VITEK2CompactOperationSOP22

1、 vitek2compact 儀器使用說明開機關機程序開機啟動vitek 2 compact （全自動微生物分析系統(tǒng)）儀1 確認vitek 2 compact儀器所接電源符合要求。2 打開交流電源（ac）開關在on 的位置。儀器按程序進行初始化（包括儀器自檢）。儀器孵育轉盤溫度上升（約需要5-15分鐘）， 以達到測試卡培養(yǎng)所需要的溫度。下面圖示為初始化（initializing）屏幕。 啟動完成后，屏幕下方的狀態(tài)區(qū)顯示ok。當狀態(tài)顯示ok，代表vitek 2 compact可以開始處理測試卡了。 關機1、 先關閉vitek 2 compact儀器；在vitek 2 compact儀器用戶界面上

2、，按回車鍵，屏幕出現(xiàn)主菜單 進入關機功能的指令：main menu > maintenance > shutdown > yes note：如果孵育器內留有測試卡，儀器顯示警告字樣：“warning：cassette processing and/or cards in incubator”（試卡運行/試卡在孵箱中，關機嗎？）選擇no，退出關機程序。選擇yes ，關機。儀器顯示下列信息并進入關機過程shutdown in progress。關機程序完成后，儀器顯示“ready for shutdown”。 關交流電源開關。 拔掉電源插座，以免發(fā)生危險。2、關閉英文工作電腦（同

3、普通電腦關機）；3、依次關掉其他附屬設備。 簡易操作規(guī)程一、 卡片選擇1 鑒定卡：gn 革蘭陰性桿菌鑒定卡 gp 革蘭陽性菌鑒定卡 nh 苛養(yǎng)菌鑒定卡yst 酵母菌鑒定卡 anc 厭氧菌鑒定卡2 藥敏卡：ast-gn 革蘭陰性桿菌藥敏卡ast-gp 革蘭陽性球菌藥敏卡ast-yst 真菌藥敏卡 二、 菌懸液配制及稀釋1懸浮液：0.45% nacl液，ph 4.5-7.22.菌懸液濃度 ： 鑒定卡 gn 0.5 - 0.63 麥氏單位 gp0.5 - 0.63 麥氏單位nh 2.7 - 3.3 麥氏單位 yst 1.8 - 2.2 麥氏單位 anc 2.7-3.3 麥氏單位 藥敏卡 ast-gn

4、 3.0ml 鹽水 + 145µl 0.5 0.63 麥氏單位菌懸液ast-gp 3.0ml 鹽水 + 280µl 0.5 0.63 麥氏單位菌懸液 ast-yst 3.0ml 鹽水 + 280µl 1.8 2.2 麥氏單位菌懸液3.藥敏卡稀釋方法- 按上述濃度手工進行稀釋vitek 2 compact上機前的細菌培養(yǎng)要求(表一)菌 種接種物的濁度 卡 片培 養(yǎng) 要 求革蘭陰性桿菌0.5-0.63 mcfgnast-gn培養(yǎng)基tsab/cba/mac ，35-37°c，需氧，無co2，培養(yǎng)18-24 小時革蘭陽性菌0.5-0.63 mcfgpast-gp

5、使用tsab/cba上的菌落。35-37°c需氧培養(yǎng)18-24小時，鏈球菌: 5-10% 二氧化碳葡萄球菌: 無 二氧化碳酵母菌1.8-2.2 mcfyst ast-yst使用sda/tsab/chba/cba/tsa/cps id3，35-37°c 需氧培養(yǎng)18-72 小時, 無二氧化碳奈瑟菌 嗜血菌 彎曲菌 其他苛養(yǎng)菌 2.7-3.3 mcfnh彎曲菌：tsab,35-37°微需氧培養(yǎng)18-24小時 其他苛養(yǎng)菌：choc,choc pvx 5-10% co2, 35-37°c需氧培養(yǎng)18-24小時 厭氧菌 棒狀桿菌 2.7-3.3 mcfanc 棒狀

6、桿菌：使用cba/can/tsab/tsahb上的菌落, 35-37°c co2,或非co2,培養(yǎng)18-24小時 厭氧菌：使用cba/cdc/bru/chba/tsab/tsahb上的菌落, 35-37°c 厭氧培養(yǎng)18-72小時 三、操作流程1. 18-24小時分純細菌（新鮮菌）。2. 根據(jù)細菌選卡片（參照表一）。3. 使用前將卡片和鹽水瓶從冰箱取出，放室溫15-20分鐘，充分復溫 。4. 在載卡架上放一次性塑料試管（注意：必須使用廠家配套提供的塑料管），每管中加入3ml 0.45% nacl溶液。5. 用比濁儀校正管（ref 93059）校正比濁儀，測定的數(shù)值應在規(guī)定范

7、圍內。6. 按表一建議配制菌懸液，并用比濁儀測定菌液濃度；如同時做藥敏試驗時，應按二（2）建議進行稀釋并混勻。7. 將卡片按順序放在載卡架上，輸樣管插入到菌液管中。藥敏卡應放在配對鑒定卡的后面。8將載卡架放入儀器的填充倉，按“充入”，70秒左右填充完畢。填充完畢后，儀器的藍色指示燈閃亮。將載卡架取出并放入裝載倉。儀器自動掃描條碼，審核所有輸入的卡片信息是否正確，確認無誤后自動進行封口和上卡。操作完成后，儀器口的藍色箭頭閃亮提示。如圖：1） 2） 3） 4）如圖所示：1)使用用戶名：labsuper密碼：labsuper進入主菜單，如左圖： 2）點擊，進入試卡編輯菜單，出現(xiàn)下圖窗口 5）選中屬于

8、同一菌株的所有實驗卡，點擊 按鈕，出現(xiàn)如下窗口，輸入實驗號和菌株編號 如果是藥敏卡請選中qc鍵，選擇質控菌株編號。 點擊 保存。11、 儀器每隔15分鐘自動閱讀孵育倉內所有卡片，并將數(shù)據(jù)傳入英文工作電腦，電腦分析所有數(shù)據(jù)并給予結果，確認無誤結果可傳至中文電腦，由操作者認可并發(fā)放臨床報告。12、已完成的卡片由儀器自動卸載入廢卡箱。vitek 2 compact結果處理測試卡片按正常程序放入vitek 2 compact孵育轉盤后，儀器經過一定時間的孵育和判讀，由工作電腦給出相應實驗室結果，按下述方法進一步處理：一、瀏覽結果從主菜單敲擊 圖標，出現(xiàn)以下窗口，點擊屏幕左列的相應編號，可見：id結果

9、ast結果下圖為“結果處理流程圖”原始結果 須補充休息的 須回顧的 須進一步確認的 完成 需要分離株信息 實驗室操作者確認分離株信息 上級操作者確認分離株信息并點擊“review” 并點擊“approve”aes提示信息； 在藥敏結果右上方顯示，見右圖標示：點擊專家系統(tǒng)按鈕，可見如下圖，可利用下拉箭頭瀏覽不同族抗生素的推薦耐藥機制：二、 鑒定結果1. 鑒定卡的結果：一般僅給出單一結果，無需進行補充試驗，電腦主機vitek 2 compact程序瀏覽結果時，可給出結果的可信度評估。單一良好結果可直接傳輸?shù)綌?shù)據(jù)庫（lsn）和中文軟件中（在打開“demoless”模式設置并保證中文軟件通訊端口打開情

10、況下），并長期儲存。2. 如果給出兩個及兩個以上結果，儀器會做出提示或要求進行補充試驗，請按注釋進行補充試驗，選擇正確的鑒定結果，并將結果傳輸。3. 不能鑒定或無法確定的結果，請查找原始分離平板，確認所分離細菌是否為純培養(yǎng)，必要時重新分離并重新進行鑒定試驗。三、 藥敏結果1. 如果同時進行鑒定和藥敏試驗，細菌鑒定結果會自動加到藥敏卡上；否則需手工添加細菌名稱到藥敏卡信息中。2. 如果有專家系統(tǒng)評語出現(xiàn)，則應按操作規(guī)程對藥敏結果作適當?shù)男薷牟⒋_認最終結果。3. 如果有瀏覽信息出現(xiàn)，應按程序處理瀏覽信息并確認最終結果。4. 上述步驟處理完畢，結果會自動傳輸?shù)絣sn數(shù)據(jù)庫中。vitek 2 comp

11、act建議質控方法目的：1.監(jiān)測鑒定及藥敏試驗步驟的精密度和準確度。2.監(jiān)測試驗所用試劑和儀器的質量。3.監(jiān)測進行試驗的工作人員是否規(guī)范操作。vitek 2 compact反應卡品種：鑒定卡藥敏卡l gn ast-gnl gp ast-gpl yst ast-ystl nhl ana 質量控制操作規(guī)范反應卡質控1.質控的參考菌株，請參閱表11.1質控菌株的貯存1.11 將菌株置于含1015%甘油的胰酶消化大豆肉湯，脫纖維羊血，或脫脂乳中，放-20°c低溫冰箱保存。1.12日常所用的質控培養(yǎng)物每月都要用冷凍保存的培養(yǎng)物來更新。1.13在測試前應將菌株在瓊脂板上傳1-2代后接種到相應培養(yǎng)

12、基上以獲得單個菌落。1.14按vitek 2 compact推薦的菌懸液制備方法，將菌株進行培養(yǎng)或制成懸液以進行試驗。1.15 只要 mic值沒有發(fā)生由于方法錯誤造成的有意義的改變，質控培養(yǎng)物就可以一直用于監(jiān)測試驗的精密度和準確度。如果某意外結果提示該菌株的內在敏感性發(fā)生改變就應換用此質控的新培養(yǎng)物。2.新生產編號反應卡的質控操作2.1對於每一批新生產批號反應卡都需應用相應質控菌株檢測生化反應和mic結果。2.2每一新生產批號至少取一張卡片進行質控以保證卡片的可靠性。2.3試驗所用的所有材料和試劑批號必須記錄并保存。3.質控頻率質控頻率可分為每日質控和每星期質控，新vitek 2 compac

13、t/ vitek 2 用戶建議先進行每日質控直至結果滿意后轉為每星期質控。3.1每天質控每天應用相應質控菌株進行質控以監(jiān)控試驗系統(tǒng)的整體質量，直至符合以下要求，則可考慮應用每周質控。 連續(xù)檢測相應質控菌株30天并記錄結果。 針對每一個生化反應/細菌和抗生素/細菌組合，每30個結果中，超出準確范圍不超過3個，則可考慮應用每周質控。建議vitek 2 compact用戶在熟悉操作時，應用每天質控模式。 3.2每周質控每周應用相應質控菌株進行質控監(jiān)控試驗系統(tǒng)的整體質量，并記錄質控結果。如所測試抗生素種類改變，必須重新應用每天質控模式直至結果滿意后再轉用每周質控。4.如果質控檢測結果和目標反應結果出現(xiàn)

14、誤差，必須立即進行查誤步驟。5.如誤差無法解決，請聯(lián)系生物梅里埃/委托代理的技術代表。 比濁儀質控在自動化儀器操作中，比濁儀質控是質控操作步驟的重要一環(huán)。1）vitek 2 compact densichek質控步驟 使用“densichek calibration standard”ref: 93059，檢測densichek 比濁儀能否準確判讀目標mcf單位，判讀值必須在目標mcf值±0.15 mcf范圍內。目標mcf單位值標記在“densichek calibration standard”標準管上。確認質控誤差原因如質控結果和目標反應結果出現(xiàn)誤差，必須遵循以下步驟查誤并矯正。

15、1.）明顯錯誤： 錯誤使用質控標準菌株 菌株/鹽水（0.45%鹽水）污染 鹽水的ph及濃度未在要求的范圍。建議采用梅里埃提供的鹽水。 沒有按照標準操作程序操作。2.）如無明顯錯誤，開始以下查誤步驟 重覆實驗以認證誤差結果。 重新采用“每日質控”程序。 確認比濁儀功能正常，比濁儀較正標準未過有效期。 所有試劑未過有效期，并妥尚保存。注意：所有懸浮液開封后有效期為一個月，為避免污染，鹽水分裝器夜間必須置於冰箱（2°c - 8°c）并每月高溫高壓消毒一次。 孵育/判讀箱溫度正常 標準菌株未受污染，生物特性及沒有改變。 菌懸液濃度符合實驗要求。 妥善接種，傳代標準菌株於建議的平板上

16、。 接種標準菌株孵育時間符合建議時間。 表1：質控參考菌株檢測卡的種類推薦的質控參考菌株gn atcc 700324 產酸克雷伯菌gp atcc 29213 金黃色葡萄球菌，43079 馬鏈球菌獸瘟亞種yst atcc 34449 葡萄牙假絲酵母，atcc 204094 粘狀毛孢子菌nh atcc 9007 流感嗜血桿菌anc atcc 8482 普通擬桿菌，atcc 13124 產氣莢膜梭菌ast-gn atcc 25922 大腸埃希菌，27853 綠膿假單胞ast-gpatcc 29212 糞腸球菌，29213 金黃色葡萄球菌ast-p533atcc 49619 肺炎鏈球菌vitek 2

17、compact質控操作流程圖示如下：1 在“ manage qc results”菜單, 點擊圖標2 輸入或掃描卡片批號 3 進行批號維護：輸入接收的數(shù)量及日期等4 按照一般上卡程序上卡，掃描試卡后，在對試卡進行維護時，選擇為質控卡。5 試驗結束后點擊圖標 查看質控結果。vitek 2 compact常見故障排除1. 儀器報警廢卡倉滿（廢卡倉超過60張卡）打開廢卡收集器艙口，取出廢卡收集器將所有卡片倒入廢物處理槽，10漂白液清洗垃圾槽，放回艙內。 2. 填充倉被非法拉開門，儀器停止運轉使用用戶名admin密碼bmx_admin登陸，選擇診斷1，鍵入login watson9命令，鍵入cold進行系統(tǒng)復位。 3. 光學讀數(shù)頭報警jam(在無測試卡的前提下)打開孵育器，拔出讀數(shù)頭，用擦鏡紙清潔 4. 孵育倉carousel 報警 試卡架分為四個部分。清洗前，應確認卡架內已沒有待處理的試卡。1) 進入卡架清洗程序：main menu>utilities>maintenance>cleaning>carousel cleaning;2) 點擊continue，儀器顯示”remove the incubactor access cover now”