實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)

1、骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)溫州醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院溫州醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院溫州醫(yī)科大學(xué)附屬一醫(yī)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心溫州醫(yī)科大學(xué)附屬一醫(yī)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心 林曉梅林曉梅上上 課課 內(nèi)內(nèi) 容容（p266-279p266-279）n骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的臨床應(yīng)用骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的臨床應(yīng)用n骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)n血細(xì)胞的生成、發(fā)育規(guī)律及形態(tài)特點(diǎn)血細(xì)胞的生成、發(fā)育規(guī)律及形態(tài)特點(diǎn)n血細(xì)胞化學(xué)染色血細(xì)胞化學(xué)染色n細(xì)胞免疫分型細(xì)胞免疫分型n細(xì)胞遺傳學(xué)分析細(xì)胞遺傳學(xué)分析一、骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的臨床應(yīng)用一、骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的臨床應(yīng)用n 臨床作用臨床作用n 適應(yīng)癥適應(yīng)癥n 禁忌癥禁忌癥1 1、骨檢的臨床作用、骨檢的臨床作用n 疾病診斷疾

2、病診斷 肯定性診斷肯定性診斷 符合性診斷符合性診斷 懷疑性診斷懷疑性診斷 排除性診斷排除性診斷 形態(tài)學(xué)描述形態(tài)學(xué)描述 稀釋骨髓象稀釋骨髓象n 觀察療效觀察療效 緩解緩解 改善改善 退步退步 復(fù)發(fā)復(fù)發(fā) 2 2、骨檢的適應(yīng)證、骨檢的適應(yīng)證n不明原因外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)或和分類異常不明原因外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)或和分類異常n不明原因的發(fā)燒、肝、脾、淋巴結(jié)腫大不明原因的發(fā)燒、肝、脾、淋巴結(jié)腫大n黃疸、骨痛、骨質(zhì)破壞、蛋白尿、腎功黃疸、骨痛、骨質(zhì)破壞、蛋白尿、腎功能異常、血沉明顯增加等能異常、血沉明顯增加等2 2、骨檢的適應(yīng)證、骨檢的適應(yīng)證n血液病的定期復(fù)查和療效觀察血液病的定期復(fù)查和療效觀察n了解骨髓造血功能了解骨

3、髓造血功能n其它檢查其它檢查 ： 骨髓活檢骨髓活檢 細(xì)胞免疫學(xué)分型細(xì)胞免疫學(xué)分型 染色體核型檢查染色體核型檢查 分析病原學(xué)檢查分析病原學(xué)檢查 造血祖細(xì)胞培養(yǎng)造血祖細(xì)胞培養(yǎng) 3 3、骨檢的禁忌證、骨檢的禁忌證 n 嚴(yán)重出血的疾病禁用嚴(yán)重出血的疾病禁用n 晚期妊娠的孕婦慎用晚期妊娠的孕婦慎用 n骨髓片的選擇骨髓片的選擇n低倍鏡檢查低倍鏡檢查n油鏡檢查油鏡檢查n骨髓象的分析與報(bào)告骨髓象的分析與報(bào)告二、骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的方法和內(nèi)容二、骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的方法和內(nèi)容 1）涂片（肉眼觀察）涂片（肉眼觀察）1 1、骨髓片的選擇、骨髓片的選擇厚薄均勻厚薄均勻頭體尾分明頭體尾分明兩邊留有空隙兩邊留有空隙尾呈鋸齒狀尾呈

4、鋸齒狀頭部要留有約頭部要留有約2cm2cm的空間的空間2 2）取材）取材n抽吸骨髓液時(shí)有特殊的疼痛感抽吸骨髓液時(shí)有特殊的疼痛感n抽出的骨髓液中有抽出的骨髓液中有黃色小粒黃色小粒（骨髓小粒）（骨髓小粒）n顯微鏡下有顯微鏡下有骨髓特有的細(xì)胞骨髓特有的細(xì)胞： 幼紅、幼粒、巨核細(xì)胞、漿細(xì)胞等幼紅、幼粒、巨核細(xì)胞、漿細(xì)胞等n骨髓桿骨髓桿/ /分葉、有核細(xì)胞數(shù)大于外周血分葉、有核細(xì)胞數(shù)大于外周血1 1、骨髓片的選擇、骨髓片的選擇3 3）染色）染色 細(xì)胞核、質(zhì)顏色分明，顆粒清楚，沒細(xì)胞核、質(zhì)顏色分明，顆粒清楚，沒有染料沉渣有染料沉渣1 1、骨髓片的選擇、骨髓片的選擇1 1）確定取材、涂片和染色是否滿意）確定

5、取材、涂片和染色是否滿意2 2）估計(jì)骨髓有核細(xì)胞增生程度）估計(jì)骨髓有核細(xì)胞增生程度3 3）巨核細(xì)胞計(jì)數(shù)）巨核細(xì)胞計(jì)數(shù)4 4）觀察有無異常細(xì)胞）觀察有無異常細(xì)胞2 2、低倍鏡下檢查、低倍鏡下檢查骨髓有核細(xì)胞增生程度骨髓有核細(xì)胞增生程度增生程度增生程度增生極度活躍增生極度活躍增生明顯活躍增生明顯活躍增生活躍增生活躍增生減低增生減低成熟紅細(xì)胞：成熟紅細(xì)胞：有核細(xì)胞有核細(xì)胞1：110：120：150：1有核細(xì)胞均數(shù)有核細(xì)胞均數(shù)/高倍鏡視野高倍鏡視野100501002050510常見病例常見病例各類型白血病各類型白血病各類型白血病、增生各類型白血病、增生性貧血、性貧血、itp正常骨髓象、增生性正常骨髓象

6、、增生性貧血貧血再障、粒缺或粒細(xì)胞再障、粒缺或粒細(xì)胞減少癥減少癥增增 生生 極極 度度 活活 躍躍增增 生生 明明 顯顯 活活 躍躍增增 生生 活活 躍躍增增 生生 減減 低低增增 生生 極極 度度 減減 低低n有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)：有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)：200200 500500個(gè)細(xì)胞，按個(gè)細(xì)胞，按細(xì)胞的不同系列和不同發(fā)育階段分別計(jì)數(shù)，計(jì)細(xì)胞的不同系列和不同發(fā)育階段分別計(jì)數(shù)，計(jì)算各階段細(xì)胞所占百分比。算各階段細(xì)胞所占百分比。n觀察細(xì)胞形態(tài)：觀察細(xì)胞形態(tài)：分類計(jì)數(shù)同時(shí)觀察細(xì)胞形態(tài)分類計(jì)數(shù)同時(shí)觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，有無異常細(xì)胞、寄生蟲等。是否正常，有無異常細(xì)胞、寄生蟲等。3 3、油鏡檢查、油鏡檢查1 1

7、）病人的基本信息）病人的基本信息2 2）骨髓的取材、涂片、染色情況）骨髓的取材、涂片、染色情況3 3）骨髓增生程度、粒紅比值和骨髓各期細(xì)）骨髓增生程度、粒紅比值和骨髓各期細(xì) 胞結(jié)果胞結(jié)果4 4）骨髓象特征的描述）骨髓象特征的描述5 5）血象特征）血象特征6 6）細(xì)胞化學(xué)染色特征）細(xì)胞化學(xué)染色特征4 4、骨髓象的分析和報(bào)告、骨髓象的分析和報(bào)告 血細(xì)胞的生成血細(xì)胞的生成 血細(xì)胞的發(fā)育規(guī)律血細(xì)胞的發(fā)育規(guī)律 各系血細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn)各系血細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn) 三、血細(xì)胞的生成、發(fā)育規(guī)律三、血細(xì)胞的生成、發(fā)育規(guī)律及形態(tài)特點(diǎn)及形態(tài)特點(diǎn) 造血干細(xì)胞造血干細(xì)胞 祖細(xì)胞祖細(xì)胞原始細(xì)胞原始細(xì)胞 幼稚細(xì)胞幼稚細(xì)胞 成熟細(xì)胞成

8、熟細(xì)胞1.1.血血 細(xì)細(xì) 胞胞 的的 生生 成成早幼早幼c c 中幼中幼c c 晚幼晚幼c c骨髓骨髓：是人體最大器官之一，主是人體最大器官之一，主要生理是進(jìn)行造血活動(dòng)，骨髓細(xì)要生理是進(jìn)行造血活動(dòng)，骨髓細(xì)胞主要是發(fā)育過程中的血細(xì)胞。胞主要是發(fā)育過程中的血細(xì)胞。n胞體胞體大小大小 大大 小小n胞核胞核 大小大小 大大 小小 核仁核仁 有有 無無 染色質(zhì)染色質(zhì) 細(xì)致細(xì)致 粗粗 核膜核膜 不明顯不明顯 明顯明顯 核形核形 圓形圓形 橢圓形橢圓形 腎形腎形 桿狀桿狀 分葉分葉2.2.血血 細(xì)細(xì) 胞胞 的的 發(fā)發(fā) 育育 規(guī)規(guī) 律律n胞漿胞漿 量量 少少 多多 嗜堿性嗜堿性 強(qiáng)強(qiáng) 弱、消失弱、消失 顆粒顆

9、粒 無無 有有 ( (非特異性非特異性 特異性特異性) )n核漿比例核漿比例 大大 小小 2.2.血血 細(xì)細(xì) 胞胞 的的 發(fā)發(fā) 育育 規(guī)規(guī) 律律粒粒 細(xì)細(xì) 胞胞 系系 列列原粒原粒 早幼粒早幼粒 中幼粒中幼粒 晚幼粒晚幼粒 桿狀核粒桿狀核粒 分葉核粒分葉核粒原始細(xì)胞形態(tài)學(xué)共同特點(diǎn)n胞漿嗜堿性胞漿嗜堿性n胞漿常無顆粒胞漿常無顆粒n核染色質(zhì)細(xì)致核染色質(zhì)細(xì)致n核仁有、清楚核仁有、清楚n高核漿比高核漿比n 紅細(xì)胞系列紅細(xì)胞系列n 粒細(xì)胞系列粒細(xì)胞系列n 淋巴細(xì)胞系列淋巴細(xì)胞系列n 漿細(xì)胞系列漿細(xì)胞系列n 單核細(xì)胞系列單核細(xì)胞系列n 巨核細(xì)胞系列巨核細(xì)胞系列3.3.血細(xì)胞的正常形態(tài)學(xué)特征血細(xì)胞的正常形態(tài)

10、學(xué)特征正常細(xì)胞形態(tài)正常細(xì)胞形態(tài)觀察內(nèi)容：觀察內(nèi)容：1.1.大小、形態(tài)。大小、形態(tài)。 3.3.核：位置、大小、形態(tài)、染色質(zhì)。核：位置、大小、形態(tài)、染色質(zhì)。2.2.胞漿：量、著色、包含物。胞漿：量、著色、包含物。 4.4.核仁：大小、多少、清晰度。核仁：大小、多少、清晰度。正常細(xì)胞形態(tài)正常細(xì)胞形態(tài)觀察內(nèi)容：觀察內(nèi)容：1.1.大小、形態(tài)。大小、形態(tài)。 3.3.核：位置、大小、形態(tài)、染色質(zhì)。核：位置、大小、形態(tài)、染色質(zhì)。2.2.胞漿：量、著色、包含物。胞漿：量、著色、包含物。 4.4.核仁：大小、多少、清晰度。核仁：大小、多少、清晰度。紅細(xì)胞系列紅細(xì)胞系列n 胞體、胞核圓形胞體、胞核圓形n 胞漿有明顯

11、的變化規(guī)律胞漿有明顯的變化規(guī)律n 胞漿中無顆粒胞漿中無顆粒粒細(xì)胞系列粒細(xì)胞系列n胞體圓形胞體圓形n顆粒和胞核有顆粒和胞核有明顯的變化規(guī)明顯的變化規(guī)律律淋巴細(xì)胞系列淋巴細(xì)胞系列n 胞體、胞核小胞體、胞核小n 胞漿量少胞漿量少漿細(xì)胞系列漿細(xì)胞系列 n胞核圓形、偏位胞核圓形、偏位n胞漿豐富、深蘭色、胞漿豐富、深蘭色、 核旁淡染區(qū)、泡沫漿核旁淡染區(qū)、泡沫漿單核細(xì)胞系列單核細(xì)胞系列n胞體、胞核較大且不規(guī)則胞體、胞核較大且不規(guī)則n胞漿較豐富、灰蘭色胞漿較豐富、灰蘭色n胞核染色質(zhì)疏松胞核染色質(zhì)疏松巨核細(xì)胞系列巨核細(xì)胞系列n胞體、胞核巨大且不規(guī)則胞體、胞核巨大且不規(guī)則n胞漿量、顆粒極豐富胞漿量、顆粒極豐富 是

12、一種以細(xì)胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合運(yùn)用化學(xué)反是一種以細(xì)胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，結(jié)合運(yùn)用化學(xué)反應(yīng)的原理，對(duì)血細(xì)胞內(nèi)的各種化學(xué)物質(zhì)，作定性、應(yīng)的原理，對(duì)血細(xì)胞內(nèi)的各種化學(xué)物質(zhì)，作定性、定位、半定量分析的方法定位、半定量分析的方法四、血四、血 細(xì)細(xì) 胞胞 化化 學(xué)學(xué) 染染 色色 血細(xì)胞化學(xué)染色的定義血細(xì)胞化學(xué)染色的定義 輔助輔助疾病的診斷疾病的診斷和和細(xì)胞系列細(xì)胞系列的判斷的判斷n不同細(xì)胞系列，其所含的化學(xué)物質(zhì)各有不同不同細(xì)胞系列，其所含的化學(xué)物質(zhì)各有不同n血細(xì)胞在病理情況下，其化學(xué)物質(zhì)成分及含血細(xì)胞在病理情況下，其化學(xué)物質(zhì)成分及含 量會(huì)發(fā)生改變量會(huì)發(fā)生改變 血細(xì)胞化學(xué)染色的作用血細(xì)胞化學(xué)染色的作用 四、血四、血

13、 細(xì)細(xì) 胞胞 化化 學(xué)學(xué) 染染 色色n過氧化物酶染色（過氧化物酶染色（poxpox）n中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色（中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色（napnap）n酯酶染色酯酶染色n鐵染色鐵染色四、血四、血 細(xì)細(xì) 胞胞 化化 學(xué)學(xué) 染染 色色 血細(xì)胞化學(xué)染色的方法血細(xì)胞化學(xué)染色的方法 粒細(xì)胞及部分的單核細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的顆粒含有粒細(xì)胞及部分的單核細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的顆粒含有過氧化酶，此染色用于急性白血病類型的鑒別過氧化酶，此染色用于急性白血病類型的鑒別診斷診斷( (急粒和急淋急粒和急淋) )n 急粒急粒強(qiáng)陽性強(qiáng)陽性n 急單急單陰性、弱陽性陰性、弱陽性n 急淋急淋陰性陰性1.1.過氧化物酶（過氧化物酶（poxpox）染色）

14、染色n napnap主要存在于成熟階段的中性粒細(xì)胞主要存在于成熟階段的中性粒細(xì)胞 報(bào)告形式為陽性率及積分報(bào)告形式為陽性率及積分n增加增加：細(xì)菌性感染、類白血病反應(yīng)、再障、：細(xì)菌性感染、類白血病反應(yīng)、再障、 急淋、淋巴瘤急淋、淋巴瘤n減少減少：慢粒、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿、：慢粒、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿、 急粒、惡組急粒、惡組2.2.中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(nap)(nap)染色染色 輔助鑒別急性白血病細(xì)胞類型（輔助鑒別急性白血病細(xì)胞類型（急粒和急單急粒和急單）n氯化醋酸氯化醋酸as-das-d萘酚酯酶（萘酚酯酶（asas-d nced nce）: :特異性酯酶（特異性酯酶（s

15、ese） 急粒呈陽性（急粒呈陽性（m3m3強(qiáng)陽性）強(qiáng)陽性）n-醋酸萘酚酯酶（醋酸萘酚酯酶（-naenae）：）：非特異性酯酶非特異性酯酶(nse)(nse) 急單呈陽性或強(qiáng)陽性，加急單呈陽性或強(qiáng)陽性，加nafnaf抑制抑制 急粒呈陰性或弱陽性，加急粒呈陰性或弱陽性，加nafnaf不抑制不抑制 急淋呈陰性急淋呈陰性3. 3. 酯酯 酶酶 染染 色色m5n 骨髓鐵分為細(xì)胞外鐵、內(nèi)鐵骨髓鐵分為細(xì)胞外鐵、內(nèi)鐵n減少：減少：缺鐵性貧血缺鐵性貧血n增加：增加：鐵粒幼紅細(xì)胞性貧血鐵粒幼紅細(xì)胞性貧血4. 4. 鐵鐵 染染 色色骨髓外鐵染色骨髓內(nèi)鐵染色骨髓內(nèi)鐵染色急性白血病常見細(xì)胞化學(xué)染色急性白血病常見細(xì)胞化學(xué)染色 急淋急淋 急粒急粒 急單急單pox - + - pox - + - + + nap nap se - +se - + + - + - + +nse - - nse - - + + +