隧道滅菌干燥機(jī)驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)的探討-楚天

1、隧道式滅菌干燥機(jī)驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)的探討摘要：針對(duì)隧道式滅菌干燥機(jī)在進(jìn)行驗(yàn)證時(shí)遇到的一些問題和使用干熱滅菌公式時(shí)的一些誤解；以及對(duì)隧道烘箱行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、gmp驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)和中國(guó)藥典三個(gè)現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范的不同一性進(jìn)行探討、分析，并提出自己的看法。關(guān)鍵詞：干熱滅菌、除熱原、驗(yàn)證1.概述藥品熱力滅菌主要分干熱滅菌和濕熱滅菌，前者可應(yīng)用于干熱滅菌柜與隧道式滅菌干燥機(jī)隧道（以下簡(jiǎn)稱“隧道烘箱”）；后者可應(yīng)用于蒸汽滅菌柜。在很多情況下滅菌過程的最終目的是除熱原，隧道烘箱就是一種連續(xù)式的干熱滅菌除熱原系統(tǒng)。隧道烘箱的設(shè)計(jì)制造質(zhì)量的好壞與滅菌除熱原效果的優(yōu)劣，主要采用溫度驗(yàn)證等方式來進(jìn)行，包括新產(chǎn)品鑒定前的質(zhì)量性能測(cè)試或用戶使用前

2、的設(shè)備gmp驗(yàn)證。因此，有一個(gè)明確的、統(tǒng)一的質(zhì)量驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)是必不可缺的。2.干熱滅菌驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)現(xiàn)狀(1)對(duì)于隧道烘箱的滅菌除熱原效果的驗(yàn)證（測(cè)試）方法：1995年行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定采用實(shí)測(cè)法，即350下滅菌時(shí)間不得少于5min；1997年修改后的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)又規(guī)定為300下滅菌時(shí)間不得少于4min（現(xiàn)行的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)jb20002.3-2004安瓿隧道式滅菌干燥機(jī)）。(2)中國(guó)藥典（2000版和2005版，附錄滅菌法）則規(guī)定：“干熱滅菌條件一般為160170×120min以上或250×45min以上，也可采用其他溫度和時(shí)間參數(shù)”。(3)實(shí)際在gmp驗(yàn)證時(shí)，又是根據(jù)藥品生產(chǎn)驗(yàn)證指南采用驗(yàn)證儀隨

3、機(jī)連續(xù)測(cè)試溫度，再用公式進(jìn)行計(jì)算驗(yàn)證，合格標(biāo)準(zhǔn)為f01000。3.問題的提出(1)驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和中國(guó)藥典三者的標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)不統(tǒng)一，導(dǎo)致新產(chǎn)品檢驗(yàn)、藥廠gmp認(rèn)證和產(chǎn)品驗(yàn)證執(zhí)行各自的標(biāo)準(zhǔn)體系，各行其是；(2)對(duì)干熱滅菌驗(yàn)證計(jì)算公式是各取樣點(diǎn)fhi值(每一溫度段所求得的當(dāng)量滅菌時(shí)間)在相應(yīng)溫度區(qū)間內(nèi)的累加，還是取fhi平均值？這二方法會(huì)導(dǎo)致了個(gè)別驗(yàn)證結(jié)果與實(shí)際出入較大。(3)在實(shí)際驗(yàn)證時(shí)怎樣判別標(biāo)準(zhǔn)取標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間f01000的合理性？以及安瓿滅菌除熱原和抗生素瓶滅菌除熱原f0值的差異性？4.對(duì)干熱滅菌驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)的探討眾所周知，隧道烘箱采用的干熱滅菌驗(yàn)證基本公式為：fh = 10（t-t0）/z d

4、t f0 (1)式中：f0標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間（min），fh當(dāng)量滅菌時(shí)間（min），t0標(biāo)準(zhǔn)滅菌溫度（），t 滅菌溫度（），t 滅菌時(shí)間（min），z 滅菌溫度系數(shù)。t0為170；滅菌溫度系數(shù)z在干熱滅菌時(shí)取20，在去熱原時(shí)取54。公式 (1)的意義是：在170最高溫度170區(qū)間內(nèi)對(duì)各取樣點(diǎn)的停留時(shí)間進(jìn)行積分，各取樣點(diǎn)的結(jié)果取最小值。對(duì)公式 (1)本身的正確性是不容置疑的，但在實(shí)際使用時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)樣本參數(shù)的不確定性導(dǎo)致了操作過程中的偏差，產(chǎn)生了以下幾個(gè)誤區(qū)，筆者想與大家探討。4.1干熱滅菌驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比我們將三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)值：300×4min、250×45min和f01000分別代入公式(1

5、)得：(1)將300×4min代入公式(1)，得：f0 = 10（t-t0）/z dt =10（t-170）/54 =10（t-170）/54（t2t1） =10（300-170）/54×4=1022.04式中：t = t2t1=4min(2)將250×45min代入公式(1)，得：f0 = 10（t-t0）/z dt =10（t-170）/54 =10（t-170）/54t =10（250-170）/54×45=1363.62式中：t =t2t1=45min(3)將f01000代入公式(1)，得： fh = 10（t-170）/54 dt 1000 在

6、公式左邊對(duì)t積分得：10（t-170）/541000 (10（t-170）/54 )·(t2t1) 1000t = (t2t1)1000/10（250-170）/54 求得：1)當(dāng)滅菌溫度t = 250 時(shí)，t = (t2t1) = 33min；2)當(dāng)滅菌溫度t = 300 時(shí)，t = (t2t1) = 3.91min；(4)將f01363.62代入公式(1)，得： fh = 10（t-170）/54 dt 1363.62 在公式左邊對(duì)t積分得：10（t-170）/541363.62(10（t-170）/54 )·(t2t1) 1363.62t = (t2t1)1363.6

7、2/10（300-170）/54 求得：當(dāng)滅菌溫度t = 300 時(shí)，t = (t2t1) = 3.91min(4)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比匯總由此換算出三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)相對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)進(jìn)行匯總，詳見(表1)表1標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比匯總執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中國(guó)藥典驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)300下滅菌時(shí)間不得少于4min250下滅菌時(shí)間不得少于45minf01000換算標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)f01022.04f01363.62250下滅菌時(shí)間不得少于33min250下滅菌時(shí)間不得少于33.7min300下滅菌時(shí)間不得少于5.34min300下滅菌時(shí)間不得少于3.91min4.2對(duì)干熱滅菌驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)的探討從(表1)中我們可以看到行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)基本接近，但大

8、大低于中國(guó)藥典所規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)。從標(biāo)準(zhǔn)的執(zhí)行角度來說，應(yīng)該是驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中國(guó)藥典。而目前這種標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)倒掛的現(xiàn)象，筆者認(rèn)為，肯定有其存在的必要性，故將其作一探討。(1)根據(jù)公式(1)fh = 10（t- t0）/z dt，這是一個(gè)分段積分，一般驗(yàn)證儀是以1030秒為一個(gè)時(shí)間分段區(qū)間。下面是以假定瓶子在滅菌烘箱內(nèi)各溫度段的停留時(shí)間各為1 min，算出每一個(gè)溫度段的當(dāng)量滅菌時(shí)間fhi，見(表2)：表2每一個(gè)溫度段的當(dāng)量滅菌時(shí)間滅菌溫度t滅菌時(shí)間t每一溫度段的當(dāng)量滅菌時(shí)間fhi總當(dāng)量滅菌時(shí)間fhit0 = 170t = 1minfh0 =1.001t1 = 180t = 1minfh1 =1.53

9、2.53t2 = 190t = 1minfh2 =2.354.88t3 = 200t = 1minfh3 =3.598.47t4 = 210t = 1minfh4 =5.5013.97t5 = 220t = 1minfh5 =8.4322.4t6 = 230t = 1minfh6 =12.9235.32t7 = 240t = 1minfh7 =19.7955.11t8 = 250t = 1minfh8 =30.3085.41t9 = 260t = 1minfh9 =46.42131.83t10 = 270t = 1minfh10 =71.10202.93t11 = 280t = 1minfh1

10、1 =108.90311.83t12 = 290t = 1minfh12 =166.81478.64t13 = 300t = 1minfh13 =255.51734.151)根據(jù)公式性質(zhì)，fh應(yīng)為每一溫度段fhi的總和，即 fh = fhi = 734.15 min（i =1，213），而不應(yīng)視為fhi的平均值fh = （fhi）/ n = 56.47 min（n =13）。其中：fhi每一溫度段所求得的當(dāng)量滅菌時(shí)間（min）；此前，個(gè)別驗(yàn)證在實(shí)際操作中誤將fh當(dāng)作平均值來對(duì)待，這顯然是錯(cuò)誤的。2)從170升溫到250, 8分鐘升溫的累積當(dāng)量滅菌時(shí)間僅為133.68min；而從250升溫到30

11、0，6分鐘升溫的累積當(dāng)量滅菌時(shí)間要達(dá)到600.47min。也就是說，當(dāng)量滅菌時(shí)間取決于溫度的高低和停留的時(shí)間。(2)中國(guó)藥典（附錄滅菌法）中又規(guī)定 “250×45min的干熱滅菌也可以除去無菌產(chǎn)品包裝容器及有關(guān)生產(chǎn)灌裝用具中的熱原物質(zhì)”。同時(shí)，藥品生產(chǎn)驗(yàn)證指南中介紹“usp版規(guī)定用于玻璃器皿除熱原的系統(tǒng)必須保證其暴露（滅菌）溫度和時(shí)間為25030 min”的規(guī)定。也就是說，干熱滅菌用作除熱原時(shí)公式(1)又可寫為：fh = 10（t-170）/54 dt f0 (2)由公式(2)左邊對(duì)t積分得：10（t-170）/54f0(10（t-170）/54 )·(t-0) f0t f

12、0/10（t-170）/54 (3)由公式(3)求得：以25030 min和25045 min為標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間的各溫度t（）下的等效滅菌時(shí)間t0，見(表3)。表3標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間的各溫度t（）下的等效滅菌時(shí)間滅菌溫度t（）f01000驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)f01363.62中國(guó)藥典25033.0045.0026021.5429.3827014.0719.182809.1812.522905.998.173003.915.343102.563.483201.672.273301.091.493400.710.973500.460.63從表3可知：250滅菌30 min與300滅菌3.56 min等效，250滅菌45

13、min與300滅菌5.34 min等效。這個(gè)結(jié)果與jb20002.3-2004安瓿隧道式滅菌干燥機(jī)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中“滅菌溫度不低于300，時(shí)間不得低于4 min” 的規(guī)定基本相吻合。(3)現(xiàn)行的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)jb20002.3-2004安瓿隧道式滅菌干燥機(jī)起始于1995年，當(dāng)初規(guī)定“350下滅菌時(shí)間不得少于5min”，1997年修改后的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)又規(guī)定為“300下滅菌時(shí)間不得少于4min”。這是因?yàn)榭紤]到該標(biāo)準(zhǔn)的適用范圍為安瓿隧道式滅菌干燥機(jī)，安瓿瓶壁厚相對(duì)較薄，熱穿透性相對(duì)較好，內(nèi)外溫差相對(duì)較小。然而，中國(guó)藥典規(guī)定 “250×45min的干熱滅菌也可以除去無菌產(chǎn)品包裝容器及有關(guān)生產(chǎn)灌裝用具中的熱

14、原物質(zhì)”，這是一個(gè)總體概念，沒有區(qū)分被滅菌物體的大小、形狀和重量。我們的標(biāo)準(zhǔn)沒有像德國(guó)bosch公司做的那樣細(xì)，即根據(jù)被滅菌物體的大小、形狀和重量（主要是重量）來決定當(dāng)量滅菌時(shí)間的大小。5.結(jié)論(1)隧道烘箱用于安瓿滅菌除熱原應(yīng)符合f025033 min(f0 = 1000) 的規(guī)定表達(dá)比較確切，而且標(biāo)準(zhǔn)值也相對(duì)統(tǒng)一。當(dāng)然，采用行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中的表達(dá)形式：“在300下滅菌時(shí)間不低于4 min”也未嘗不可。(2)建議隧道烘箱用于“去除粉針分裝與凍干生產(chǎn)用玻璃儀器中及有關(guān)生產(chǎn)灌裝用具中的熱原物質(zhì)”的必須符合中國(guó)藥典，即f025045 min的規(guī)定或300滅菌去熱原時(shí)間不低于5.34min。(3)如果隧道烘箱溫度達(dá)不到300，則可以參照(表3)提供的各溫度段的相應(yīng)滅菌時(shí)間來操作，但滅菌去熱原溫度不得低于170。(4)由于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)300取的是靜態(tài)溫度，無法反映器皿在