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1、菊花的組織培養(yǎng)菊花的組織培養(yǎng)第1頁(yè)/共27頁(yè) 通過(guò)必修課的學(xué)習(xí),我們已經(jīng)了解到大多綠色開(kāi)花植物都是靠種子來(lái)繁殖的。那么,有沒(méi)有不用種子來(lái)培育植物的方法呢? 組織培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)繁殖扦插嫁接壓條 第2頁(yè)/共27頁(yè)扦插嫁接壓條 第3頁(yè)/共27頁(yè) 指植物的離體部分(包括任何器官、組織、細(xì)胞或原生質(zhì)體),在人工控制的培養(yǎng)基及環(huán)境條件(溫度及光照)下,得以生長(zhǎng)和分化成完整植株的一種無(wú)菌培養(yǎng)技術(shù)。又稱:植物離體培養(yǎng)一、植物組織培養(yǎng)的概念第4頁(yè)/共27頁(yè)第5頁(yè)/共27頁(yè)概念:細(xì)胞的全能性是指已分化的細(xì)胞具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能。原因:是生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)植物組織培養(yǎng)原理:植物細(xì)胞的全
2、能性第6頁(yè)/共27頁(yè)1. 什么叫分化?其實(shí)質(zhì)是什么?2. 什么叫脫(去)分化、再分化?3. 愈傷組織的細(xì)胞有什么特點(diǎn)?4. 如何控制細(xì)胞的脫分化與去分化? 閱讀閱讀32頁(yè)解決下列問(wèn)題:頁(yè)解決下列問(wèn)題:二、植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程二、植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程基因的選擇性表達(dá) 第7頁(yè)/共27頁(yè)植物組織培養(yǎng)過(guò)程示意圖 2、上面的示意圖中還有什么地方不夠完善的?沒(méi)有進(jìn)行滅菌處理,試管也沒(méi)有做密封等。第8頁(yè)/共27頁(yè)1、外植體帶菌2、培養(yǎng)基及接種器具滅菌不徹底3、接種操作時(shí)帶入4、環(huán)境不清潔3、外植體滅菌與接種操作,談?wù)劷M織培養(yǎng)污染的主要途徑及怎樣預(yù)防污染?第9頁(yè)/共27頁(yè)污染的預(yù)防措施(一)防止外植體帶菌
3、(二)保證培養(yǎng)基及接種器具徹底滅菌(三)操作人員嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程(四)保證接種與培養(yǎng)環(huán)境清潔第10頁(yè)/共27頁(yè)二、植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程二、植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程 離體器官、 組織或細(xì)胞 脫分化 愈傷組織 再分化 根、芽 植物體 第11頁(yè)/共27頁(yè)愈傷組織第12頁(yè)/共27頁(yè)三、影響植物組織培養(yǎng)的因素:三、影響植物組織培養(yǎng)的因素:1、外植體的選取 不同植物的組織培養(yǎng)難度不同 同一種植物的不同組織培養(yǎng)難度不同2、培養(yǎng)基的配制(MS培養(yǎng)基) 大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有機(jī)物:甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等 植物激素
4、:生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、赤霉素等未開(kāi)花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝第13頁(yè)/共27頁(yè)MS固體培養(yǎng)基成分及比例第14頁(yè)/共27頁(yè)微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同,MS培養(yǎng)基則需提供大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng),無(wú)機(jī)鹽混合物包括植物生長(zhǎng)必須的大量元素和微量元素兩大類。閱讀課文,思考以下問(wèn)題1. 同微生物培養(yǎng)基相比,MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同?2、你認(rèn)為組織培養(yǎng)過(guò)程中,成功的關(guān)鍵有哪些?這些步驟的適宜條件是什么?組織的脫分化及愈傷組織的再分化。植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,影響植物細(xì)胞脫分化、再分化的最重要因素是植物激素,細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素之間的濃度比可以調(diào)控植株組培過(guò)程中芽和根的形成。 第15頁(yè)/共27頁(yè)3、
5、不同植物激素使用順序使用順序使用順序 實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果 先生長(zhǎng)素,先生長(zhǎng)素,后細(xì)胞分裂素后細(xì)胞分裂素 有利于細(xì)胞分裂但不分化有利于細(xì)胞分裂但不分化 先細(xì)胞分裂素,先細(xì)胞分裂素,后生長(zhǎng)素后生長(zhǎng)素 細(xì)胞既分裂也分化細(xì)胞既分裂也分化 同時(shí)使用同時(shí)使用 分化頻率提高分化頻率提高 第16頁(yè)/共27頁(yè)4、不同植物激素使用量生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素/ /細(xì)胞分裂素比值細(xì)胞分裂素比值結(jié)果結(jié)果 比值高時(shí)比值高時(shí) 促根分化,促根分化,抑芽形成抑芽形成 比值低時(shí)比值低時(shí) 促芽分化,促芽分化,抑根形成抑根形成 比值適中比值適中 促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng)促進(jìn)愈傷組織生長(zhǎng) 第17頁(yè)/共27頁(yè)思考:以下培養(yǎng)基出現(xiàn)的現(xiàn)象反應(yīng)了什么問(wèn)題?第18頁(yè)
6、/共27頁(yè)5、pH、溫度、光照(菊花組培) pH=5.8 溫度控制在1822 每日光照12h6、消毒在培養(yǎng)的整個(gè)過(guò)程中,都需要是一個(gè)無(wú)菌環(huán)境第19頁(yè)/共27頁(yè)同常規(guī)的無(wú)性繁殖方法相比,組織培養(yǎng)快速繁殖法主要具有以下優(yōu)點(diǎn):(1)快速)快速 采用常規(guī)的方法如分株法,一棵花卉一年一般只能生產(chǎn)幾株或幾十株,但用組織培養(yǎng)的方法則每年可以繁殖出幾萬(wàn)甚至數(shù)百萬(wàn)的小植株。(2)周年生產(chǎn))周年生產(chǎn) 花卉組織培養(yǎng)快速繁殖是在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行,因條件可控,所以不受季節(jié)限制,可以全年進(jìn)行連續(xù)生產(chǎn)。而常規(guī)的無(wú)性繁殖則受季節(jié)限制,只能在花卉生長(zhǎng)季節(jié)進(jìn)行繁殖。(3)經(jīng)濟(jì)效益高)經(jīng)濟(jì)效益高 花卉組織培養(yǎng)快速繁殖所需要的空間小,在
7、一個(gè)200平方米的培養(yǎng)室內(nèi)一年可生產(chǎn)試管苗上百萬(wàn)株。如按每株1元計(jì)算,每年產(chǎn)值上百萬(wàn)元。(4)以組織培養(yǎng)繁殖的種苗與母株有著相同的遺傳基因)以組織培養(yǎng)繁殖的種苗與母株有著相同的遺傳基因所以使用這項(xiàng)技術(shù)可讓優(yōu)良的品種不斷地延續(xù)。組織培養(yǎng)與常規(guī)繁殖相比優(yōu)點(diǎn)眾多第20頁(yè)/共27頁(yè)制備MS固體培養(yǎng)基外植體消毒 接種 培 養(yǎng)栽 培四、實(shí)驗(yàn)操作 移 栽沖洗酒精無(wú)菌水沖洗氯化汞無(wú)菌水沖洗至少三次之上配制各種母液配制培養(yǎng)基滅毒第21頁(yè)/共27頁(yè)1、培養(yǎng)基的滅菌(高壓蒸汽滅菌)2、外植體的消毒(酒精、氯化汞)3、接種的無(wú)菌操作(酒精、酒精燈灼燒)4、無(wú)菌箱中的培養(yǎng);5、移栽到消過(guò)毒的環(huán)境中生存一段時(shí)間。在整個(gè)操
8、作過(guò)程中,是如何來(lái)實(shí)現(xiàn)無(wú)菌環(huán)境的?第22頁(yè)/共27頁(yè)結(jié)果分析與評(píng)價(jià)(一)對(duì)接種操作中污染情況的分析(二)是否完成了對(duì)植物組織的脫分化和再分化(三)是否進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)、對(duì)照與記錄(四)生根苗的移栽是否合格第23頁(yè)/共27頁(yè)作業(yè):P361、在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,為什么要進(jìn)行一系列的消毒、滅菌,并且要求無(wú)菌操作。2、在選取菊花莖段是,為什么要選取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝?第24頁(yè)/共27頁(yè)課題延伸(略)練習(xí)1.答:植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差,對(duì)培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的生長(zhǎng),如一些細(xì)菌、真菌等的生長(zhǎng)。而培養(yǎng)物一旦受到微生物的污染,就會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)前功盡棄,因此要進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作。2.答:外植體的生理狀態(tài)是成功進(jìn)行組織培養(yǎng)的重要條件之一。生長(zhǎng)旺盛的嫩枝生理狀況好,
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