生物化學實驗理論考試題答案

1、生物化學實驗理論考試題答案1. 醋酸纖維薄膜電泳時點樣端應靠近電極的哪一端，為什么？答；電泳時點樣端應靠近負極，因為血清中各種蛋白質在PH為8.6的環(huán)境中均帶負電，根據(jù)同性相吸，異性相斥原理，點樣端在負極時蛋白質向正極泳動從而實現(xiàn)蛋白質分離。2. 用分光光度計測定物質含量時，設置空白對照管的作用,為什么？答；空白對照是為了排除溶劑對吸光度的影響。溶液的吸光度表示物質對光的吸收程度，但是作為溶劑也能吸收，反射和透射一部分的光，因此必須以相同的溶劑設置對照，排除溶劑對吸光度的影響。3. 簡述血清蛋白的醋酸纖維薄膜的電泳原理？答；血清蛋白中各種蛋白質離子在電場力的作用下向著與自身電荷相反的方向涌動，

2、而各種蛋白質等電點不同，且在PH為8.6時所帶電荷不同，分子大小不等，形狀各有差異，所以在同一電泳下永動速度不同從而實現(xiàn)分離。4. 何謂Rf值？影響Rf值的因素？答;Rf是原點到層析中心的距離與原點到溶劑前沿的距離之比。Rf的大小與物質的結構，性質，溶劑系統(tǒng)，層析濾紙的質量和層析溫度有關，對同一種物質來講Rf是一個常量。5. 什么是鹽析？鹽析會引起蛋白質的變性嗎？一般用什么試劑? 答;鹽析是指當溶液中的中性鹽持續(xù)增加時，蛋白質的溶解度下降，當中性鹽的濃度達到一定程度的時候，蛋白質從溶液中析出的現(xiàn)象。鹽析不會引起蛋白質的變性，因為蛋白質的結構并未發(fā)生改變，去掉引起鹽析的因素蛋白質仍能溶解；一般用

3、飽和硫酸銨溶液進行鹽析6. 簡述DNS法測定還原糖濃度的實驗原理？ 答;還原糖與DNS在堿性條件下加熱被氧化成糖酸，而DNS被還原為棕紅色的3-氨基-5-硝基水楊酸。在一定范圍內(nèi)還原糖的量與3-氨基-5硝基水楊酸顏色的深淺成正比，用分光光度計 測出溶液的吸光度，通過查對標準曲線可計算出3-氨基-5硝基水楊酸的濃度，從而得出還原糖的濃度。7. 影響蛋白質沉淀的因素是什么？沉淀和變性有什么聯(lián)系？答;水溶液中的蛋白質分子由于表面形成水化層和雙電層從而形成穩(wěn)定的親水膠體顆粒，在一定的理化因素影響下蛋白質顆粒因失去電荷和脫水而沉淀。這些因素包括溶液的酸堿度、鹽溶液的濃度、溫度、重金屬離子以及有機溶劑等。

4、變性蛋白質不一定沉淀，沉淀的蛋白質不一定變性。沉淀時蛋白質可能仍然保持天然構像，而變性是蛋白質的高級結構被破壞失去活性。8. 簡述薄層層析法分離糖類的原理/? 答;薄層層析的實質就是吸附層析，也就是在鋪有吸附劑的薄層上，經(jīng)過反復地被吸附劑吸附以及被擴展劑擴展的過程。而吸附劑對不同的物質的吸附力不同，從而使糖在薄層上的涌動速度不同達到分離的目的9. 等電點的定義？蛋白質在等電點時有哪些特點？答;當溶液的PH為一定數(shù)值時，其中的蛋白質正負電荷相等，即凈電荷為零，此時的PH值就是該蛋白質等電點。蛋白質在等電點時的溶解度最小。10. 蛋白質顯色黃色反應的原理是什么?反應結果為什么深淺不一？答;含有苯環(huán)

5、的氨基酸如酪氨酸和色氨酸，能被硝酸硝化成黃色的物質，而且不同蛋白質中所含的苯環(huán)數(shù)量不同，造成與試劑反應的程度不同，因此呈現(xiàn)顏色深淺不一 。11. RNA水解后的三大組分是什么？怎樣各自驗證的？答;核糖，磷酸，嘌呤堿。核糖+苔黒酚Fe（濃HCI）綠色物質；磷酸+鉬酸銨藍色；嘌呤堿+硝酸銀白色12. 等電點時為什么蛋白質溶解度最低？答;蛋白質形成膠體二等條件是帶電荷，從而在外表面形成水化膜，導致各膠體顆粒不結合，當PH等于PI時，靜電荷為零，蛋白質分子之間不存在排斥，則聚集沉淀，所以在等電點時溶解度最小。13. 雞蛋清可以用作鉛汞中毒的解毒劑是為什么? 答;由于重金屬離子能與蛋白質中帶負電基團如C

6、OOH等作用，生成難溶重金屬的蛋白質鹽，減少機體對重金屬的吸收。14. 血清醋酸纖維薄膜電泳可將血清蛋白依次分為哪幾條帶？哪帶電泳最快？影響電泳速度有哪些？答;有血清蛋白、a1-球蛋白、a2-球蛋白、b-球蛋白、r-球蛋白；其中血清蛋白點用最快。影響因素蛋白質所帶電荷數(shù)，分子大小與形狀以及緩沖液濃度。15. 什么是抑制劑？什么是變性劑？區(qū)別是什么？答;凡是能使酶活性降低而不使酶失活變性的物質成為抑制劑；凡是能引起蛋白質變性失活的物質叫變性劑。抑制劑只是抑制蛋白質的特性而變性劑則破環(huán)蛋白質的結構。16 簡述橘皮中提取果膠原理？答；果膠不溶于乙醇的原來將其沉淀得到果膠。17 離心管如何在天平上平衡？操作離心時應注意什么?答;把放在小燒杯中的離心管（包括蓋子）和管套放在平衡的天平上，用膠頭滴管取離心液調(diào)平。注