常用pH緩沖液

1、資料 常用 pH緩沖溶液的配制和pH 值常用 pH 緩沖溶液的配制和 pH值常用 pH緩沖溶液的配制和 pH 值溶序 液pH配制方法號 名值稱13.0 ml氯0.2 mol/LHCl 與化25.0 ml鉀10.2 mol/L 1.7-KCl 混合鹽均勻后，加酸?水稀釋至100 ml氨在 500 ml水中溶解基氨基乙酸乙150 g ，加2 酸2.3-480 ml 濃鹽酸，再加鹽水稀釋至酸1L一在 200 ml氯水中溶解乙2 g 一氯酸乙酸后，加32.8-40 g NaOH，氫溶解完全氧后再加水化稀釋至 1L鈉鄰 把 25.0 ml苯 0.2 mol/L二 的鄰苯二甲 甲酸氫鉀酸溶液與43.6氫

2、6.0 ml 0.1鉀 mol/L HCl - 混合均勻，鹽 加水稀釋酸 至 100 ml鄰把 25.0 ml苯0.2 mol/L二的鄰苯二甲甲酸氫鉀酸溶液與氫517.5 ml4.8鉀0.1 mol/L-NaOH混合氫均勻，加水氧稀釋至化100 ml鈉六在 200 ml亞水中溶解甲六亞甲基基6 四四胺 40 g，5.4胺加濃 HCl10 ml ，再-加水稀釋鹽至 1 L酸磷 把 25.0 ml酸 0.2 mol/L76.8二 的磷酸二氫氫鉀與鉀 23.6 ml - 0.1 mol/L氫 NaOH混合氧 均勻，加水化稀釋至鈉 100 ml硼把 25.0 ml酸0.2 mol/L-的硼酸 -氯氯化

3、鉀與化4.0 ml 0.18鉀8.0mol/L-NaOH 混合氫均勻，加水氧稀釋至化100 ml鈉把 0.1氯mol/L氯化化銨與銨90.1 mol/L9.1-氨水以 2：氨1 比例混水合均勻硼把 25.0 ml酸0.2 mol/L-的硼酸 -氯氯化鉀與化43.9 ml10 鉀10.00.1 mol/L-NaOH混合氫均勻，加水氧稀釋至化100 ml鈉11 氨把 49.0 11.6基 ml 0.1乙 mol/L 氨酸基乙酸 -氯- 化鈉與氯 51.0 ml化 0.1 mol/L鈉 NaOH混合- 均勻氫氧化鈉磷 把 50.0酸 ml 0.05氫 mol/L二 Na2HPO4與鈉 26.9 ml

4、1212.0- 0.1 mol/L氫 NaOH 混合氧 均勻，加水化 稀釋至鈉 100 ml把 25.0氯ml 0.2化mol/L KCl鉀與 66.0 ml-13 0.2 mol/L 13.0氫NaOH混合氧均勻，加水化稀釋至鈉100 ml一、 常用溶液的配制（一）溶液配制注意事項1藥品要有較好的質(zhì)量試劑分為優(yōu)級純（保證試劑， Guaranteedreagent ，GR）、分析試劑（ Antalyticalreagent ，AR）化學(xué)純（ Chemical pure，C P）和實驗試劑（ Laboratoryreagent ，LR）等等。工業(yè)用的化學(xué)試劑，雜質(zhì)較多，只在個別情況下應(yīng)用，如配洗

5、液用的硫酸、配干燥劑的氯化鈣等。2藥品稱量要精確。3配制試劑用水應(yīng)用新鮮的去離子水或雙蒸餾水，比電阻值在50 萬歐姆以上， pH 在 5.57.0之間才可應(yīng)用，在組織培養(yǎng)等特殊用途時應(yīng)注意此項要求，配制一般化驗用溶液只要求用雙蒸餾水或去離子水。配好后的溶液，應(yīng)立即除菌處理（如高壓滅菌、抽濾或加抑菌物質(zhì)），以防雜菌生長。（二） 0.067 （ 1/15 ）Mol/L 磷酸緩沖液11/15Mol/L磷酸二氫鉀溶液的配制：稱取磷酸二氫鉀（ KH2PO4，AR）9.08g ，用蒸餾水溶解后，傾入1 000ml 容量瓶內(nèi)，再稀釋至刻度 （ 1000ml）。21/15Mol/L磷酸二氫鈉溶液的配制：稱取無

6、水磷酸氫二鈉（ Na2HPO4，A.R. ） 9.47g （或者Na2HPO4·2H2O 11.87g ）用蒸餾水溶解后，放入1 000ml 容量瓶內(nèi)，再加蒸餾水稀釋至刻度 （ 1000ml）。3按附表的比例， 配制成不同 pH 值的緩沖溶液。附表 1 磷酸鹽緩沖液配制法（單位：毫升）1/151/15p 1/151/15pMol/Mol/H Mol/Mol/LLLLHNa H KHPNa H KH P2222PO4O4PO4O458.092.07 66.623.4.8159.990.17 72.028.0.926 12.287.87 76.823.2.036 15.384.77 80

7、.819.2.136 18.681.47 84.115.9.256 22.477.67 87.013.0.366 26.773.37 89.410.6.476 31.868.27 91.58.5.586 37.562.57 93.26.8.696 43.556.58 94.75.3.786 49.650.48 95.84.2.816 55.444.68 97.03.0.927 61.138.98 98.02.0.04（三） 0.15Mol/LPB 液附表 2 0.15Mol/LPB液配制法pH 0.15Mol/0.15Mol/L Na 2 HPO4 L NaH2PO4?（ ml）（ ml）6.

8、26.573.546.37.562.566.49.051.087.61.039.007.72.028.027.81.019.047.87.013.06Na2HPO4·2H2O分子量=175.05 0.15Mol/L溶液含 26.7g/L 。Na2HPO4·12H2O分子量=358.22 0.15Mol/L溶液含 53.7g/L 。NaH2PO4·H2O分子量=138.00 0.15Mol/L溶液含 20.7g/L 。NaH2PO4·2H2O分子量=156.03 0.15Mol/L溶液含 23.4g/L 。（四） 0.2Mol/L PB緩沖液附表 3 0.

9、2mol/L PB緩沖液配制法pH 0.2 Mol/L0.2Mol/LNa2HPO4NaH2PO4（ ml ）（ ml）5.88.092.06.012.387.76.218.581.56.426.573.56.637.562.56.849.051.07.061.039.07.272.028.07.481.019.07.687.013.07.891.58.58.094.75.30.2Mol/L Na24HPO·2H2O溶液 35.61g/LNa2HPO4·12 H 2O溶液含71.64g/L0.2Mol/LNaH 2PO4·H2O溶液含 27.60g/LNaH2PO

10、4·2 H 2O溶液含31.21g/L欲配 0.1Mol/L PB緩沖液則在 0.2Mol/L PB緩沖液的基礎(chǔ)上加H2O稀釋 1 倍即可。欲配制 PBS液時，則在溶液中加0.85 的 NaCl 溶液即可。（五）無鈣鎂離子磷酸緩沖鹽水（ PBS）（ 0.15Mol/L PH 7.2）NaCl 8.0gKCl 0.2gNa2HPO4 1.15g（如為 Na2HPO4·12H2O，則為 2.89g ）KH2PO4 0.2g將上述試劑依次溶于1000ml 去離子水中，完全溶解后， 115高壓滅菌 10min15min ，存在4冰箱中備用。 此液可用于配制和稀釋細(xì)胞分散劑以及洗滌細(xì)

11、胞培養(yǎng)物。（六）硼酸鹽緩沖液（ Borate saline buffer ）1硼酸（ 3BO3）0.2Mol/L硼酸：硼酸12.37g 加水至 1 000ml 。2硼砂（ Na2B4O7）0.05Mol/L硼砂：硼砂19.07g 加水至 1 000ml 。附表 4 不同 pH 的0.2Mol/L硼酸緩沖液配制法p 0.05M 0.2M p 0.05M 0.2MH ol/Lol/LH ol/Lol/L硼砂硼酸硼砂硼酸（ ml ）（ ml （ ml）（ ml）71.09.083.56.5.4271.58.584.55.5.6472.08.086.04.0.8783.07.098.02.0.00（七

12、）巴比妥緩沖液1pH8.2 離子強度0.05Mol/L巴比妥緩沖液巴比妥鈉47.6g蒸餾水 3 000ml1.17N HCl 55.0ml（ 1.17 N HCl=193ml濃HCl 加 1 807ml 蒸餾水） 將 4.76g 巴比妥鈉溶于 3 000ml 蒸餾水。 加 1.17 N HCl 55ml。 用 HCl 調(diào)節(jié) pH 到 8.2 ，并加蒸餾水至4 265ml 。2 pH8.4 0.06Mol/L巴比妥緩沖液巴比妥 1.84g巴比妥鈉10.30g加蒸餾水至1 000.00ml3 pH8.6 0.06Mol/L巴比妥緩沖液巴比妥 1.66g巴比妥鈉12.76g加蒸餾水 1 000.00

13、ml（八） 0.2Mol/L醋酸鹽緩沖液見表附表5附表 5 0.2Mol/L醋酸鹽緩沖液配制法pH0.20.1pH0.20.123MolMol23Mol Mol37/L/L37/L/L TriHCl TriHCls（ ms（ m（ m l ）（m l ）l ）l ）98255872527. .51909056088257.5772530. .097982662882510.772532. .5 .576875073882512.772535. .5 .064762873882515.772537. .5 .553650762882517.772540. .5 .042540740882520.

14、772542. .0 .531322862（九）三羥甲基甲烷鹽酸緩沖液（ Tris HCl 緩沖液）不同 pH， 0.05Mol/L25ml0.2Mol/L三羥甲基氨基甲烷加ml0.1NHCl，加水稀釋至100ml（見下表）附表6 Tris HCl 緩沖液配制法pH2 33 7 0.2 0.1pHMol NHC 2 3/Ll3 7Tri(ml s(m)l)0.2 0.1Mol NHC/LlTri(mls(m)l)98255872527.51909065088257.5772530.097982862882510.772532.0 .576874073882512.772535.5 .06476

15、2873882515.772537.0 .553650762882517.772540.5 .042540740882520.772542.0 .531322862882522.772545.5 .021203005882525.25.0104 0三羥甲基氨基甲烷 （Tris ）分子量 =121.140.2Mol/L三羥甲基氨基甲烷： Tris24.23g，加水至1 000ml 。0.1NHCl ：取 HCl8.6ml ，加水至 1 000ml 。（十） 0.5Mol/LpH9.5 碳酸鹽緩沖液NaHCO33.70gNa2CO3 0.60g溶于 600.00ml 蒸餾水中即得。不用時塞緊瓶塞，

16、以免吸收空氣中二氧化碳使PH下降。最好小量配制。（十一）甘油磷酸緩沖液1配制 pH8.0 磷酸緩沖液?0.1Mol/LNa2HPO4 94.50ml0.1N NaH 2PO4 5.50ml混合即可2 9 份甘油與1 份 pH8.0磷酸緩沖液混合，即為甘油磷酸緩沖液。用途：用于免疫熒光試驗。（十二） Hanks 液1貯存液NaCl 80.00gKCl 4.00gNa2HPO4·12 H 2O 1.52gKH2PO4 0.60g葡萄糖 4.00g0.4 酚紅液 50.00ml雙餾水加至100.00ml115高壓滅菌15min，冰凍保存。2工作液貯存液 1份雙餾水 9份115高壓滅菌15m

17、in。臨用時用滅菌的5.6 NaHCO3液調(diào) pH值至 7.2 左右（溶液呈橙紅色）。（十三）萘（鈉）氏試劑（ Nessler s reagent ）配方 1：氯化汞 6.0g碘化鉀 12.4g20 NaOH 30ml加蒸餾水至100ml配方 2：碘化汞 11.5g碘化鉀 8g蒸餾水 50ml（完全溶解后）過濾，加20 NaOH 50ml。用途：檢測溶液中氨離子。（十四）阿氏（ Alsever s）液葡萄糖 2.05g檸檬酸鈉0.80g氯化鈉 0.42g蒸餾水 100ml溶解后，以10%檸檬酸調(diào)節(jié) pH 至 6.1 ，過濾，分裝，10 磅 10min 滅菌， 4保存。（十五）青、鏈霉素混合液（簡稱 SP液或雙抗液）青霉素（ 40萬 U） 5 支鏈霉素（ 200 萬 g） 1支分別溶于100ml 滅菌無離子水中或共同溶于200ml滅菌無離子水中，混合后分裝小瓶，置 - 10- 20冰箱保存?zhèn)溆茫? 萬單位 g/ml ）。臨用時，按 1%的量加入營養(yǎng)液或其他溶液中，最后濃度是青霉素 100U/ml ，鏈霉素 100ug/ml 。（十六）洗液（清潔液）配方 1：重鉻酸鉀 150g蒸餾水 300ml濃硫酸 3 000ml將重鉻酸鉀加入蒸餾水中，使之自然溶解或水浴溶解，亦可在大坩堝中加熱溶解，然