血型鑒定微柱凝膠法

1、；血型鑒定微柱凝膠法1.目的：采用正反定型對受檢者進行血型鑒定2.職責：嚴格按照血型鑒定試劑說明書操作3.適用范圍：血庫工作人員4.原理：凝膠作為微柱凝膠卡的填充物，將生物化學的凝膠分子篩過濾技術(shù)、離心技術(shù)和血型血清學的抗體特異性結(jié)合在一起，當抗原抗體反應(yīng)時，凝集的紅細胞在離心力的作用下不能通過凝膠而留在凝膠上層或游離在凝膠中，呈陽性反應(yīng)；而抗原抗體沒有反應(yīng)時，未凝集的紅細胞在離心力的作用下可通過凝膠而沉積在微柱凝膠管的底部，呈現(xiàn)陰性反應(yīng)。5.試劑、儀器及所需材料5.1 ABO/RhD血型定型檢測試劑卡：江陰立博醫(yī)藥生物技術(shù)有限公司，產(chǎn)品注冊號：國械注準20163400855，包裝：6孔/卡，

2、12卡每盒。儲存要求：18-25保存，主要成分：IgM性質(zhì)抗-A單克隆試劑：細胞株HA4、ADD、HA5、HA3，來源于河北醫(yī)科大學生物醫(yī)學工程中心；IgM性質(zhì)抗-B單克隆試劑：細胞株BAD、BDF、HB4，來源于河北醫(yī)科大學生物醫(yī)學工程中心；IgM性質(zhì)抗-D單克隆試劑：細胞株RUM-1，來源于英國Millipore公司。5.2 0.8%-1%的A型和B型紅細胞 5.3 0.9%的生理鹽水：安徽雙鶴藥業(yè)有限責任公司5.4 LB-3000醫(yī)用低速離心機 一次性吸管 一次性塑料試管6.標準種類及收集要求樣本應(yīng)符合臨床輸血技術(shù)規(guī)范要求，應(yīng)無嚴重溶血、無脂血及無纖維蛋白存在，EDTA抗凝的血液標本。7

3、.檢測環(huán)境條件：18-25，濕度30%-70%8.操作程序8.1 血型卡有六個凝集管。其中第一管為抗A凝膠，第二管為抗B凝膠，第三管為抗D凝膠，第四至六管為中性膠。8.2 用生理鹽水將待檢者的壓積紅細胞配置成0.8%-1%濃度，分別加入第一至第三管和第六管微管中，每管50ul。8.3 將A型、B型紅細胞分別加入到第四和第五管中，每管50ul。.；8.4將待檢者血漿分別加入到第四至第六管中。每管25ul。8.5 混勻后置專用離心機離心5分鐘。8.6 離心結(jié)束后，取出觀察結(jié)果并記錄。9.結(jié)果判定-A-B-DAcBcctr結(jié)果+0+0+0A型D陽性0+00B型D陽性00+0O型D陽性+000AB型D

4、陽性+000+0A型D陰性0+0+00B型D陰性000+0O型D陰性+0000AB型D陰性10.注意事項10.1為了便于鑒別，抗A微管中內(nèi)容物為藍色，抗B微管中內(nèi)容物為黃色，抗D微管中內(nèi)容物為乳白色，其他三個中性膠中內(nèi)容物為乳白色。10.2 使用血型卡前重新離心后使用。10.3 若凝膠卡封口開裂、孔中凝膠干涸或有氣泡時，不可使用。10.4 撕開凝膠卡的封口膜時，不可用力過猛，以免造成凝膠微孔間的交叉感染。10.5 紅細胞懸液的濃度為0.8%-1%，濃度過高或過低會影響檢測結(jié)果。10.6 血漿標本必須充分離心去除纖維蛋白，否則會在微柱凝膠中阻止紅細胞沉淀，呈現(xiàn)假陽性反應(yīng)。10.7 如在微柱凝膠中出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，強烈提示為紅細胞抗原抗體陽性反應(yīng)，也不排除其他原因所致溶血，一定要認真分析并向上級主管技術(shù)人員報告并討論。10.8 某些藥物、疾病可導(dǎo)致正定型結(jié)果弱陽性反應(yīng)或正反定型不相符，應(yīng)進一步檢查以明確原因。10.9 溶血性疾病、巨球蛋白血癥、輸注大分子血漿擴容劑如右旋糖酐等可能會影響實驗結(jié)果。10.10 人源血液樣本存在潛在的傳染性，凝膠卡使用后按醫(yī)療生物垃圾廢棄物處理。10.11 本產(chǎn)品進行臨床驗證時，