實(shí)驗(yàn)三環(huán)境因素對(duì)微生物的影響實(shí)用教案

1、一、實(shí)驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)(shyn)目的目的1.1.了解溫度對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響；了解溫度對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響；2.2.了解抗生素（青霉素、氨芐青霉素等）的抗菌范圍，學(xué)習(xí)抗菌譜試驗(yàn)的了解抗生素（青霉素、氨芐青霉素等）的抗菌范圍，學(xué)習(xí)抗菌譜試驗(yàn)的基本基本(jbn)(jbn)方法。方法。3.3.了解消毒劑（碘酒或酒精）對(duì)微生物分布的影響。了解消毒劑（碘酒或酒精）對(duì)微生物分布的影響。4.4.了解紫外線殺菌對(duì)微生物的作用特點(diǎn)了解紫外線殺菌對(duì)微生物的作用特點(diǎn)第1頁(yè)/共17頁(yè)第一頁(yè)，共17頁(yè)。二、實(shí)驗(yàn)二、實(shí)驗(yàn)(shyn)原理原理1. 1. 溫度溫度: :影響微生物生長(zhǎng)與存活的最重要因素。影響微生物生長(zhǎng)與存活的最重要因

2、素。自然界的微生物可根據(jù)對(duì)溫度的適應(yīng)性分為低自然界的微生物可根據(jù)對(duì)溫度的適應(yīng)性分為低溫型、中溫型和高溫型。溫型、中溫型和高溫型。但不管但不管(bgun)(bgun)哪一種溫度型的微生物，都哪一種溫度型的微生物，都有生長(zhǎng)溫度范圍。分為最高、最適和最低生有生長(zhǎng)溫度范圍。分為最高、最適和最低生長(zhǎng)溫度。在最適宜溫度里生長(zhǎng)良好：超過最長(zhǎng)溫度。在最適宜溫度里生長(zhǎng)良好：超過最高溫度細(xì)胞死亡；低于最低溫度細(xì)胞被抑制高溫度細(xì)胞死亡；低于最低溫度細(xì)胞被抑制或死亡?；蛩劳?。第2頁(yè)/共17頁(yè)第二頁(yè)，共17頁(yè)。2. 2. 抗生素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響：抗生素是某些微生物抗生素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響：抗生素是某些微生物在生長(zhǎng)代謝

3、在生長(zhǎng)代謝(dixi)(dixi)過程中產(chǎn)生的能抑制或殺死其過程中產(chǎn)生的能抑制或殺死其它微生物的次生代謝它微生物的次生代謝(dixi)(dixi)產(chǎn)物。每種抗生素都產(chǎn)物。每種抗生素都有它固定的抗菌范圍和抗菌譜。有它固定的抗菌范圍和抗菌譜。例如青霉素只對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌具有抗菌作用；多粘菌素例如青霉素只對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌具有抗菌作用；多粘菌素只對(duì)革蘭氏陰性菌有作用，這類抗生素稱為窄譜抗生只對(duì)革蘭氏陰性菌有作用，這類抗生素稱為窄譜抗生素；素；另一些抗生素對(duì)多種細(xì)菌具有作用，例如四環(huán)素、土霉另一些抗生素對(duì)多種細(xì)菌具有作用，例如四環(huán)素、土霉素對(duì)許多革蘭氏陽(yáng)性菌和陰性菌都有作用稱為廣譜抗素對(duì)許多革蘭氏陽(yáng)性菌和陰

4、性菌都有作用稱為廣譜抗生素。生素。二、實(shí)驗(yàn)二、實(shí)驗(yàn)(shyn)原理原理第3頁(yè)/共17頁(yè)第三頁(yè)，共17頁(yè)。 比如氨芐青霉素，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性球菌、變形桿菌、沙門氏菌比如氨芐青霉素，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性球菌、變形桿菌、沙門氏菌(sh mn sh jn)(sh mn sh jn)、痢疾桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌、痢疾桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌、 大腸桿大腸桿菌及流感桿菌等都有很好的抗菌效果。菌及流感桿菌等都有很好的抗菌效果。 二、實(shí)驗(yàn)二、實(shí)驗(yàn)(shyn)原理原理第4頁(yè)/共17頁(yè)第四頁(yè)，共17頁(yè)。3.3.化學(xué)消毒劑對(duì)微生物分布的影響化學(xué)消毒劑對(duì)微生物分布的影響 人體皮膚人體皮膚(p f)(p f)分布著一定種類與數(shù)量的微生物。使

5、用分布著一定種類與數(shù)量的微生物。使用化學(xué)消毒劑對(duì)皮膚化學(xué)消毒劑對(duì)皮膚(p f)(p f)進(jìn)行表面消毒是醫(yī)院里進(jìn)行無菌操進(jìn)行表面消毒是醫(yī)院里進(jìn)行無菌操作常用的方法之一。作常用的方法之一。二、實(shí)驗(yàn)二、實(shí)驗(yàn)(shyn)原理原理第5頁(yè)/共17頁(yè)第五頁(yè)，共17頁(yè)。4.4.紫外線的殺菌紫外線的殺菌(sh jn)(sh jn)作用作用 波長(zhǎng)為波長(zhǎng)為200-300nm200-300nm的紫外線都有殺菌的紫外線都有殺菌(sh jn)(sh jn)能力，其中以能力，其中以260nm260nm的殺菌的殺菌(sh (sh jn)jn)能力最強(qiáng)。其殺菌能力最強(qiáng)。其殺菌(sh jn)(sh jn)機(jī)理是抑機(jī)理是抑制制DN

6、ADNA復(fù)制，以及產(chǎn)生臭氧和復(fù)制，以及產(chǎn)生臭氧和H2O2 H2O2 而產(chǎn)生一定而產(chǎn)生一定的殺菌的殺菌(sh jn)(sh jn)作用。但紫外線穿透力弱，作用。但紫外線穿透力弱，一般適用于表面消毒和空氣消毒。一般適用于表面消毒和空氣消毒。二、實(shí)驗(yàn)二、實(shí)驗(yàn)(shyn)原理原理第6頁(yè)/共17頁(yè)第六頁(yè)，共17頁(yè)。1、菌種：大腸桿菌、白色葡萄球菌、枯草(k co)芽孢桿菌等。2、藥敏片:青霉素、慶大霉素、環(huán)丙沙星、菌必治第7頁(yè)/共17頁(yè)第七頁(yè)，共17頁(yè)。四、實(shí)驗(yàn)四、實(shí)驗(yàn)(shyn)步驟步驟1.1.溫度對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響（每組）溫度對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響（每組）（1 1）菌種：大腸桿菌）菌種：大腸桿菌( (白

7、葡白葡) )、枯草芽孢桿菌。、枯草芽孢桿菌。（2 2）培養(yǎng)基：取肉湯培養(yǎng)基（液體培養(yǎng)基）培養(yǎng)基：取肉湯培養(yǎng)基（液體培養(yǎng)基） 5 5支。支。（3 3）接種：分別接種大腸桿菌）接種：分別接種大腸桿菌( (白葡白葡) )和枯草芽孢桿和枯草芽孢桿菌各菌各2 2支試管，余下支試管，余下1 1支不接種作陰性對(duì)照。支不接種作陰性對(duì)照。（4 4）加熱：取接種的大腸桿菌）加熱：取接種的大腸桿菌( (白葡白葡) )和枯草芽孢桿和枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基各菌培養(yǎng)基各1 1支，于支，于100100作用作用15min15min后取出，冷水后取出，冷水(lngshu)(lngshu)沖涼。沖涼。5 5支試管放入支試管放入373

8、7溫箱培養(yǎng)。溫箱培養(yǎng)。（5 5）觀察：培養(yǎng)）觀察：培養(yǎng)24h24h后觀察現(xiàn)象，并記錄。后觀察現(xiàn)象，并記錄。第8頁(yè)/共17頁(yè)第八頁(yè)，共17頁(yè)。2.2.抗生素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響抗生素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響（1 1）菌種：大腸桿菌（）菌種：大腸桿菌（G G）、白色葡萄球菌或金黃）、白色葡萄球菌或金黃色葡萄球菌（色葡萄球菌（G G）。）。（2 2）接菌）接菌 用接種環(huán)刮取一環(huán)菌體，輕放在平板上；將無菌的用接種環(huán)刮取一環(huán)菌體，輕放在平板上；將無菌的棉簽在無菌水棉簽在無菌水( (液體液體(yt)(yt)培養(yǎng)基培養(yǎng)基) )中潤(rùn)濕；用濕中潤(rùn)濕；用濕潤(rùn)的無菌棉簽將平板上的菌體均勻涂布。潤(rùn)的無菌棉簽將平板上的菌體均勻

9、涂布。 （2 2種不同的菌各做種不同的菌各做1 1個(gè)平板。）個(gè)平板。）四、實(shí)驗(yàn)四、實(shí)驗(yàn)(shyn)步驟步驟第9頁(yè)/共17頁(yè)第九頁(yè)，共17頁(yè)。（3 3）放置藥敏片：用無菌鑷子?。┓胖盟幟羝河脽o菌鑷子取4 4種不種不同的抗生素藥敏片各同的抗生素藥敏片各1 1個(gè)，貼在平板上個(gè)，貼在平板上（每個(gè)平板放（每個(gè)平板放4 4個(gè)），輕輕壓一下，倒個(gè)），輕輕壓一下，倒置。置。 注意：在貼濾紙條時(shí)不要在培養(yǎng)基注意：在貼濾紙條時(shí)不要在培養(yǎng)基上拖動(dòng)濾紙片，避免抗生素溶液在培上拖動(dòng)濾紙片，避免抗生素溶液在培養(yǎng)基中擴(kuò)散時(shí)分布養(yǎng)基中擴(kuò)散時(shí)分布(fnb)(fnb)不均勻。不均勻。 （4 4）培養(yǎng)：平板于）培養(yǎng)：平板于373

10、7培養(yǎng)培養(yǎng)24h24h后觀察、后觀察、記錄實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象。記錄實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象。四、實(shí)驗(yàn)四、實(shí)驗(yàn)(shyn)步驟步驟第10頁(yè)/共17頁(yè)第十頁(yè)，共17頁(yè)。第11頁(yè)/共17頁(yè)第十一頁(yè)，共17頁(yè)。3.3.化學(xué)消毒劑對(duì)微生物分布的影響化學(xué)消毒劑對(duì)微生物分布的影響（1 1）分區(qū)）分區(qū): :將將1 1個(gè)營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板分為個(gè)營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板分為4 4個(gè)區(qū)域；個(gè)區(qū)域； （2 2人人1 1個(gè)平板，每人個(gè)平板，每人2 2個(gè)區(qū)）個(gè)區(qū)）（2 2）接種：）接種：2 2名同學(xué)直接用手指在平板名同學(xué)直接用手指在平板的的2 2個(gè)區(qū)域劃之字形，待用碘酒個(gè)區(qū)域劃之字形，待用碘酒/ /酒精酒精棉球消毒后，稍候片刻，再在另外棉球消毒后，稍候片刻，再在另

11、外2 2個(gè)區(qū)域劃之字形；個(gè)區(qū)域劃之字形； （3 3）培養(yǎng)：平板于）培養(yǎng)：平板于3737培養(yǎng)培養(yǎng)24h24h后觀后觀察察(gunch)(gunch)、記錄實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象。、記錄實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象。四、實(shí)驗(yàn)四、實(shí)驗(yàn)(shyn)步驟步驟甲乙第12頁(yè)/共17頁(yè)第十二頁(yè)，共17頁(yè)。4.4.紫外線的消毒作用紫外線的消毒作用(zuyng)(zuyng)（穿透作用（穿透作用(zuyng)(zuyng)）（1 1）菌種：大腸桿菌、白色葡萄球菌）菌種：大腸桿菌、白色葡萄球菌（2 2）接菌：用接種環(huán)刮取一環(huán)菌體，輕放在平板上；將無）接菌：用接種環(huán)刮取一環(huán)菌體，輕放在平板上；將無菌的棉簽在無菌水菌的棉簽在無菌水( (液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基) )中潤(rùn)濕；用濕潤(rùn)的無菌棉中潤(rùn)濕；用濕潤(rùn)的無菌棉簽將平板上的菌體均勻涂布。簽將平板上的菌體均勻涂布。 【可做【可做1 1種菌，也可做種菌，也可做2 2種（中間劃線）】。種（中間劃線）】。四、實(shí)驗(yàn)四、實(shí)驗(yàn)(shyn)步步驟驟第13頁(yè)/共17頁(yè)第十三頁(yè)，共17頁(yè)。第14頁(yè)/共17頁(yè)第十四頁(yè)，共17頁(yè)。第1