獸醫(yī)病理生理學實驗指導

1、家畜病理生理學實驗指導獸醫(yī)專業(yè)用中國農(nóng)業(yè)大學編目 錄緒論3實驗一 發(fā)熱 10實驗二 肺水腫 12實驗三 乏氧性缺氧和中毒性缺氧 13實驗四 應激對耗氧量的影響 15實驗五 實驗性休克 17實驗六 急性心機能不全 20實驗七 彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）22緒 論一、概 述 家畜病理生理學是一門研究家畜患病時機能變化的實驗性科學。為了研究患病機體機能變化和確定其病理過程的發(fā)生原因、發(fā)生機理、經(jīng)過和轉歸的一般規(guī)律性，廣泛地應用著動物實驗的研究方法，此外也應用臨床觀察及實驗治療的方法。動物實驗是在動物身上人工造成各種生命活動障礙，各種病理過程，并控制及改變其持續(xù)和經(jīng)過，仔細觀察記錄其變化，以求更深刻地

2、分析疾病現(xiàn)象的因果關系及其發(fā)生、發(fā)展、經(jīng)過和轉歸規(guī)律的可能性。今日病理生理學的重大成就，大多是從動物實驗中獲得的，因而說病理生理學是一門實驗性科學。疾病是很復雜的，為了要闡明疾病過程的基本規(guī)律，在實驗中又常常把疾病簡化，分出其主要和次要方面，前者常常受到人們的重視。 動物實驗有急性和慢性的區(qū)分。急性實驗是動物經(jīng)過麻醉后，進行一般實驗外科手術，找出血管或神經(jīng)，打開腹腔或胸腔，再以病原因子作用于機體，這時使用一定的儀器記錄各臟器的機能活動，如描記血壓、呼吸、臟器的體積變化、腺體的分泌滴數(shù)等。實驗完畢后動物即死去。慢性實驗則是先給動物施行一定的無菌外科手術，以創(chuàng)造實驗條件，待其手術完全恢復健康后再進

3、行實驗和觀察。這樣就避免了因急性實驗時使動物處在將死亡的，不合乎正常生活條件的或者因麻醉而改變了神經(jīng)機能活動和器官機能活動狀態(tài)的缺點，而獲得較近似正常生活條件下的機能活動的規(guī)律，使其所得到的實驗成果更富有臨床醫(yī)學的實踐意義。然而，也必須說明，慢性實驗是屬于綜合性研究方法，而急性實驗是分析性研究方法，若當須綜合某些材料時，常須事先掌握足夠的已分析研究好了的局部性材料，故慢性實驗常需要急性實驗的配合。 病理生理學的研究常采取慢性實驗及臨床觀察的方法，但在教學實驗中，由于時間及設備條件的限制，以及學生所掌握的知識不足，通常較多地運用急性實驗方法。 （一）病理生理教學實驗目的和任務除了驗證課堂講授的部

4、分理論，加深理解外，更主要的是培養(yǎng)學生初步具有研究實驗性疾病的技能，為今后臨床醫(yī)學研究打下基礎。此外還可以為人類疾病提供動物模型：（1）使學生初步掌握復制家畜疾病小動物模型、人類疾病動物模型的基本方法，觀察、記錄、分析實驗結果，書寫實驗報告；（2）訓練學生作實驗設計的技能；（3）培養(yǎng)學生嚴謹?shù)目茖W態(tài)度。 （二）病理生理學實驗課的要求1實驗前（1）認真預習實驗指導，了解實驗的目的、方法和操作步驟。（2）復習實驗都分有關理論。（3）檢查實驗器材和藥品是否齊全。（4）小組成員應有明確分工，但同時應重視合作，使每人都能得到應有的技能訓練。2實驗時（1）應確立嚴謹、誠實的科學態(tài)度，正規(guī)和準確的技術操作，

5、耐心、細致地觀察實驗中出現(xiàn)的每個現(xiàn)象，而且要準確、及時、客觀地記錄。整個實驗過程都不得敷衍、馬虎和主觀臆測。（2）必須伴隨整個實驗過程進行科學思維，力求了解每個步驟和每個現(xiàn)象的意義。（3）要注意盡量減少對實驗動物的不必要損傷。使用藥品應注意節(jié)約。 3實驗后（1）認真整理和分析實驗結果。（2）儀器和藥品用完后要清點，并放回原處。應清洗者必須及時清洗干凈。每個實驗組，應保持自己桌面的清潔，課后打掃、整理好實驗室。（3）按時完成實驗報告。 （三）實驗報告內(nèi)容的書寫和項目的要求1姓名、班次、組別、日期。2實驗項目。3實驗目的。4實驗動物 包括種類、數(shù)量、性別、體重。5實驗方法 簡要寫出主要實驗方法。若

6、實驗操作改動較大時，應詳細敘述。6實驗結果 根據(jù)實驗目的將原始記錄系統(tǒng)化、條理化，表達方式一般有三種。 （1）敘述式 用文字將觀察到的、與實驗目的有關的現(xiàn)象客觀地加以描述，描述時需要有時間概念與順序。 （2）表格式 能夠較為清楚地反映觀察內(nèi)容，有利于相互對比。每一圖表應說明一定的中心問題。圖表應由學生自已設計。表內(nèi)的項目及計量單位應說明。 （3）曲線式 實驗中描記的血壓、呼吸等曲線應寫于實驗報告中。書寫時，須原始的描記圖，取其明顯變化的有關各段連接而成。7實驗結果分析或討論 由于實驗指導中的每一個實驗，都是已進行了大量實驗的結果。學生所作實驗，次數(shù)雖少，若與這結果一致，即可作為分析的依據(jù)。討論

7、包括：（1）以實驗結果為依據(jù)，論證實驗目的；（2）實驗結果提示了哪些新問題，如果出現(xiàn)“異?，F(xiàn)象”，應加以分析。二、疾病實驗性研究中實驗設計的若干問題 關于病理生理學所常用的動物（兔、豚鼠、大鼠、小鼠、貓、猴、狗、羊等），其基本知識和實驗基本操作（包括動物的捉拿和固定方法，動物被毛的去除方法，動物給藥途徑和方法，動物的麻醉方法，動物的取血方法，急性動物實驗中常用的手術方法，常用測量：指標及測量方法以及實驗動物的處死方法等等）都能在動物生理學實習指導和動物藥理實習指導書籍中查閱到，本實習指導由于篇幅的限制，就不加以贅述。但是對于疾病實驗性研究中實驗設計存在的若干問題則須詳細討論。 根據(jù)高等獸醫(yī)院校

8、培養(yǎng)目標要求，應培養(yǎng)學生初步具有疾病實驗性研究的能力。困此，可通過每一個實驗或通過學生自行設計實驗逐步培養(yǎng)學生初步懂的疾病實驗性研究中實驗設計的若干問題。這對于提高教學質量來說，是十分必要的。 實驗設計是根據(jù)科學研究中選題、假說和誤差控制等基本問題的要求，對科學實驗做出合理的安排，從而有效地引出結果和結論。設計是否嚴謹直接關系到實驗結果的準確性和結論的可靠性。不重視實驗設計或設計不周密都會造成實驗損失或導致實驗失敗。 新課題的科學實驗或初做科學實驗，很難一開始就做出周密的設計。因此常要求進行預備試驗。預備試驗是根據(jù)研究者的“原始假說”作初步探索，也是對“原始假說”作非正式的驗證。同時也是對初步

9、確定采用的實驗方法和操作步驟進行演習。根據(jù)預備試驗結果（包括經(jīng)驗教訓），對原始假說、實驗方法和技術操作必要的修正，為正式實驗設計鋪平道路。 經(jīng)預備試驗后就應該進行正式的實驗設計。實驗設計涉及各方面，力求全面、周密和嚴謹?，F(xiàn)擇幾個基本問題分述如下。 （）實驗對象的選擇在疾病實驗性研究中，實驗對象主要是實驗動物。實驗動物選擇合適與否與實驗成敗及誤差大小有很大關系。其選擇要點是：（1）選擇經(jīng)濟價值較低的動物種類；（2）根據(jù)實驗要求選擇動物品種和純度，最好用純系動物；（3）動物必須是健康的、營養(yǎng)狀況良好的；（4）最好選用年齡一致或接近的并體重一致或相近的動物，一般選擇發(fā)育成熟的年輕動物；（5）動物的性

10、別最好相同，如對性別要求不高的實驗可雌雄動物混用，分組時應雌雄搭配開，與性別直接有關者，只能用某種性別的動物。（二）對照和分組一般來說，實驗都應當有實驗組和對照組，對照組與實驗組具有同等重要意義。任何摒棄、輕視對照組的觀點和做法部是十分有害的。因為在實驗中很難避免非實驗因素的干擾而造成的誤差，用對照組的方法就可有效地消除各種非實驗因素的干擾所造成的誤差。 對照可分為：（1）同體對照，即同一動物實驗前后實驗結果及數(shù)據(jù)的對照；（2）異體對照，即設立對照組；（3）不完全對照，即以文獻資料或歷史的、他地的、他人的資料作對照，但由于時間、地點和條件不同，差異是相當大的，動物實驗一般不采用。 實驗組與對照

11、組應遵守一致性原則，兩組只允許在被研究動因方面不同，在實驗對象、實驗者、實驗條件、環(huán)境、時間及儀器、藥品等其他方面應力求一致。只有這樣，才能消除實驗誤差。兩組的例數(shù)應相等或相近似（在計數(shù)指標，每組不應少于30例；在測量指標每組不能少于5例，10-20例較好），切忌隨意減少對照組的例數(shù)。分組時為避免主觀性因素，可采用隨機抽樣的方法。 （三）觀察的指標指標是在實驗觀察中用來指示（反映）研究對象中某些特征（如藥物的效應）可被研究者或儀器測知的一種現(xiàn)象標志。也就是說，動物醫(yī)學實驗指標，是反映試驗對象所發(fā)生的生理現(xiàn)象或病理現(xiàn)象的標志。指標可分為計數(shù)指標和測量指標，或主觀指標和客觀指標，等等。所選定的指標

12、，至少要合乎下述基本條件。 1特異性 指標應特異地反映所觀察的事物（現(xiàn)象）的本質，即指標能特異地反映某一特定的現(xiàn)象，不至于與其他現(xiàn)象相混淆。如氨中毒時血液中氨濃度顯著升高可作為氨中毒的特異指標。 2客觀性 最好選擇可用具體數(shù)值或圖形表達的指標（如腦電圖、心電圖、血壓和呼吸描記、化驗檢查等）。因為主觀指標（如肝脾觸診、目力比色等）易受主觀性因素的影響而造成較大的誤差。 3重現(xiàn)性 一般來說，客觀性指標在相同條件下可以重現(xiàn)。重現(xiàn)高的指標一般意味著無偏性或偏性小，誤差小，從而較正確地反映實際情況。重現(xiàn)性的大小可能與儀器穩(wěn)定性、操作誤差、受試動物的機能狀態(tài)和實驗環(huán)境條件影響有關。如受這些因素影響而重現(xiàn)性

13、小者，此指標不宜采用。 4靈敏性 指標測量的技術方法或儀器靈敏度是極其重要的。所采用的技術方法不靈敏，該測出的變化測不出來，就會得出“假陰性結果”；儀器不精密，所得陰性數(shù)值則不真實。目前常用的分光光度法、放射免疫法以及酶標法等，因為靈敏度較高常被采用。 5技術和設備的可能性 盡量選用既靈敏客觀，又切合本單位和研究者技術和設備實際的指標。 6指標選定必須有依據(jù) 現(xiàn)成（定型）指標，必須有文獻依據(jù)，自己創(chuàng)立的指標必須一經(jīng)過專門的實驗鑒定。 （四）結果觀察和記錄觀察和記錄在科學實驗活動中占有十分重要的地位。為了正確地觀察和記錄，實驗者在技術上應明確實驗目的要求，熟悉所使用的技術或儀器設備；觀察記錄時要

14、嚴謹、細致，實事求是，力戒主觀片面性。 要重視原始記錄，在實驗設計中應預先規(guī)定或設計好原始記錄方式。原始記錄方式有：文字、數(shù)字（手寫或打?。⒈砀?、圖形、照片、影片和錄像帶等。原始記錄要及時、完整、精確和整潔，嚴禁撕頁或涂改。并要保持原始性，切不可用整理后的記錄來代替原始記錄。 原始記錄不管是什么記錄方式，都一定要寫明：實驗題目、實驗對象、實驗方法、實驗條件、實驗者、實驗日期，記錄好觀察測量的結果和數(shù)據(jù)。規(guī)定填好的項目一定要及時完整、正確的填寫。圖形、圖片一定要整理保存。 （五）實驗結果的數(shù)據(jù)處理、分析和判斷研究者不應局限于取得原始資料或數(shù)據(jù)，而且要應用數(shù)理統(tǒng)計學的原理和方法來處理數(shù)據(jù)和對數(shù)據(jù)

15、進行分析判斷。 首先必須把原始數(shù)據(jù)或資料系統(tǒng)化，計算出各組數(shù)據(jù)的均值或百分數(shù)。如是計數(shù)指標，一般用百分數(shù)表示，若為測量指標，則計算出均值，最好標明均數(shù)和標準差，進而標明均數(shù)的標準誤。 其次進行統(tǒng)計學的顯著性測驗。如需作顯著性測驗時，請參看統(tǒng)計學原理。 分析和判斷實驗結果時，不能按照研究者的偏見去抽樣比較，或者在計算百分數(shù)或均數(shù)時任意舍取。研究者必須實事求是，不能強求實驗結果服從自己的假說，而應根據(jù)實驗結果去修正假說，使假說上升為結論或理論。 三、常用實驗動物的正常生理生化數(shù)值和常用非揮發(fā)性麻醉劑的用法及劑量 為了學生查閱方便，本實驗指導介紹下列常用實驗動物的正常生理生化數(shù)值和常用非揮發(fā)性麻醉劑

16、的用法及劑量，分別列于表1和表2。 表1 常用實驗動物的正常生理生化數(shù)值動物兔大鼠小鼠狗山羊壽命（年）4-92-32-310-2017性成熟期（日）120-24060-7535-60180-300180-300成年體重15kg以上雌150g，雄250g以上20g以上8-20kg30-50kg體溫（直腸）38.5-4037.5-3936.5-3937-39385-39.7心率（次/分）120-150200-360520-78080-13070-80呼吸（次/分）38-8066-15084-23020-3010-20血壓（mmHg*）90-13070-18493-138108-18950-130血

17、色素（g）7.1-15.512.0-17.810-1910.5-207-14紅細胞（百萬/mm3）4.0-6.47.2-9.67.7-12.55.5-8.515.0-19.0白細胞（千/mm3）5.2-125.0-25.04.0-12.06-179.6血小板（萬/mm3）12-2510-13815.7-1522.0-303.4-6.0血液pH7.21-7.577.26-7.447.31-7.427.25-7.35總血量（占體重）5.465.76-6.947.788-96-7血非蛋白氮（mg）28-5120-4436-11720-4430-44血清鉀（mEq/L）2.7-5.13.8-5.43.

18、7-5.02.45-4.11血清鈉（mEq/L）155-165126-155129-149141-157血清鈣（mEq/L）5.6-8.03.1-5.33.8-6.44.5-6血清氯（mEq/L）92-11294-110104-117100-125血清膽紅素（mg）0.10.1-0.30.1-0.30.10尿比重1.010-1.0501.020-1.0501.025-1.070重要臟器重量（占體重）腦0.401.220.590.26心0.350.760.500.850.4-0.55肺0.531.340.940.91腎0.700.320.880.30肝3.191.655.182.941.8-2脾

19、0.940.150.38甲狀腺0.0220.0160.020.08腎上腺0.020.050.010.08*1 mmHg=133.322Pa表2 常用非揮發(fā)性麻醉劑的用法及用量藥名動物注入途徑劑量（g/kg）安密妥鈉狗、兔、貓腹腔內(nèi)注射肌肉內(nèi)注射直腸內(nèi)灌注靜脈內(nèi)注射0.08-0.10.08-0.10.1（10%溶液）0.04-0.05（10%溶液)鼠腹腔內(nèi)注射0.1（10%溶液）巴比妥鈉狗靜脈內(nèi)注射0.225貓、兔腹腔內(nèi)注射0.2鴿腹部肌肉注射0.182鼠皮下注射0.2水合氯醛狗、貓靜脈內(nèi)注射腹腔內(nèi)注射0.1-0.150.25-0.3兔直腸內(nèi)灌注靜脈內(nèi)注射1.0（5% 溶液）0.05-0.075

20、戊基巴比妥鈉狗、貓、兔、鼠皮下注射腹腔內(nèi)注射0.040-0.050.040-0.05狗靜脈注射0.03鳥類肌肉內(nèi)注射0.05-0.1硫苯妥鈉狗、貓、兔靜脈內(nèi)注射0.025-0.05（2.5-5%溶液）苯巴比妥鈉狗、貓靜脈內(nèi)注射腹腔內(nèi)注射0.08-0.10.08-0.1兔腹腔內(nèi)注射0.15-0.2鴿肌肉內(nèi)注射0.03氨基甲酸乙酯兔、貓靜脈內(nèi)注射腹腔內(nèi)注射0.75-1.00.75-1.0鴿肌肉內(nèi)注射1.25蛙皮下（淋巴囊）注射2.0（25%溶液）實驗一 發(fā)熱（一）實驗目的通過復制發(fā)熱與單純體溫升高模型，觀察發(fā)熱和單純體溫升高時體溫、皮溫、呼吸頻率等的變化，搞清發(fā)熱和體溫升高的概念及其區(qū)別。（二）

21、實驗原理 動物體在多種因素的作用下（如細菌、病毒的感染，腫瘤等），能產(chǎn)生并釋放內(nèi)生性致熱源。后者作用于丘腦下部體溫調(diào)節(jié)中樞，使調(diào)定點上移，從而引起一系列神經(jīng)-體液反應，使體溫升高。本試驗通過注射內(nèi)生性致熱源所引起的發(fā)熱和單純由于散熱障礙所引起的體溫升高，觀察它們的體溫和皮溫等變化規(guī)律，比較它們的異同。（三） 實驗動物 成年家兔（四） 實驗器材與藥品 內(nèi)生性致熱源生理鹽水溶液，凡士林，半導體溫度計，體溫表，嬰兒稱，小棉墊，20 ml注射器，坐標紙等。（五）實驗方法1、 取體重相似的家兔2只，分別稱重。2、 分別用體溫表測直腸溫度，用半導體溫度計測兩耳皮溫，每15分鐘測一次，共3次。3、 將一只家

22、兔從耳緣靜脈注入內(nèi)生性致熱原生理鹽水溶液，劑量為10 ml/kg。注射后，每隔15分鐘測直腸溫度、耳皮溫一次，并觀察兩耳血管狀態(tài)、呼吸等，持續(xù)2小時。4、 將另一只家兔固定在40的恒溫兔臺上，蓋上棉墊（將頭露出）。每隔15分鐘測直腸及耳皮溫一次，并觀察耳血管、呼吸等狀態(tài)，持續(xù)2小時。5、 揭去棉墊，停止加熱，并將兔放開，再每隔15分鐘測直腸及耳皮溫一次，觀察耳血管、呼吸等變化，持續(xù)3分鐘。（六）實驗注意事項1、 測直腸溫度時，體溫表頭上應涂少許凡士林。每次插入直腸內(nèi)的深度應一致，一般以5 cm為宜。2、 測耳、皮溫的位置應固定。3、 注射內(nèi)生性致熱原的兔切忌捆綁。（七）討論以時間為橫坐標，溫度

23、為縱坐標，畫出兩兔耳皮溫和直腸溫度的變化曲線，比較兩者有何區(qū)別？為什么？附錄：內(nèi)生性致熱源生理鹽水溶液的制備方法1、 取體重2 kg以上的家兔1只，仰臥固定于兔臺上，于下腹部剃毛消毒。在下腹正中避開膀胱處。向腹腔滴注（每分鐘約2 ml）無污染生理鹽水，每公斤體重100 ml。為了防止感染，每毫升生理鹽水中加入青霉素60單位，鏈霉素0.8 mg.2、 滴注完畢，兔繼續(xù)固定2小時，然后將腹腔液吸入經(jīng)熱原處理的瓶內(nèi)，儲存于冰箱中（4）備用。實驗二 肺水腫（一） 實驗目的 通過實驗了解水腫的發(fā)生機理以及組織內(nèi)壓與水腫之間的關系。（二） 試驗原理正常的組織內(nèi)壓是負的（約- 6.5 mmHg左右），這種負

24、壓是不致有過多的液體在組織間隙中積聚的保證。一旦組織內(nèi)壓從負壓變?yōu)檎龎海瑒t會導致水腫的發(fā)生。常見的原因有：細胞外液容量的積聚增加，微血管通透性增高，毛細血管流體靜壓增高，血漿膠體滲透壓下降，淋巴回流減少等，這些因素的一個一個或幾個能使組織內(nèi)壓變?yōu)檎担瑥亩l(fā)生水腫。（三） 實驗動物體重相仿的家兔3只。（四） 實驗器材與藥品腎上腺素、油酸、生理鹽水、天平、5 ml注射器、剪刀、鑷子、細絲線、濾紙等。（五） 實驗方法1 取3只兔子稱重，并觀察其呼吸、心率等狀態(tài)。2 將其中的一只兔子，耳緣靜脈注射腎上腺素。另一只按0.5 ml/kg體重耳緣靜脈注射油酸，注射后立即注意觀察呼吸、心率等狀態(tài)。3 兔子死

25、后，打開胸腔，用線在氣管分叉處結扎，在結扎處上方切斷氣管，小心的把心臟及其血管除去，將肺完整的取出，用濾紙吸取肺表面的水分后，稱取肺重，計算肺系數(shù)（肺系數(shù) 肺重量（kg）/體重量（kg）× 100）。然后肉眼觀察肺的大體變化。切開肺臟，觀察切面的變化，注意有無泡沫狀液體的流出。4 另一只兔子，按同樣劑量耳緣靜脈注射生理鹽水，觀察其呼吸等狀態(tài)。半小時后處死動物。然后按上法取出肺，并稱重和計算肺系數(shù)。（六） 實驗注意事項取出肺時，注意勿損傷肺表面和擠壓肺組織，以防治水腫液流出，影響肺系數(shù)值。（七） 討論1 實驗組和對照組家兔的肺有何不同？為什么？2 腎上腺素和油酸所導致的肺水腫的機制有何

26、不同？實驗三 乏氧性缺氧和中毒性缺氧（一）實驗目的1 掌握復制乏氧性、血液性缺氧動物模型的方法，并了解不同類型缺氧的發(fā)生、發(fā)展過程。2 觀察不同類型缺氧時，動物呼吸、皮膚及血液色澤等變化特點。（二） 實驗原理環(huán)境缺氧，血紅蛋白變性或組織細胞氧化酶受到抑制，可使機體因氧吸入不足、氧運輸障礙或利用障礙而發(fā)生缺氧。由于各型缺氧的發(fā)病環(huán)節(jié)不同，機體所表現(xiàn)出的缺氧癥狀也不一致。（三）實驗動物 小鼠。（四）實驗器材與藥品 堿石灰，CO，3亞硝酸鈉，1美藍；小鼠缺氧瓶（100-250 m1帶塞的錐形瓶或廣口瓶，瓶內(nèi)最好放一個架空的尼龍網(wǎng)，以防止小鼠接觸NaOH），帶塞廣口瓶，500 ml燒杯，CO發(fā)生裝置（

27、圖1），5 ml吸管，1 ml注射器，酒精燈，剪刀，鑷子。（五）實驗方法1乏氧性缺氧（1）取少許堿石灰及小鼠一只，放入缺氧瓶內(nèi)，觀察小鼠的一般情況，呼吸頻率及深度，尾、唇、爪的顏色，然后塞緊瓶塞，注意觀察小鼠上述各項指標的變化，直至死亡，如有其他變化，亦隨時記錄。（2）小鼠尸體待實驗做完后，剪開腹腔。比較血液、肝臟或肌肉的色澤。2一氧化碳中毒性缺氧（1）參照圖1，裝好CO發(fā)生裝置。（2）將小鼠放入廣口瓶中，觀察指標同1，然后與CO發(fā)生裝置連接。（3）通CO后，注意觀察上述指標，直至小鼠死亡。（4）小鼠死后，進行剖檢。3亞硝酸鈉中毒性缺氧 （1）取體重相近的2只小鼠（20 g以上），放在500

28、m1燒杯內(nèi)，觀察呼吸頻率、深度及膚色后，分別向腹腔注入3亞硝酸鈉溶液0.2 ml，然后再立即向其中一只腹腔注入1美藍液0.3 ml，另一只腹腔注入生理鹽水0.3 ml。 （2）觀察以上各指標，比較兩鼠的表現(xiàn)及死亡時間有無差異。留下注生理鹽水的小鼠最后剖檢。 （六）實驗注意事項 1缺氧瓶要嚴密不漏氣，如室溫過低，最好將缺氧瓶置于22水浴內(nèi)，因為漏氣或溫度瓶置于22水浴內(nèi)，因為漏氣或溫度過低都會使小鼠死亡時間延長，影響實驗時間。 3小鼠腹腔注射時，應稍靠左下腹，勿損傷肝臟，但也要避免將藥液注入腸腔或膀胱。（七）討論 不同類型缺氧致死動物所觀察各項指標變化有何不同？為什么？圖1 CO發(fā)生裝置實驗四

29、應激對耗氧量的影響（）實驗目的 通過對應激前后耗氧量的測定，了解應激對神經(jīng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)的變化及其生物學意義。（二）實驗原理 應激是應激原作用于機體所引起的一種非特異性反應。本實驗以冷水游泳作為應激原，觀察小鼠應激前后耗氧量的變化，說明應激時機體的代謝狀態(tài)。 （三）實驗動物 小鼠。（四）實驗器材與藥品 廣口瓶、膠塞、其中一個膠塞有孔連接一玻璃管，玻璃管外壁末端起10 cm長度始末兩端標記，內(nèi)有冰水的水槽。天平，秒表，水槽，廣口瓶，干紗布和棉花若干，堿石灰，凡士林等。（五）實驗方法 1取一只小鼠，放入耗氧量測定裝置中，測其耗氧時間（上升10 cm水柱的時間），連續(xù)3次，并記錄。2將小鼠稱重后放入冷

30、水中（最好是冰水），迫使其不停地游泳5-10分鐘。3取出小鼠，擦干被毛上的水，用同樣的方法測其耗氧時間，連續(xù)3次，并記錄。4將應激后的小鼠和另一只未進行應激的小鼠一起放入盛有少量堿石灰的廣口瓶中，隔絕空氣，觀察其活動情況，分別記錄兩只小鼠的死亡時間。5結果記錄 項目上升10 cm水柱的時間備注123平均值應激前應激后（六）實驗注意事項1測定耗氧時間，先要用凡士林封住瓶口，防止漏氣。2實驗中，捉拿小鼠要輕拿輕放，切忌粗暴。（七）討論1試比較小鼠應激前后的耗氧時間，分析其原因？2試比較兩只小鼠的死亡時間，解釋其機理？ 、圖3 小鼠耗氧置測定裝置實驗五 實驗性休克（）實驗目的 學習休克的動物模型復制

31、，并根據(jù)休克時動脈壓、中心靜脈壓、心率、呼吸、尿量、皮溫等變化來了解休克的發(fā)生機理和防治原則。（二）實驗原理 機體因急性大量失血、創(chuàng)傷、感染、過敏等各種因素，使循環(huán)血量絕對或相對減少。初期可發(fā)生一系列代償活動。但當各系統(tǒng)的代償活動仍不足以維持有效循環(huán)血量時，由于急性循環(huán)障礙使組織灌流量嚴重不足，以致發(fā)生全身性機能代謝性障礙，出現(xiàn)一系列臨床癥狀。本實驗用快速放血的方法，造成家兔的失血性休克。（三）實驗動物 2 kg 以上家兔。（四）實驗器材與藥品 剪毛剪，手術剪，眼科剪，手術刀，止血鉗，有齒鑷，無齒鑷，血壓描記裝置，中心靜脈壓測定裝置，呼吸描記裝置，半導體溫度計，導尿管，量筒，注射器，紗布，棉花

32、，乳膠管，燒杯，輸液裝置，離心管，試管等，1普魯卡因，1肝素，生理鹽水，20烏拉坦，去甲腎上腺素，右旋糖酐，3.8構櫞酸鈉等。（五）實驗方法 1失血性休克（1）家兔稱重后仰臥固定于兔手術臺上，由耳靜脈緩漫注射20鳥拉坦（6 ml/kg），待麻醉后，于頸部、腹股溝和下腹部剪毛，消毒。（2）從耳靜脈注射1肝素（1 ml/kg）。（3）切開頸部分離出頸總動脈和氣管，并接通描記血壓和呼吸裝置。分離右頸外靜脈一段（長約5 cm），下穿兩條線，結扎遠心端，用動脈夾夾住其近心端，用眼科剪在近心端剪一小口，將與中心靜脈壓測量裝置相連的塑料管（充滿生理鹽水），插入切口至右心房入口處，用線結扎固定好。（4）描記一

33、段正常的血壓、呼吸及中心靜脈壓曲線。并觀察記錄家兔心率、皮溫等。（5）于下腹部正中作縱行皮膚切口約4 cm，分離腹部肌肉至腹膜，小心剪開腹膜，找到膀胱后，將其輕輕提起，找出輸尿管并分離。用細塑料管作雙側輸尿管插管，連到記滴裝置，記錄尿滴（或記錄10分鐘尿量）。（6）按“1000 ml × kg體重 × 6”來估計家兔的總血量，然后切開腹股溝部暴露股動脈，分離，下引兩條線，結扎遠心端，近心端先用動脈夾夾住，在中間剪一小口，將充有3.8構橡酸鈉液的細塑料管向心插入并固定。打開股動脈夾，按總量的10快速將血放到注射器內(nèi)，放血畢，觀察動脈血壓、呼吸、中心靜脈壓、尿量以及心率、皮溫等

34、變化。間隔10分鐘重復觀察一次。如動脈血壓仍高于30 mmHg，可再放血10進行觀察，使血壓維持在30 mmHg水平。（7）30分鐘后，經(jīng)靜脈注入1：20000去甲腎上腺素10 ml，立即觀察上述變化。然后將放出的血液全部從頸靜脈快速輸入，必要時加輸?shù)头肿佑倚?0 ml。觀察并記錄輸液過程中，血壓、呼吸、尿量、心率和皮溫等變化。（8）結果記錄動物： 性別： 體重： 放血量： 第一次 第二次 占總血量觀察指標時間心率（次/分）呼吸（次/分）血壓（mmHg）中心靜脈壓（cm 水柱） 尿量（滴/分）皮溫（）其他放血前第一次放血后第二次放血后注射腎上腺素后輸 血 后2腸系膜上動脈閉塞性休克（1）家兔

35、稱重后固定于兔手術臺上，在頸部和腹部剪毛。用1普魯卡因作局部麻醉，切開頸部皮膚，分離一側頸總動脈，穿線備用。（2）局麻后，沿腹中線自劍突下1.5 cm，切開皮膚約5 cm，打開腹腔，用溫生理鹽水紗布將內(nèi)臟輕輕推向右前方，在左側腎上腺右上方找出腸系膜上動脈，分離周圍組織，穿線備用。（3）自耳靜脈注射1肝素（l ml/kg），然后作頸總動脈插管，并與描記血壓裝置相連，記錄正常血壓曲線。（4）輕輕提起腸系膜上動脈的穿線，用尖端包有膠布的止血鉗夾閉腸系膜上動脈，同時觀察血壓變化。（5）夾閉1小時后，松開止血鉗，觀察血壓變化，待休克出現(xiàn)后再觀察1小時血壓等變化。然后檢查腹腔有無滲出液，并觀察腸襻的形態(tài)學

36、變化。（六）實驗注意事項 1手術過程中應盡量避免出血。2盛血的注射器，應預先放一些抗凝劑。（七）討論 1放血后觀察的各種指標變化有何不同？為什么？2根據(jù)實驗結果你認為應該怎樣判斷和處理休克病畜。3試討論腸系膜上動脈閉塞性休克的發(fā)病機理。實驗六 急性心機能不全（一）實驗目的 復制急性心機能不全動物模型。了解心機能不全的發(fā)病機理，觀察心機能不全時血液動力學的主要變化。（二）實驗原理 右心室的前負荷或后負荷過度增加，都會發(fā)生右心衰竭。本實驗用注射過量生理鹽水和注射栓塞劑的方法，造成家兔的急性右心室前、后負荷增加，從而發(fā)生急性右心衰竭。通過測定其在心衰過程中血液動力學的變化，進一步理解心機能不全的發(fā)生

37、及發(fā)展。（三）實驗動物 健康家兔。（四）實驗器材與藥品 兔臺，小動物手術器械，二道生理記錄儀，血氣酸堿分析儀，中心靜脈壓測定裝置，輸液裝置，嬰兒秤，1普魯卡因溶液，1肝素生理鹽水溶液，生理鹽水，液體石蠟。（五）實驗方法 1將家兔稱重后，仰臥固定于兔臺上。 2頸動脈插管 頸部剪毛、消毒。從正中皮下注射1普魯卡因作浸潤麻醉后，做頸部正中切口，逐層鈍性分離，游離左側頸總動脈2-3 crn，其下穿入兩根絲線，結扎近頭端，近心端以動脈夾夾閉。在結扎端稍下方用眼科剪將動脈壁剪一小斜口，插入動脈導管，用線結扎固定，然后連于血壓描記裝置。 3頸靜脈插管 分離一側頸外靜脈，其下穿入絲線兩根，結扎近頭端，在其稍下

38、方剪一小斜口，插人充滿生理鹽水的塑料導管5-6 cm，結扎固定并連于中心靜脈壓測定裝置。觀察測定管液面有無波動。如無波動，表明導管不通，可用少許生理鹽水沖洗或將導管稍加旋轉，進退，直至液面出現(xiàn)波動為止。 4分離另一側頸外靜脈，同樣作靜脈插管并連以輸液裝置。 5氣管插管 分離氣管，其下穿一根線，用眼科剪在氣管上作T形切口，插入氣管套管，并用線結扎固定，連以呼吸描記裝置。 6觀察并記錄實驗前各項指標 描記一段血壓、呼吸曲線，測定中心靜脈壓，從耳中動脈隔絕空氣抗凝采血1 m1，作血氣和酸堿指標測定。 7用已預熱至38的液體石蠟，按每公斤體重0.5 ml的量，從耳緣靜脈緩慢注入。注射時，注意觀察呼吸、

39、中心靜脈壓和血壓的變化，當中心靜脈壓開始上升或和血壓開始下降時，即停止注射。觀察5-10分鐘，如仍恢復正常水平可再緩緩注入少量液體石蠟，直至血壓有輕度下降或和中心靜脈壓有輕度升高為止（一般液體石蠟用量不超過0.5 mlkg）。 8注射栓塞劑后5分鐘，再測各項指標一次。 9以約每分鐘10 ml的速度，輸入生理鹽水。輸液量每增加50 ml，測各項指標一次。直至動物死亡。 10動物死亡后，擠壓胸壁，觀察氣管內(nèi)有無分泌物溢出。剖開胸、腹腔（注意勿損傷血管和臟器），觀察胸、腹腔有無積水，臟器有無淤血水腫，心臟大小。最后剪開心腔，觀察心臟各腔體積，測量左右心室壁厚度。切開肺臟并擠壓，觀察有無水分擠出。 11結果記錄觀察指標實驗階段血壓（mmHg）呼吸（次/分）中心靜壓（mmHg）血氣分析Po2 (KPa)pHPco2 (kPa)HCO3mmol/l正常注蠟后輸液后剖檢所見（六）實驗注意事項1用液體石蠟作栓塞劑時，注射速度一定要慢，控制在0.1-0.2 ml分，且一定要事先給液體石蠟和注射器加熱，以降低液體石蠟粘稠度，使其在進入血液后易形成小栓子。2若輸液