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文檔簡介
1、一、胃蛋白酶原的特性一、胃蛋白酶原的特性三、胃蛋白酶原三、胃蛋白酶原I/III/II臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用四、胃蛋白酶原的檢測四、胃蛋白酶原的檢測第1頁/共21頁一、胃蛋白酶原的特性 (pepsinogen)第2頁/共21頁胃蛋白酶原I/II (PG I/II)分泌部位PG是胃底腺的主細(xì)胞和頸粘液細(xì)胞分泌; PG除主細(xì)胞和頸粘液細(xì)胞分泌外,幽門腺和十二指腸腺亦可產(chǎn)生.第3頁/共21頁P(yáng)GI&PGII第4頁/共21頁胃蛋白酶原I/II( PG I/II)第5頁/共21頁介紹內(nèi)容介紹內(nèi)容一、一、胃蛋白酶原的特性胃蛋白酶原的特性三、三、胃蛋白酶原胃蛋白酶原I/III/II臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用四、胃蛋白
2、酶原的檢測四、胃蛋白酶原的檢測第6頁/共21頁檢測方法檢測方法 放射免疫測定法(RIA)(RIA):有放射性有放射性 酶免疫測定法( EIA)( EIA): 需樣少需樣少, , 較低特異性和較低特異性和靈敏度靈敏度 時(shí)間分辨熒光免疫分析法( TRFIA)( TRFIA):靈敏、簡靈敏、簡便便, ,較高特異性、靈敏度較低、易受干擾。較高特異性、靈敏度較低、易受干擾。 乳膠增強(qiáng)免疫比濁法:較低靈敏度及特異性較低靈敏度及特異性, ,方方便便, ,適合大規(guī)模篩查,易受干擾。適合大規(guī)模篩查,易受干擾。五、胃蛋白酶原檢測五、胃蛋白酶原檢測第7頁/共21頁第8頁/共21頁五、胃蛋白酶原檢測酶標(biāo)板酶標(biāo)板反應(yīng)底
3、物反應(yīng)底物包被抗體包被抗體檢測抗原檢測抗原酶標(biāo)抗體酶標(biāo)抗體酶標(biāo)抗體酶標(biāo)抗體反應(yīng)產(chǎn)物反應(yīng)產(chǎn)物酶免疫測定法第9頁/共21頁乳膠免疫測定法(LIALIA法) 以血清或血漿為樣本,利用全自動生化分析儀對樣本的乳膠凝集反應(yīng)所導(dǎo)致的吸光度變化進(jìn)行檢測。 將抗PG IPG I(IIII)抗體與乳膠顆粒表面結(jié)合制成乳膠試劑,與試驗(yàn)樣本中的PG IPG I(IIII)反應(yīng),使乳膠顆粒產(chǎn)生凝集。在確定的波長下測定該反應(yīng)的濁度變化,其變化量會隨著檢測樣本中PG IPG I(IIII)的濃度而成比例增加。根據(jù)已知濃度的PG IPG I(IIII)標(biāo)準(zhǔn)液制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,求出樣本中PGIPGI(IIII)的濃度。第10頁/
4、共21頁+乳膠顆粒 抗體 抗原 乳膠免疫測定法(LIALIA法)凝集產(chǎn)生濁度 第11頁/共21頁化學(xué)發(fā)光(chemiluminescencechemiluminescence)是指伴隨化學(xué)反應(yīng)過程所產(chǎn)生的光的發(fā)射現(xiàn)象。 某些物質(zhì)( (發(fā)光劑) )在化學(xué)反應(yīng)時(shí),吸收了反應(yīng)過程中所產(chǎn)生的化學(xué)能,使反應(yīng)的產(chǎn)物分子或反應(yīng)的中間態(tài)分子中的電子躍遷到激發(fā)態(tài),當(dāng)電子從激發(fā)態(tài)回復(fù)到基態(tài)時(shí),以發(fā)射光子的形式釋放出能量,這一現(xiàn)象稱為化學(xué)發(fā)光?;瘜W(xué)發(fā)光法原理第12頁/共21頁底物A A底物B B發(fā)光反應(yīng)化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法(CLEIACLEIA)第13頁/共21頁胃蛋白酶原I/II I/II (PGI/PGIIPG
5、I/PGII)試劑盒性能指標(biāo)BSBE最低檢測限為PGI:PGI:1 1ng/ml,PGII:ng/ml,PGII:1 1ng/mlng/ml線性范圍,PGI:,PGI:200200ng/mLng/mL,PGII:PGII:100100ng/mLng/mL抗干擾性:0.1g/l0.1g/l的膽紅素、18g/l18g/l的甘油三酯和2.5g/l2.5g/l的血紅蛋白, RF, RF為520IU/ml520IU/ml, 小于上述濃度的物質(zhì)不會對該試驗(yàn)產(chǎn)生干擾 穩(wěn)定性:開蓋放在試劑倉中1414天,空白無變化,質(zhì)控結(jié)果基本無變化,可兩點(diǎn)定標(biāo)第14頁/共21頁采血要求 靜脈采血2-3mL2-3mL于普通管
6、中(不能使用含EDTAEDTA、枸櫞鹽酸試管),離心分離出血清。 2-82-8條件下,樣本可保存7 7天,-20-20可長期保存。避免樣本反復(fù)凍融。五、胃蛋白酶原檢測第15頁/共21頁 檢驗(yàn)方法 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備: 1. 將試劑盒從冷藏環(huán)境中取出,放置室溫(1825)平 衡至少30分鐘。 2. 將恒溫箱或恒溫水浴鍋溫度調(diào)到37,待溫度穩(wěn)定后使 用。 3. 取1包固體洗液用500mL純化水溶解后備用。 實(shí)驗(yàn)步驟: 較準(zhǔn)品較準(zhǔn)品或血清或血清酶結(jié)酶結(jié)合物合物室溫室溫振蕩振蕩 洗板洗板 拍干拍干發(fā)光底發(fā)光底物物A A、B B 發(fā)光發(fā)光儀檢測儀檢測包被板包被板3737溫育溫育 60min60min第16頁/共21頁第17頁/共21頁河南美凱生物其他二類產(chǎn)品A A:化學(xué)發(fā)光定量檢測系列產(chǎn)品 1)性激素系列 LH、FSH、PRL、T、P、E2、fE3 2)甲功系列 T3、fT3、T4、fT4、TSH、Anti-TG、Anti-TPO 3)糖尿病系列 C-P、INSB B:膠體金快速檢測系列產(chǎn)品 LH、HCGC C:微生物類系列產(chǎn)品 BV診斷(唾液酸酶法)、BV聯(lián)合檢測(化學(xué)反應(yīng)法)、 Uu和Mh培養(yǎng)鑒定藥敏(微生物檢驗(yàn)法)。第18頁/共21頁 廠家:河南美
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