試述基因工程研究的原理與基本路線并舉例說明其在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物方面的應(yīng)用

1、試述基因工程研究的原理與基本路線并舉例說明其在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物方面的應(yīng)用基因工程是按照人們的愿望對(duì)攜帶遺傳信息的分子（DNA）進(jìn)行設(shè)計(jì)和改造,從而培育生物新類型或治療遺傳疾病的一種現(xiàn)代的、嶄新的、分子水平的生物工程技術(shù);包括基因重組、克隆、表達(dá)；其核心是構(gòu)建重組體DNA的技術(shù)，因而基因工程和DNA重組技術(shù)有時(shí)成為同義詞。當(dāng)代人類社會(huì)所面臨的人口的增加、食品的短缺、疑難病的治療、資源的匱乏、環(huán)境染的加劇等重大問題,都在不同程度上依賴于生物技術(shù)的研究加以解決。因?yàn)樯锛夹g(shù)能利用生物資源的可再生性,在常溫常壓下生產(chǎn)珍貴藥品;節(jié)約能源和資源、減少環(huán)境污染;能創(chuàng)造動(dòng)植物優(yōu)良新品種,增加糧食生產(chǎn),開辟食物新來源

2、;解決疑難病的治療,并能對(duì)相關(guān)的傳統(tǒng)行業(yè)技術(shù)改造和產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整產(chǎn)生極其深遠(yuǎn)的作用。所以生物技術(shù)蘊(yùn)藏著巨大的經(jīng)濟(jì)潛力和社會(huì)效益。生物技術(shù)的發(fā)展,僅有20多年的歷史。然而在世界范圍內(nèi)給醫(yī)學(xué)帶來了一場(chǎng)革命性的變化,給農(nóng)業(yè)帶來了新的綠色革命,使輕工、食品、環(huán)保、海洋、能源開發(fā)等有關(guān)領(lǐng)域得到了前所未有的發(fā)展。一、基因工程的原理現(xiàn)在人們常說的生物技術(shù)實(shí)際上就是現(xiàn)代生物技術(shù)。現(xiàn)代生物技術(shù)包括基因工程、蛋白質(zhì)工程、細(xì)胞工程、酶工程和發(fā)酵工程等五大工程技術(shù)。其中基因工程技術(shù)是現(xiàn)代生物技術(shù)的核心技術(shù)?；蚬こ痰暮诵募夹g(shù)是DNA的重組技術(shù)，也就是基因克隆技術(shù)。既然基因工程這么重要,那么什么是基因工程呢? 基因工程（

3、genetic engineering），是在分子水平上對(duì)基因進(jìn)行操作的復(fù)雜技術(shù)，是指利用DNA體外重組或PCR擴(kuò)增技術(shù)從某種生物基因組中分離感興趣的基因，或是用人工合成的方法獲取基因，然后經(jīng)過一系列切割，加工修飾，連接反應(yīng)形成重組DNA分子，再將其轉(zhuǎn)入適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞，以期獲得基因表達(dá)的過程1。根據(jù)這個(gè)概念，人們可以從一個(gè)生物的基因中提取有用的基因片斷，植入到另外一個(gè)生物體內(nèi)，從而使該生物獲得某些新的遺傳性狀。從而獲得所需要的新的生物的變種，運(yùn)用基因工程可以加快生物的變異，并使生物的變異朝著有益于人類的方向發(fā)展。同時(shí)，這個(gè)定義表明，基因工程具有以下幾個(gè)重要特征：首先，外源核酸分子在不同的寄主生

4、物中進(jìn)行繁殖，能夠跨越天然物種屏障，把來自任何一種生物的基因放置到新的生物中，而這種生物可以與原來生物毫無親緣關(guān)系，這種能力是基因工程的第一個(gè)重要特征。第二個(gè)特征是，一種確定的DNA小片段在新的寄主細(xì)胞中進(jìn)行擴(kuò)增，這樣實(shí)現(xiàn)很少量DNA樣品"拷貝"出大量的DNA，而且是大量沒有污染任何其它DNA序列的、絕對(duì)純凈的DNA分子群體?？茖W(xué)家將改變?nèi)祟惿臣?xì)胞DNA的技術(shù)稱為“基因系治療”（germlinetherapy），通常所說的“基因工程”則是針對(duì)改變動(dòng)植物生殖細(xì)胞的。無論稱謂如何，改變個(gè)體生殖細(xì)胞的DNA都將可能使其后代發(fā)生同樣的改變。而且基因工程是處在分子水平上的操作，因而

5、可以跨越不同的物種進(jìn)行操作，大大改善了傳統(tǒng)的只能同類生物雜交并且不能控制變異方向的方法。不同種的生物一般是不能交配的，例如魚和牛，就不能進(jìn)行交配而生出下一代。但是利用基因工程，我們可以把魚的某些基因移植到牛的受精卵上，或者把牛的基因移植到魚的受精卵上，加以培養(yǎng)，就可以產(chǎn)生既有牛的性狀又有魚的性狀的新的物種。雖然基因工程有這么多的好處，但是也不是說可以濫用的。因?yàn)槊糠N生物經(jīng)過適者生存的自然選擇，都能適應(yīng)所處的生存環(huán)境.如果移植了外來的基因，可能會(huì)打破其體內(nèi)的細(xì)胞的平衡，從而導(dǎo)致細(xì)胞的快速衰老甚至死亡?？梢姡蚬こ桃_處理好細(xì)胞的相容性。二、基因工程的基本路線：一般來說，基因工程是指在基因水平

6、上的遺傳工程，它是用人為方法將所需要的某一供體生物的遺傳物質(zhì)-DNA大分子提取出來，在離體條件下用適當(dāng)?shù)墓ぞ呙高M(jìn)行切割后，把它與作為載體的DNA分子連接起來，然后與載體一起導(dǎo)入某一更易生長(zhǎng)、繁殖的受體細(xì)胞中，以讓外源遺傳物質(zhì)在其中“安家落戶”，進(jìn)行正常復(fù)制和表達(dá)，從而獲得新物種的一種嶄新的育種技術(shù)?；蚬こ痰幕静僮鞒绦?（如圖1）：從復(fù)雜的生物有機(jī)體基因組中，經(jīng)過酶切消化或多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）擴(kuò)增等步驟，分離出帶有目的基因的DNA片斷。在體外，將帶有目的的基因的外源DNA片斷連接到能夠自我復(fù)制的并具有選擇記號(hào)的載體分子上，現(xiàn)成重組DNA

7、分子。將重組DNA分子轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞，并與之一起增殖。從大量的細(xì)胞繁殖群體中，篩選出獲得重組DNA分子的受體細(xì)胞克隆。從這些篩選出來的受體細(xì)胞克隆中提取出已經(jīng)得到擴(kuò)增的目的基因，供進(jìn)一步分析研究實(shí)用。將目的基因克隆到表達(dá)載體上，導(dǎo)入寄主細(xì)胞，使之在新的遺傳背景下實(shí)現(xiàn)功能的表達(dá)，產(chǎn)生出人類所需要的物質(zhì)。 圖1 基因工程的一般步驟（一）、目的基因的獲取1直接從染色體DNA中分離：僅適用于原核生物基因的分離，較少采用2人工合成：根據(jù)已知多肽鏈的氨基酸順序，利用遺傳密碼表推定其核苷酸順序再進(jìn)行人工合成。適應(yīng)于編碼小分子多肽的基因。3.從mRNA合成cDNA：采用一定的方法釣取特定基因的mRNA，

8、再通過逆轉(zhuǎn)錄酶催化合成其互補(bǔ)DNA（cDNA）4從基因文庫(kù)中篩選5利用PCR合成（二）、目的基因與載體DNA體外重組1. 粘性末端連接法（如圖2）：即同聚物加尾連接法。當(dāng)載體和目的基因無法采用同一種制酶進(jìn)行切斷，無法得到相同得粘性末端時(shí)，可采用此方法2.人工接尾法（如圖3）3.人工接頭連接法（如圖4） 圖2 粘性末端連接法 圖3 人工結(jié)尾法 圖4 人工接頭連接法（三）、重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞重組DNA需導(dǎo)入宿主細(xì)胞才能進(jìn)行增殖或表達(dá)。重組質(zhì)?？赏ㄟ^轉(zhuǎn)化（transformation）方式導(dǎo)入宿主細(xì)胞。如果是用噬菌體作為載體的重組體，則需要用外殼蛋白進(jìn)行包裝，使之成為具有感染能力的噬菌體，再

9、通過轉(zhuǎn)染(transfection)方式將重組噬菌體DNA導(dǎo)入大腸桿菌等宿主細(xì)胞。（四）篩選并鑒定無性繁殖含重組分子的受體細(xì)胞（轉(zhuǎn)化子）1.根據(jù)重組體的表型進(jìn)行篩選：對(duì)于帶有抗藥基因的質(zhì)粒重組體，可采用插入滅活法（如圖5）進(jìn)行篩選。 圖5 插入滅活法2. 根據(jù)標(biāo)志互補(bǔ)進(jìn)行篩選轉(zhuǎn)化進(jìn)來的外源基因產(chǎn)物能夠彌補(bǔ)受體菌株的突變型缺陷。 受體菌： his- 在不含組氨酸的 外源基因：his+ 培養(yǎng)基中生長(zhǎng)3.根據(jù)DNA限制酶譜進(jìn)行分析（如圖6） 圖64.用核酸雜交法（如圖7）進(jìn)行分析鑒定采用與目的基因部分互補(bǔ)的DNA片段作為探針，與含有重組體的細(xì)菌菌落進(jìn)行雜交，經(jīng)放射自顯影，如結(jié)果為陽(yáng)性，即可確定重組體

10、中帶目的基因。 圖7 核酸雜交法（五）、外源基因的表達(dá)1 、原核表達(dá)體系大腸桿菌是當(dāng)前采用最多的原核表達(dá)體系 ，尚有一些不足之處：缺乏轉(zhuǎn)錄后加工機(jī)制，只能表達(dá)克隆cDNA，不宜表達(dá)真核基因組DNA，缺乏適當(dāng)?shù)姆g后加工機(jī)制，表達(dá)真核蛋白質(zhì)不能形成適當(dāng)折疊或進(jìn)行糖基化修飾；很難表達(dá)大量的可溶性蛋白等。2、真核表達(dá)體系與原核表達(dá)體系比較，真核表達(dá)體系如酵母、昆蟲、哺乳類動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)體系顯示了較大優(yōu)勢(shì)性。常用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法有：磷酸鈣轉(zhuǎn)染、DEAE葡聚糖介導(dǎo)轉(zhuǎn)染、電穿孔法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染及顯微注射。三、基因工程在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物上的應(yīng)用：（一）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的概念 借助基因工程技術(shù)把外源目的基因?qū)肷臣?xì)胞、胚胎

11、干細(xì)胞和早期胚胎，并在受體染色體上穩(wěn)定整合，使之經(jīng)過各種發(fā)育途徑得到能把外源目的基因傳給子代的個(gè)體，即轉(zhuǎn)基因動(dòng)物（transgenic animal）3。轉(zhuǎn)入的目的基因稱為轉(zhuǎn)基因（transgene），這種轉(zhuǎn)移目的基因的過程稱為轉(zhuǎn)基因作用（transgenesis）。關(guān)于“轉(zhuǎn)基因”的概念，通常只限于動(dòng)、植物中經(jīng)基因工程技術(shù)進(jìn)行的基因轉(zhuǎn)移，因此品種間不論有性或無性雜交獲得新基因的途徑都不屬此范疇。（二）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物技術(shù) 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物技術(shù)是20世紀(jì)80年代初發(fā)展起來的一項(xiàng)生物技術(shù)，它克服了物種之間的生殖隔離，實(shí)現(xiàn)了動(dòng)物物種之間遺傳物質(zhì)的交換和重組。根據(jù)外源基因?qū)氲姆椒ê蛯?duì)象的不同，至今主要有3種途徑

12、可以產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，即顯微注射法、反轉(zhuǎn)錄病毒法和胚胎干細(xì)胞法。 1受精卵原核顯微注射法 顯微注射技術(shù)是從動(dòng)物胚胎學(xué)研究移核實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上發(fā)展而來。顯微注射法(microinjection)是指通過顯微操作儀把外源基因注入受體動(dòng)物的受精卵，外源基因整合到受體細(xì)胞染色體上，發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的技術(shù)4。1974年，Jaenisch5應(yīng)用顯微注射法，在世界上首次成功地獲得了SV40 DNA轉(zhuǎn)基因小鼠。1981年，Costantini6將兔一珠蛋白基因注入小鼠的受精卵，使受精卵發(fā)育成小鼠，表達(dá)出了兔一珠蛋白。20世紀(jì)80年代初期人們利用這一方法向動(dòng)物生殖細(xì)胞轉(zhuǎn)移外源基因，成功地建立了轉(zhuǎn)基因小鼠。1985年轉(zhuǎn)

13、基因綿羊和轉(zhuǎn)基因豬問世，以后轉(zhuǎn)基因大鼠、兔、雞、牛、魚等都已陸續(xù)取得成功，可見顯微注射法是迄今應(yīng)用得較為普遍而又最有成效的一種獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的技術(shù)。本方法是在顯微鏡下，用直徑約為1m的玻璃管直接插入受精卵的雄原核內(nèi)，將毛細(xì)管內(nèi)所帶有的外源基因的DNA注入原核，然后將其移植到假孕母體輸卵管或子宮內(nèi)并發(fā)育成子代個(gè)體。為了解轉(zhuǎn)基因的整合情況，可酌情應(yīng)用斑點(diǎn)雜交、多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)或Southern印跡雜交等方法對(duì)子代個(gè)體DNA進(jìn)行檢測(cè)。顯微注射法的優(yōu)點(diǎn)是導(dǎo)入的外源基因片段可長(zhǎng)達(dá)50 kb，且無需載體，外源基因在宿主染色體上的整合率相對(duì)較高。其不足之處是外源基因的整合是隨機(jī)的，因而難以控制其整合率；再者，

14、對(duì)外源基因能否穩(wěn)定整合于受體基因組的檢測(cè)，必須等到子一代個(gè)體出生后經(jīng)過選擇才能確定，不利于在生育期長(zhǎng)、產(chǎn)仔少的大家畜中應(yīng)用。2胚胎干細(xì)胞介導(dǎo)法 胚胎干細(xì)胞（embryonic stem cell，ES）是指從哺乳動(dòng)物胚胎囊胚期內(nèi)的細(xì)胞團(tuán)中分離出來的尚未分化的胚胎細(xì)胞，這種細(xì)胞具有發(fā)育的多能性，能夠分化出各種組織7。20世紀(jì)80年代中期人們開始研究利用ES細(xì)胞獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的方法。這個(gè)途徑是將外源基因直接導(dǎo)入ES細(xì)胞，經(jīng)體外培養(yǎng)篩選后再注入到受體囊胚腔中，與其中的囊胚細(xì)胞聚集在一起，成為受體胚胎的一部分，參與其分化。由這種胚胎發(fā)育而成嵌合體的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，即其中有一部分組織來源于整合有外源基因的供

15、體ES細(xì)胞。在嵌合過程中，被轉(zhuǎn)化的ES細(xì)胞分化而成的生殖細(xì)胞可通過雜交將引入的外源基因傳遞下去。在以胚胎干細(xì)胞為媒介獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的技術(shù)中，既可以用多種方法將外源基因?qū)隕S細(xì)胞，且細(xì)胞的鑒定、篩選比較方便，又可預(yù)先在細(xì)胞水平上測(cè)定外源基因的拷貝數(shù)、定位和表達(dá)的水平以及插入的穩(wěn)定性等，而且將ES細(xì)胞注入囊胚的操作較易進(jìn)行，整合率相對(duì)較高。只是建立ES細(xì)胞系本身就是一項(xiàng)難度極高的工作，目前小鼠ES細(xì)胞系雖已建立，但在豬、羊中還未能得到真正穩(wěn)定的ES細(xì)胞株。3.反轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)移基因反轉(zhuǎn)錄病毒感染法(retrovirus-mediated gene transfer)主要是利用反轉(zhuǎn)錄病毒DNA的長(zhǎng)末端

16、重復(fù)序列(LTR)區(qū)域具有轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子活性這一特點(diǎn)，將外源基因連接到LTR下部進(jìn)行重組后，包裝成高滴度病毒顆粒，直接感染受精卵，或微注入囊胚腔中，攜帶外源基因的反轉(zhuǎn)錄病毒DNA可以整合到宿主染色體上8。反轉(zhuǎn)錄病毒是一類含有RNA的動(dòng)物病毒，它的基因組進(jìn)入寄主細(xì)胞內(nèi)，在反轉(zhuǎn)錄酶催化下合成DNA。反轉(zhuǎn)錄病毒的這種特性說明它有可能是一種天然的轉(zhuǎn)導(dǎo)因子，可經(jīng)人工操作改建為動(dòng)物基因的轉(zhuǎn)移載體。另外，反轉(zhuǎn)錄病毒感染效率高，但卻不會(huì)招致寄主細(xì)胞的死亡，被它感染或轉(zhuǎn)化的動(dòng)物細(xì)胞?？沙掷m(xù)許多世代。反轉(zhuǎn)錄病毒可用作載體的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是其寄主范圍廣泛，包括無脊椎動(dòng)物和脊椎動(dòng)物，其中有的還能夠在人體細(xì)胞中生長(zhǎng)。 （三）轉(zhuǎn)

17、基因動(dòng)物的應(yīng)用 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的研究?jī)?nèi)容非常廣泛，20世紀(jì)8090年代以來從基礎(chǔ)理論到應(yīng)用技術(shù)在深度和廣度上都有了很大發(fā)展，并已日漸由實(shí)驗(yàn)室走向生產(chǎn)實(shí)踐。1在基因表達(dá)調(diào)控研究方面的應(yīng)用 利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物可作為在體內(nèi)研究外源基因表達(dá)調(diào)控的“反應(yīng)器”，下面僅就DNA順式調(diào)控元件和基因在發(fā)育中的時(shí)空調(diào)節(jié)為例予以介紹。（1）順式調(diào)控元件的研究 異常的脂蛋白水平與動(dòng)脈粥樣硬化等疾病有關(guān)。人類有5種脂蛋白，各自含有不同的載脂蛋白?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)約有17種載脂蛋白，它們的編碼基因已測(cè)序，是用于研究心血管疾病的候選基因。把載脂蛋白基因轉(zhuǎn)入小鼠，可用來研究人脂蛋白代謝、調(diào)控以及動(dòng)脈粥樣硬化。在研究載脂蛋白基因組織特異性表達(dá)

18、的順式調(diào)控元件時(shí)，發(fā)現(xiàn)有兩簇載脂蛋白基因凋節(jié)的組織特異性表達(dá)。一簇包括A、C-和 A-基因，定位于人11號(hào)染色體長(zhǎng)臂2區(qū)3帶（11q23），是按A、C、A的順序組成。C的轉(zhuǎn)錄方向與其他兩個(gè)基因相反。 A-和C-主要在肝和小腸中表達(dá)，A-主要在小腸表達(dá)。在 C-基因的-0.2-1.4bp之間是調(diào)節(jié) A基因在小腸中表達(dá)的區(qū)域。這個(gè)區(qū)域也是 C和A基因在小腸表達(dá)的凋控元件，表明這一元件可以調(diào)節(jié)整個(gè)載脂蛋白基因簇在小腸的表達(dá)。另一基因簇定位于19號(hào)染色體長(zhǎng)臂1區(qū)3帶（19q13），包含有E、C和C-基因，它們按E、C、C順序排列。E基因主要在肝臟和大部分身體組織中表達(dá)，但表達(dá)水平低。以后發(fā)現(xiàn)在C基因和

19、C基因之間有一調(diào)控區(qū)可使E基因在肝臟內(nèi)高水平表達(dá)，該區(qū)長(zhǎng)約154 bp。此外，還證實(shí)這個(gè)調(diào)控區(qū)也調(diào)節(jié)該座位其他兩個(gè)載脂蛋白基因 C和 C在肝臟的表達(dá)。（2）與發(fā)育相關(guān)基因的表達(dá)與調(diào)控 用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物可研究基因在發(fā)育中的時(shí)空調(diào)控。珠蛋白基因是研究發(fā)育調(diào)控的最好例子。人類珠蛋白基因分為、兩簇，分別定位于16號(hào)和11號(hào)染色體，各長(zhǎng)30kb和60kb。據(jù)1993年的報(bào)道，為分析完整的-珠蛋白基因中人的珠蛋白基因的開關(guān)調(diào)控，Peterson等把一個(gè)含有248 kb長(zhǎng)的人-珠蛋白基因簇的酵母人工染色體（YAC）轉(zhuǎn)入小鼠。對(duì)轉(zhuǎn)基因小鼠中此基因簇的表達(dá)分析表明，在成年的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中只有人-珠蛋白表達(dá)；在子一代和

20、子二代動(dòng)物中證實(shí)YAC 座位有樣珠蛋白基因的發(fā)育開關(guān)調(diào)控，即在卵黃囊中有-和-珠蛋白基因表達(dá)，在14天的肝臟中有少量和大量表達(dá)，而在成年動(dòng)物中則僅有珠蛋白基因的mRNA表達(dá)。采用先在酵母細(xì)胞內(nèi)通過同源重組的方式使YAC發(fā)生突變，然后把這種突變的YAC導(dǎo)入小鼠，就可以詳細(xì)研究整個(gè)座位上基因的調(diào)控機(jī)制，如珠蛋白基因在發(fā)育與分化中的基因表達(dá)、定點(diǎn)誘變的基因?qū)Πl(fā)育凋節(jié)的影響等等。 除前述有關(guān)基因表達(dá)凋控的研究外，把轉(zhuǎn)基因動(dòng)物用于遺傳病動(dòng)物模型的研制近年來發(fā)展也很快，如把pro-膠原突變基因?qū)胄∈蠡蚪M，可產(chǎn)生類似人的骨發(fā)育不全癥的轉(zhuǎn)基因小鼠，這對(duì)了解人類遺傳病的發(fā)病機(jī)理意義重大。2用于基因產(chǎn)品的制備

21、在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中，導(dǎo)入的目的基因表達(dá)，人們就可以從該動(dòng)物的乳汁和血液里獲得目的基因產(chǎn)物，因此，可把轉(zhuǎn)基因動(dòng)物看作是一種個(gè)體表達(dá)系統(tǒng)（whole animal expression system），以制備某種基因產(chǎn)物。這樣的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物常被稱作動(dòng)物生物反應(yīng)器（animal bioreactor）。1982年P(guān)almiter把大鼠生長(zhǎng)激素基因轉(zhuǎn)入小鼠，成功地獲得高效表達(dá)生長(zhǎng)激素的小鼠，其體積明顯增加，證實(shí)了用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)外源基因產(chǎn)品的可行性。近年來的報(bào)道已證實(shí)在轉(zhuǎn)基因家畜（如豬）的乳腺中可高效合成自身不含有的異源蛋白，如乳清蛋白等。目前，英國(guó)正在研究通過羊-乳球蛋白啟動(dòng)子和乳清蛋白啟動(dòng)子的控制，在轉(zhuǎn)

22、基因羊體內(nèi)表達(dá)人1抗胰蛋白酶和凝血因子；在美國(guó)已有在轉(zhuǎn)基因小鼠、乳羊和乳牛乳汁中分別表達(dá)產(chǎn)生tPA和促性腺素的研究報(bào)道。我國(guó)利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物為反應(yīng)器生產(chǎn)基因制品的工作也在展開，最近有關(guān)單位已從轉(zhuǎn)基因羊乳汁中獲得促紅細(xì)胞生成素。3動(dòng)物品種的培育與改良通過外源基因的導(dǎo)人，改造動(dòng)物的基因組，可達(dá)到使家畜、家禽的生長(zhǎng)速度加快，肉、蛋或奶產(chǎn)量及品質(zhì)提高，飼料利用率提高、抗病力加強(qiáng)的目的。加上體細(xì)胞克隆技術(shù)能使優(yōu)良種畜迅速擴(kuò)群，可在短時(shí)間培育出新品種。對(duì)于動(dòng)物遺傳資源保護(hù)的意義更加深遠(yuǎn)，對(duì)瀕危物種挽救是必不可少的。目前這方面的應(yīng)用也是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物最具經(jīng)濟(jì)開發(fā)前景的領(lǐng)域之一。把具有優(yōu)良性狀的基因或抗病基因?qū)胄?/p>

23、禽以培育新的品種，這是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物研究中的一個(gè)極重要的方面。如已培育出抗雞白細(xì)胞組織增生病毒的轉(zhuǎn)基因雞新品種。丘才良9把一種寒帶比目魚抗凍蛋白基因(AFP)成功地轉(zhuǎn)移到大西洋鮭中，為提高某些魚類的抗寒能力做了積極的嘗試，魏彥章10利用人生長(zhǎng)激素基因構(gòu)建的轉(zhuǎn)基因鯉魚，表現(xiàn)出快速增長(zhǎng)的效應(yīng)。1985年我國(guó)學(xué)者朱作巖在國(guó)際上首次將小鼠MThGH融合基因注入金魚受精卵中，獲得轉(zhuǎn)基因金魚，其F1比轉(zhuǎn)基因魚的同代大兩倍。以后該類實(shí)驗(yàn)中還陸續(xù)獲得其他鯽、鯉等幾種轉(zhuǎn)入生長(zhǎng)激素基因的魚。四、展望基因工程技術(shù)以其巨大的生命力影響著人類的生活 ，并已逐步滲透到人類生活的各個(gè)領(lǐng)域。隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)領(lǐng)域的不斷拓展，在實(shí)驗(yàn)室獲得的新突破和技術(shù)成果不斷地運(yùn)用到生產(chǎn)實(shí)踐中去，創(chuàng)造出更多具有優(yōu)良經(jīng)濟(jì)性狀的不同種類的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，使地球的生物圈變得更加豐富多彩。轉(zhuǎn)基因技術(shù)的出現(xiàn)與發(fā)展為研究動(dòng)物改良、抗病育種方面，探明人類疾病發(fā)病機(jī)理研究以及建立人類遺傳疾病的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型，建立動(dòng)物生物反應(yīng)器來生產(chǎn)天然活性藥物蛋白和基因治療以及生產(chǎn)人類器官代用品等方面極具有開發(fā)潛力，轉(zhuǎn)基因技術(shù)的成熟和推廣將給人類帶來無限光明 。參考文獻(xiàn)：1李立家，肖庚富基因工程 M 北京：科學(xué)出版社，2 0 0 4 ：1 2蘇明學(xué)“基因工程的基本操作程序”的教學(xué)分析與設(shè)計(jì)J生物學(xué)通報(bào)，2009（44）：33基因工程與轉(zhuǎn)基因動(dòng)物J中國(guó)禽業(yè)導(dǎo)刊。2001（