檢測生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì)

1、教學(xué)目標教學(xué)目標 嘗試檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)，探討細胞中主要化合物的種類。 一、實驗原理：一、實驗原理：淀粉淀粉+碘液碘液 藍色藍色 50-65水浴水浴還原糖還原糖+斐林試劑斐林試劑 磚紅色沉淀磚紅色沉淀 （Cu2O）（還原糖：單糖、麥芽糖、乳糖）（還原糖：單糖、麥芽糖、乳糖）蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑雙縮脲試劑 紫色絡(luò)合物紫色絡(luò)合物脂肪脂肪+蘇丹蘇丹（） 橘黃色（紅色）橘黃色（紅色）還原糖檢測還原糖檢測實驗的實驗實驗的實驗結(jié)果結(jié)果蛋白質(zhì)檢測蛋白質(zhì)檢測實驗的實驗實驗的實驗結(jié)果結(jié)果脂肪檢測脂肪檢測實驗的實實驗的實驗結(jié)果驗結(jié)果二、材料二、材料還原糖：應(yīng)選還原糖：應(yīng)選含糖高含糖高，顏色為，

2、顏色為白色或近于白色白色或近于白色的的植物組織（植物組織（防止顏色干擾實驗現(xiàn)象的觀察防止顏色干擾實驗現(xiàn)象的觀察），），如蘋果、梨、葡萄如蘋果、梨、葡萄淀粉：馬鈴薯淀粉：馬鈴薯脂肪：花生子葉、花生勻漿脂肪：花生子葉、花生勻漿蛋白質(zhì)：豆?jié){、鮮肝提取液、雞蛋清（稀釋）蛋白質(zhì)：豆?jié){、鮮肝提取液、雞蛋清（稀釋）三、用具三、用具斐林試劑（新制斐林試劑（新制Cu （OH ）2）A液、液、0.1g/ml NaOHB液液 、0.05g/ml CuSO4四、試劑四、試劑先混合，再使用；現(xiàn)配現(xiàn)用先混合，再使用；現(xiàn)配現(xiàn)用等體積混合等體積混合新制新制斐林試劑斐林試劑是是氫氧化銅氫氧化銅，可溶性可溶性還原糖還原糖中含有中

3、含有醛基（醛基（-CHO）或酮基，具有弱）或酮基，具有弱還原性還原性，在水浴，在水浴加熱的情況下可以把加熱的情況下可以把Cu2+還原成磚紅色的還原成磚紅色的Cu2O（氧化亞銅氧化亞銅） 雙縮脲試劑雙縮脲試劑:A液、液、0.1g/ml NaOHB液液 、0.01g/ml CuSO4注意：先加注意：先加A液液1毫升，毫升， 再滴加再滴加B液液34滴滴尿素和合成雙縮脲的化學(xué)反應(yīng)式尿素和合成雙縮脲的化學(xué)反應(yīng)式 尿素尿素尿素尿素雙縮脲雙縮脲雙縮脲試劑檢測蛋白質(zhì)中的肽鍵雙縮脲試劑檢測蛋白質(zhì)中的肽鍵在強堿性溶液中，雙縮脲與二價銅離子在強堿性溶液中，雙縮脲與二價銅離子形成紫色絡(luò)合物，稱為雙縮脲反應(yīng)。形成紫色絡(luò)

4、合物，稱為雙縮脲反應(yīng)。 雙縮脲試劑檢測肽鍵雙縮脲試劑檢測肽鍵蘇丹蘇丹或蘇丹或蘇丹染液、染液、體積分數(shù)為體積分數(shù)為50%的酒精溶液，碘液、的酒精溶液，碘液、 蒸餾水。蒸餾水。還原性糖還原性糖+斐林試劑斐林試劑磚紅色沉淀磚紅色沉淀還原性糖：葡萄糖還原性糖：葡萄糖、果糖、麥芽糖、乳糖等、果糖、麥芽糖、乳糖等非還原性糖：蔗糖、淀粉等非還原性糖：蔗糖、淀粉等制備蘋果的制備蘋果的組織樣液組織樣液（實驗員（實驗員老師準備）。老師準備）。用量筒去用量筒去2ml組織樣液，再用組織樣液，再用量筒取量筒取1ml新配制好的斐林試劑。新配制好的斐林試劑。取一只試管，將取一只試管，將2ml蘋果組織樣液倒蘋果組織樣液倒1m

5、l斐林試劑混合均勻，此時溶液呈藍斐林試劑混合均勻，此時溶液呈藍色。色。水浴加熱水浴加熱:將試管放入盛將試管放入盛有溫水的大燒杯中，用酒精有溫水的大燒杯中，用酒精燈加熱到燈加熱到50-65。(注意注意問題：實驗冊問題：實驗冊P7第第10點點)溶液的顏色變化過程：淡藍溶液的顏色變化過程：淡藍色色棕色棕色磚紅色（沉磚紅色（沉淀）。淀）。溶液的顏色從藍色變成磚紅色沉淀。溶液的顏色從藍色變成磚紅色沉淀。蘋果中含有還原性的糖。蘋果中含有還原性的糖。脂肪脂肪+蘇丹蘇丹橘黃色橘黃色脂肪脂肪+蘇丹蘇丹紅色紅色方法一：取少量脂肪樣液，方法一：取少量脂肪樣液，加入加入3滴蘇丹滴蘇丹，震蕩，震蕩，可看到溶液呈了橘黃色

6、可看到溶液呈了橘黃色實驗材料要求實驗材料要求種子顆粒較大，便于切片種子顆粒較大，便于切片制作制作：不能用：不能用芝麻芝麻脂肪含量高：不能用脂肪含量高：不能用玉米玉米花生是比較理花生是比較理想的實驗材料想的實驗材料顯微鏡、鑷子、毛顯微鏡、鑷子、毛筆、吸水紙、刀片、筆、吸水紙、刀片、載玻片、蓋玻片、載玻片、蓋玻片、培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿50% %的酒精的酒精、蘇丹、蘇丹、清水清水取一粒浸泡過取一粒浸泡過3-4小時的花生種子，去小時的花生種子，去皮，分開兩片子葉，將子葉切成薄片，然皮，分開兩片子葉，將子葉切成薄片，然后用毛筆將花生薄皮放入盛有清水的培養(yǎng)后用毛筆將花生薄皮放入盛有清水的培養(yǎng)皿中。皿中。取一片載玻

7、片，用紗布擦凈，用取一片載玻片，用紗布擦凈，用毛筆取一片最薄的材料，放在載玻毛筆取一片最薄的材料，放在載玻片中央。片中央。用滴管在花生種子薄片上滴幾滴用滴管在花生種子薄片上滴幾滴蘇丹蘇丹染液染液，染色，染色3分鐘，用吸水紙吸去花分鐘，用吸水紙吸去花生種子薄片周圍的染液。生種子薄片周圍的染液。在薄片上滴在薄片上滴1至至2滴體積分數(shù)為滴體積分數(shù)為50%的酒精的酒精，洗去浮色洗去浮色，用吸水，用吸水紙洗去花生子葉周圍的酒精。紙洗去花生子葉周圍的酒精。切片切片紙片紙片觀察觀察在薄片上滴一滴清水，蓋在薄片上滴一滴清水，蓋上蓋玻片，制成臨時裝片。上蓋玻片，制成臨時裝片。在低倍鏡下尋找花生種子在低倍鏡下尋找

8、花生種子薄片的最薄處，將這部分移薄片的最薄處，將這部分移至視野中央。至視野中央。用高倍顯微鏡觀察花用高倍顯微鏡觀察花生種子薄片。生種子薄片。低倍鏡下觀察低倍鏡下觀察高倍鏡下觀察高倍鏡下觀察顯微鏡下觀察到橘黃色（顯微鏡下觀察到橘黃色（或紅色或紅色）的）的顆粒。顆粒?；ㄉN子細胞中含有脂肪。花生種子細胞中含有脂肪。蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑雙縮脲試劑紫色絡(luò)合物紫色絡(luò)合物豆?jié){、蛋清、牛奶都是很豆?jié){、蛋清、牛奶都是很好的實驗材料。好的實驗材料。在用蛋清做實驗材料時，在用蛋清做實驗材料時，要注意將要注意將蛋清稀釋蛋清稀釋，如果，如果稀釋不夠，反應(yīng)后的產(chǎn)物稀釋不夠，反應(yīng)后的產(chǎn)物會粘固在試管內(nèi)壁上，使會粘固在

9、試管內(nèi)壁上，使反應(yīng)不容易徹底。反應(yīng)不容易徹底。試管架、試管、吸管試管架、試管、吸管蛋清稀釋液蛋清稀釋液雙縮脲試劑雙縮脲試劑A液、液、雙縮脲試劑雙縮脲試劑B液、液、量筒量筒用量筒量取用量筒量取2ml的蛋清稀釋的蛋清稀釋液。再用量筒取液。再用量筒取1ml雙縮脲雙縮脲尿試劑尿試劑A液液將量取的蛋清液和雙縮脲試劑將量取的蛋清液和雙縮脲試劑A液分別倒入到試管中，震蕩液分別倒入到試管中，震蕩均勻，此時可見試管內(nèi)仍然是均勻，此時可見試管內(nèi)仍然是透明的。透明的。再向試管中加入再向試管中加入3至至4滴雙滴雙縮脲試劑縮脲試劑B液。液。震蕩均勻，此時可見試管內(nèi)震蕩均勻，此時可見試管內(nèi)溶液呈紫色溶液呈紫色蛋清液呈紫色

10、。蛋清液呈紫色。蛋清液中含有蛋白質(zhì)。蛋清液中含有蛋白質(zhì)。注意事項：注意事項： 先加先加 ，再加，再加 鑒定前，留出一部分組織樣液，以便對比鑒定前，留出一部分組織樣液，以便對比A液液1mlB液液4滴滴斐林試劑與雙縮脲試劑的比較斐林試劑雙縮脲試劑甲液乙液A液B液成分0.1g/ml NaOH0.05g/mlCuSO40.1g/ml NaOH0.01g/mlCuSO4鑒定物質(zhì)還原糖蛋白質(zhì)添加順序甲、乙兩液等量混勻、現(xiàn)配現(xiàn)用先加入A液1ml，搖勻；再加入B液34滴，搖勻反應(yīng)條件5065溫水浴加熱不需加熱，搖勻即可（4）淀粉的檢測和觀察）淀粉的檢測和觀察顏色變化：顏色變化：變藍變藍1、在做生物組織中還原性

11、糖、蛋白質(zhì)、脂、在做生物組織中還原性糖、蛋白質(zhì)、脂肪的鑒定，對實驗材料肪的鑒定，對實驗材料的選擇，敘述錯誤的是（的選擇，敘述錯誤的是（ ）A.甘蔗的薄壁組織、甜菜的塊根等，都含甘蔗的薄壁組織、甜菜的塊根等，都含有較多的糖且近于有較多的糖且近于白色，白色， 因此可以用于進因此可以用于進行還原糖的鑒定。行還原糖的鑒定。B.花生種子含脂肪多且子葉肥厚，是用于花生種子含脂肪多且子葉肥厚，是用于脂肪鑒定的理想材料脂肪鑒定的理想材料C.大豆種子蛋白質(zhì)含量高，是進行蛋白質(zhì)大豆種子蛋白質(zhì)含量高，是進行蛋白質(zhì)鑒定的理想植物組織材料。鑒定的理想植物組織材料。D.雞蛋清含蛋白質(zhì)多，是進行蛋白質(zhì)鑒定雞蛋清含蛋白質(zhì)多，

12、是進行蛋白質(zhì)鑒定的動物材料。的動物材料。A. .下列關(guān)于實驗操作步驟的敘述中，正確的是下列關(guān)于實驗操作步驟的敘述中，正確的是 （ ） A A、用于鑒定可溶性還原糖的斐林試劑甲液和乙液，、用于鑒定可溶性還原糖的斐林試劑甲液和乙液，可直接用于蛋白質(zhì)的鑒定可直接用于蛋白質(zhì)的鑒定 B B、脂肪的鑒定需要顯微鏡才能看到被染成橘黃色的、脂肪的鑒定需要顯微鏡才能看到被染成橘黃色的脂肪滴脂肪滴 C C鑒定可溶性還原糖時，要加入斐林試劑甲液搖勻鑒定可溶性還原糖時，要加入斐林試劑甲液搖勻后，再加乙液后，再加乙液 D D用于鑒定蛋白質(zhì)的雙縮脲試劑用于鑒定蛋白質(zhì)的雙縮脲試劑A A液與液與B B液要混合均液要混合均勻后

13、，再加入含樣品的試管中，且必須現(xiàn)用現(xiàn)配勻后，再加入含樣品的試管中，且必須現(xiàn)用現(xiàn)配3 3下列各項可作為鑒定生物組織中還原性糖的理想材料下列各項可作為鑒定生物組織中還原性糖的理想材料是是（ ） A A韭菜韭菜 B B鳶尾鳶尾 C C菠菜菠菜 D D梨梨B BD D實戰(zhàn)演練實戰(zhàn)演練1(2012高考廣東卷高考廣東卷)分析下表，可推測分析下表，可推測()注：注：“”顯色，顯色，“”顯色更深；顯色更深；“”不顯色。不顯色。A甲溶液含有淀粉甲溶液含有淀粉B乙溶液含有還原糖乙溶液含有還原糖C混合溶液不含淀粉混合溶液不含淀粉 D混合溶液含有淀粉酶混合溶液含有淀粉酶溶液溶液雙縮脲試劑雙縮脲試劑碘液碘液斐林試劑斐林

14、試劑甲甲乙乙甲、乙混合甲、乙混合D2根據(jù)檢測根據(jù)檢測“生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)”實驗，回答問題：實驗，回答問題：(1)檢測成熟蘋果果肉中存在還原糖所用的試劑是檢測成熟蘋果果肉中存在還原糖所用的試劑是_該試劑與細胞內(nèi)還原糖發(fā)生作用，形成該試劑與細胞內(nèi)還原糖發(fā)生作用，形成_沉淀。沉淀。 (2)在檢測花生子葉中的脂肪的實驗中，能將脂肪染成橘黃色的染在檢測花生子葉中的脂肪的實驗中，能將脂肪染成橘黃色的染液是液是_，用其染色時，沖洗浮色要用酒精，這是因為酒精，用其染色時，沖洗浮色要用酒精，這是因為酒精_。(3)檢測黃豆組織中存在蛋白質(zhì)時，向組織液中加入雙縮脲試劑檢測黃

15、豆組織中存在蛋白質(zhì)時，向組織液中加入雙縮脲試劑A搖勻，再向樣液中加入雙縮脲試劑搖勻，再向樣液中加入雙縮脲試劑B搖勻。其中雙縮脲試劑搖勻。其中雙縮脲試劑B的量的量只有只有34滴，而不能過量，為什么？滴，而不能過量，為什么？_斐林試劑斐林試劑磚紅色磚紅色蘇丹蘇丹能溶解蘇丹能溶解蘇丹過量的雙縮脲試劑過量的雙縮脲試劑B會與試劑會與試劑A反應(yīng)，使溶液呈藍色，而掩蓋生成的紫色反應(yīng)，使溶液呈藍色，而掩蓋生成的紫色(4)本實驗注意事項：本實驗注意事項：斐林試劑極不穩(wěn)定，其甲液和乙液需斐林試劑極不穩(wěn)定，其甲液和乙液需_，使用時再臨時混合均勻用于實驗。，使用時再臨時混合均勻用于實驗。雙縮脲試劑的使用，應(yīng)先加試劑雙

16、縮脲試劑的使用，應(yīng)先加試劑_，造成堿性環(huán)境，再加試劑造成堿性環(huán)境，再加試劑_。在可溶性還原糖的檢測中，對試管中溶液加熱時，試管底部不在可溶性還原糖的檢測中，對試管中溶液加熱時，試管底部不要觸及要觸及_；試管口不要朝向；試管口不要朝向_，以免溶液沸騰時沖出試管造成燙傷。以免溶液沸騰時沖出試管造成燙傷。分別配制、儲存分別配制、儲存A液液(0.1 g/mL NaOH溶液溶液)B液液(0.01 g/mL CuSO4溶液溶液)燒杯底部燒杯底部實驗者或其他人實驗者或其他人(1) 圖中圖中A是是 ，B是是 。（2）圖中）圖中X是是 ，常用，常用 試劑檢測，試劑檢測，在小麥種子在小麥種子中主要是指中主要是指

17、。（3）圖中）圖中Y是是 ，其中含有糖是，其中含有糖是 。（4）圖中）圖中Z的種類有的種類有 種。種。（5）列舉出）列舉出的常見功的常見功能能 。（6）從）從P的角度分析的角度分析具有多樣性的原具有多樣性的原因因 。（7）HIV含有含有、中的中的 。課后習題課后習題 一、基礎(chǔ)題1.(1) (2)2.蘇丹染液 豆?jié){ 磚紅色沉淀 斐林試劑 馬鈴薯 橘黃色 雙縮脲試劑 葡萄汁 藍色 碘液 花生子葉 紫色3. B課后習題課后習題 二、拓展題1.提示：細胞是有生命的，它可以主動地從環(huán)境中獲取生命活動需要的元素。這是生物與非生物的區(qū)別之一。不能。因為最基本的生命系統(tǒng)是細胞，將細胞內(nèi)含有的各種物質(zhì)放在試管中

18、，它們不能構(gòu)成細胞這種結(jié)構(gòu)。2.教學(xué)參考教學(xué)參考組成細胞化學(xué)元素的作用組成細胞化學(xué)元素的作用 1組成各種化合物 化學(xué)元素主要以化合物的形式參與細胞的組成和細胞的代謝活動，這些化合物是生物體進行各項生命活動的基礎(chǔ)：如N：是核酸、蛋白質(zhì)、NADP+、ATP、固醇、葉綠素、生長素、甲狀腺激素等的重要組成成分；P是磷脂、NADP+、ATP等的重要組成成分等。2影響生物體的生命活動 如B可促進花粉的萌發(fā)和花粉管的伸長按元素的生物學(xué)功能，大致可分為下列類型。（1）、構(gòu)成原生質(zhì)的基本元素：如C、H、O、N、P是構(gòu)成核酸的主要元素；C、H、O、N是構(gòu)成蛋白質(zhì)的主要元素等。（2）、調(diào)節(jié)機體活動的元素：如離子態(tài)的

19、Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Cl-、H+及其他離子OH-、HCO3-、SO42-、HPO42-等。（3）、與蛋白質(zhì)結(jié)合的元素：如 Fe（血紅蛋白、細胞色素、固氨酶等），Cu（血藍素、細胞色素、氧化酶等），Mg（固氮酶），Co（構(gòu)成維生素B12，在天然存在的形式中，維生素B12可能是與肽或蛋白質(zhì)結(jié)合的），Zn（DNA聚合酶、 RNA聚合酶）， I（甲狀腺蛋白質(zhì)。這是一種含碘蛋白質(zhì)，是人體內(nèi)的碘庫）Mn（精氨酸酶等多種酶）（4）微量調(diào)節(jié)元素：如B、Cr、Se、As、Ni等。這些元素是不可缺的，又是不可替代的。教學(xué)參考教學(xué)參考 關(guān)于細胞中各化合物含量的問題關(guān)于細胞中各化合物含量的問題 1. 組

20、織細胞中含量最多的化合物是水，可以說不論是哪種細胞（脂肪細胞一般除外），該細胞是處于什么季節(jié)，什么什么地方，在什么時期，細胞中水的含量都是最多，有機化物蛋白質(zhì)的含量僅于第二。2.在細胞中各化合物的含量變化以核酸最為穩(wěn)定，其變化范圍較小且有規(guī)律性，而水的含量變化范圍為最大。同時，各化合物在細胞中的含量也不能低于最低值，否則將影響細胞的生命。多細胞生物體內(nèi)，由許多相似的細胞和細胞間質(zhì)有機結(jié)合而成的結(jié)構(gòu)，有一定的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能。 教學(xué)參考教學(xué)參考 三檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)三檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)1實驗關(guān)鍵：（1）還原糖的鑒定a.材料應(yīng)含糖量高且無色；b.斐林試劑的甲液和

21、乙液現(xiàn)配現(xiàn)用，混合均勻。（2）脂肪的鑒定子葉應(yīng)切成薄片（3）蛋白質(zhì)的鑒定實驗關(guān)鍵：a.先加雙縮脲試劑A，再加雙縮脲試劑Bb.雞蛋蛋白液必須稀釋(10倍)教學(xué)參考教學(xué)參考 三檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)三檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)2實驗材料的準備(1)鑒定還原糖的實驗材料準備：植物組織是常用的實驗材料，但必須加以選擇。在雙子葉植物中，光合作用的主要產(chǎn)物葡萄糖形成后合成為淀粉，暫時儲藏在葉子內(nèi)，因此最好不用雙子葉植物的葉子做實驗材料。有些單子葉植物，如韭菜、鳶尾，并不將光合作用的初始產(chǎn)物轉(zhuǎn)變?yōu)榈矸?，因此葉內(nèi)含有大量的還原單糖，但是，由于葉片中葉綠素的顏色較深，對于鑒定時的顏色反應(yīng)起著

22、掩蓋作用，導(dǎo)致實驗現(xiàn)象不明顯，因此，也不宜用單子葉植物的葉子做實驗材料。本實驗最理想的實驗材料是含糖量較高的生物組織(或器官)，而且組織的顏色較淺.或近于白色的.如蘋果和梨的果實，經(jīng)試驗比較，顏色反應(yīng)的明顯程度，依次為蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜。(2)鑒定脂肪的實驗材料準備：實驗材料最好選擇富含脂肪的種子，如花生種子(取其子葉)。供實驗用的花生種子，必須提前浸泡34h。浸泡時間短了，不容易切成片；浸泡時間過長，則組織太軟，切下的薄片不易成形。 教學(xué)參考教學(xué)參考 三檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)三檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)(3)鑒定蛋白質(zhì)的實驗材料準備：實驗材料最好選用富含蛋白質(zhì)的

23、生物組織(或器官)，植物材料常用的是大豆，動物材料常用的是雞蛋(卵白)。如用大豆，必須提前浸泡12h，這樣容易研磨成漿。有條件的學(xué)校，可以直接采用現(xiàn)成的大豆磨成的豆?jié){，豆?jié){可以購買，也可用小型的榨汁機制取。如果用稀釋的卵白做實驗材料，實驗效果會更好。3實驗的注意事項實驗的注意事項(1)斐林試劑與雙縮脲試劑的不同點斐林試劑與雙縮脲試劑都由NaOH和CuSO4組成，但二者有如下3點不同：a.溶液濃度不同、斐林試劑中NaOH的濃度為0.1gmL，CuSO4的濃度為0.05gmL；雙縮脲試劑中NaOH的濃度為0.1gmL，CuSO4的濃度為0.01gmL。b.使用原理不同。斐林試劑實質(zhì)是新配制的Cu(OH)2溶液；雙縮脲試劑實質(zhì)是在堿性環(huán)境下的Cu2+。c.使用方法不同。斐林試劑使用時，先把NaOH溶液