HPV分型試劑盒及市場各產(chǎn)品比較

1、hpv分型試劑盒1、 hpv目前市場上主要產(chǎn)品：雜交法（達(dá)安19、凱普21、亞能23、透景26）；實(shí)時(shí)熒光pcr（之江13種高危分型、港龍凱普亞能13種高危不分型、達(dá)安8個(gè)型定量）；第二代雜交捕獲法（hc2）等2、操作方法：200ul標(biāo)本hpv所有廠家標(biāo)本處理操作流程（包括之江生物，都大同小異）：12000rpm離心5min沉淀加1ml生理鹽水混勻12000rpm離心5min沉淀加100ul核酸提取液混勻100溫浴10分鐘12000rpm離心5minpcr試劑配制點(diǎn)樣上pcr儀擴(kuò)增hpv實(shí)驗(yàn)：a、雜交法：首先加樣上pcr儀做擴(kuò)增，上機(jī)時(shí)間大約一個(gè)半小時(shí)左右。pcr完成后做雜交，目前市場上有手工

2、雜交和使用雜交儀雜交。操作時(shí)間2-4個(gè)小時(shí)。b、第二代雜交捕獲法（hc2）: 原理是利用對抗體捕獲信號的放大和化學(xué)發(fā)光信號的檢測, c、熒光定量pcr：直接上機(jī)通過熒光信號累積實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)pcr進(jìn)程，之江生物是用多重pcr對標(biāo)本進(jìn)行準(zhǔn)確的13個(gè)高危型的具體分型，其他不能具體分型。舉例之江產(chǎn)品：之江八管雙通道儀器(雙色熒光pcr儀器都可以用)：123456789101112amix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1bmix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2cmix3mix3mix3mi

3、x3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3dmix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4emix5mix5mix5mix5mix5mix5mix5mix5mix5mix5mix5mix5fmix6mix6mix6mix6mix6mix6mix6mix6mix6mix6mix6mix6gmix7mix7mix7mix7mix7mix7mix7mix7mix7mix7mix7mix7hmix8mix8mix8mix8mix8mix8mix8mix8mix8mix8mix8mix8一排八管做一個(gè)標(biāo)本即可具體分型！結(jié)果判斷：

4、hpv核酸熒光pcr檢測混合液若fam通道ct值35，結(jié)果判斷為若vic通道ct值35，結(jié)果判斷為mix116+56hpv16hpv56mix218+45hpv18hpv45mix335+59hpv35hpv59mix439+51hpv39hpv51mix558+52hpv58hpv52mix631hpv31mix733hpv33mix868hpv68四管四通道儀器（abi7500、羅氏480、伯樂cfx96、slan96孔等四色熒光pcr儀器）：123456789101112amix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1bmix2mix2m

5、ix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2cmix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3dmix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4emix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1fmix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2gmix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3hmix4mix4mix4mix

6、4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4四管做一個(gè)標(biāo)本即可具體分型！結(jié)果判斷：hpv核酸熒光pcr檢測混合液若fam通道ct值35，結(jié)果判斷為若vic通道ct值35，結(jié)果判斷為若610通道ct值35，結(jié)果判斷為若670通道ct值35，結(jié)果判斷為mix116+56hpv16hpv56mix218+52+58+31hpv18hpv52hpv58hpv31mix335+45+33+68hpv35hpv45hpv33hpv68mix439+51+59hpv39hpv51hpv593、 產(chǎn)品分析比較： 之江h(huán)pv試劑hc-ii試劑檢測方法熒光pcr法二代雜交捕獲核酸檢

7、測技術(shù)檢測hpv分型13種高危型具體分型不能分型檢測時(shí)間1.5-2小時(shí)4小時(shí)以上操作簡單繁瑣（涉及10多種試劑配制等）檢測過程pcr擴(kuò)增，儀器自動(dòng)完成多步加液安全性閉管反應(yīng)，安全性高多種試劑，操作過程接觸有毒物質(zhì)檢測儀器pcr儀器分子雜交儀等專用儀器靈敏度高靈敏較靈敏檢測方式閉管檢測，有效防止污染不進(jìn)行pcr擴(kuò)增，無污染檢測通量基本已適合目前醫(yī)院標(biāo)本量通量高結(jié)果分析儀器自動(dòng)分析人工閱讀或需專用閱讀儀及軟件樣本類型生殖道分泌物、宮頸細(xì)胞等生殖道分泌物、宮頸細(xì)胞等實(shí)驗(yàn)室要求pcr實(shí)驗(yàn)室驗(yàn)收不需 之江h(huán)pv試劑凱普hpv試劑檢測方法熒光pcr法核酸擴(kuò)增及導(dǎo)流雜交技術(shù)檢測時(shí)間1.5-2小時(shí)4

8、-8小時(shí)pcr反應(yīng)體積40ul25ulpcr擴(kuò)增模板4ul1ul檢測儀器pcr儀器pcr儀器及分子雜交儀檢測hpv型別高危13型21型靈敏度高靈敏較靈敏樣本類型生殖道分泌物、宮頸細(xì)胞等生殖道分泌物、宮頸細(xì)胞等檢測方式閉管檢測，有效防止污染雜交為開放式反應(yīng)，易產(chǎn)生交叉污染檢測通量基本適合目前醫(yī)院標(biāo)本量通量高結(jié)果分析儀器自動(dòng)分析人工閱讀或需專用閱讀儀及軟件生物安全閉管反應(yīng)，安全性高雜交過程會(huì)接觸有危險(xiǎn)物質(zhì)如：nbt/bcpi有毒溶液等多種混合型抗干擾能力強(qiáng)干擾，不宜檢測4、上海之江h(huán)pv優(yōu)劣勢: 優(yōu)點(diǎn)：閉管pcr操作，避免擴(kuò)增污染能夠?qū)?3個(gè)高危型精確分型靈敏度高，操作簡單，減少了雜交的操作程序，一個(gè)實(shí)驗(yàn)大約2個(gè)小時(shí)內(nèi)完成針對開放熒光pcr檢測系統(tǒng)，無需額外增加設(shè)備，有人員培訓(xùn)基礎(chǔ)。可以相對定量：ct值30（+）；30 ct值24（+）；