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1、大果山楂黃酮提取物對四氯化碳致大鼠慢性肝損傷 的保護作用 09-09-10 10:07:00 作者:潘瑩, 張林 麗 編輯:studa20 ;一;【摘要】 目的研究大果山楂黃酮提取物對大鼠實驗性慢性肝損 傷、肝纖維化的預防作用,并探討其作用機制。方法采用 40% CCI4 皮下注射 制備肝纖維化大鼠模型,分別用 3 種不同濃度的大果山楂黃酮提取物進行干 預,觀察檢測大鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、血清白蛋白與血 清球蛋白的比值、肝組織勻漿超氧化物歧化酶 (SOD)和丙二醛(MDA 含量以及肝 組織病理學變化。結果大果山楂黃酮提取物預防給藥能降低 CCl4 所致大鼠血清 中異
2、常增高的 ALT, AST 升高 CCl4 所致大鼠血清中異常降低的 A/G 比值;大 果山楂黃酮提取物預防給藥能使肝損傷大鼠肝勻漿異常降低的 SOD 含量上升, 異常增高的 MDA 含量下降;光鏡下觀察肝纖維化模型組大鼠肝細胞嚴重變性、 壞死,膠原纖維明顯增加,大果山楂黃酮提取物預防各組大鼠肝細胞病理損傷 得到明顯改善。結論大果山楂黃酮提取物對大鼠實驗性肝損傷具有一定程度的 預防作用和抗肝纖維化作用。 【關鍵詞】 大果山楂黃酮提取物 肝纖維化 谷丙轉(zhuǎn)氨酶 谷草轉(zhuǎn)氨酶 白蛋白 球蛋白超氧化物歧化酶丙二醛 Abstract:ObjectiveTo study the an ti-hepatofi
3、brotic effect of the Malus doumeri(Bois)Chev. flav ono ids extract ion on experime ntal hepatic fibrosis and its mecha ni sm.MethodsThe hepatic fibrosis rat model was developed by subcuta neous injectio n of 40 % CCl4 (5 ml/kg) and rats were treated with extract of Mdf at 1.5g/ (kg d) , 0.75/ (kg d)
4、 or 0.38/ (kg d) . Ala nine aminotran sferase(ALT),aspartate ami notra nsferase(AST),Albumi n( A),globuli n( G)levels were measured and pathological cha nges after of liver tissue was exam ined HE sta inin g.ResultsThe extract of Mdf could reduce the serums levels of ALT and AST, i ncrease the hepat
5、ic ratio of A/G,i ncrease the activity of superoxide dismutase and reduce the level malondialdehyde Examined by light microscope ,the degeneration and n ecrosis level of hepatocytes and the distributi on of collage n fibrosis were markedly in creased in the model group. The extract of Molf could sig
6、 nifica ntly alleviate pathological cha nges and the collage n fibrosis.C on clusio nThe extract of Mdf can protect hepatocytes from injury and preve nt the progressi on of hepatic fibrosis in rats. Key words:Malus doumeri(Bois)Chev. flav ono ids extract ion; Hepatic fibrosis; Ala nine Aminotransfer
7、ase; Aspartate Aminotransferase; Albumin; Globulin ; Superoxide dismutase ; Malondialdehyde 大果山楂為薔薇科青蘋果屬臺灣林檎的干燥成熟果實 , 性味甘、酸、 澀、微溫 ,有理氣健脾、消食導滯之功效 , 在廣西作為山楂習用已有八十多年的 歷史, 已知其化學成分有維生素、鞣質(zhì)、萜類、苷類、黃酮類、酚類和微量元素 其中黃酮含量豐富 ,是中藥山楂的 2 倍多 1。已知某些黃酮類成分具有很好 的保肝作用 , 因此本文從保肝的角度,研究了大果山楂黃酮提取物對大鼠實驗性 慢性肝損傷、肝纖維化的預防作用,觀察了大果山楂
8、黃酮提取物對 CCl4 誘發(fā)大 鼠實驗性慢性肝損傷、肝纖維化的影響?,F(xiàn)報道如下。 1 器材與方法 1.1 動物 Wistar 大鼠 60 只,雌雄各半,體重 (18020) g, 由廣西中醫(yī)學院動物實 驗中心提供 , 桂醫(yī)動字第 11004 號。 1.2 試劑與藥品 大果山楂 Malus domeri(Bois)Chev., 購自廣西賀州,經(jīng)廣西區(qū)藥品檢驗所 黃燮才專家鑒定為薔薇科蘋果屬植物臺灣林檎的干燥成熟果實;大果山楂總黃 酮提取物,自行提取。四氯化碳 (CCl4) 淮南化學試劑。臨用前以花生油調(diào)和按 體積比配成 40 CCl4 溶液。秋水仙堿,由云南西雙版納制藥廠生產(chǎn),批準文 號:國藥準
9、字H53021369 將秋水仙堿片研碎用蒸餾水配成 0.02 mg/ml 混懸 液, 用作陽性對照藥物。ALT 試劑盒、AST 試劑盒、白蛋白試劑盒、總蛋白試劑 盒,伊利康生物技術有限公司生產(chǎn) , 批號分別為 060305, 060407, 060503, 060517。超氧化物歧化酶(SOD)丙二醛(MDA)測試盒,南京建成生物工程研究所 產(chǎn)品 , 批號 20060701。 1.3 儀器 JY9222D 超聲波細胞粉碎機(寧波新芝科器研究所);UV22100 分光光度計(日 本島津); 電熱恒溫水浴鍋 (上海醫(yī)療器械五廠生產(chǎn) )。 1.4 方法 2Wistar 大鼠 60 只,雌雄各半,體重
10、 (18020) g ,隨機分為 6 組: 空白對照組 (10 只) ,肝纖維化模型對照組 (10 只),秋水仙堿陽性對照組 (10 只),大果山楂總黃酮提取物預防低、中、高劑量組各 10 只。普食普水飼養(yǎng) 1 周后開始造模,除空白對照組外其余各組以 40 CCl4 花生油溶液腹部皮下注 射,首次 5 ml/kg ,以后 3 ml/kg , 2 次/周,連續(xù)注射 8 周。造模前兩天開 始灌胃給藥或蒸餾水,一直持續(xù)到實驗結束,1 次/d,劑量為:空白組和模型 組灌以蒸餾水10 ml/(kg d);秋水仙組灌以秋水仙堿 0.2 g/(kg d);大果山 楂總黃酮提取物預防低、中、高劑量組分別灌以大果山楂總黃酮提取物 1.5,0.75, 0.38 g/(kg d),逐日觀察大鼠活動、進食量、毛色等情況。 8 周 末各組大鼠于末次灌胃 24 h 后取材、處死。每只大鼠摘眼球法取血約 3 ml, 裝入預先滴有肝素 50 卩 I 的 EP 管中,以 3 000 r/min 離心 10 min,取上清 液,賴氏法測定血清 ALT, AST 測 SOD MDA 取血完畢后處死大鼠,立刻剖開 腹腔,暴露肝臟,取肝右中央葉約 0.5 c
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