大孔樹脂分離丹參酚酸B篩選探究

1、大孔樹脂分離丹參酚酸b篩選探究【關(guān)鍵詞】丹酚酸b；,高效液相色譜法；，大孔樹脂 論文代寫摘要：目的篩選分離丹酚酸b的最佳大孔樹脂。方 法以高效液相色譜(hplc)測(cè)得丹酚酸b含量為指標(biāo)，對(duì) 10種不同型號(hào)的樹脂分別進(jìn)行吸附與解吸性能考察。結(jié)果大 孔樹脂的吸附與解吸性能有較大差異，hpd450, d101, x5, hpd800, d4020, hpd700對(duì)丹酚酸b均有較強(qiáng)的吸附與可洗 脫性，d101為最佳吸附樹脂。結(jié)論大孔樹脂分離丹酚酸b 方法是可行的。關(guān)鍵詞：丹酚酸b；高效液相色譜法；大孔樹脂丹酚酸(salvianolic acids )是中藥丹參salvia miliiorrhiza b

2、ge.中的主要活性成分，具有抗動(dòng)脈粥樣硬 化、保護(hù)心肌細(xì)胞、防心腦缺血損傷、抗血小板凝聚、抗肝 纖維化、改善記憶、抗腫瘤等作用1, 2。丹參藥材中水 溶性成分提取，多以丹參素或原兒茶醛為指標(biāo)3, 4,但 兩者在藥材中的含量均較低，只有丹酚酸b為丹酚酸中最主 要的有效成分5。目前對(duì)丹酚酸分離多采用醋酸乙酯萃 取法，但該種方法溶劑消耗大，并存在溶劑殘留。大孔樹脂 吸附是目前用于許多有效成分分離的良好方法，成本低、效 率高，但至今尚無篩選大孔樹脂分離丹酚酸b的報(bào)道。本人 就大孔樹脂對(duì)丹參酚酸b的吸附與解吸性能進(jìn)行綜合考察， 以期找到一種分離丹參酚酸b的最佳大孔樹脂。1材料與儀器1. 1材料與試藥丹參

3、藥材，湖北產(chǎn)，601減壓干燥后，粉碎過40目 篩。大孔樹脂:hpd450 （弱極性）、hpd600 （極性）、hpd700 （非極性）、hpd800 （中極性）（河北滄州寶恩化工有限公司）、 d101 （非極性）（天津海光化工有限公司）、d4020 （非極性）、 ab8 （弱極性）、x5 （非極性）、s-8 （極性）、nka9 （極性）（南 開大學(xué)化工廠）。乙睛為色譜純；甲醇、甲酸為分析醇； 丹酚酸b對(duì)照品（中國 藥檢所，批號(hào)20031108）o1. 2 儀器 分離色譜柱（20 mmx500 mm）； agilent 1100 高效液相色譜儀，紫外檢測(cè)器，色譜柱kromasil c18（250

4、 mmx4. 6 mm） /5 u m02方法2. 1丹參提取液的制備丹參藥材粉，加10倍量70% 乙醇50°c浸提1 h,過濾后濾渣再加8倍量70%乙醇50°c浸 提30 min,合并濾液，減壓濃縮至原體積的1/3,用10%hcl 調(diào)ph至3.0,靜置，離心去沉淀(4 000 r&#12539；minl)o 保留上清液，并測(cè)定其中的丹酚酸b含量。畢業(yè)論文2.2大孔樹脂吸附各種大孔樹脂經(jīng)乙醇、5%鹽酸和 5%氫氧化鈉順序浸泡35 h后，以水洗至ph中性。量取丹 參提取液100 ml各10份，分別加入hpd450,hpd600,hpd700, hpd800, d101

5、, d4020, ab8, x5, s8, nka9 樹脂 10 g,靜 態(tài)吸附24h。過濾，濾液測(cè)定丹酚酸b含量，計(jì)算 吸附率。 論文代寫2.3樹脂解吸吸附后的樹脂,分別用水、30%, 50%, 70%乙醇各100 ml淋洗，收集淋洗液，測(cè)定丹酚酸b含量， 計(jì)算各溶液解吸率。解吸率為解吸量占吸附量的百分率。2.4丹酚酸b的含量測(cè)定采用高效液相色譜法。流動(dòng)相：乙睛：甲醇：水：甲 酸(20 ： 55 ： 24 ： 1),柱溫30°c,進(jìn)樣量10 nl,流速1 ml&#12539；minl,運(yùn)行時(shí)間20 min,檢測(cè)波長(zhǎng)276 nmo丹 酚酸b的保留時(shí)間為15.3 min,分離度

6、大于2. 0,理論塔 板數(shù)不低于5 000o.4. 1標(biāo)準(zhǔn)曲線制備精密稱定丹酚酸b對(duì)照品23 mg,水溶解并定容50 ml。 分別吸取對(duì)照液 0, 0. 31, 0. 62, 1.25, 2. 5, 5, 10ml,加水定容至 10 ml,分別得到 0, 0.014 4, 0. 028 8, 0. 057 5, 0. 115, 0.230, 0. 460 mg&#12539；mll 對(duì)照液梯度，進(jìn)樣高 效液相色譜儀。以峰面積x為橫坐標(biāo)，濃度y為縱坐標(biāo)，繪 制標(biāo)準(zhǔn)曲線。y二0.000 106x+0. 005 464, "0.999 9。表明 丹酚酸b在00460 mg&

7、# 12539；mil范圍內(nèi)具有良好的線性 關(guān)系。2. 4.2樣品測(cè)定吸取樣液2 ml,加水溶解并定容至100 mlo過濾，濾液過045 y m微孔濾膜，進(jìn)樣高效液相色譜儀，按標(biāo)準(zhǔn)曲線制作 方法 測(cè)定峰面積,計(jì)算樣液的丹酚酸b含量。3結(jié)果3. 1各種樹脂對(duì)丹酚酸b的吸附性能比較經(jīng)測(cè)定， 丹參提取液的丹酚酸濃度為24. 056 mg&#12539；mll,各種 樹脂對(duì)其均有吸附，吸附率均在70%以上。在所試樹脂中， 除ab8和nka9外，其它均表現(xiàn)良好的吸附性，吸附率大于 90%o結(jié)果見表lo吸附能力排序?yàn)?d101&gt； s-8&gt；hpd700&gt； h

8、pd450&gt； hpd800&gt； x5&gt；d4020&gt；hpd600&gt； ab8&gt； nka9o表1不同樹脂對(duì)丹酚酸b的吸 附與解吸率（略）3.2各種樹脂的解吸性能s8和nka9樹脂在低醇洗脫液下即解吸大部分，而其它樹脂較少解吸，只有提高乙醇濃 度50%以上才有較多的解吸。總解吸率排序?yàn)椋篽pd450&gt； d101&gt；x5&gt；hpd800&gt；d4020&gt；hpd700&gt；hpd600&gt； ab8&gt； nka-9 &gt；

9、s8o 各種樹脂對(duì)于解吸所 需醇濃度有較大差異，如d101和hpd450在50%以上才有較 大解吸，而d4020在50%醇濃度以下即有較大解吸。綜合解 吸與吸附能力，除hpd600, ab8, nka9, s8外，其它均可 作為丹酚酸b的分離用樹脂，d101為最佳吸附與解吸樹脂。 畢業(yè)論文4討論4. 1大孔樹脂法作為分離丹酚酸b的方法是方便可行 的，通過吸附可將提取液中的酚酸b富集，通過不同濃度醇 洗脫，可得到不同純度的丹酚酸b產(chǎn)品。由于樹脂可再生， 因而可反復(fù)使用，故而是分離丹酚酸b的良好方法。4.2本實(shí)驗(yàn)對(duì)丹酚酸b的吸附和解吸進(jìn)行了靜態(tài)考 察，通過吸附解吸，篩選出適合的樹脂。但為了結(jié)合生產(chǎn), 采用大孔樹脂柱，提取液的吸附和解吸處在流動(dòng)狀態(tài)下，其 參數(shù)有所變化，因此下步實(shí)驗(yàn)中需進(jìn)一步考察大孔樹脂對(duì)丹 酚酸b的動(dòng)態(tài)吸附狀況。論文代寫參考文獻(xiàn)：論文代寫1 林佳，徐麗珍，李琰，等.不同產(chǎn)地丹參中 丹參酮iia的含量比較j.中國中藥學(xué)雜志，2002, 27(2):153.2 吳世蓉.不同產(chǎn)地丹參其主要化學(xué)成分的分離 與測(cè)定j 基層中藥雜志，2002, 16(3):24.畢業(yè)論文3 黃詒林，張均田.丹參中三種水溶性成分的體