《蛋白質(zhì)化學(xué)》ppt課件

1、 氨基酸是蛋白質(zhì)水解的最終產(chǎn)物，是組成蛋白質(zhì)的根本單位構(gòu)件分子。從各種生物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的氨基酸已有180多種，但參與蛋白質(zhì)組成的常見氨基酸只需20種，這20種氨基酸稱為常見氨基酸或根本氨基酸。amino acid, aa 或或 AA氨基酸的構(gòu)造通式氨基酸的構(gòu)造通式 H3NCHCOOR-+H2NCHCOOHR或或氨基酸是含有氨基的羧酸，不同氨基酸的氨基酸是含有氨基的羧酸，不同氨基酸的R基不同，基不同，除脯氨酸外都為除脯氨酸外都為L-氨基酸。氨基酸。H甘氨酸甘氨酸CH3丙氨酸丙氨酸L-L-氨基酸的通式氨基酸的通式RC+NH3COO-H據(jù)據(jù)R基團(tuán)基團(tuán)化學(xué)構(gòu)造化學(xué)構(gòu)造分類分類 脂肪族脂肪族A16種種芳香族

2、芳香族A (Phe、Tyr、Trp)雜環(huán)雜環(huán) (His、Pro)據(jù)據(jù)R基團(tuán)基團(tuán)極性分類極性分類極性極性R基團(tuán)基團(tuán)AA非極性非極性R基團(tuán)基團(tuán)AA不帶電荷不帶電荷帶電荷帶電荷帶正電荷種帶正電荷種帶負(fù)電荷種帶負(fù)電荷種據(jù)酸堿性質(zhì)據(jù)酸堿性質(zhì)分類分類中性一氨基一羧基中性一氨基一羧基酸性酸性 ( (一氨基二羧基一氨基二羧基 ) Glu ) Glu、AspAsp堿性堿性()()二氨基一羧基二氨基一羧基 Lys Lys、HisHis、ArgArg據(jù)營養(yǎng)據(jù)營養(yǎng)學(xué)分類學(xué)分類 必需必需非必需非必需人的必需氨基酸人的必需氨基酸Met Trp Lys Val Ile Leu Phe ThrMet Trp Lys Val

3、Ile Leu Phe Thr假假 設(shè)設(shè) 來來 借借 一一 兩兩 本本 書書 Arg Arg、His TrpHis Trp、CysCys甘氨酸甘氨酸 Gly, G丙氨酸丙氨酸 Ala, A纈氨酸纈氨酸 Val, V亮氨酸亮氨酸 Lue, L異亮氨酸異亮氨酸 Ile, I1. 側(cè)鏈只是烴鏈側(cè)鏈只是烴鏈5種種 脂肪族氨基酸脂肪族氨基酸2. 側(cè)鏈含有羥基側(cè)鏈含有羥基 2種種絲氨酸絲氨酸 Ser, S蘇氨酸蘇氨酸 Thr, T3. 側(cè)鏈含硫原子側(cè)鏈含硫原子2種種 半胱氨酸半胱氨酸 Cys, C甲硫氨酸甲硫氨酸 Met, M4. 側(cè)鏈含有羧基或酰胺基側(cè)鏈含有羧基或酰胺基4種種 天冬氨酸天冬氨酸 Asp,

4、 D谷氨酸谷氨酸 Glu, E天冬酰胺天冬酰胺Asn, N谷氨酰胺谷氨酰胺 Gln, Q5. 側(cè)鏈含有堿性基團(tuán)側(cè)鏈含有堿性基團(tuán)3種種 賴氨酸賴氨酸 Lys, K精氨酸精氨酸 Arg, R組氨酸組氨酸 His, H苯丙氨酸苯丙氨酸 Phe, F酪氨酸酪氨酸 Tyr, Y色氨酸色氨酸 Trp, W組氨酸組氨酸 His,H脯氨酸脯氨酸 Pro,P非非極極性性氨氨基基酸酸極極性性中中性性氨氨基基酸酸帶正電荷的氨基酸帶正電荷的氨基酸帶負(fù)電荷的氨基酸帶負(fù)電荷的氨基酸 在少數(shù)蛋白質(zhì)中分別出一些不常見的氨基酸，通常稱為不常見蛋白質(zhì)氨基酸。這些氨基酸都是在蛋白質(zhì)合成后由相應(yīng)的根本氨基酸衍生而來的。NHHOCOO

5、H4-羥基脯氨酸H2NCH2CHCH2CH2CHCOOHOHNH25-羥基賴氨酸NH2CH3NHCH2CHCH2CH2CHCOOH6-N-甲基賴氨酸HOIICH2CHCOOHNH23,5-二碘酪氨酸 非蛋白質(zhì)氨基酸：存在于生物體內(nèi)，但不組成蛋白質(zhì)非蛋白質(zhì)氨基酸：存在于生物體內(nèi)，但不組成蛋白質(zhì) 的呈游離或結(jié)合態(tài)的氨基酸，約的呈游離或結(jié)合態(tài)的氨基酸，約150種，具有多種生種，具有多種生理功能。理功能。1 L-氨基酸的衍生物氨基酸的衍生物 L-瓜氨酸和瓜氨酸和L-鳥氨酸是合成精氨酸的中間產(chǎn)物。鳥氨酸是合成精氨酸的中間產(chǎn)物。2D-氨基酸氨基酸 D-Ala存在于肽聚糖中，存在于肽聚糖中，D-Phe是短桿

6、菌肽是短桿菌肽S的的組分。組分。3、-氨基酸氨基酸 -Ala是泛酸的前體，是泛酸的前體，-氨基丁酸是傳送神經(jīng)激氨基丁酸是傳送神經(jīng)激動(dòng)的化動(dòng)的化 學(xué)介質(zhì)。學(xué)介質(zhì)。 構(gòu)型：組成蛋白質(zhì)的氨基酸除構(gòu)型：組成蛋白質(zhì)的氨基酸除GlyGly以外都有手性碳原子，以外都有手性碳原子，在三維空間上就有兩種不同的陳列方式，它們互為鏡影，在三維空間上就有兩種不同的陳列方式，它們互為鏡影，這兩種不同的構(gòu)型分別稱為這兩種不同的構(gòu)型分別稱為D-D-型和型和L-L-型。型。 以丙氨酸為例：以丙氨酸為例： 如含兩個(gè)手性碳原子，那么有種立體異構(gòu)體，分別稱如含兩個(gè)手性碳原子，那么有種立體異構(gòu)體，分別稱為為-,-,- -，別，別-

7、-和別和別- -氨基酸。氨基酸。 H2NCHCOOHCCH3OHHHCNH2COOHCCH3OHHHCNH2COOHCCH3HHOH2NCHCOOHCCH3HHO L-蘇氨酸蘇氨酸 (L-threonine) D-蘇氨酸蘇氨酸 (D-threonine) L-別別-蘇氨酸蘇氨酸 (L-allo-threonine) D-別別-蘇氨酸蘇氨酸 (D-allo-threonine)自然界中組成蛋白質(zhì)的氨基酸都是自然界中組成蛋白質(zhì)的氨基酸都是L-L-型。型。 (Gly(Gly除外除外) )旋光性：旋光性： 組成蛋白質(zhì)的氨基酸除組成蛋白質(zhì)的氨基酸除GlyGly以外，都有手性碳原子，以外，都有手性碳原子，

8、 所以所以都有旋光性，能使偏振光的偏振面的向左或向右旋轉(zhuǎn)，向左旋都有旋光性，能使偏振光的偏振面的向左或向右旋轉(zhuǎn)，向左旋轉(zhuǎn)的稱左旋，用轉(zhuǎn)的稱左旋，用“一號(hào)表示，向右旋轉(zhuǎn)的稱右旋，用一號(hào)表示，向右旋轉(zhuǎn)的稱右旋，用“號(hào)表示。是號(hào)表示。是AAAA的物理常數(shù)，與構(gòu)造、的物理常數(shù)，與構(gòu)造、PHPH值有關(guān)。值有關(guān)。 消旋消旋外消旋外消旋內(nèi)消旋內(nèi)消旋光吸收：光吸收：組成蛋白質(zhì)的氨基酸中，組成蛋白質(zhì)的氨基酸中，TrpTrp、TyrTyr和和 Phe Phe對(duì)紫外光對(duì)紫外光有一定的吸收，這是由于有一定的吸收，這是由于它們分子中含有苯環(huán)，是它們分子中含有苯環(huán)，是苯環(huán)的共軛雙鍵呵斥的，苯環(huán)的共軛雙鍵呵斥的，這三個(gè)氨基

9、酸的光吸收都這三個(gè)氨基酸的光吸收都在在280nm280nm附近。附近。 pH=pI+OH-pHpI+H+OH-+H+pH中性中性AA酸性酸性AA逐漸提高洗逐漸提高洗脫液脫液pH和離和離子強(qiáng)度子強(qiáng)度二、電泳二、電泳 氨基酸在氨基酸在pH高于或低于其高于或低于其pI的溶液中為帶電的溶液中為帶電的顆粒，在電場(chǎng)中能向正極或負(fù)極挪動(dòng)。這種經(jīng)過的顆粒，在電場(chǎng)中能向正極或負(fù)極挪動(dòng)。這種經(jīng)過氨基酸在電場(chǎng)中泳動(dòng)而到達(dá)分別各種氨基酸的技術(shù)氨基酸在電場(chǎng)中泳動(dòng)而到達(dá)分別各種氨基酸的技術(shù), 稱為電泳稱為電泳(elctrophoresis) 。 分別氨基酸混合物常用紙電泳。分別氨基酸混合物常用紙電泳。一、蛋白質(zhì)的定義一、

10、蛋白質(zhì)的定義 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)(Protein(Protein，pr) pr) ：是一切生物體：是一切生物體中普遍存在的，由天然氨基酸按照中普遍存在的，由天然氨基酸按照一定的順序，經(jīng)過肽鍵銜接而成的一定的順序，經(jīng)過肽鍵銜接而成的一條或多條肽鏈構(gòu)成的生物大分子；一條或多條肽鏈構(gòu)成的生物大分子；其種類繁多，各具有一定的相對(duì)分其種類繁多，各具有一定的相對(duì)分子質(zhì)量，復(fù)雜的分子構(gòu)造和特定的子質(zhì)量，復(fù)雜的分子構(gòu)造和特定的生物功能；是表達(dá)生物遺傳性狀的生物功能；是表達(dá)生物遺傳性狀的一類主要物質(zhì)。一類主要物質(zhì)。于水。于水。胰島素胰島素牛核糖核酸酶牛核糖核酸酶血紅蛋白血紅蛋白一級(jí)構(gòu)造一級(jí)構(gòu)造(primary str

11、ucture)二級(jí)構(gòu)造二級(jí)構(gòu)造(secondary structure)三級(jí)構(gòu)造三級(jí)構(gòu)造(tertiary structure)四級(jí)構(gòu)造四級(jí)構(gòu)造(quaternary structure)高級(jí)高級(jí)構(gòu)造構(gòu)造蛋白質(zhì)的一級(jí)構(gòu)造決議高級(jí)構(gòu)造！蛋白質(zhì)的一級(jí)構(gòu)造決議高級(jí)構(gòu)造！NH2-CH-CHOOH甘甘氨氨酸酸NH2-CH-CHOOH甘甘氨氨酸酸+-HOH甘氨酰甘氨酸甘氨酰甘氨酸肽鍵NH2-CH-C-N-CH-COOHHHHONH2-CH-C-N-CH-COOHHHHONH-CH-CHOHO OH甘甘氨氨酸酸甘氨酰甘氨酸甘氨酰甘氨酸* *兩分子氨基酸縮合構(gòu)成二肽，三分子氨基酸縮合那么構(gòu)成三肽兩分子氨基酸縮

12、合構(gòu)成二肽，三分子氨基酸縮合那么構(gòu)成三肽* *由十個(gè)以內(nèi)氨基酸相連而成的肽稱為寡肽由十個(gè)以內(nèi)氨基酸相連而成的肽稱為寡肽(oligopeptide)(oligopeptide)，由更多，由更多 的氨基酸相連構(gòu)成的肽稱多肽的氨基酸相連構(gòu)成的肽稱多肽(polypeptide)(polypeptide)。* * 多肽鏈多肽鏈(polypeptide chain)(polypeptide chain)是指許多氨基酸之間以肽鍵銜接而是指許多氨基酸之間以肽鍵銜接而成的一種構(gòu)造。成的一種構(gòu)造。N 末端：多肽鏈中有自在氨基的一端末端：多肽鏈中有自在氨基的一端C 末端：多肽鏈中有自在羧基的一端末端：多肽鏈中有自在

13、羧基的一端多肽鏈有兩端多肽鏈有兩端氨基酸的順序是氨基酸的順序是N 端端C 端的陳列順序。如上述五肽可表示為：端的陳列順序。如上述五肽可表示為： Ser-Val-Tyr-Asp-Gly 絲氨酰纈氨酰酪氨酰天冬氨酰谷氨酸絲氨酰纈氨酰酪氨酰天冬氨酰谷氨酸COOH酰胺平面酰胺平面 由肽鍵周圍的由肽鍵周圍的6個(gè)原子組成的剛性平面?zhèn)€原子組成的剛性平面鍵長介于單鍵長介于單雙鍵之間雙鍵之間 +-GSH過氧過氧化物酶化物酶H2O2 2GSH 2H2O GSSG GSH GSH復(fù)原酶復(fù)原酶NADPH+H+ NADP+ 谷胱甘肽在體內(nèi)參與氧化復(fù)原過程，作為某些氧化復(fù)谷胱甘肽在體內(nèi)參與氧化復(fù)原過程，作為某些氧化復(fù)原酶

14、的輔因子，作用是維護(hù)巰基酶，或防止過氧化物原酶的輔因子，作用是維護(hù)巰基酶，或防止過氧化物積累。積累?？股仡惗嚯目股仡惗嚯亩虠U菌肽短桿菌肽S 體內(nèi)許多激素屬寡肽或多肽激素類多肽激素類多肽蛋白質(zhì)的一級(jí)構(gòu)造蛋白質(zhì)的一級(jí)構(gòu)造(Primary structure)包括：包括： (1)組成蛋白質(zhì)的多肽鏈數(shù)目組成蛋白質(zhì)的多肽鏈數(shù)目; (2)多肽鏈的氨基酸順序多肽鏈的氨基酸順序; (3)多肽鏈內(nèi)或鏈間二硫鍵的數(shù)目和位置。多肽鏈內(nèi)或鏈間二硫鍵的數(shù)目和位置。 其中最重要的是多肽鏈的氨基酸順序，它是蛋白其中最重要的是多肽鏈的氨基酸順序，它是蛋白質(zhì)生物功能的根底。質(zhì)生物功能的根底。2.蛋白質(zhì)一級(jí)構(gòu)造測(cè)定的意義蛋白

15、質(zhì)一級(jí)構(gòu)造測(cè)定的意義是推測(cè)蛋白質(zhì)高級(jí)構(gòu)造的分子根據(jù)是推測(cè)蛋白質(zhì)高級(jí)構(gòu)造的分子根據(jù)是了解蛋白質(zhì)生理功能的分子根底是了解蛋白質(zhì)生理功能的分子根底是闡明遺傳疾病發(fā)活力理的分子手段是闡明遺傳疾病發(fā)活力理的分子手段是研討生物進(jìn)化的分子佐證是研討生物進(jìn)化的分子佐證 胰島素胰島素一級(jí)構(gòu)造一級(jí)構(gòu)造高級(jí)構(gòu)造高級(jí)構(gòu)造鐮刀形鐮刀形紅細(xì)胞紅細(xì)胞正常紅正常紅細(xì)胞細(xì)胞 -鏈鏈N端氨基酸陳列順序端氨基酸陳列順序 1 2 3 4 5 6 7 8 Hb-A正常人正常人 Val-His-Leu-Thr-Pro-Glu-Glu-Lys Hb-S患患 者者 Val-His-Leu-Thr-Pro-Val-Glu-Lys生物生物 與人

16、不同的與人不同的AA數(shù)目數(shù)目黑猩猩黑猩猩 0恒河猴恒河猴 1兔兔 9袋鼠袋鼠 10牛、豬、羊、狗牛、豬、羊、狗 11馬馬 12雞、火雞雞、火雞 13響尾蛇響尾蛇 14海龜海龜 15金槍魚金槍魚 21角餃角餃 23小蠅小蠅 25蛾蛾 31小麥小麥 35粗早鏈孢霉粗早鏈孢霉 43酵母酵母 44 14106100134323029271817675952514845413887848280706891GlyGlyPheCysGlyGlyGlyArgLysGlyCysLysPheHisProLeuGlyArgTyrAlaAsnTrpTyr707580LysLysLysProProTyrIleGlyTh

17、rMetAsnLeu血紅素血紅素 細(xì)胞色素細(xì)胞色素c c分子的空間構(gòu)造分子的空間構(gòu)造不變的不變的AAAA殘基殘基 35個(gè)不變的個(gè)不變的AA殘基，是殘基，是Cyt C 的生物功能所不的生物功能所不可短少的。其中有的能夠參與維持分子構(gòu)象；有的可短少的。其中有的能夠參與維持分子構(gòu)象；有的能夠參與電子傳送；有的能夠參與能夠參與電子傳送；有的能夠參與“識(shí)別并結(jié)合識(shí)別并結(jié)合細(xì)胞色素復(fù)原酶和氧化酶。細(xì)胞色素復(fù)原酶和氧化酶。3.一級(jí)構(gòu)造測(cè)定的原那么和根本流程一級(jí)構(gòu)造測(cè)定的原那么和根本流程一級(jí)構(gòu)造測(cè)定的原那么：一級(jí)構(gòu)造測(cè)定的原那么：將大化小，逐段分析，制成兩套肽片段，找出重將大化小，逐段分析，制成兩套肽片段，找

18、出重疊位點(diǎn)，排出肽的前后位置，最后確定蛋白質(zhì)的疊位點(diǎn)，排出肽的前后位置，最后確定蛋白質(zhì)的完好序列。完好序列。目前往往采用從待測(cè)蛋白質(zhì)的基因序列反推出目前往往采用從待測(cè)蛋白質(zhì)的基因序列反推出蛋白質(zhì)的一級(jí)構(gòu)造。蛋白質(zhì)的一級(jí)構(gòu)造。將肽段順序進(jìn)展疊聯(lián)以確定完好的順序?qū)㈦亩雾樞蜻M(jìn)展疊聯(lián)以確定完好的順序 將肽段分別并測(cè)出順序?qū)㈦亩畏謩e并測(cè)出順序?qū)Ｗ⑿粤呀鈱Ｗ⑿粤呀饽┒税被釡y(cè)定末端氨基酸測(cè)定拆開二硫鍵拆開二硫鍵純蛋白質(zhì)純蛋白質(zhì)經(jīng)過核酸來推演蛋白質(zhì)中的氨基酸序列經(jīng)過核酸來推演蛋白質(zhì)中的氨基酸序列按照三聯(lián)密碼的原那么推上演氨基酸的序列按照三聯(lián)密碼的原那么推上演氨基酸的序列分別編碼蛋白質(zhì)的基因分別編碼蛋白質(zhì)的基

19、因測(cè)定測(cè)定DNA序列序列陳列出陳列出mRNA序列序列一級(jí)構(gòu)造測(cè)定的根本流程一級(jí)構(gòu)造測(cè)定的根本流程:測(cè)定蛋白質(zhì)的一級(jí)構(gòu)造前的預(yù)備任務(wù)測(cè)定蛋白質(zhì)的一級(jí)構(gòu)造前的預(yù)備任務(wù)A. 樣品純度必需樣品純度必需97%以上；以上； 聚丙烯酰胺凝膠電泳要求一條帶聚丙烯酰胺凝膠電泳要求一條帶B. 測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量；測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量； SDS-PAGE，凝膠過濾法，沉降系數(shù)法，凝膠過濾法，沉降系數(shù)法C. 測(cè)定蛋白質(zhì)多肽鏈種類和數(shù)目；測(cè)定蛋白質(zhì)多肽鏈種類和數(shù)目； 種類：種類： SDS-PAGE 數(shù)目：數(shù)目：N末端氨基酸殘基摩爾數(shù)末端氨基酸殘基摩爾數(shù)/蛋白質(zhì)摩爾數(shù)蛋白質(zhì)摩爾數(shù)D. 測(cè)定蛋白質(zhì)的氨基酸組成；并

20、根據(jù)分子量計(jì)算每種氨基酸的測(cè)定蛋白質(zhì)的氨基酸組成；并根據(jù)分子量計(jì)算每種氨基酸的個(gè)數(shù)；個(gè)數(shù)；E. 測(cè)定水解液中的氨量，計(jì)算酰胺的含量。測(cè)定水解液中的氨量，計(jì)算酰胺的含量。4.蛋白質(zhì)的一級(jí)構(gòu)造測(cè)定蛋白質(zhì)的一級(jí)構(gòu)造測(cè)定1多肽鏈的拆分多肽鏈的拆分獲得單條線形多肽鏈獲得單條線形多肽鏈 由多條多肽鏈組成的蛋白質(zhì)分子，必需先進(jìn)展拆由多條多肽鏈組成的蛋白質(zhì)分子，必需先進(jìn)展拆分。如：血紅蛋白為四聚體，烯醇化酶為二聚體分。如：血紅蛋白為四聚體，烯醇化酶為二聚體等。等。拆分非共價(jià)鍵：可用拆分非共價(jià)鍵：可用8mol/L8mol/L尿尿素或素或6mol/L6mol/L鹽酸胍處置。鹽酸胍處置。拆分二硫鍵：幾條多肽鏈經(jīng)過拆

21、分二硫鍵：幾條多肽鏈經(jīng)過二硫鍵交聯(lián)在一同?？稍诙蜴I交聯(lián)在一同?？稍?mol/L8mol/L尿素或尿素或6mol/L6mol/L鹽酸胍存在下，用鹽酸胍存在下，用過量的過量的- -巰基乙醇處置，使二巰基乙醇處置，使二硫鍵復(fù)原為巰基，然后用烷基化硫鍵復(fù)原為巰基，然后用烷基化試劑維護(hù)生成的巰基，以防止它試劑維護(hù)生成的巰基，以防止它重新被氧化。重新被氧化。拆分拆分巰基的維護(hù)-OOCCHCH2SHNH3+ICH2CNH2OCH2OCClOCH2Cl-OOCCHCH2SNH3+OCCH2OCH2-OOCCHCH2SNH3+CH2CNH2O-OOCCHCH2SNH3+2N-末端和末端和C-末端氨基酸殘基確實(shí)

22、定末端氨基酸殘基確實(shí)定為氨基為氨基 酸序列陳列建立兩個(gè)重要的參考點(diǎn)酸序列陳列建立兩個(gè)重要的參考點(diǎn)N端分析方法：端分析方法： 二硝基氟苯法二硝基氟苯法DNPDNP法、法、DNFBDNFB法或法或FDNBFDNB法法 丹磺酰氯法丹磺酰氯法DNSDNS法法 丹磺酰丹磺酰-氨氨基酸有很強(qiáng)基酸有很強(qiáng)的熒光性質(zhì)的熒光性質(zhì) 苯異硫氰酸苯異硫氰酸( (酯酯) )法法PITCPITC法、法、PTCPTC法、法、PTHPTH法、法、EdmanEdman降解法降解法 由于其延續(xù)反響特性，由于其延續(xù)反響特性，成為蛋白質(zhì)序列分析儀成為蛋白質(zhì)序列分析儀的分析原理！的分析原理！ 氨肽酶氨肽酶aminopeptidase,

23、Apaseaminopeptidase, Apase法法 AlaValGly氨肽酶法：氨肽酶是一種肽鏈外切酶，它能從多肽鏈的氨肽酶法：氨肽酶是一種肽鏈外切酶，它能從多肽鏈的N-端逐個(gè)的端逐個(gè)的水解。根據(jù)不同的反響時(shí)間測(cè)出酶水解所釋放出的氨基酸種類和數(shù)水解。根據(jù)不同的反響時(shí)間測(cè)出酶水解所釋放出的氨基酸種類和數(shù)量，從而知道蛋白質(zhì)的量，從而知道蛋白質(zhì)的N-末端殘基順序。最常用的氨肽酶是亮氨酸末端殘基順序。最常用的氨肽酶是亮氨酸氨肽酶，水解以亮氨酸殘基為氨肽酶，水解以亮氨酸殘基為N-末端的肽鍵速度最大。末端的肽鍵速度最大。C末端分析方法末端分析方法肼解法：多肽與肼在無水條件下加熱，肼解法：多肽與肼在無水條件下加熱，C-端氨基酸即從肽鏈端氨基酸即從肽鏈上解離出來，其他的氨基酸那么變成肼化物。肼化物可上解離出來，其他的氨基酸那么變成肼化物。肼化物可以與苯甲醛縮合成不溶于水的物質(zhì)而與以與苯甲醛縮合成不溶于水的物質(zhì)而與C-端氨基酸分別。端氨基酸分別。H2NCHCROHNCHCROORnCCHHNOHn-1N-端氨基酸 C-端氨基酸ORnCCHH2NOHH2NCHCRONHNH2+H+NH2NH2氨