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1、細(xì)胞外細(xì)胞外ca2+濃度對(duì)坐骨神經(jīng)濃度對(duì)坐骨神經(jīng)腓腸肌收縮的影響腓腸肌收縮的影響實(shí)驗(yàn)組員:貝金玲、朱思佳、馬忠梅、張麗香一、選題的意義 1、ca2+是人體必需的常量元素,也是構(gòu)成人體骨骼的最基本原料。體液含鈣量少,但起的作用卻很大。鈣的其中一個(gè)作用就是抑制神經(jīng)肌肉的過度興奮性。 2、ca2+離子是維持機(jī)體細(xì)胞正常功能的非常重要的離子,它對(duì)于維持細(xì)胞膜兩側(cè)的生物電位,維持正常的神經(jīng)傳導(dǎo)功能,維持正常的肌肉收縮與舒張功能以及神經(jīng)-肌肉傳導(dǎo)功能都具有重要的作用,還有一些激素的作用均通過鈣離子表現(xiàn)出來。 3、因此,細(xì)胞內(nèi)外鈣離子濃度的變化必然會(huì)引起細(xì)胞生理活性發(fā)生改變。本實(shí)驗(yàn)就不同濃度的ca2+溶液對(duì)
2、蟾蜍離體腓腸肌收縮性的影響進(jìn)行了研究,為進(jìn)一步探討ca2+的作用及其原理提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。二、特色與創(chuàng)新之處: 1、ca2+是是興奮興奮收縮的藕聯(lián)因子收縮的藕聯(lián)因子,其作其作用是正性的用是正性的。 2、但這是指在興奮發(fā)生之后;對(duì)于因快鈉通道開放引起的鈉離子內(nèi)流而產(chǎn)生去極化為主的快反應(yīng)細(xì)胞來說,鈣離子由于“膜屏障膜屏障作用作用”的存在,細(xì)胞外高鈣使鈉離子內(nèi)流受到抑制,細(xì)胞興奮性有所下降。肌肉收縮的原理 滑行學(xué)說 滑行過程: ap ca2+內(nèi)流,ca2+ica2+與肌鈣蛋白結(jié)合原肌球蛋白構(gòu)象改變,雙螺旋結(jié)構(gòu)扭轉(zhuǎn),現(xiàn)出肌動(dòng)蛋白與橫橋結(jié)合的位點(diǎn)肌動(dòng)蛋白與橫橋結(jié)合、扭動(dòng)、解離,橫橋循環(huán)細(xì)肌絲不斷向暗帶移動(dòng),
3、atp分解肌小節(jié)縮短,肌肉收縮 細(xì)胞外ca對(duì)na內(nèi)流有競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用稱為膜屏障效應(yīng)。細(xì)胞外ca對(duì)na 去極產(chǎn)生阻礙,因此當(dāng)血液中ca不足時(shí),由于na容易去極,細(xì)胞易興奮。值得一提的是,由于細(xì)胞內(nèi)終池中的ca一般比較豐富,因此對(duì)骨骼肌收縮不會(huì)產(chǎn)生影響,所以興奮性增大了的細(xì)胞可引起頻繁的收縮,這也是缺ca但仍會(huì)出現(xiàn)抽搐的原因。膜屏障效應(yīng)膜屏障效應(yīng) 所以,本組認(rèn)為鈣離子是細(xì)胞興奮抑制離子。當(dāng)細(xì)胞外低鈣時(shí),鈣離子的“膜屏障作用”減弱,細(xì)胞興奮性增高。 三、可行性分析實(shí)驗(yàn)材料及儀器實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物: 蟾蜍蟾蜍實(shí)驗(yàn)器材:實(shí)驗(yàn)器材: 常用手術(shù)器械、蛙板、培養(yǎng)皿、滴管、紗布、粗棉線、任常用手術(shù)器械、蛙板、培
4、養(yǎng)皿、滴管、紗布、粗棉線、任氏液氏液 、肌槽、肌槽、毀髓針、玻璃解剖針、神經(jīng)屏蔽盒、大頭毀髓針、玻璃解剖針、神經(jīng)屏蔽盒、大頭針、燒杯、針、燒杯、rm6240b生理信號(hào)記錄儀生理信號(hào)記錄儀、張力傳感器,、張力傳感器,、膠頭滴管、移液管、任氏液配方各試劑、膠頭滴管、移液管、任氏液配方各試劑、不同不同ca2+濃度濃度任氏液等。任氏液等。實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備以及試劑都是實(shí)驗(yàn)室所具備的實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備以及試劑都是實(shí)驗(yàn)室所具備的四、擬采用的研究方法 1、ca2+溶液的配制方法 (1)高濃度ca2+溶液:氯化鈣的量是正常任氏液中氯化鈣含量的10倍,其它成分同任氏液; (2)低濃度鈣離子溶液:氯化鈣的量是正常任氏液中
5、氯化鈣含量的十分之一,其它成分同任氏液。 任氏液成分: nacl 32. 5g; kcl 1 .4g; cacl2, 1. 2g; nah2po4, 1. 0g; nahco3, 4. 0g; 葡萄糖, 2. 0g; 以上物質(zhì)溶解在1000ml蒸餾水中配成任氏液。備注:實(shí)際實(shí)驗(yàn)各實(shí)際用量根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)備注:實(shí)際實(shí)驗(yàn)各實(shí)際用量根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有情況來進(jìn)行計(jì)算。及實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有情況來進(jìn)行計(jì)算。試劑試劑標(biāo)準(zhǔn)任氏液標(biāo)準(zhǔn)任氏液高濃度鈣離子高濃度鈣離子低濃度鈣離子低濃度鈣離子nacl 32. 5gkcl 1 .4gcacl21.2g 12g0.12gnah2po41. 0gnahco34. 0g葡萄糖 2.
6、0g;2.制備蟾蜍坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本 按常規(guī)方法用生長(zhǎng)狀況良好的成體蟾蛛制備坐骨神經(jīng)排腸肌標(biāo)本, 并在肌肉端和神經(jīng)端分別結(jié)扎一根棉線備用, 在任氏液中穩(wěn)定5min。 每組均用標(biāo)準(zhǔn)任氏液作為對(duì)照后再分別浸泡到ca2+濃度為0.12 g/l(低濃度)、1.2 g/l( 標(biāo)準(zhǔn))、12 g/l(高濃度)任氏液溶液浸潤(rùn)5min。3.儀器連接 如下圖所示,連接儀器裝置。 注意保持標(biāo)本的濕潤(rùn)。4.刺激參數(shù)的設(shè)置 (1)閾強(qiáng)度的測(cè)定:起始刺激:0.05v; 增量:0.02v; 刺激時(shí)間間隔:20ms; 組間延時(shí):4s; 波寬:1ms (2) 最適刺激強(qiáng)度的測(cè)定:起始刺激:閾強(qiáng)度;增量:0.02v; 刺激時(shí)間間
7、隔:20ms; 組間延時(shí):4s; 波寬:1ms備注:實(shí)際實(shí)驗(yàn)各參數(shù)值根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)來進(jìn)行設(shè)定。備注:實(shí)際實(shí)驗(yàn)各參數(shù)值根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)來進(jìn)行設(shè)定。 (3)記錄閾強(qiáng)度和最適刺激強(qiáng)度 由rm6240生理信號(hào)記錄儀自動(dòng)輸出刺激, 記錄閾強(qiáng)度和最適刺激強(qiáng)度。 (4)記錄單收縮各參數(shù) 收縮的幅度 收縮和舒張的時(shí)程5、實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)參數(shù)參數(shù) 閾強(qiáng)度閾強(qiáng)度 最適刺激強(qiáng)度最適刺激強(qiáng)度 收縮幅度收縮幅度實(shí)驗(yàn)組數(shù)123123123標(biāo)準(zhǔn)任氏液高濃度鈣離子低濃度鈣離子五、預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果 低于標(biāo)準(zhǔn)濃度的ca2+可以使標(biāo)本興奮性升高,閾值降低,最適刺激強(qiáng)度降低,最適刺激強(qiáng)度下的收縮幅度升高。 高于標(biāo)準(zhǔn)濃度的ca2+可以使標(biāo)本興奮性降低,閾值升高,最適刺激強(qiáng)度升高,最適刺激強(qiáng)度下的收縮幅度降低。 本實(shí)驗(yàn)探討了不同濃度ca2+對(duì)坐骨神經(jīng)-腓腸肌收縮的影響,但由于實(shí)驗(yàn)條件和時(shí)間有限所用ca2+濃度梯度較大,組數(shù)較少,可能會(huì)使所得結(jié)論局限在一定范圍內(nèi)。要想得到進(jìn)一步的結(jié)論,需做進(jìn)一步探究。六、試驗(yàn)中遇到的困難七、參考文獻(xiàn)目錄1陳躍先.鈣的生理作用j.福建醫(yī)藥雜志, 2000, 22(2).2王玢,左明雪.人體及動(dòng)物生理學(xué)(第二版)m.北京:高等教育出版社, 2002.3解景田,趙靜.生理學(xué)實(shí)驗(yàn)(第二版) m.北京:高等教育出版社, 2002.4孫洪兆.水合氯醛對(duì)
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