自然條件下極易造成人群的感染。(四) 傳播途徑及暴露后果1. 傳播途徑 結(jié)核桿菌有多種傳播途徑,以呼吸道吸入帶菌的飛沫及帶菌的塵埃為主要傳播途徑。2. 暴露后后果 結(jié)核桿菌菌暴露后,在一定時間內(nèi)暴露俞久,感染的機會愈大。結(jié)核桿菌潛伏感染者一般無明顯癥狀,發(fā)病者多為慢性過程??沙霈F(xiàn)發(fā)熱、盜汗、食欲減退、消瘦、疲乏無力等一般結(jié)核病癥狀。如為肺結(jié)核還可出現(xiàn)咳嗽,咳痰、咳血及肺部X 線改變等。部分病人,特別是兒童可出現(xiàn)腦膜炎及全身播散型結(jié)核。(五)宿主范圍天然宿主主要為人和牛 .(六)結(jié)核病的預(yù)防、診斷和治療1. 預(yù)防 卡介苗接種對預(yù)防和減
4、少兒童結(jié)核病,特別是結(jié)核性腦膜炎、血行播散性結(jié)核病的發(fā)生起著重要作用。目前對實驗人員尚無有效的特異性預(yù)防措施。2. 診斷 感染后是否發(fā)病依據(jù)可疑癥狀, X 線改變及病原學檢查來判定。肺結(jié)核的實驗室診斷方法主要有痰涂片檢查。3. 治療 對一般抗生素不敏感,對鏈霉素、異煙肼、利福平、乙胺丁醇、丙嗪酰胺等藥物敏感。三.實驗室實驗活動及其危險性與預(yù)防措施(一)實驗室實驗活動背景資料實驗活動內(nèi)容 本實驗室主要從事臨床常規(guī)標本的涂片檢查和免疫學檢測(二)可能造成不良后果的因素與預(yù)防措施1. 實驗樣品涂片 用于顯微觀察的培養(yǎng)物、血液、唾液和糞便等樣品在固定和染色時,可能產(chǎn)生氣溶膠。擬采取防護措施:涂片操作過
5、程應(yīng)避免產(chǎn)生氣溶膠,制成涂片后立即染色可減少危險。若涂片不能及時染色,建議將涂片浸泡在戊二醛溶液中。涂片應(yīng)當用鑷子拿取恰當儲存,并經(jīng)清楚污染或高壓滅菌后再丟棄。(三)實驗室危害評估潛在危險因素危害程度發(fā)生可能性固有風險措施合理性殘留風險實驗樣品涂片(1)在固定和染色時產(chǎn)生氣溶膠中度可能中度合理中風險實驗儀器設(shè)備(1)離心機使用過程中產(chǎn)生的氣溶膠高度可能高度合理高風險(2)容器的破碎和傾灑造成污染高度可能高度合理高風險(3)檢測未經(jīng)滅活的樣品對儀器與環(huán)境造成的污染中度很可能中度合理中風險室內(nèi)空氣、實驗用品以及操作臺面污染中度很可能中度合理中風險個人防護裝備(1)手污染造成感染性物質(zhì)的食入中度很可能中度合理中風險(2)與皮膚和眼睛的接觸感染中度很可能中度合理中風險(3)個人防護裝備未徹底消毒造成污染中度很可能中度合理中風險四.工作人員素質(zhì)細菌實驗室共有技術(shù)人員 1 名,參加醫(yī)院、科室培訓 3 次以上。經(jīng)體檢健康狀況良好。五評估結(jié)論結(jié)核分枝桿菌在外界環(huán)境相當穩(wěn)定, 主要通過空氣傳播, 宿主范圍較廣,感染性很強,微量的感染就可使
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