神經(jīng)毒檢查法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1、神經(jīng)毒檢查法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程目的：建立降纖酶神經(jīng)毒檢查的基本操作，為神經(jīng)毒檢查人員提供止確的操作規(guī)程。2. 依據(jù)：中華人民共和國t生部標(biāo)準(zhǔn)（試行）（97）衛(wèi)藥標(biāo)字01號。am本標(biāo)準(zhǔn)適用于降纖酶神經(jīng)毒檢查的操作。4. 職責(zé)：qc神經(jīng)毒檢查人員對本標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施負(fù)責(zé)。5. 程序：5.1. 實(shí)驗(yàn)用具：天平（精度lg,鴿子稱重用）、電子天平（精度o.olmg,供試品稱重用）、 注射器（精度0.02ml）刻度吸管、針頭、試管、試管架、洗耳球、帆布手套、細(xì)繩、金屬 直鍛、75%酒精棉球、玻璃鉛筆。稀釋劑：氯化鈉注射液。5.2. 供試品溶液的配制：5.2.1. 用75%酒精棉球擦手消毒；5.4.1. 取供試品適量，

2、放入試管中，并標(biāo)明批號；5.4.2. 加入氯化鈉注射液，制成濃度為75u/ml的供試品溶液。5.3. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：健康無傷，體重在300-500g的鴿子。5.4. 檢查法：5.4.1. 本檢查法由兩人共同完成操作。5.4.2. 由一人戴好帆布手套，從籠中取出鴿子，用細(xì)繩捆好鴿子的雙翅及雙腳，放 到天平上，稱體重，并編號。5.4.3. 稱重后，用雙手握住鴿子，讓腹部朝上抻開一側(cè)翅膀。5.4.4. 另一人用75%酒精棉球，輕擦鴿子翅膀根部靜脈注射部位，然后慢慢注入規(guī)定 劑量（鴿子體重每lkg注射0.5ml）的供試品溶液。5.4.5. 共注射3只，注射后，放入籠中，觀察即時(shí)反應(yīng)。5.4.6. 正常飼養(yǎng)

3、，并觀察24小時(shí)。5.5.結(jié)果判斷：觀察24小時(shí)，鴿子不得出現(xiàn)抽搐、死仁 如3只鴿子中有一只岀現(xiàn)抽搐或死亡，應(yīng)另取鴿子5只復(fù)試，均不得出現(xiàn)死亡。6. 附：神經(jīng)毒檢查記錄zl0090 00o活力檢查標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程目的：建立活力檢查的基本操作，為活力檢查人員提供正確的操作規(guī)程。5.5. 依據(jù)：遼寧省藥品標(biāo)準(zhǔn)（1987年版）注射用胸腺肽質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。5.6. 范圍：本標(biāo)準(zhǔn)適用于注射用胸腺肽及注射用p-轉(zhuǎn)移因子活力檢查的操作。5.7. 職責(zé)：qc活力檢查人員對本標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施負(fù)責(zé)。5.8. 程序：實(shí)驗(yàn)用具：離心機(jī)（1500轉(zhuǎn)/分）、刻度離心管、冰箱、恒溫水溫箱、電子顯微鏡、試管、試管架、 刻度吸管、滴管、血球計(jì)

4、數(shù)池、時(shí)鐘、無菌小瓶、針頭、75%酒精棉球。52試劑：無鈣鎂漢格氏（hanks）儲(chǔ)備液、漢格氏溶液（臨用時(shí)配制）、磷酸鹽緩沖液（pbs）、 肝素溶液、阿氏（alsevers）液、固定液（臨用時(shí)配制）、姬姆薩儲(chǔ)備液、姬姆薩染色液。53試驗(yàn)前的準(zhǔn)備：3. 綿羊血的采集及紅細(xì)胞懸液的制備；4. 于綿羊頸靜脈抽取羊血，每lml羊血加lml阿氏液，立即混勻，分裝于無菌小 瓶中，置4°c保存可供兩周內(nèi)使用。取儲(chǔ)備羊血0.1ml,加磷酸鹽緩沖液5ml洗滌，離心（1500轉(zhuǎn)/分）3分鐘，棄去上清液，同 法再洗滌2次，再以漢格氏液5ml洗滌一次，最后，將紅細(xì)胞懸t 4.5ml的漢格氏液中備用。5.3.

5、2.臍帶血的采集：從胎盤尚未剝離的臍帶屮采血，置裝有肝素溶液的瓶屮（血： 肝索溶液=3:1）立即搖勻，置冰箱中備用。5.33白細(xì)胞懸液的制備。5. 取臍帶血數(shù)滴，置適宜的試管屮，按3滴血加水5ml使成低滲，破壞紅細(xì)胞2 分鐘，立即加入與水等體積的漢格氏儲(chǔ)備液恢復(fù)等滲，離心（1500轉(zhuǎn)/分）6分鐘。5332 沉淀用漢格氏液洗滌一次，離心（1500轉(zhuǎn)/分），取沉淀，按每3滴血，加漢格 氏溶液0.25ml的比例，制成口細(xì)胞懸液備用。5.34 供試品溶液的制備：取供試品適量，加入精密量取的漢格氏溶液，制成規(guī)定濃度 的供試品溶液。5.4.操作法：6. 取小試管6支，各加門細(xì)胞懸液0.25ml,其中3支各加供試品溶液0.25ml, 另外3支各加漢格氏溶液0.25ml做對照，搖勻，置37°c恒溫箱中10分鐘。7. 取岀加紅細(xì)胞懸液1滴，搖勻，離心（1500轉(zhuǎn)/分）34分鐘，置冰箱中過 夜。8. 次日，從冰箱中取出，吸去上清液，留沉淀1滴，輕輕懸起細(xì)胞，搖勻，加 固定液一滴，固定10分鐘。9. 加姬姆薩染色液1滴，搖勻，染色15分鐘，滴入血球計(jì)數(shù)池，于高倍鏡下查數(shù) 200個(gè)淋巴細(xì)胞屮粘有3個(gè)或3個(gè)以上的羊紅細(xì)胞的淋巴細(xì)胞數(shù)，求得玫瑰花結(jié)百分率。10. 計(jì)算3支供試品管中玫瑰花結(jié)百分率的平均值和3支對照管中玫瑰花結(jié)百分 率的平均值。11. 計(jì)算供試品管與對照管和