中草藥對仔豬免疫功能的影響研究

1、復(fù)方中草藥“豬康散”對仔豬細(xì)胞免疫功能、抗氧化及生產(chǎn)性能影響的研究摘要：為了研究在斷奶仔豬的日糧中添加復(fù)方中藥“豬康散”對其細(xì)胞免疫功能的影響。選取生長健康、體壯20日齡杜長大三元雜交仔豬35頭，隨機(jī)分成5個(gè)組并在20日齡時(shí)進(jìn)行體內(nèi)抗體水平的檢測，據(jù)體內(nèi)抗體水平將其編號(hào)，隨機(jī)分成5組。其中，第1組為對照組，第2、3、4、5組為試驗(yàn)組。在第26-30日齡時(shí)將“豬康散”按0.5%、1.0%、2%三個(gè)濃度梯度混于飼料中飼喂2、3、4組仔豬，其余時(shí)間飼喂基礎(chǔ)日糧。并且所有試驗(yàn)豬均在第21日齡時(shí)以2頭份/頭的劑量用豬瘟兔化弱毒苗進(jìn)行免疫，第5組為轉(zhuǎn)移因子組，注苗時(shí)應(yīng)將轉(zhuǎn)移因子與疫苗一同混合后再注射，其他

2、均相同。所有試驗(yàn)豬均于第35、45、55、65日齡時(shí)無菌前腔靜脈采血；結(jié)果表明： 1%中藥組的平均日增重、平均日采食量、淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、細(xì)胞亞群、SOD、GSH-Px均顯著或不顯著的高于對照組轉(zhuǎn)移因子組、0.5%中藥組、2%中藥組(P<0.05或P>0.05)，1%中藥組料肉比顯著低于對照組(P<0.05)；血清中MDA有下降的趨勢，但差異不顯著（P>0.05）。由此說明，在仔豬日糧中添加1%的復(fù)方中藥“豬康散”能增強(qiáng)仔豬細(xì)胞免疫功能，提高仔豬生產(chǎn)性能和抗氧化能力。關(guān)鍵詞：中草藥“豬康散”；仔豬；生產(chǎn)性能；免疫功能近年來，隨著規(guī)模化養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展，不合理的用藥、不規(guī)范的生

3、產(chǎn)養(yǎng)殖以及不科學(xué)的飼養(yǎng)管理等，使得豬病越演越嚴(yán)重，尤其是免疫抑制性疾病更為突出，每年都給養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的損失。為了提高經(jīng)濟(jì)效益，現(xiàn)在人們開始將目光投向了毒性低與無抗藥性、經(jīng)濟(jì)實(shí)用等優(yōu)點(diǎn)的中草藥，并且逐漸將它廣泛應(yīng)用于養(yǎng)豬業(yè)。本實(shí)驗(yàn)所用的復(fù)方中草藥“豬康散”是按“扶正祛邪”、“正氣存內(nèi)，邪不可干”的中醫(yī)理論科學(xué)組方而成的純中藥制劑。復(fù)方中草藥“豬康散”是由金銀花、連翹、板蘭根、大青葉、黃連、黃芩、黃柏、忍冬藤、梔子、石膏、知母等17位中藥組成，方中單味中藥金銀花、板蘭根、大青葉、黃連、黃芩等均具有直接或間接的免疫增強(qiáng)作用。1實(shí)驗(yàn)材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)材料1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 選取體壯健康，胎次、日

4、齡相同的平均體重在5Kg左右的，20日齡杜長大三元雜交仔豬35頭，根據(jù)體重相近，公母各半的原則隨機(jī)分成5個(gè)組，每組7頭，即對照組、轉(zhuǎn)移因子組、0.5%中藥組、1%中藥組、2%中藥組。飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)間45天。1.1.2 實(shí)驗(yàn)器材試劑 流式細(xì)胞儀、恒溫水浴鍋、CO2培養(yǎng)箱、超凈工作臺(tái)、冷凍離心機(jī)、顯微鏡、淋巴細(xì)胞分離液（1.077）、1640培養(yǎng)液、小牛血清、雙抗、臺(tái)盼藍(lán)、二甲基亞砜、轉(zhuǎn)移因子、豬瘟弱毒疫苗1.1.3中藥 復(fù)方中草藥“豬康散”是由金銀花、連翹、板蘭根、大青葉、黃連、黃芩、黃柏、忍冬藤、梔子、石膏、知母等17位中藥組成。按比例配方粉碎過60目篩，塑料袋500 g/袋分裝備用。1.2實(shí)驗(yàn)設(shè)

5、計(jì) 第1組為對照組，第2、3、4、5組為試驗(yàn)組。在第26-30日齡將復(fù)方中藥“豬康散”按0.5%、1.0%、2.0%三個(gè)濃度梯度混于飼料中飼喂2、3、4組仔豬，其余時(shí)間飼喂基礎(chǔ)日糧；5是轉(zhuǎn)移因子組，只是在注豬瘟疫苗時(shí)應(yīng)將轉(zhuǎn)移因子與苗一同混合后再注射，而不用“豬康散”，并且所有試驗(yàn)豬均在第21日齡時(shí)以2頭份/頭的劑量用豬瘟兔化弱毒苗進(jìn)行免疫，其他飼養(yǎng)管理均相同。實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)日糧參照 NRC (1998年 )豬營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制，其配方及營養(yǎng)水平見表 1。表1 基礎(chǔ)日糧配方和營養(yǎng)水平日糧組成含量(%)營養(yǎng)水平含量(%)玉米 58.27消化能DE(MJ/Kg )13.80豆粕24.5粗蛋白20.2(20.20

6、)魚粉7. 00 鈣0.86(0.88)乳清粉 6. 00 總磷0.63(0.64)大豆油1. 30 有效磷042鹽酸賴氨酸 0. 24賴氨酸1.30石粉 0. 80 蛋氨酸0.36磷酸氫鈣0. 64 食鹽 0.25 復(fù)合預(yù)混料 1.00 注:中藥組除在飼料中按0.5%、1%、2%添加中藥外，其他均同基礎(chǔ)飼糧。每1 kg基礎(chǔ)飼糧含維生素A 5.4×107IU、維生素D31.08×108IU、維生素E 1.8×104IU、維生素 K35g、維生素B1 2g、 維生素B215g、維生素B6 6g、維生素B12 30 mg、煙酸35g、泛酸鈣13mg、葉酸 850 mg

7、、Fe 155 mg、Cu 10 mg、Mn 100mg、Zn 100 mg、Se 0.25mg、 0.35mg、Co 0.2mg。1.3指標(biāo)的測定及方法 所有試驗(yàn)仔豬在35、45、55、65日齡時(shí)3次前腔靜脈采血4ml，血樣分為 2 份，2 ml一份用肝素抗凝，另一份為非抗凝血。肝素抗凝血用于細(xì)胞亞群及淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的測定。非抗凝血4000 r/min離心15 min，將血清分裝于EP管中，然后封口，置于- 20低溫冰箱中保存用于抗氧化指標(biāo)的測定。1.3.1生產(chǎn)性能 采食量：實(shí)驗(yàn)期間以圈為單位準(zhǔn)確測定和記錄每10天飼料喂量，并計(jì)算每10天及全期(35-65日齡)各階段的平均日采食量(ADFI

8、)。日增重：在試驗(yàn)期間的第35日齡、第45日齡、第55日齡、第65日齡清晨700 稱量仔豬空腹體重。并計(jì)算各階段(每10天及全期) 的平均日增重(ADG)。料重比：根據(jù)各階段的平均日采食量與平均日增重之比來計(jì)算各個(gè)階段的料重比(F/ G)。1.3.2淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率 用真空抗凝采血管無菌前腔靜脈采血1mL，置于10mL離心管中，用Ca2 +、Mg2 +的 Hank，s液等倍稀釋后，然后沿管壁緩緩疊加到盛有1mL淋巴細(xì)胞分層液的10ml離心管上層，25，2 000r/min離心20min；用巴氏吸管吸取中間云霧狀白細(xì)胞部分，再用3-5倍體積無 Ca2 +、Mg2 +的Hank，s液洗 3次，每次4

9、，1500 r /min離心10min；最后將細(xì)胞懸浮于RPMI 1640完全培養(yǎng)液中，并用臺(tái)盼藍(lán)染色并計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)( > 95% )，調(diào)整細(xì)胞濃度為2×106個(gè)/mL；將淋巴細(xì)胞懸液加入96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，ConA使終濃度為 5g/mL，另一組加入等體積的1640培養(yǎng)液作為對照，培養(yǎng)體系為每孔100L；置37、5%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48 h；在培養(yǎng)結(jié)束前4小時(shí)，每孔加入初始濃度為 5 mg/mL的四甲基偶氮唑鹽(MTT)10L，繼續(xù)培養(yǎng)；培養(yǎng)結(jié)束后，每孔加入100L二甲基亞砜，并搖動(dòng)，使紫色結(jié)晶完全溶解；用酶聯(lián)免疫檢測儀在570nm波長處測光密度(OD)值。根據(jù)測定結(jié)果按下列

10、公式計(jì)算外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。轉(zhuǎn)化率=ConA刺激孔的OD值無ConA刺激孔OD值/無ConA刺激孔的OD值。1.3.3細(xì)胞亞群 用購自美國Southern Biotechnology Associates，Inc 公司的抗豬淋巴細(xì)胞 CD3 (8E6，LgG1 )單克隆抗體，F(xiàn)TTC標(biāo)記；抗豬淋巴細(xì)胞CD4 (7421224，LgG2b)單克隆抗體，為FTTC標(biāo)記；抗豬淋巴細(xì)胞CD8(7622211，LgG2a) 單克隆抗體，為Biotin標(biāo)記，采用美國Coulter公司 EPICS2 XL流式細(xì)胞儀檢測外周血T淋巴細(xì)胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+）的數(shù)量測定。1.3.4抗氧化酶 用南

11、京建成生物工程研究所生產(chǎn)的 SOD、GSH-Px和MDA 檢測試劑盒進(jìn)行測定。按試劑盒說明書要求操作，采用日本島津公司生產(chǎn)的UV-2501PC紫外可見分光光度計(jì)測定各測定管的OD值，最后計(jì)算出樣品中SOD、GSH-Px和MDA的值。超氧化物歧化酶測定試劑盒，羥胺法，批號(hào)為20101027；谷胱甘肽過氧化物酶測定試劑盒，比色法，批號(hào)為20101103；丙二醛測定試劑盒，TBA法，批號(hào)為20101104；一氧化氮測定試劑盒，硝酸還原酶法，批號(hào)為20101027；。一氧化氮合酶測定盒，20101014。以上試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。1.4 數(shù)據(jù)處理與分析 所有數(shù)據(jù)用 SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟

12、件進(jìn)行單因素方差分析和LDS多重比較。試驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。2結(jié)果與分析2.1復(fù)方中藥“豬康散”對仔豬生產(chǎn)性能的影響 由表2可看出：平均日采食量：在35-45日齡時(shí)1%中藥組顯著高于各實(shí)驗(yàn)組（P<0.05），轉(zhuǎn)移因子和0.5%中藥組顯著高于對照組和2%中藥組（P<0.05），46-55日齡時(shí)2%中藥組極顯著高于對照組（P<0.01），0.5%中藥組顯著高于2%中藥組和對照組，46-55日齡時(shí)，1%中藥組極顯著高于各實(shí)驗(yàn)組（P<0.01），轉(zhuǎn)移因子組、0.5%中藥組顯著高于對照組和2%中藥組 (P<0.05)；平均日增重：35-45日齡時(shí)，各實(shí)驗(yàn)組

13、之間均差異不顯著（P>0.05），46-55日齡1%中藥組極顯著高于對照組（P<0.01），顯著高于各實(shí)驗(yàn)組（P<0.05），56-65日齡時(shí)，1%中藥組極顯著高于對照組（P<0.01），轉(zhuǎn)移因子組顯著高于對照組、2%中藥組，所有實(shí)驗(yàn)組在日增重上均高于對照組；料肉比：35-45日齡段各實(shí)驗(yàn)組之間料肉比差異不顯著（P>0.05），但均低于對照組，46-55日齡段中1%中藥組的料肉比顯著低于對照組、0.5%中藥組、2%中藥組(P<0.05)，跟轉(zhuǎn)移因子組之間差異不顯著，所有實(shí)驗(yàn)組均低于對照組，56-65日齡時(shí)，除0.5%中藥組跟對照組不顯著外，其他各實(shí)驗(yàn)組之間均

14、顯著低于對照組（P<0.05）；在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間，以1%中藥組中仔豬增重最為明顯，料肉比最低。 表2試驗(yàn)期中草藥“豬康散”對仔豬生產(chǎn)性能的影響日 齡分 組平均日采食量ADFI(g)平均日增重ADG (g)料 肉 比(F/G)35-45日齡對照組258.12±0.02a206.60±0.10a1.26±0.05a轉(zhuǎn)移因子組277.66±0.02b217.20±0.14a1.18±0.14a0.5%中藥組276.92±0.01b217.00±0.27a 1.26±0.13a1%中藥組293.42±

15、;0.03c275.00±0.40a1.17±0.5a2%中藥組259.36±0.02a 224.40±0.20a 1.27±0.10a 46-55日齡對照組565.80±0.05Ba363.60±0.29Aa1.59±0.11b轉(zhuǎn)移因子組599.80±0.04ABab423.60±0.41ABa1.47±0.14ab0.5%中藥組622.60±0.25Ab440.20±0.70ABa1.54±0.21b1%中藥組620.20±0.01ABab5

16、77.60±0.33Bb1.09±0.07a2%中藥組588.40±0.01Ab399.40±0.30ABa1.51±0.11b56-65日齡對照組722.70±0.02Aa526.40±0.74Aa1.51±0.25b轉(zhuǎn)移因子組748.40±0.05Cb684.20±0.16ABbc1.10±0.03a0.5%中藥組739.20±0.04BCb635.80±0.19ABab1.17±0.04ab1%中藥組777.52±0.01Dc774.20&

17、#177;0.41Bc1.02±0.05a2%中藥組728.50±0.01ABa 531.80±0.39Aa1.40±0.11ab注：同列右標(biāo)小寫字母相同表示差異不顯著(P>0.05 )，大寫字母相同表示差異不顯著(P>0.05 ) ，不同小字母表示差異顯著(P< 0.05) ，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01 )，下表同。2.2復(fù)方中藥“豬康散”對仔豬淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的影響表由表3可知：對照組、轉(zhuǎn)移因子組、0.5%中藥組、1%中藥組、2%中藥組這五個(gè)實(shí)驗(yàn)組之間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的差異顯著（P>0.05）。在35日齡、4

18、5日齡、55日齡三個(gè)日齡段，1%中藥組轉(zhuǎn)化率均高于對照組、轉(zhuǎn)移因子組、0.5%中藥組和2%中藥組，轉(zhuǎn)移因子組、0.5%中藥組、2%中藥組均高于對照組。 表3復(fù)方中藥“豬康散”對仔豬淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的影響 日 齡分 組35日齡45日齡55日齡對照組0.38±0.03a0.50±0.07a0.53±0.07a轉(zhuǎn)移因子組0.43±0.12a0.61±0.05a0.63±0.08a 0.5%中藥組0.42±0.12a0.54±0.06a0.62±0.03a 1%中藥組0.47±0.09a0.66±

19、;0.06a0.67±0.09a 2%中藥組0.43±0.04a0.58±0.02a0.59±0.10a 2.3復(fù)方中藥“豬康散”對仔豬T細(xì)胞亞群的影響由表4可知：35日齡和45日齡段時(shí)1%中藥組的CD3%值均高于各實(shí)驗(yàn)組，顯著高于轉(zhuǎn)移因子組（P<0.05），但跟對照組、0.5%中藥組、2%中藥組差異不顯著（P>0.05）；55日齡時(shí)，CD3值顯著高于對照組（P<0.05），跟0.5%中藥組、2%中藥組、轉(zhuǎn)移因子組差異不顯著（P>0.05）；35日齡時(shí)，1%中藥組CD3CD4%值顯著高于對照組和0.5%中藥組（P<0.05）

20、，跟2%中藥組和轉(zhuǎn)移因子組差異不顯著（P>0.05）；45日齡時(shí)，CD3CD4%顯著高于對照組、轉(zhuǎn)移因子組、0.5%中藥組、2%中藥組（P<0.05），轉(zhuǎn)移因子組、0.5%中藥組、2%中藥組也顯著高于對照組（P<0.05）；轉(zhuǎn)移因子組、0.5%中藥組、2%中藥組之間差異不顯著（P>0.05）；55日齡時(shí)，CD3CD4%顯著高于對照組、0.5%中藥組、2%中藥組（P<0.05）；CD3CD8%：35日齡時(shí)，1%中藥組CD3CD8%顯著高于0.5%中藥組（P<0.05），45日齡時(shí)，各實(shí)驗(yàn)組之間差異不顯著（P>0.05），55日齡時(shí)，1%中藥組顯著高于對照

21、組（P<0.05）；CD4/CD8：35日齡時(shí)，1%中藥組CD4/CD8顯著高于對照組和2%中藥組（P<0.05），轉(zhuǎn)移因子組差異顯著高于2%中藥組（P<0.05），45日齡和55日齡各實(shí)驗(yàn)組之間差異不顯著（P>0.05），但1%中藥組與轉(zhuǎn)移因子組值較為相近且均高于對照組、0.5%中藥組、2%中藥組。表4復(fù)方中藥“豬康散”對仔豬T淋巴細(xì)胞亞群的影響日齡分 組CD3（%）CD3CD4（%）CD3CD8（%）CD4/CD835日齡對照組65.33±0.38ab33.98±0.76a23.34±0.60ab1.28±0.05ab轉(zhuǎn)移因子

22、組62.05±2.40a36.09±1.33ab26.69±1.22ab 1.60±0.09bc0.5%中藥組66.84±1.26ab34.17±2.31a20.38±1.62a1.54±0.11abc1.0%中藥組70.14±1.20b39.57±0.53b29.57±3.14b1.70±0.12c2.0%中藥組65.94±3.79ab35.55±0.82ab26.11±2.3ab1.24±0.14a45日齡對照組56.78±

23、;3.34a26.74±0.84a30.68±4.40a0.91±0.15a轉(zhuǎn)移因子組63.1±0.47ab 31.02±0.95b35.76±6.20a1.00±0.06a0.5%中藥組63.72±0.53ab30.44±0.34b31.08±1.37a 0.90±1.38a1.0%中藥組66.18±3.79b36.68±0.86c37.13±3.64a1.16±0.12a2.0%中藥組62.91±1.02ab30.43±0

24、.45b30.85±2.90a0.80±0.10a55日齡對照組52.41±3.30a24.64±3.70a33.43±5.50a0.66±0.01a 轉(zhuǎn)移因子組62.45±0.13b29.31±0.17ab44.53±0.58b0.73±0.28a0.5%中藥組59.10±4.36ab25.38±1.50a45.80±0.65 b0.54±0.04a1.0%中藥組63.75±1.33b34.39±1.05b47.19±3.7

25、0b 0.75±0.03a2.0%中藥組59.63±0.64ab28.18±0.77a45.49±6.49b0.62±0.07a2.4復(fù)方中藥“豬康散”對仔豬抗氧化的影響由表5可知：55日齡時(shí)，1%中藥組的SOD值顯著高于對照組(P<0.05)，而跟轉(zhuǎn)移因子組、0.5%中藥組和2%中藥組差異不顯著(P>0.05)；65日齡時(shí)，1%中藥組的SOD值顯著高于對照組、轉(zhuǎn)移因子組、0.5%中藥組和2%中藥組，轉(zhuǎn)移因子組也顯著高于、0.5%中藥組和2%中藥組；35日齡和45日齡，差異不顯著（P>0.05），但各實(shí)驗(yàn)組均高于對照組。GSH

26、-Px在45日齡時(shí)，1%中藥組顯著高于對照組(P<0.05)，而在35日齡和55日齡時(shí)，轉(zhuǎn)移因子組、0.5%中藥組和2%中藥組，在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上，差異不顯著，但各實(shí)驗(yàn)組仍高于對照組，65日齡時(shí)，1%中藥組和轉(zhuǎn)移因子組顯著高于對照組(P<0.05)。MDA：除45日齡時(shí)，各實(shí)驗(yàn)組顯著低于對照組(P<0.05)外，其余各實(shí)驗(yàn)組在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上差異不顯著（P>0.05），但1%中藥組在整個(gè)實(shí)驗(yàn)期均低于對照組、轉(zhuǎn)移因子組、0.5%中藥組和2%中藥組，35日齡時(shí)，轉(zhuǎn)移因子低于對照組、0.5%中藥組和2%中藥組。在從整個(gè)實(shí)驗(yàn)來看，SOD、GSH-Px隨著日齡增長而逐漸增加，MDA顯著或

27、不顯著的逐漸降低，且以1%中藥組效果最為顯著。表5 復(fù)方中藥“豬康散”對仔豬抗氧化酶SOD、GSH-Px、MDA的影響指標(biāo)分組35日齡45日齡55日齡65日齡SOD對照組116.84±3.75a129.43±2.35a133.42±3.78b133.78±5.51a轉(zhuǎn)移因子134.67±11.20a135.92±3.40a142.98±3.95ab152.91±1.77b0.5%中藥組127.99±2.64a135.04±9.29a138.44±0.87ab141.02±4.

28、30ab1.0%中藥組135.31±4.66a145.40±7.23a152.07±6.19a170.07±4.46c2.0%中藥組129.43±7.01a133.41±5.68a135.94±4.99ab140.64±4.72abGSH-Px對照組410.30±1.85a442.05±24.49a477.58±46.68a527.88±21.00a轉(zhuǎn)移因子440.01±55.18a546.06±51.31ab638.18±9.09a705.15

29、±15.41b0.5%中藥組418.28±17.09a509.70±60.82ab539.77±1.20a600.91±28.18ab1.0%中藥組495.48±36.62a664.85±65.69b692.57±70.79a762.70±17.09b2.0%中藥組421.82±25.80a581.82±72.52ab577.28±55.86a612.73±96.25abMDA對照組4.05±0.67a3.82±0.13a3.58±0.

30、64a2.91±0.68a轉(zhuǎn)移因子3.11±0.11a2.71±0.37b2.50±0.35a2.17±0.06a0.5%中藥組3.51±0.87a2.92±0.17b2.72±0.61a2.39±0.09a1.0%中藥組2.99±0.45a2.61±0.17b2.31±0.31a2.06±0.27a2.0%中藥組3.27±0.26a2.78±1.48b2.52±0.13a2.21±0.18a3討論3.1復(fù)方中藥“豬康散”對仔

31、豬生產(chǎn)性能的影響目前大量研究報(bào)道表明：中草藥具有藥用和營養(yǎng)的雙重效用，應(yīng)用中草藥飼料添加劑能改善仔豬消化道功能、增強(qiáng)消化酶活性，從而增強(qiáng)機(jī)體對養(yǎng)分的消化吸收和合成代謝，促進(jìn)生長發(fā)育，增強(qiáng)機(jī)體免疫機(jī)能，維護(hù)機(jī)體的健康，從而實(shí)現(xiàn)加快動(dòng)物生長速度和提高飼料報(bào)酬1-3。陳燕凌等4試驗(yàn)表明，在日糧中添加復(fù)方中草藥制劑能增加斷奶仔豬的體重、日增重、日采食量等，降低料重比，在一定程度上改善生產(chǎn)性能。尹富貴等試驗(yàn)表明5 ，在日糧中添加0.2中草藥復(fù)方添加劑可緩解斷奶仔豬斷奶應(yīng)激，并可顯著提高斷奶仔豬的平均日增重，降低料肉比。李和平6在肉雞日糧中添加1%“禽康散”能明顯的提高肉雞平均日增重和降低料肉比，提高飼料

32、轉(zhuǎn)化率，實(shí)現(xiàn)對肉雞生產(chǎn)性能的提高。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：在日糧中添加不同濃度的中藥和轉(zhuǎn)移因子，能不同程度的提高仔豬的平均日采食量和平均日增重，效果不顯著，而1%中藥添加組能顯著提高仔豬平均日增重和降低料肉比（P<0.05），這可能跟復(fù)方中藥“豬康散”組成有關(guān)。方中的大青葉、板藍(lán)根、黃連等就決定了它具有清熱解毒，抗菌消炎的作用，能夠有效的改善仔豬胃腸道內(nèi)微生物環(huán)境，減少腹瀉，而增強(qiáng)仔豬抵抗力，有利于營養(yǎng)物在腸道能夠充分吸收；同時(shí)中草藥含有多種營養(yǎng)元素和有效活性成分能提高胃腸道內(nèi)各種消化酶的活性，增強(qiáng)新陳代謝，加快血液循環(huán)，來提高仔豬生產(chǎn)性能。3.2復(fù)方中藥“豬康散”對淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的影響淋巴細(xì)胞

33、增殖試驗(yàn)是檢測機(jī)體細(xì)胞免疫功能的一種體外試驗(yàn)，淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化程度可反映機(jī)體細(xì)胞免疫功能的水平，因此可作為檢測細(xì)胞免疫功能的重要指標(biāo)之一。T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率越高，意味著淋巴細(xì)胞在外來因子的刺激下增殖反應(yīng)上升，機(jī)體的細(xì)胞免疫能力提高主要分為非特異性刺激和特異性刺激兩種。理論上講，非特異性刺激(如ConA，PHA等)可以使60-70左右的淋巴細(xì)胞發(fā)生增殖，而特異性抗原刺激可以使5-30的細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化7。本實(shí)驗(yàn)在35日齡、45日齡、55日齡三個(gè)日齡段時(shí)對照組、轉(zhuǎn)移因子組、0.5%中藥組、1%中藥組、2%中藥組的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率差異均不顯著（P>0.05），在實(shí)驗(yàn)期間1%中藥組仔豬淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率均高于

34、轉(zhuǎn)移因子組、0.5%中藥組、2%中藥組、對照組，轉(zhuǎn)移因子組又都高于0.5%中藥組、2%中藥組、對照組。從整個(gè)實(shí)驗(yàn)期可以看出：在55日齡時(shí)，淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率最高，由此也就說明，隨著日齡的增長仔豬的免疫功能不斷完善。3.3復(fù)方中藥“豬康散”對仔豬淋巴細(xì)胞亞群的影響T細(xì)胞是體內(nèi)重要的細(xì)胞免疫應(yīng)答細(xì)胞，CD3是成熟T細(xì)胞的表面標(biāo)志，T淋巴細(xì)胞根據(jù)其表面標(biāo)記抗原主要分為CD4+和CD8+兩大細(xì)胞亞群，CD4+CD8+是免疫應(yīng)答所不可缺少的亞群，是評估機(jī)體免疫狀態(tài)的重要依據(jù)，是機(jī)體免疫內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定最重要的指標(biāo)。在與其它動(dòng)物相比，豬具有非常特殊的淋巴解剖學(xué)結(jié)構(gòu)和不尋常的林巴細(xì)胞遷移行為，包括高比例的CD4+CD

35、8+細(xì)胞亞群和低比值的CD4/CD8細(xì)胞比8。Annin Saalmu11er等9研究中發(fā)現(xiàn)在幼齡階段豬的CD4-CD8-細(xì)胞比例較高，而成年時(shí)CD4+CD8+細(xì)胞已具有較高水平，約占T淋巴細(xì)胞的21%，這表明抗原依賴性CD8+表達(dá)逐漸增多，這種變化已被體外刺激實(shí)驗(yàn)中CD4+CD8+的產(chǎn)生所證明。本實(shí)驗(yàn)中隨著日齡的增加CD3%細(xì)胞在逐漸增加，表明T細(xì)胞總數(shù)增加；CD3CD4% T細(xì)胞的顯著增高，意味著活化T細(xì)胞數(shù)在增加，機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)功能處于亢進(jìn)狀態(tài)；CD4/CD8值逐漸降低可能跟CD8+表達(dá)增多有關(guān)；同時(shí)，用轉(zhuǎn)移因子組、0.5%中藥組和2%中藥組CD3CD8%逐漸增多可能就與用藥后使免疫細(xì)胞

36、受抗原刺激而導(dǎo)致抗原依賴性CD8+過度增多有關(guān)。3.4復(fù)方中藥“豬康散”對仔豬抗氧化酶的影響近年來，發(fā)現(xiàn)一些天然中草藥具有提高抗氧化酶的活性，能夠清除自由基的危害，提高動(dòng)物體自身的免疫能力10。目前已有研究證實(shí)了許多中藥具有較強(qiáng)的抗氧化作用，如淫羊霍、甘草、首烏、山楂、當(dāng)歸等11。SOD就是生物體內(nèi)清除自由基的抗氧化酶的一種。SOD廣泛存在于生物體的各種組織中，可使超氧陰離子歧化為H2O2而被清除。血清中SOD活力高低間接反映了機(jī)清除自由基的能力。而GSH-Px也是以一定的方式清除自由氧和脂質(zhì)過氧化物，從而保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的完整性。MDA可以反映機(jī)體脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物生成速率和強(qiáng)度，也間接反映組織LPO損傷程度12-13。本方所用的黃芩的活性成分總黃酮以及黃連活性成份小蘗堿都具有良好的清除氧自由基的作用，而多糖也有部分清除氧自由基的作用14。張杲15研究認(rèn)為，連翹提取物及連翹果實(shí)提取物中的連翹苷、連翹酯苷都有具有很強(qiáng)的抗氧化能力，這可能與中斷脂質(zhì)過氧化鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，或清除自由基保護(hù)抗氧化酶免受自由基損傷，來提高抗氧化酶的活性。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明： 0.5%中藥組、1%中藥組、2%中藥組中SOD酶、GSH-Px酶均顯著或不顯著的高于對照組（P<0.05